全 文 ：第 33 卷第 5 期
2013 年 10 月
林 产 化 学 与 工 业
Chemistry and Industry of Forest Products
Vol． 33 No． 5
Oct． 2013
doi:10． 3969 / j． issn． 0253－2417． 2013． 05． 018
红槭树树枝化学成分及抗氧化活性研究
收稿日期:2012 － 08 － 27
作者简介:万春鹏(1983 －)，男，江西南昌人，助理研究员，博士，主要研究方向为天然产物化学;E-mail:lemonwan@ 126． com。
WAN Chun-peng
万春鹏1，周寿然2
(1．江西省果蔬保鲜与无损检测重点实验室，江西农业大学农学院，江西 南昌 330045;
2．江西中医学院基础医学院，江西 南昌 330006)
摘 要: 采用柱色谱技术从红槭树甲醇提取物中分离并鉴定了 8 个具有抗氧化活性的化学成
分。经波谱解析化合物鉴定为:3－甲氧基－4－羟基苯酚－1－O－β－D－(6－O－没食子酰)－葡萄糖苷
(1)，7，8－二羟基－6－甲氧基－香豆素(2)，没食子酸(3)，没食子酸甲酯(4)，3，4－二羟基－5－甲氧
基－苯甲酸甲酯(5)，丁香酸甲酯(6)，香草酸甲酯(7)和 3，5－二羟基－4－甲氧基－苯甲酸(8)。化合物 1，5 和 8 为首次从
槭树科植物中分离得到;除化合物 3 和 4 外，其它化合物均为首次从该植物中分离得到。化合物 1～7 具有很强的清除
DPPH自由基活性，其半数抑制浓度(IC50)为 8． 03～990． 57 μmol /L。
关键词: 红槭树;化学成分;抗氧化
中图分类号:TQ351;Ｒ284 文献标识码:A 文章编号:0253 － 2417(2013)05 － 0093 － 04
Chemical Constituents of Acer rubrum L． and Their Antioxidant Activities
WAN Chun-peng1，ZHOU Shou-ran2
(1． Jiangxi Key Laboratory for Fresh Fruits ＆ Vegetables and Nondestructive Tests，College of Agronomy，Jiangxi Agricultural
University，Nanchang 330045，China;2． School of Basic Medical Sciences，Jiangxi University of
Traditional Chinese Medicine，Nanchang 330006，China)
Abstract:Eight phenolic compounds with good antioxidant activities were isolated from methanol extracts of Acer rubrum L． These
compounds were identified as 3-methoxy-4-hydroxyphenol-1-O-β-D-(6-O-galloyl)-glucopyranoside (1)，7，8-dihydroxy-6-
methoxycoumarin(2)，gallic acid (3)，methyl gallate(4)，3，4-dihydroxy-5-methoxybenzoic acid methyl ester(5)，methyl
syringate(6)，methyl vanillate(7)and 3，5-dihydroxy-4-methoxybenzoic acid(8)by the NMＲ and HＲ-ESI-MS ． Compounds 1，
5 and 8 were isolated for the first time from Aceraceae． All of the compounds except 3 and 4 were isolated for the first time from
this species． Compounds 1 － 5 showed powerful DPPH scavenging activity with the range of IC50 8． 03 － 990． 57 μmol /L。
Key words:Acer rubrum L．;chemical constituents;antioxidant activity
红槭树(Acer rubrum L．)为槭树科槭属落叶乔木，又称红花槭，主产于北美大部分地区，是一种极具
观赏性的植物。除作为观赏性植物外，红槭树也具有一定的药用价值，有文献记载红槭树皮煮水洗眼可
用于治疗各种眼痛［1］。另外，红槭树还是枫糖浆的天然“制造工厂”。枫糖浆是枫树植物冬春季节分泌
的树汁加热浓缩而成的一种风味糖替代品，主要有 3 种枫树植物能够分泌枫糖浆，它们分别为红槭，糖
槭和黑槭树［2］。红槭树的化学成分及药理活性的研究报道很少，最近，有研究报道红槭树不同部位提
取物具有抗氧化和清除活性氧自由基的作用［3］，但没有分离鉴定出抗氧化活性成分。1969 年，有印度
学者［4］从其树皮部位分离鉴定了 β－谷甾醇，儿茶素及两个结构新颖的 B 型原花青素二聚体和三聚体;
1999 年，Abou－Zaid等［5］又从红槭树叶中分离鉴定了一系列没食子衍生物，包括 1－O－没食子酰－α－L－
鼠李糖、1－O－没食子酰－β－D－葡萄糖、没食子酸、没食子酸甲酯、没食子酸乙酯和没食子酸二聚体及其
乙酯;鞣花酸、儿茶素、表儿茶素、槲皮素和山柰酚的糖苷等酚类化合物。本课题组采用柱色谱技术从红
槭树甲醇提取物乙酸乙酯萃取部分分离得到了 8 个酚类化合物，采用核磁共振谱和高分辨质谱对得到
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的化合物进行了结构鉴定。
1 实 验
1． 1 材料与仪器
核磁共振光谱利用 Varian 500 MHz型核磁共振仪测定(四甲基硅(TMS)为内标)，高分辨率电喷
雾电离质谱(HＲ－ESI－MS)由 Q－Star Elite(美国应用生物系统公司)质谱仪测定，分析和半制备高效
液相色谱为日立 Elite LaChrom系统包括 L2130 泵，L－2200 自动进样器，L－2455 二极管阵列检测器和
菲罗门 Luna C18 色谱柱(250 mm × 10 mm，S－5 μm)，DLC－10 /11 中压层析系统(美国 D－Star 仪器公
司)，SpectraMax M2 多功能酶标仪(美谷分子仪器公司)。各种柱色谱填料:硅胶(230～400 μm)，葡聚
糖凝胶 Sephadex LH－20 和 GF254 薄层层析硅胶板(安玛西亚公司)。环己烷、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、
甲醇、乙醇等均为分析纯;色谱纯甲醇、三氟乙酸、1，1－二苯基－2－苦基肼(DPPH)和维生素 C(Vc)均购
自 Sigma－Aldrich (美国 Sigma公司)。
1． 2 植物来源
红槭树于 2009 年夏季采自加拿大魁北克，由美国罗德岛大学药学系(College of Pharmacy，
University of Ｒhode Island)高级园丁 J． Peter Morgan 先生鉴定，树枝标本(JPMCS2)存放于罗德岛大学药
学系植物标本室。加拿大红枫树树枝由 J． Peter Morgan先生粉碎备用。
1． 3 提取与分离
取粉碎后的红槭树粉末 500 g，以 1 000 mL甲醇于锥形瓶中室温浸泡提取 3 次 (每次 7 d)，过滤，合
并滤液于旋转蒸发仪上减压浓缩，得甲醇提取物 38 g。甲醇提取物混悬于 500 mL 蒸馏水中，依次用等
体积的正己烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取 3 次，减压浓缩后得正己烷萃取物 1． 1 g、乙酸乙酯萃取物 18 g及
正丁醇萃取物 14 g。乙酸乙酯萃取物 18 g经硅胶柱色谱分离，以氯仿 /甲醇混合溶剂梯度洗脱(20 ∶ 1→
3 ∶ 1，体积比)，TLC合并相同馏分，得到 3 个部分(A1 ～ A3)。A3 部分(8 g)经 Sephadex LH－20 凝胶柱
色谱分离，甲醇洗脱，得到 7 个馏分(B1 ～ B7)。B4 馏分经 C18 中压色谱(MPLC)分离(2 cm × 15 cm)，
甲醇 /水梯度洗脱(1 ∶ 9→7 ∶ 3，体积比)，得到 14 馏分(C1 ～ C14)。C2 部分经半制备液相色谱分离，以
20 % 甲醇为流动相等度洗脱得到化合物 3(460 mg)。C5 部分经半制备液相色谱分离，以 30 % 甲醇为
流动相等度洗脱分别得化合物 4(7． 7 mg)和 8(0． 8 mg)。C6 部分经半制备液相色谱分离，以 27 % 甲
醇为流动相等度洗脱得化合物 1(10 mg)。C9 部分经半制备液相色谱分离，以 25 % 甲醇为流动相等度
洗脱分别得到化合物 2(2． 2 mg)和 5(4． 6 mg)。C12 部分经半制备液相色谱分离，以 41 % 甲醇为流动
相等度洗脱分别得化合物 6(0． 8 mg)和 7(2． 0 mg)。以上制备 HPLC流速均为 3． 2 mL /min。
1． 4 抗氧化实验
参考文献［6］采用微孔板的方法测定分离得到的单体化合物的清除 DPPH自由基活性。分别于 96
孔板中加入 50 μL不同浓度的测试化合物，然后再加入 100 μL 80 mg /L的 DPPH甲醇溶液，轻轻摇匀后
用锡箔纸包裹 96 孔板以避光，每个测试样品设 3 个复孔，Vc 为阳性对照，加入相同体积的溶剂为空白
对照。避光反应 30 min后，立即于 515 nm波长下测定其吸光度(OD)值，按下面公式计算抑制率(y):
y = (C0 － C1)/C0 × 100 %
式中:C0—空白对照的吸光度值(OD值);C1—加入测试样品和 DPPH反应 30 min后的 OD值。
2 结果与分析
采用各种柱色谱技术从红槭树枝甲醇提取物中分离了 8 个化合物，利用 NMＲ和 HＲ－ESI－MS 等技
术手段鉴定了其结构，利用清除 DPPH自由基测定了其抗氧化活性。
2． 1 化合物结构鉴定
化合物 1:白色粉末，UV(MeOH)λmax 277，212 nm;(+)HＲ－ESI－MS，m/z 477． 0735［M + Na］
+，可
知分子式为 C20H22O12。
1H NMＲ(500 MHz，CD3OD，δ，J /Hz)显示 δ 7． 00(2H，s，H－2″，6″)为芳环上 2 个
第 5 期 万春鹏，等:红槭树树枝化学成分及抗氧化活性研究 95
对称的质子信号，一组 ABX耦合系统信号［6． 59(1H，d，1． 9 Hz，H－2)，6． 52(1H，d，J = 8． 6 Hz，H－5)，
6． 47(1H，dd，J = 8． 6，1． 9 Hz，H－6)］;另外还有一组糖信号，4． 63(1H，dd，J = 7． 4，1． 7 Hz，H－1)为糖的
端基质子信号，4． 49(1H，d，J = 11． 9 Hz，H－6a)，4． 33(1H，dd，J = 11． 8，6． 7 Hz，H－6b)，3. 62(1H，
overlap，H－5)，3． 41 ～ 3． 30(3H，m，H－2，3，4)为糖上其它质子信号，3． 60(3H，d，J = 1． 8 Hz，OCH3)
为甲氧基信号;结合 13C NMＲ(125 MHz，CD3OD)δ 166． 8(C－7″)，145． 1(C－3″，5″)，138． 5 (C－4″)，
120. 0(C－1″)和 108． 8(C－2″，6″)为典型的没食子酰基 C信号;151． 3(C－1)，147． 8(C－3)，141. 7(C－4)，
114． 7(C－5)，108． 7(C－6)和 102． 5(C－2)为芳环 C信号;102． 5(C－1)，76． 4(C－3)，74. 2(C－5)，73． 6
(C－2)，70． 4(C－4)，63． 6(C－6)为葡萄糖上 C 信号，54． 9(OCH3)为甲氧基信号;各个片段的连接由
二维 NMＲ谱确定，根据异核单量子相关(HSQC)谱归属与氢相连的各个 C 信号，异核多键相关
(HMBC)谱显示芳香质子信号 H－2(δH 6． 59)与 C－1(151． 3)，C－3(147． 8)，C－4(141． 7)和 C－6(108． 7)
相关，H－5(δH 6． 52)与C－1(151． 3)，C－3(147． 8)，C－4(141． 7)相关，H－6(δH 6． 47)与 C－1(151． 3)，
C－2(102． 5)，C－4(141． 7)相关，甲氧基(δH 3． 60)和 C－3(147． 8)相关，葡萄糖的端基质子(H－1)与
C－1(151． 3)相关，说明甲氧基和羟基分别取代在 3 和 4 位;葡萄糖连接在 1 位酚羟基上;另外 HMBC还
给出葡萄糖 H2－6和 C－7″(166． 8)相关，确定没食子酰连接在葡萄糖的 C－6 位，故确定化合物 1 结构为
3－甲氧基－4－羟基苯酚 1－O－β－D－(6－O－没食子酰)－葡萄糖苷，且化合物 1 的 NMＲ数据与文献［7～8］
对照一致。
化合物 2:白色粉末，UV(MeOH)λmax 337 nm;(+)HＲ－ESI－MS，m/z 231． 017［M + Na］
+，可知分子
式为 C10H8O5。
1H NMＲ (500 MHz，CD3OD，δ，J /Hz)δ 3． 89(3H，s，OCH3)，6． 20(1H，d，J = 9． 0 Hz，
H－3)，6． 72(1H，s，H－5)，7． 84(1H，d，J = 9． 0 Hz，H－4)。化合物 2 的 NMＲ 数据与文献［6］一致，化合
物 2 鉴定为 7，8－二羟基－6－甲氧基－香豆素。
化合物 3:白色粉末，UV(MeOH)λmax 276 nm;(－)HＲ－ESI－MS，m/z 169． 0110［M － H］
－，可知分子
式为 C7H6O5。
1H NMＲ(500 MHz，CD3OD，δ，J /Hz)δ 7． 06(2H，s，H－2，6)，化合物 3 的
1H NMＲ 数据与
文献［9］报道基本一致，并且其 HPLC保留时间及紫外数据与标准品相一致，确定化合物 3 为没食子酸。
化合物 4:白色粉末，UV(MeOH)λmax 276 nm;(－)HＲ－ESI－MS，m/z 183． 0099［M － H］
－，可知分子
式为 C8H8O5。
1H NMＲ(500 MHz，CD3OD，δ，J /Hz)δ 7． 04(2H，s，H－2，6)为芳环上 2 个对称的质子信
号，3． 81(3H，s，OCH3)为甲氧基信号;
13C NMＲ(125 MHz，CD3OD)δ 108． 6(C－2，6)，120． 0 (C－1)，
138. 3(C－4)，145． 1(C－3，5)，167． 6(C－7)，50． 8(COOCH3)。化合物 4 的 NMＲ数据与文献［10］报道一
致，鉴定化合物 4 为没食子酸甲酯。
化合物 5:白色粉末，UV(MeOH)λmax 276 nm;(－)HＲ－ESI－MS，m/z 197． 0208［M － H］
－，可知分子
式为 C9H10O5。
1H NMＲ(500 MHz，CD3OD，δ，J /Hz)δ 7． 17(2H，s，H－2，6)为芳环上 2 个质子信号，3． 87
(3H，s，5－OCH3)和 3． 84(3H，s，OCH3)为两个甲氧基信号，
13C NMＲ(125 MHz，CD3OD)δ 104． 6(C－6)，
110． 5(C－2)，120． 0(C－1)，139． 2(C－4)，144． 9(C－3)，147． 7(C－5)，167． 4(C－7)，55． 2(5 － OCH3)，
50． 9(COOCH3)。化合物 5 的 NMＲ数据与文献［11］报道基本一致，鉴定化合物 5 为 3，4－二羟基－5－甲
氧基－苯甲酸甲酯。
化合物 6:白色粉末，UV(MeOH)λmax 262，292 nm;(+)HＲ－ESI－MS，m/z 234． 9146［M + Na］
+，可知
分子式为 C10H12O5。
1H NMＲ(500 MHz，CD3OD，δ，J /Hz)δ 7． 32(2H，s，H－2，6)为芳环上 2 个质子信号，
3． 89(6H，s，3，5－OCH3)和 3． 87(3H，s，OCH3)为 3 个甲氧基信号，化合物 6 的
1H NMＲ数据与文献［12］
报道基本一致，鉴定化合物 6 为丁香酸甲酯。
化合物 7:白色粉末，UV(MeOH)λmax 276 nm;(+)HＲ－ESI－MS，m/z 205． 0400［M + Na］
+，可知分子
式为 C9H10O4，
1H NMＲ (500 MHz，CD3OD，δ，J /Hz)显示一组 ABX 耦合系统，δ 7． 55(1H，dd，J = 8． 7，
1. 6 Hz，H－6)，7． 54(1H，d，J = 1． 6 Hz，H－2)，6． 84(1H，d，J = 8． 7 Hz，H－5)示为 1，3，4－三取代苯环，
3. 90(3H，s，3－OCH3)和 3． 86(3H，s，OCH3)为两个甲氧基信号;
13C NMＲ(125 MHz，CD3OD)δ 121． 7
(C－6)，114． 5(C－2)，123． 6(C－1)，151． 4(C－4)，144． 9(C－3)，112． 1(C－5)，167． 2(C－7)，55． 0
96 林 产 化 学 与 工 业 第 33 卷
(3－OCH3)，50． 9(COOCH3)。以上 NMＲ数据与文献［13］报道的香草酸甲酯的数据一致，确定化合物 7
为香草酸甲酯。
化合物 8:白色粉末，UV(MeOH)λmax 276 nm; (－)HＲ－ESI－MS，m/z 183． 0170［M － H］
－，可知分子
式为 C8H8O5;化合物 8 的
1H NMＲ谱和 4 类似，1H NMＲ(500 MHz，CD3OD，δ，J /Hz)δ 7. 19(2H，s，H－2，
6)为芳环上 2 个对称的质子信号，3． 87(3H，s，OCH3)为甲氧基信号。以上
1H NMＲ数据与文献［14］报
道的数据一致，化合物 8 鉴定为 3，5－二羟基－4－甲氧基－苯甲酸。
2． 2 抗氧化活性
从红槭树中分离鉴定的 8 个单体化合物均具有一定的抗氧化活性，其半数抑制浓度(IC50)范围为
8． 03～990． 57 μmol /L;阳性对照 Vc 的 IC50为 71． 02 μmol /L。其中化合物 1 抗氧化活性最强，IC50为
8． 03 μmol /L;而化合物 6 抗氧化活性最差，IC50为 990． 57 μmol /L。没食子衍生物(1，3 ～ 7)的抗氧化活
性随着没食子酸酚羟基数目的减少，其活性减弱;甲酯化可以增强没食子酸的抗氧化活性，化合物 3 和
4 的 IC50分别为 20． 39 和 16． 49 μmol /L;化合物 8 分离得到的量少而没有测定其抗氧化活性。
没食子衍生物和黄酮类化合物是红槭树的主要成分，文献报道它们都具有很强的抗氧化活性，这可
能是红槭树中发挥抗氧化、清除自由基作用的物质基础。
3 结 论
从红槭树乙酸乙酯萃取物中分离并鉴定了 8 个单体化合物，3－甲氧基－4－羟基苯酚－1－O－β－D－
(6－O－没食子酰)－葡萄糖苷(1)，7，8－二羟基－6－甲氧基－香豆素(2)，没食子酸(3)，没食子酸甲酯
(4)，3，4－二羟基－5－甲氧基－苯甲酸甲酯(5)，丁香酸甲酯(6)，香草酸甲酯(7)和 3，5－二羟基－4－甲氧
基－苯甲酸(8)。其中化合物 3－甲氧基－4－羟基苯酚－1－O－β－D－(6－O－没食子酰)－葡萄糖苷(1)，
3，4－二羟基－5－甲氧基－苯甲酸甲酯(5)和 3，5－二羟基－4－甲氧基－苯甲酸(8)为首次从槭树科植物中
分离得到。除化合物没食子酸(3)和没食子酸甲酯(4)外其它均为首次从红槭树植物中分离得到。化
合物 1～7 具有较强的清除 DPPH自由基活性，其 IC50范围为 8． 03～990． 57 μmol /L。
致谢:感谢美国罗德岛大学药学系 Navindra P． Seeram博士提供的实验指导及 J． Peter Morgan 先生对实验材料的鉴定及
准备。
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