全 文 ：作者简介 王松( 1975 － ) ，男，湖北利川人，硕士研究生，主治医师，主要从事临床麻醉工作。通讯作者 喻红，博士，教授。
冷水七对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用
王 松1，2，喻 红1
1．武汉大学医学院( 湖北 武汉 430072)
2．湖北民族学院附属医院( 湖北 恩施 445000)
【摘要】目的 观察冷水七对脑缺血再灌注损伤( I /R) 大鼠的保护作用。方法 Wistar大鼠随机分为 4 组，对照组、
假手术组、冷水七低、高剂量组，大鼠急性全脑缺血模型用双侧颈总动脉结扎法制备，大鼠灌胃给药 15 d后，测定脑
组织中的含水量，脑匀浆后测定脑组织中丙二醛( MDA) 、超氧化物歧化酶( SOD) 的含量及乳酸脱氢酶( LDH) 的活
性。结果 冷水七可降低缺血损伤后脑组织含水量和 MDA的含量，升高 SOD的活性，降低 LDH 的活性。结论
冷水七对 I /R损伤大鼠脑组织具有抗氧化作用。
【关键词】冷水七; I /R; MDA; SOD; LDH
【中图分类号】R285． 5 【文献标识码】A 【文章编号】1008 － 8164( 2011) 01 － 0025 － 02
Protective Effect of Lengshuiqi on Ischemia and
Reperfusion － induced Brain Injury in Rats
WANG Song1，2，YU Hong1
( 1． Medical College of Wuhan University，Wuhan 430072，China;
2． Affiliated Hospital of Hubei Institute for Nationalities，Enshi 445000，China)
【Abstract】Objective To observe the protective effect of Lengshuiqi on ischemia and reperfusion
－ induced brain injury ( I /R) in rats．Methods Cerebral ischemia reperfusion model ( bilateral ca-
rotid arteries were clamped) of rats were used．80 rats were randomly divided into 4 groups to
observe the activity of brain tissue lactic dehydrogenase ( LDH ) and superoxide dismutase
( SOD) and content change of malondialdehyde( MDA) ，water content in ischemia areas was
measured．Lengshuiqi group was treated with Lengshuiqi at dose 15 ml /kg、30 ml /kg i．g for 15
days．Contrast group and pseudo operational group were set up too．Results Rats treated above
had obviously lower brain tissue LDH activity and higher SOD activity and lower MDA content，
significantly decreased the content of the brain water．Conclusion Lengshuiqi has an apparent
protection on cerebral ischemia reperfusion injury in rats．
【Key words】Lengshuiqi; I /R; MDA; SOD; LDH
冷水七( Impatiens pritzellii Hook． f ． var． hupehen-
sis Hook． f． ) 为凤仙花科凤仙花属植物，为恩施地区
常用民族药，以其根茎入药，具散瘀消肿，祛风除
湿，镇痛止血，清热解毒功效［1］。临床常用于风湿
疼痛、四肢麻木等症，因其活血化瘀作用明显，临床
也常用于心脑血管系统疾病的治疗。研究表明冷水
七提取物有明显的抗炎、镇痛、活血作用［2 － 5］，为进
一步探讨冷水七对心脑血管系统作用，本实验在大
鼠脑缺血再灌注损伤 ( cerebral ischemia － reperfu-
sion，I /R) 模型上观察冷水七对 I /R 损伤大鼠的保
护作用，旨在为冷水七作为预防 I /R 所导致脑损伤
或作为抗氧化药物提供实验依据。
1 材料与方法
1． 1 药品及试剂 冷水七由湖北民族学院附属医
院药剂科提供，并经药剂科鉴定符合实验要求。取
第 28 卷第 1 期( 第 25 页)
2011 年
湖北民族学院学报·医学版
Journal of Hubei University for Nationalities·Medical Edition
Vol． 28 No． 1 P． 25
2011
冷水七干燥，粉碎过 40 目筛，取适量加 50%乙醇浸
泡 24 h，超声提取 2 次( 45 kHz，600W) ，每次 45 min，
合并滤液，回收乙醇，滤过，浓缩，调 pH 至中性，G4
垂熔玻璃漏斗滤过，使成 1 g /ml、2 g /ml ( 按生药材
计算) 的水溶液，115℃灭菌 45 min，冷藏备用。丙二
醛( MDA ) 、超氧化物歧化酶 ( SOD ) 、乳酸脱氢酶
( LDH) 等试剂盒均购自南京建成生物技术研究所，
化学试剂均为分析纯。
1． 2 仪器 KQ － 600GDV 恒温数控超声波清洗器
( 昆山超声波仪器有限公司) ，TU － 1901 紫外可见
分光光度计( 北京普析通用仪器有限责任公司) ，超
声波细胞粉碎机( 杭州成功超声波有限公司 ) ，
BSA224S － CW电子分析天平 ( 北京赛多利斯仪器
系统有限公司) 。
1． 3 实验方法
1． 3． 1 实验动物及分组: Wistar 雄性大鼠 80 只，体
重 250 ～ 300 g，随机分为 4 组( 每组 20 只) ，分别为
对照组、假手术组、冷水七高、低剂量组。
1． 3． 2 I /R 大鼠模型制备: 冷水七高、低剂量组分
别用 2 g /ml 、1 g /ml 冷水七水溶液灌胃，容量均为
15 ml /kg，对照组灌胃同体积生理盐水，每天灌胃一
次，连续给药 15 d，末次给药 1 h后，用水合氯醛( 0． 5
g /kg) 麻醉大鼠，颈部正中手术分离双侧颈总动脉，
在动物清醒的情况下，用动脉夹夹闭双侧颈总动脉，
30 min后重新开启动脉夹恢复脑供血，24 h 后断头
取脑备用。假手术组手术分离双侧颈总动脉但不用
动脉夹夹闭，其余与对照组进行相同处理。实验中
采用加温装置，使大鼠肛温保持 37. 0 ～ 37. 5℃。
1． 3． 3 脑组织含水量测定: 每组各取上述 10 只大
鼠，断头取脑，去除脑干与小脑，称重 ( 湿重) ，然后
于 120℃恒温箱中干燥 48 h，称重( 干重) ，计算脑组
织含水量，公式如下:
脑组织含水量( % ) = ( 湿重 －干重) /湿重 × 100%［6］。
1． 3． 4 脑组织 MDA 含量及 SOD、LDH 活性测定:
每组各取上述 10 只大鼠，断头取脑，去除脑干与小
脑，在冰浴条件下超声粉碎，制备成 10%脑组织匀
浆，按 MDA、SOD、LDH 试剂盒使用说明书进行处
理，再用紫外 －可见分光光度法测定 I /R 损伤脑组
织中 MDA含量、SOD和 LDH的活性。
1． 4 统计学方法 用 SPSS11． 5 软件分析，实验数
据采用均数 ±标准差( x ± s) 表示，进行配对 t检验。
2 结果
与假手术组比较，对照组大鼠全脑缺血 30 min
再灌注 24 h后，脑组织含水量明显升高( P ＜ 0. 01) ，
冷水七高、低剂量组脑组织含水量较对照组有明显
降低( P ＜ 0. 05) ;对照组大鼠脑组织 MDA含量显著
升高，SOD活性降低明显，LDH 活性明显升高，而冷
水七低、高剂量组可明显降低 I /R 大鼠脑组织 MDA
含量，提高 SOD活性，降低 LDH活力。
表 1 冷水七对 I /R损伤大鼠的影响( x ± s，n = 10)
组别 LDH( U/mg) MDA( μmol /mg) SOD( U/mg) 脑组织含水量( % )
对照组 182 ± 27． 3* 28． 38 ± 2． 15* 1． 78 ± 0． 48* 80． 19 ± 0． 97*
假手术组 100 ± 40． 4 13． 62 ± 1． 23 4． 50 ± 0． 55 78． 24 ± 0． 72
冷水七低剂量组 148 ± 28． 3＊△ 18． 78 ± 2． 34＊△ 3． 07 ± 0． 39△ 78． 94 ± 0． 64▲
冷水七高剂量组 121 ± 31． 6△ 14． 83 ± 2． 01△ 4． 21 ± 0． 40△ 78． 86 ± 0． 70▲
注:与假手术组比较: * P ＜ 0． 01;与对照组比较: △P ＜ 0. 01，▲ P ＜ 0. 05
3 讨论
I /R可导致脑组织损伤与机能障碍，其发生机
制尚未完全明确。主流观点认为，I /R 后导致脑组
织损伤，其发生机制与氧自由基、细胞内 Ca2 +超载、
白细胞浸润、一氧化氮、兴奋性氨基酸等物质的毒性
作用有关［7］。导致神经细胞不可逆损害的又一个
原因与脑缺血后进一步发展形成脑水肿有关。缺血
导致脑水肿发生的主要机制: 一是脑组织缺血缺氧
使脑组织能量耗竭，细胞膜 Na + － K +泵功能障碍，
Ca2 + － ATP酶活性下降，致使离子稳态失衡，造成脑
水肿［8］，二是脑组织缺血缺氧导致毛细血管的通透
性增加，大量液体渗出并集中在脑实质细胞及血管
周围的细胞间隙内，造成实质细胞代谢发生障碍和
颅内压升高。实验结果表明，冷水七水溶液使脑组
织水肿减轻，其作用机制可能与改变毛细血管通透
性、使细胞间液渗出减少有关，也可能与影响 Na + －
K + ATP酶或 Ca2 + － ATP酶活性有关。
MDA是脂质过氧化的主要产物，其含量多少能
间接反映脂质过氧化反应强弱程度，也能反映细胞
损伤的程度; SOD 能够清除机体中过多的自由基，
其活性高低能反映体内清除自由基的能力。本实验
结果表明，I /R 损伤后脑组织 MDA 含量明显增加，
SOD活性明显降低，LDH 活性明显升高，而冷水七
可明显抑制 I /R损伤脑组织 LDH的释放，再灌后脑
组织中 MDA生成减少，明显升高( 下转第 29 页)
62 湖北民族学院学报·医学版 第 1 期
环节的忽视以及个体体质的差异有关。可见人为的
和不必要的手术损伤因素在预防粘连中的重要。应
该从以下几个方面注意: ( 1) 术中爱护组织，注意保
护肠管，避免过度钝性分离粘连，减少肠管在空气中
暴露的时间和面积，必要时用温盐水纱垫保护肠管，
有助于肠管浆膜面的保护和不显性失水。术中防止
腹膜撕裂、缺损及大块组织结扎。勿长时间阻断血
管或钳夹肠管。( 2 ) 术中努力使创面腹膜化，可吸
收缝线外翻缝合切口的腹膜。缝线缝针宜小并尽量
减少异物残留﹝如线头过长﹞。( 3 ) 仔细清除附着
于脏器和腹膜上的积脓及坏死组织，腹腔内止血要
彻底，减少电刀的使用，防止电流致浆膜损伤。( 4 )
术后早期下床活动，尽早恢复胃肠蠕动。( 5 ) 对于
手术时间长、手术操作范围广、出血渗液多、腹腔污
染重者，术终时大量温盐水或稀释碘伏冲洗腹腔，术
后可延长禁食时间，警惕肠粘连发生的可能性。
( 6) 避免不必要的引流管放置，或选择合适的腹腔
引流，并尽早拔除。( 7 ) 术后注意纠正水电解质及
酸碱平衡紊乱，预防低钾、低镁。( 8 ) 改善病人营养
状况，行肠外营养支持。( 9 ) 合理使用抗生素预防
或控制感染，正确处理腹腔感染并发症。( 10 ) 为预
防粘连性肠梗阻，在腹部手术关腹前使用医用透明
质钠凝胶或防粘连医用膜，它作为防粘连阻隔剂，可
在一定程度上防止术后组织粘连和纤维组织过度增
生，减少粘连发生。( 11 ) 腹部手术史者在日常生活
中要养成良好生活习惯，忌饱餐、过度饮酒及油腻食
物，避免进食不洁或过敏食物，不要进食难以消化食
物，如柿子、糯米等。避免剧烈运动或体位的突然改
变。便秘者，要及时处理。( 12 ) 目前腹腔镜手术方
式的开展也可减少肠粘连的发生。
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［收稿日期 2010 － 10 － 16］
( 上接第 26 页) 脑组织中 SOD 的活性，提示冷水七
有抗自由基、抑制脂质过氧化作用，减少或抑制由氧
自由基导致生物膜的脂质过氧化反应，从而保护细
胞的结构和功能，从而起到减轻或延缓脑组织的再
灌注损伤的作用。
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［收稿日期 2011 － 01 － 18］
92第 1 期 湖北民族学院学报·医学版