全 文 ：元宝草不同药用部位中芒果苷和总黄酮的含量测定
郭 澄＊ 1　郑清明1, 2　郑汉臣 2
1(上海交通大学附属第六人民医院药剂科 ,上海 200233)　　2(第二军医大学药学院生药学教研室 , 上海 200433)
　 2005-12-16收稿;2006-06-11接受
本文系上海交通大学附属第六人民医院特色专业基金资助项目(No.04-233)
1　引　　言
元宝草(HypericumsampsoniHance.)系金丝桃科(Hypericaceae)金丝桃属(Hypericum)多年生草本植物。近年来的
研究表明元宝草也具有抗忧郁作用 ,其所含的黄酮成分是主要的活性成分 。本实验分别测定了元宝草生药全草 、根 、茎 、
叶 、花 、果实等部位中芒果苷和总黄酮的含量。实验结果为资源开发和品质评价提供科学依据。
2　实验部分
2.1　实验材料 、试剂与仪器　元宝草采自江西省高安市 , 经作者鉴定。芒果苷 , 自制 , 经 HPLC面积归一化法测定纯度
99.0%以上 ,芦丁对照品(中国药品生物制品检定所 ,含量测定用);甲醇为色谱纯 ,水为二次蒸馏水。其它试剂为分析
纯。 Waters高效液相色谱系统(Waters600E泵 、996 DAD光电二极管阵列检测器 、Milennium 2000 色谱分析软件),
WatersSymmetryC
18
柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm)、岛津 UV-240分光光度计(岛津公司)。
2.2　样品制备　(1)对照品溶液制备　精密称取 120℃干燥至恒重的芒果苷对照品 25 mg, 置 25 mL容量瓶中 , 加甲醇
适量 , 完全溶解 ,用甲醇稀释至刻度 , 摇匀。甲醇稀释成对照品溶液(芒果苷 0.2 g/L)。精密称取 120℃干燥至恒重的芦
丁标准品 10mg,加甲醇溶解制成总黄酮检测对照品溶液(芦丁 0.1 g/L)。 (2)样品溶液制备　将元宝草全草生药置烘
箱 40℃下干燥至恒重 , 分别取全草 100g, 花 、幼果 、叶各 5 g, 主茎 、幼茎 、根各 10 g, 经粉碎或捣碎后各取 1.0 g, 分别置
50 mL三角烧瓶中 , 每次加入 20 mL甲醇 , 超声 40min, 提取 3次 , 过滤 ,合并滤液转移至 100mL容量瓶中 ,加入甲醇至刻
度 , 摇匀 , 用于芒果苷含量测定。花 、幼果 、叶 、主茎 、幼茎 、根捣碎后样品各取 1.0g, 置索氏提取器中 ,加入石油醚 80 mL,
回流脱脂 , 再加 80 mL甲醇 ,水浴提取至无色 , 过滤后将提取液转移至 100 mL容量瓶中加入甲醇定容 , 作为总黄酮测定
供试品溶液。 (3)色谱条件　柱温:35 ℃,流动相 A相为甲醇 , B相为 0.5% H
3
PO
4
液(用三乙胺调至 pH3.0),两相比例
为 32%A～ 68%B,流速 0.8 mL/min,进样量 20 μL;检测波长:318 nm。
3　结果与讨论
3.1　芒果苷含量测定　(1)线性关系考察　取芒果苷对照品液适量 , 分别置 10 mL容量瓶中 , 加入甲醇定容至刻度 ,不
同浓度依次进样 , 分别重复进样 3次。 以对照品峰面积为纵坐标 Y, 浓度 C(g/L)为横坐标 X, 求得线性回归方程:
Y=-129537.43+48661521.25X(r=0.9990),线形范围 0.004 ～ 0.200g/L。 (2)精密度和重复性实验　精密吸取对照
品溶液(0.032g/L), 连续测得 6次 , 求得芒果苷峰面积值的 RSD为 1.14%。精密吸取对照品溶液(0.032g/L), 进样 ,分
别于第一 、二天测定 ,测定日间精密度的 RSD为 1.60%。称取元宝草全草地上部分样品 6份 ,每份 1 g精密称定 , 测得芒
果苷的峰面积 , RSD为 1.42%。 (3)回收实验　称取已知含量的元宝草生药粉末 1.0 g, 按高 、中 、低 3个浓度加入一定
量对照品溶液 , 按 2.2(2)方法制备 ,加入量 0.064 、0.032、0.016 g/L的回收率分别为 101.30%、100.31%、99.79%, RSD
分别为 1.56%、1.89%、1.30%。 (4)芒果苷含量测定　分别精密吸取生药不同药用部位的样品溶液及对照品溶液 ,分
别进样 , 以外标法计算各样品溶液中的芒果苷含量 , 全草(0.13%)、全草地上部分(0.49%)、幼果(0.27%)、花
(0.84%)、叶(0.66%)、主茎(未检出)、幼茎(0.048%)、根(未检出)。
3.2　总黄酮含量测定　(1)线性关系考察　取芦丁对照品溶液 0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0和 10.5 mL分别置 50 mL
容量瓶中 , 各加水至体积为 12.0 mL, 加入 5%NaNO2 2.0 mL, 摇匀 , 放置 6 min, 加 10% Al(NO3)3 2.0 mL, 摇匀 , 放置
6 min。加入 4%NaOH20mL,用蒸馏水稀释至刻度 , 摇匀。放置 15min后以第一管作空白 ,在 500 nm测吸收光度 ,以吸
收光度 A为纵坐标 ,浓度 C(g/L)为横坐标 ,求得线性回归方程为:A=11.463C+0.004 (r=0.9996), 线性范围:0.008 ～
0.042g/L。 (2)精密度和重复性实验量取对照品溶液(0.024g/L),连续测得 6次 ,求得对照品吸收度的 RSD为 0.97%。
称取元宝草全草地上部分样品 6份 ,每份 1.0g, 按 2.2(2)制备样品 , 测得总黄酮的吸光度 , RSD为 1.06%。 (3)回收实验
准确称取已知含量的元宝草生药粉末 1.0 g,按高 、中 、低 3个浓度加入一定量对照品溶液 , 加入量 0.032、0.024和 0.016
g/L的回收率分别为 99.69%、99.58%和 101.04%, RSD分别为 1.13%、1.10%和 1.99%。 (4)样品溶液浓度测定　分别精
密量取元宝草生药不同药用部位的样品溶液(相当于总黄酮 0.024g/L),以外标法测得样品中总黄酮含量 ,全草(3.68%)、
全草地上部分(5.10%)、幼果(3.22%)、花(10.60%)、叶(6.41%)、主茎(0.13%)、幼茎(1.65%)和根(0.06%)。
第 34卷
2006年 11月　　　　　　　　　　　　
分析化学 (FENXIHUAXUE)　来稿摘登
ChineseJournalofAnalyticalChemistry 　　　　　　　　　　　　
第 11期
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