全 文 ：36
第 44 卷 第 5 期
2015 年 5 月
Vol.44 No.5
May.2015
化 工 技 术 与 开 发
Technology & Development of Chemical Industry
大叶桉叶中没食子酸的提取研究
吴春燕，蔡　敏，韦后明，易灵红
（广西现代职业技术学院资源工程系，河池 547000）

摘　要：以大叶桉叶为原料，选择合适的溶剂提取大叶桉叶中的没食子酸。以高效液相色谱为检测手段，用蒸
馏水进行提取。通过提取时间、提取温度、固液比、提取次数4个单因素实验，确定正交试验的水平，优化提取工艺。
通过正交试验确定没食子酸提取量的影响因素大小是：提取温度＞提取时间＞提取次数＞固液比。最佳工艺条件是：
提取时间150min，提取温度100℃，固液比为1∶60，提取次数为3次，在此工艺条件下，没食子酸提取量为5.27mg·g-1。
关键词：大叶桉叶；没食子酸 ；正交试验
中图分类号：TQ 941 文献标识码：A 文章编号：1670-9905(2015)05-0036-03
基金项目：2015 年广西高校科研项目 ( 项目编号：KY2015LX736)
作者简介：吴春燕（1982-），女，广西钦州人，硕士，讲师，主要从事化工教学和研究工作
收稿日期：2015-03-11
大叶桉植物的叶子及果实都具有药理活性。
大叶桉水煎剂对金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、甲
型链球菌、八叠球菌、伤寒杆菌、大肠埃希菌、铜绿
假单胞菌杆菌、奈瑟球菌有较强的抑制作用。大叶
桉叶中含有的没食子酸在试管内对流感病毒有抑
制作用 [1]。此外，没食子酸还可作抗氧化剂，具有
抗炎、抗氧化、抗自由基、抗突变等多种生物学活
性，可用于制造焦性没食子酸、有机合成和制备药
物、试剂等 [2-3]。本文通过单因素实验和正交试验，
探索了大叶桉叶中没食子酸的提取工艺，为大叶桉
叶的综合开发利用提供理论依据。
1　实验
1.1 材料与试剂
原料及试剂：大叶桉叶采自广西河池市内，经
50℃烘干、粉碎并过 0.178mm 筛后备用；没食子酸
对照品（≥ 98%），提取溶剂用甲醇为分析纯，液相
色谱用甲醇为色谱纯，水为二次蒸馏水，磷酸为分
析纯。
仪器：LC-310 型高效液相色谱仪，HH型数显
恒温水浴锅，FN101-2A 型电热恒温鼓风干燥箱等。
1.2　试验方法
1.2.1　没食子酸的提取
取大叶桉叶干粉 1g，放入锥形瓶中，加入一定
量的提取溶剂，待恒温水浴锅升到设定温度后，放
入锥形瓶，提取一定时间后，减压抽滤，将滤渣用等
量提取溶剂再次提取后，合并滤液，将滤液转移到
250mL 容量瓶中，再从容量瓶中吸取 25mL 转移到
250mL 容量瓶中，供高效液相色谱分析用。
1.2.2　没食子酸的定量分析
1.2.2.1　色谱条件
色谱柱：Ultimate XB-C18 柱（250mm×4.6mm，
5μm）；流动相：甲醇-0.5%磷酸水溶液（5∶95，v/v）；
流速：1.0mL·min-1；检测波长：272nm；柱温：25℃；
进样量：10μL。
没食子酸对照品液相色谱图如图 1所示。
147.00
mM
U
117.20
87.40
0.00 3.20 9.606.40 12.80 14.40 16.00
min
1.60 4.80 11.208.00
57.60
27.80
-2.00
图 1　没食子酸对照品液相色谱图
1.2.2.2　标准曲线的绘制
精确称取没食子酸对照品溶于二次蒸馏水中，
37第 5 期
配制成 400mg·L-1 的标准溶液，超声波脱气。再将
此溶液稀释为浓度为 2.0、4.0、8.0、16.0、32.0mg·L-1
的系列标准工作液，超声波脱气。按照 1.2.2.1 的色
谱条件采用外标法进行测定。以没食子酸浓度作为
横坐标，吸收峰面积作为纵坐标作图，可得标准工作
曲线如图 2所示。由图 2可知，没食子酸的浓度在
2.0~32.0mg·L-1 浓度范围内，峰面积与浓度呈现良
好的线性关系，线性回归方程为 Y=15502X-100.35，
相关系数为 0.9999。
峰
面
积

浓度 C/mg·L-1
图 2　没食子酸含量的标准工作曲线
2　结果与讨论
2.1　单因素实验
2.1.1　提取溶剂对大叶桉叶中没食子酸提取量的影响
由于没食子酸中含有 3个羟基和 1个羧基，具
有极性，故选择水和甲醇作为提取溶剂。固定提取
时间为 120min，固液比为 1∶50（g∶mL），考察不同
浓度下的甲醇-水溶液对大叶桉叶中没食子酸提取
量的影响，结果如图 3所示。由图 3可知，随着甲醇
含量的增大，没食子酸提取量逐渐降低，故选择蒸馏
水为提取溶剂。
提
取
量
/m
g·
g-1

提取溶剂
图 3　提取溶剂对没食子酸提取量的影响
2.1.2　提取时间对没食子酸提取量的影响
提取温度为 100℃，提取溶剂为蒸馏水，按固液
比 1∶50（g∶mL）的条件考察提取时间对大叶桉叶
中没食子酸提取量的影响，结果如图 4所示。由图
4可知，没食子酸提取量随着提取时间延长而逐渐
提高。当提取时间达 120min 后再延长时间提取率
变化不大，没食子酸已基本溶解在水中，故提取最佳
时间为 120min。
提取时间 /min
提
取
量
/m
g·
g-1

图 4　提取时间对没食子酸提取量的影响
2.1.3　提取温度对大叶桉叶中没食子酸提取量的影响
提取时间为 120min，提取溶剂为蒸馏水，按固
液比 1∶50（g∶mL）的条件考察提取温度对大叶桉
叶中没食子酸提取量的影响，结果如图 5所示。由
图 5可知，没食子酸提取量随温度的升高呈逐渐上
升的趋势。其原因是高温下没食子酸的溶解、扩散
速度加快，从而加快了大叶桉叶中没食子酸的溶出。
由于蒸馏水的沸点为 100℃，无法再提高提取温度，
故提取温度选择为 100℃。
提取温度 /℃
提
取
量
/m
g·
g-1

图 5　提取温度对没食子酸提取量的影响
2.1.4　固液比对大叶桉叶中没食子酸提取量的影响
提取时间为 120min，提取温度为 100℃，提取溶
剂为蒸馏水，考察固液比对大叶桉叶中没食子酸提
取量的影响，结果如图 6所示。从图 6看出，没食子
酸的提取量随溶剂量的增大而逐渐提高，但过大的
溶剂量一方面会造成溶剂浪费，另一方面也会将大
提
取
量
/m
g·
g-1

固液比 /g∶mL
图 6　固液比对没食子酸提取量的影响
吴春燕等：大叶桉叶中没食子酸的提取研究
38 化 工 技 术 与 开 发 第 44 卷
Extraction of Gallic Acid from Eucalyptus Robusta Leaf
WU Chun-yan, CAI Min, WEI Hou-ming, YI Ling-hong
(Department of Resources Engineering，Guangxi Modem Vocational Technology College，Hechi 547000, China)
Abstract: Gallic Acid was extracted from eucalyptus robusta leaf with suitable solvents．Applied HPLC as detection method,
dstilled water was selected as the extractant．Based on the four single-factor tests of extraction time, extraction temperature, the ra-
tio of solid to liquid and extraction times, optimize extraction process of orthogonal experiments were determined and optimal con-
ditions were obtained: extraction time was 150min, extraction temperature was 100 ℃ , the ratio of solid to liquid was 1∶60 and
extraction times was 2 times. The extraction amount was 5.27 mg/g．
Key words：eucalyptus robusta leaf; gallic acid; orthogonal experiments
叶桉叶中的其他杂质溶解出来。故选择提取固液比
为 1∶50（g∶mL）。
2.1.5　提取次数对大叶桉叶中没食子酸提取量的影响
提取时间为 120min，提取温度为 100℃，提取溶
剂为蒸馏水，固液比为 1∶50（g∶mL），考察提取次
数对大叶桉叶中没食子酸提取量的影响，结果如图
7 所示。由图 7 可知，大叶桉叶提取 2次时没食子
酸基本提取完成，再增加提取次数没食子酸提取量
的增加很小。故选择提取次数为 2次。
提取次数
提
取
量
/m
g·
g-1

图 7　提取次数对没食子酸提取量的影响
2.2　正交试验
2.2.1　实验因素与水平表
在单因素实验基础上，选取提取时间（min）、提
取温度（℃）、固液比（g∶mL）、提取次数 4 因素，进
行 L9（34）正交试验，试验因素与水平表见表 1。
表 1　正交试验实验因素与水平表
因素
水平
A
提取时间
/min
B
提取温度
/℃
C
固液比
/（g∶mL）
D
提取次数
1 90 80 1∶40 1
2 120 90 1∶50 2
3 150 100 1∶60 3
2.2.2　结果与讨论
正交试验结果见表 2。由表 2 正交试验结果
可知，影响大叶桉叶中没食子酸提取因素顺序为：
B＞ A＞ D＞ C，即提取温度＞提取时间＞提取次
数＞固液比，以 A3B3C3D3 为最优组合，即提取时间
120min，提取温度 100℃，固液比为 1∶60，提取次数
为 3次。
2.2.2　最佳工艺条件的验证
按 A3B3C3D3 组合，即提取时间 120min，提取温
度 100℃，固液比为 1∶60，提取次数为 3次，进行 3
次平行试验，并取平均值，得大叶桉叶中没食子酸提
取率的提取量为 5.27mg·g-1。
表 2　正交试验设计及试验结果
因素 A B C D 提取量 /(mg·g-1)
1 1 1 1 1 3.79
2 1 2 2 2 4.69
3 1 3 3 3 4.88
4 2 1 2 3 4.82
5 2 2 3 1 4.90
6 2 3 1 2 4.85
7 3 1 3 2 4.63
8 3 2 1 3 5.10
9 3 3 2 1 4.98
T1 13.36 13.24 13.74 13.67
T2 14.57 14.69 14.49 14.17
T3 14.71 14.71 14.58 14.8
极差 1.35 1.47 0.84 1.13
3　结论
通过单因素实验及正交试验可知，以蒸馏水为
提取溶剂较为合适，影响大叶桉叶中没食子酸提取
顺序为：提取温度＞提取时间＞提取次数＞固液
比。最佳工艺条件是：提取时间 120min，提取温度
100℃，固液比为 1∶60，提取次数为 3次，在此工艺
条件下，没食子酸提取量为 5.27mg·g-1。
参考文献：
[1] 王国强 . 全国中草药汇编（卷二）[M]. 北京：人民卫生
出版社，2014：69.
[2] 李沐涵，殷美琦，冯靖涵，等 . 没食子酸抗肿瘤作用研
究进展 [J]. 中医药信息，2011，28(1)：109-111．
[3] 常连举，张宗和，黄嘉玲，等 . 没食子酸的制备与应用
综述 [J]. 生物质化学工程，2010，44(4)：48-50.