全 文 ：12 6 浙江预防医学 1 998年第 2 期
奋 考 文 献
刘志城 、 于守洋 . 营养与食品卫生 学 . 北京 : 人
民卫生出版社 , 1 98 9 : 2 0 7一2 1 3
中华人民共和国国家标准 . 食 品卫生检脸方法 理
化部分 . 北 京 . 中国标准出版社 , 1 9 8 6 : 1 2 7一 12 9
卫生部食 品卫生监督枪脸所 . 食品卫生检 验方法
理化部分注解 . 1 9 8 7 : 2 5 6
食 品卫生理化检验文集 (第一集 ) . 北京 : 北京大
学 出版社 , 1 99 0 : 2 4
冯素萍 , 等 . 分析化学 , 19 9 3 , 2 1 ( 3 ) : 2 9 4
F o g g A
.
G
, e t a l
.
A n a l y s t
,
1 9 7。 , V o l 1 0 4 :
1 0 8了一 1 0 9 0
架秀坤 、 白晤光 . 分析化学 , 19 5 7 , x s ( 5)一峨4
王丽增 , 等 . 应用化学 , 1 9 0 0 , 了 ( 3 ) : 82
中 草 药 六 月 雪 的 毒 性 试 验
浙江省卫生防疚站 ( 3 1 0 0 0 9) 夏 勇 傅剑云 吴葱岭 徐彩菊 赵 硕
六月雪 ( S e r i s s a s e r i s s o i d e , ( D C . ) D r u e e ) ,
茜草科六月雪属植物 , 具有疏风解表 、 清热利湿 、 舒
筋活络之功效〔 , ) 。 为开发其实用和经济价值 , 科研
人员意欲通过科学处理 , 将其应用于食品生产 ,作为
一种食品新资源 。 为 了保证食用的安全 , 我们对它
的急性毒性和致突变性进行了实验研究 。
材料与方法
1
. 实验材料
受试物 : 六月雪粉末由浙江新昌健神保健品有
限公司提供。 该品由六月雪干品粉碎制成 。
动物 : 健康 IC R 小鼠 , 体重 1 8一 2 5克 , S D 大
鼠 , 体重 1 80 一 2 10 克 , 均由浙江省实验动物中心提
供 。
菌种 : 组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌株 ,
T人 , 7、 T A 。 、 T人 , 0 、 T A 10 : , 由上海市劳动卫生
与职业病研究所提供。
试验前菌株鉴定合格 。
2
. 实验方法及数据统计 : 按 G B 1 5 1 9 3一 9拭食
品安全性毒理学评价程序和方法 》 〔幻进行 。
结果与讨论
1
. 急性经口毒性试验 : 大 、 小鼠经口染毒最高
剂量达 10 9 / k g B . W . , 染毒后两周内未见动物出
现异常反应和死亡情况 。 六月雪大 、 小鼠急性经 口
毒性 L D S。雌难两性均大 于 5 9 / k g B . W . , 按急
性毒性分级属实际无毒类 。
2
.
A m es 试验 : 采用平板掺入法 ,六月雪设四
个剂量组 4 0 、 2 0 0 、 1 0 0 0和 5 00 0 u g /皿 , 同 时设阴
性对照蒸馏水和阳性对照 (敌克松 50 u g /皿 , 二 氨
基茹40 u g /皿 ) 。 每个剂量组设三个平行样 , 实验重
复二次 。 结果见表 1 , 六月雪四个剂量组的回变菌
落数在加 S 。 和不加 S , 的条件下 , 均未超过阴性对
照组回变菌落数的两倍 , 且各剂量组间无明显剂量
反应关系 , 而阳性对照组的回变菌落数均明显增加
( M R > 2)
, 六月雪 A m es 试验结果阴性 。
演 1 六月雪 A ln es 试验结果
组 别 回 变 菌 落 数 (又生 SD )一- .一 .
- 一 一一一一一 -一 -一 ~ 一 - - ~一一 ~一一 .一一 -一一一~ 一- - - - - ~一一一T A ” T A ” T A : 0 0 T A i o :(林g /皿 ) 一 s 。 + S , 一 S , + S 。 一 S 。 + S 。 一 S 。 + S 。阴性对照 1 09 土 12 · 7 1 1 5士 2 1 · 2 2 6士 0 . ? 3 5 士 ? 1 11魂士 a . 5 1 25 士 7 . 1 2 5 0 士 1 4 . 1 2 5 6士 5 . ?受 ` 0 1 15 士 1 8 · ` 1 1口土 1 7 · 0 2 5 士 2 . a s l 士召. 2 1 1 5 上 2 1 . 2 1 3 1 士 2 5 . 6 2 5 2土 5 . 5 2 5 7士 2 2 . 2试 2 00 1 1` 士 8 · 5 1 1 1士 9 . 9 2 7 土 2 . 1 3 3 士 ` . , 1 1了士 马 . 0 13 6士 2 , 5 2 47 士了 , 1 2 7。士 1 4 . 1物 1 0 0 0 1 1 2 士 5 · 7 1 2 3 士 4 · 2 2 5 士导. 7 3 3士 2 . ` 1 10 士 i ` . 1 2 5 3 士 。 ` 。 2 ` 6 士 z 日 8 Z e o 士 1 7 . 0
5 0 0 0 1 1 5 土 7 · 1 1 24 士5 7 3 3 士4 , 2 3。土 1 . 4 1 13 土 i s . G 1 3 1士 1 . 续 2 60 土 2 5 . 5 2 了` 士 5 . 5
故克松 50 2 9 1 8 士2 6 6 · 0 5 4 5 士 17 6 . 3 1 0 5 2士 2 2 4 . 2 12 02 士 2 2 9 . 。
二纸荃荡4 0 9 30 土 2 8 7 · 2 6 54 士 i Za 、 6 5 2 a 士 i 妞峨. 5 30 。土 20 . `一一~ - 一一- - 一一一一 , , ~ 一一一- - .一一口一 - 一_ 一
浙江预防医学 1 99 8年第 2期 . 1 2 7 ·
3
. 小鼠骨髓细胞微核试验 : 六月雪设三 个 剂
量组 1 . 2 5、 2 . 5。和 5 .。。 g / k g , 同时设阴性对照和
旧性对照 (环磷酞胺4 0 m g / k g ) 。 结果见表 2 , 六月
雪三剂量组的微核率与阴性对照组比较 , 差别无显
著性 (砂检验 , P > 0 . 05 ) , 而阳性对 照组 与阴性
对照组比较微核率明显增高 ,且有显著性差异 ( P <
0
.
0 1 )
, 六月雪小鼠微核试验结果阴性 。
裹 2 六月雪小鼠骨艇细胞微核试验结果
表 3 六月雪小鼠精子畸形试验结果
组 别
(m盯 k g )
鼠数
(只 )
观察精于
数 (个 )
嗬形致
(个 )
畸形率
(% )一一~ 一一一 一 ~ ~ 一~ 一 ~ 叭一 ~ 一一一 叫一 - 叫一 .一~ 山一一一124时功0,傀占`1ōJl九O口`J任月叹gn吃上,月O,人nU,二志,感1ù亡U阴性对照(H : O )12 5 0六月雪 2 5 0 0
5 0 0 0
环磷醉胺 4 0
1 0 0 0 0
1 0 0 0 0
仑00 0
1 0 0 00
10 0 0 0
n.八切0ēU,二
j土,鑫奋月人
组 别
`m留k g )
鼠 致 P CE M N P C E M N
(只 ) (个 ) (个 ) (编 ) 一~ .一~ ~ , ~ ~ , 州一 巴湘 .一 , . ` = . . 四 . . . ,关 P < 0 , 0 1阴性对服( H :切1 2占口
六月彗 2 5 00
石0 0 0
环礴阶胶4 0
I QOO口
I OQOO
10 0 0 0
I 0 0 0 Q
10公00
1 公
1
,
1
i 口
3 0
,
5 令
水 P < 0 . 0 1
4
. 小鼠精子畸形试验 : 六月雪设三个剂量 组
1
.
25
、
2
.
50 和 5 . 。。 g / k g , 同时设阴性对照和附性
对照 (环磷酞胺切 也盯 k g ) 。 结果见表 3 , 六月雪三
剂量组精子畸形率与阴性对照组比较 , 差别无显著
性 ( H检验 , P > 。 . 0 5 ) , 而阳性对照组与阴性对 ,照
组比较精子畸形率明显增高 ,且有显著性差异( P <
0
.
0 1 ) , 六月雪小鼠精子畸形试验结果阴性。
上述实验结果表明 , 六月雪大、 小鼠急性毒性
试验 L D 。。 雌雄两 性 均大 于 10 9 / k g B . W . , 属
实际无毒级 , 据此不再进行蓄积毒性试验 31t 。 三项
诱变试验 : 人m ” 试验 , 小鼠骨髓细胞微核试验 、
小鼠糟子畸形试验结果均为阴性 , 且三项诱变试验
的阳性对照组均得出阳性结果 ,说明测试系统有效 ,
提示六月雪对基因 、 染色体和生殖细胞无诱变损害
作用。 故从食品毒理学的角度出发 ,可以初步认为 ,
六月雪对人体无毒 , 无致突变作用 , 有良好的研究
和应用价值 。
参 考 文 献
1 《全国中草药汇编》编写组 . 粼全国 中草 药 汇 编》
(上册 )人民卫生出版社 . 10 7 5 : 7 3 5 .
2 卫生部《食品安全性毒理学评价程序和 办法 》 G B
1 5 1 9 3一甘4 `
3 刘婉谷 . 《卫生毒理学基础》 . 第、 版 . 人 民卫 生
出版社 . 1 9匀2: 16肠 .
n功1口ǎO几U,止二孟王上
应用 P C R 法检测霍乱 O J 3 。肠毒素
温岭市防渡站 尹卡佳 毛文祥 王琳娜 孙部茄
O
: 。。霍乱弧菌是第一个能引起霍乱流 行 的非
0 : 群霍乱孤菌。 它所引起的临床症状和 流 行特点
与 O : 群霍乱弧菌引起的霍乱病极为相 似 , 也能产
生致泻较强的霍乱肠毒素 ( C T ) , 具有 C T X 基因。
因此检测 O , 霍乱弧菌是否携带 C T基因 , 这对了
解该菌株的致病力 , 控制其传播和流行具有重要意
义 。 我们采用 P C R 技术对本市( 19夕6年 ) 收集的巧
株 O : a , 霍乱弧菌进行 C T 基因检测 , 现将检测结果
报告如下 。
材料与方法
一 、 菌株来源 , 15 株 O , , , 霍乱弧菌均从本市疑
似病人 , 带菌者粪便及外环境中检出。
二 、 试剂与方法 : 采用 P C R 法 , 试荆盒由军
事医学科学院放射医学研究所提供。 扩增反应采用
三步法进行 , 循环次序 : 变性g 4 O C , 峨5 5 , 退火5 5 , 0 ,
4 5 5 ,延伸 72 00 , 遵5 5 , 以此循环 35次 , 扩增完成后 ,
经 1 . 5纬琼脂凝胶电泳 , 在紫外灯下观察有 3 10 6 9的
橙色荧光带者即为阳性。
三 、 细菌培养 , 将 15株菌株分别置碱性蛋白陈
水 ( PH , 8。 4 ) 3 7吧 , 增菌 6 一 8 小时 。
四 、 仪器 : D B 6 e马20 一 26 扩增仪 , 台式高速离
心机 , 紫外检测仪 M O D E L Z F 一 3 , D Y 一 30 0 型低
压电泳仪 , (下转第 12 页 )