全 文 ：癌变·畸变·突变　　1998年第 10卷第 3期　　　　　　　 Carcinogenesis Teratogenesis and Mutagenesis Vol 10 No 3 1998
赤包根茎醇提取物致突变性研究①
吴勃岩1　张音员娴1　王华江2　赵玉桢2　段玉芹2　孙玉珍2
1黑龙江中医药大学生物学教研室　哈尔滨　150040　2哈尔滨医科大学生物学教研室　哈尔滨　150080
摘要　本文采用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验 , 小鼠骨髓细胞染色体畸变试验 , Ames 试验 ,对赤包根茎醇
提取物进行致突变性研究 ,结果表明 , 赤包根茎醇提取物无致突变作用 , 本文试验组合的三个测试系统结果一
致 ,均提示赤包根茎醇提取物对遗传物质无损伤作用。
关键词　赤包根茎;微核试验;染色体畸变试验;Ames试验;致突变
A STUDY ON THE MUTAGENICITY OF ETHANOL EXTRACT OF
THLADIANTHA DUBIA BUNGERHIZOME
Wu Boyan , et al
Biological Dept.of HeiLongjiang Universi ty of Chinese Medicine , Harbin 150040
Abstract　We studied the mutation indnad by ethanol ex tract of Thladiatha dubia bunge rhi-
zome in the bone marrow cell of mice and tow ards the TA98 and TA100 bactarial lines by meth-
ods of PCE-MNT and CAT of mice and Ames test.The results indicated that 30% and 50%
ethanol ex tract of thladiantha dubia bunge rhizome did not induce signif icantly increase of PCE-
MNF and CAP in mice.The mutagenicity of ethanol ext ract also show ed negative result in Ames
best.All results indicated that ethanol ext ract of thladiantha dubia bunge rhizome is not damage
effect to genetic material.
Key word 　Ethanol ext ract of Thladiatha dubia bunge rhizome;M icronucleus;Chromosome
aberration;Ames test;Mutagenicity .
　　赤包根茎为葫芦科赤包属多年生草本植
物赤包(Thladiantha dubid Bunge)的干燥根
茎 , 《本草纲目》记载其性寒味苦 ,具有清热解
毒 ,散结消痈 ,通乳之功效(1)。民间偏方治疗
癌症有一定疗效 。黑龙江中医药大学中药研
究所研究证明赤包根茎醇提取物有明显的抑
瘤作用 ,是一种很有前途的抗癌中药(2)。目
前国内外还未见他人报道赤包根茎致突变性
研究。本文通过小鼠骨髓嗜多染红细胞微核
(PCE-MN)试验 ,小鼠骨髓细胞染色体畸变
(CA)试验 , Ames 试验 , 对赤包根茎 30%和
50%醇提取物及分离的赤包根茎单体 Ⅰ进行
致突变性研究。
材料与方法
1　材料
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① 本课题为黑龙江省自然科学基金 、省教委资助项目
实验动物 、纯系昆明种小鼠 ,体重 18-22
克 ,由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。
赤包根茎醇提取物为皂甙类 ,从 30%醇
提取物分离的赤包根茎单体 Ⅰ是以皂皮酸为
甙元的双糖链皂甙———赤包甙 ,由黑龙江中医
药大学中药研究所提供。
2　方法
2.1　PCE-MN 试验
取昆明种小鼠随机分成 8组 ,每组 10只 ,
雌雄各半 ,实验组赤包根茎醇提取物按高 、中
低三个剂量灌胃给药七天 ,末次给药 24h后处
死;阴性对照组灌服生理盐水;阳性对照组按
40mg/kg 的剂量腹腔注射环磷酰胺(CP),间
隔24h 再注射同量 CP , 6h 脱颈椎处死小鼠 。
取股骨骨髓常规制定 ,每只鼠计数 1000 个
PCE ,统计微核千分率 。
2.2　CA试验
实验动物品种 、分组和处理方法同微核试
验 ,小鼠处死前 3h 均腹腔注射秋水仙素 4mg/
kg ,取股骨骨髓常规制备染色体片 ,每只鼠计
数 100个中期相 ,统计畸变百分率。
2.3　Ames试验
赤包根茎单体 Ⅰ用 DMSO 溶解 ,设三个
剂量。
采用 TA98 、TA100两菌株 ,由美国加州
大学 Ames试验室提供 ,经哈医大毒理室鉴
定 。采用两菌株(加与不加 S9)。各剂量组皆
作三个平行样本 、计算其回变菌落数 。
结果与讨论
PCE-MN试验结果见表 1。
结果表明各实验组小鼠 , PCE 微核率与
阴性对照组比较均无显著性差异(P >0.05),
说明赤包根茎 30%和 50%醇提取物不诱发小
鼠骨髓 PCE 微核的增加 ,虽然 50%醇提取物
高剂量组微核率有所增高(2.4‰±1.0),但仍
属于正常范围。
表 1　赤包根茎 30%和 50%醇提取物对小鼠 PCE微核的影响
组　　别 剂　　　量 鼠数 PCE数 微核率(‰)
x ±s
阴性对照 　　　　生理盐水 10 10 000 1.50±0.71
实验Ⅰ 30%醇提取物 0.01g/ kg 10 10 000 1.50±1.26＊
实验Ⅱ 30%醇提取物 0.02g/ kg 10 10 000 1.80±1.03＊
实验Ⅲ 30%醇提取物 0.06g/ kg 10 10 000 1.60±0.84＊
实验Ⅳ 50%醇提取物 0.06g/ kg 10 10 000 1.70±0.82＊
实验Ⅴ 50%醇提取物 0.11g/ kg 10 10 000 2.00±1.05＊
实验 Ⅵ 50%醇提取物 0.22g/ kg 10 10 000 2.40±1.07＊
阳性对照 　　　CP　　 40mg/kg 10 10 000 30.80±2.10
＊表示与阴性对照组比较 P>0.05
　　CA试验结果见表 2。
结果表明各实验组小鼠骨髓细胞 CA 率
与阴性对照组比较均无显著性差异(P >
0.05),而阳性对照组小鼠的 CA 率与阴性对
照组比较 ,差别有极显著性意义(P <0.01),
说明赤包根茎 30%和 50%醇提取物对小鼠染
色体没有致畸变作用 。
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表 2　赤包根茎 30%和 50%醇提取物对小鼠骨髓细胞 CA 率的影响
组　　别 剂　　　量 鼠数 中期细胞数 畸变细胞数 畸变率(%)
阴性对照 　　　　生理盐水 8 800 9 1.13
实验Ⅰ 30%醇提取物 0.01g/ kg 8 800 9 1.13＊
实验Ⅱ 30%醇提取物 0.02g/ kg 8 800 10 1.25＊
实验Ⅲ 30%醇提取物 0.06g/ kg 8 800 12 1.50＊
实验Ⅳ 50%醇提取物 0.06g/ kg 8 800 10 1.25＊
实验Ⅴ 50%醇提取物 0.11g/ kg 8 800 11 1.38＊
实验 Ⅵ 50%醇提取物 0.22g/ kg 8 800 13 1.63＊
阳性对照 　　　CP　　 40mg/kg 8 800 198 24.75＊＊
＊表示与阴性对照组比较 P>0.05 , ＊＊与阴性对照组比较 P<0.01
　　Ames试验结果见表 3 。
结果表明无论有无 S9 存在 ,各药物剂量
组与相应组自发回变皿比较均 P >0.05 ,二者
无显著性差异 ,说明赤包根茎提取物单体 Ⅰ无
诱变性 。
表 3　Ames试验结果
检样 浓度(μg/皿)
平均每皿菌落数
不加 S-9　　　　　　　　　　　　　　加 S-9
TA98　　　　　　TA100　　　　　　TA98　　　　　　TA100
赤包根茎 　100 　　　 24.67＊ 　　　　96＊ 　　　　19＊ 　　　165＊
(单体Ⅰ) 500 22.22＊ 100＊ 20＊ 122＊
1000 20.44＊ 103＊ 19＊ 156＊
自发回变 20.67＊ 115 20 145
敌克松 62.5 1228 845
2-氨基芴 10 · 215 426
＊与自发回变皿比较 P>0.05。
　　Ames试验在基因水平上反映了遗传物质
受损伤情况 、CA 和 MN 试验从染色体水平上
反映了遗传物质损伤情况(3)。本文试验组合
的三个测试系统 PCE-MN T 、CAT 、Ames试
验结果是一致的 ,均提示赤包根茎醇提取物对
遗传物质无损伤作用 。为赤包根茎的开发应
用提供了遗传毒理安全性实验数据 。
参考文献
1　江苏新医学院编.中药大辞典.上海:上海人民卫生出版
社 , 1977:503
2　张玉梅.赤包根茎化学成分研究.黑龙江中医学院研究
生论文.1992
3　陈奇.中药药理研究方法学.第一版 ,北京:人民卫生出
版社 , 1993:130-190
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