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东北八种老鹳草没食子酸含量比较



全 文 :小鼠免疫功能调节作用。结果显示蝇蛆蛋白粉能明
显提高机体的细胞免疫和体液免疫功能 ,且可显著
提高正常小鼠 HC50 ,增强其体液免疫功能 ,而对巨
噬细胞的吞噬功能无影响;对免疫功能低下小鼠
HC50无影响 ,但对 CY造成的体液免疫功能低下的
小鼠有明显预防性保护作用 ,并使体液免疫功能恢
复至正常水平。在实验全过程中未见实验动物有任
何不良反应 ,提示如机体免疫功能下降或体质衰弱
者 ,可口服蝇蛆蛋白粉来增强免疫功能预防某些疾
病 。此外 ,蝇蛆蛋白质中各种必需氨基酸完全符合
WHO /FAO标准 ,而且必需氨基酸配比协调 ,含量齐
全 ,含硫氨基酸较丰富 〔3〕。因此 ,蝇蛆蛋白粉作为
保健品的开发与研制有广阔的潜力。
以 CY制作的免疫抑制动物模型 ,制作简单 、方
法稳定可靠 。经 CY处理的动物 , T细胞与 B细胞
均有损伤 ,表现为小剂量可明显抑制 B细胞功能 ,
大剂量才对 T细胞功能有显著抑制作用即:小剂量
抑制体液免疫功能 ,大剂量抑制特异性细胞免疫功
能。本实验表明 ,蝇蛆蛋白粉对正常小鼠 α无影
响 ,即对巨噬细胞的吞噬功能无影响;对免疫功能低
下小鼠 HC50无影响 ,即对体液免疫功能无影响。这
种现象可能与造模 CY剂量 、给药时间 、剂量等因素
有关 ,有待于进一步探讨 。
参 考 文 献
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(2006 - 11 -20收稿)
资源
东北八种老鹳草没食子酸含量比较
尹海波 ,何 静 ,王 冰 ,许 亮
(辽宁中医药大学药学院 ,辽宁大连 116600)
  摘要 采用 HPLC法比较东北三省 8种老鹳草没食子酸的含量 , 结果:鼠掌老鹳草中没食子酸含量最高达
0. 301%, 建议可作为老鹳草药用来源。
关键词 老鹳草属;没食子酸;东北三省
中图分类号:R282.71  文献标识码:A  文章编号:1001-4454(2007)06-0637-02
作者简介:尹海皮(1973-),辽宁沈阳人 ,副教授 ,从事药用植物学的教学和资源开发, Tel:(0411)87586004。
  老鹳草是我国少常用中药 ,为牻牛儿苗科牻牛
儿苗 E rod ium stephanianum W illd.、老鹳草 Geranium
wilford iiMaxim.或野老鹳草 G. carolinianum L.的
干燥地上部分 〔1〕 , 始见于明代兰茂的 《滇南本
草》〔2〕 ,正名为五叶草 ,别名有老观草 、六阳草 、五瓣
草 、猫角迹 、老官草。历代本草均有记载 ,有祛风湿 、
通经络 、止泻痢的功效〔3〕。我国老鹳草属 Geranium
有 60多种 ,资源丰富。东北地区有多种老鹳草作药
用 。本实验以东北三省八种老鹳草药材为研究对
象 ,采用 HPLC法考察抗菌有效成分没食子酸含量 。
1  材料与仪器
高效液相色谱仪 (Ag ilent 1100), 紫外检测器
(VWD), Ag ilent色谱工 作站 , 超声波 清洗器
(AS5150A)。对照品没食子酸 (中国药品生物制品
检定所 ,批号:120563-200412)。
实验材料为自采新鲜的 8种老鹳草全草 (表
1),凭证标本保存于药用植物教研室 。取干燥地上
部分 ,研成粉末 ,过 40目筛。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 色谱柱 D ikma D iamonsil-C18(200
mm ×4.6mm , 5μm),流动相:乙腈-0.025 mol /L磷
酸水 ,流速:1 m l /m in, 检测波长:274 nm ,灵敏度
(AUFS)0.05。
2.2 流动相选择 没食子酸水溶性较强 ,选用不
同比例的乙腈 、磷酸水色谱分析结果表明 ,当乙腈-
磷酸水 (2∶98)时 ,样品保留时间适当 ,峰形较好。
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DOI牶牨牥牣牨牫牳牰牫牤j牣issn牨牥牥牨牠牬牬牭牬牣牪牥牥牱牣牥牰牣牥牨牥
在此流动相条件下对供试样品色谱分析结果表明测
定峰与杂质峰得到较好的分离 ,详见图 1及图 2。
 表 1  实验材料
编号 名称 采集地点 鉴定结果
05001 鼠掌老鹳草 辽宁省沈阳市北陵 Geranium sibiricum
050011 老鹳草 辽宁省浓阳市北陵 G. wiford ii
050016 毛蕊老鹳草 黑龙江省佳木斯市四丰山 G. eriostmon
050020 块根老鹳草 黑龙江省佳木斯市四丰山 G. dahuricum
050028 灰背老鹳草 吉林省长白山白河镇前四合村 G. wlassowianum
050036 北方老鹳草 吉林省长白山二道白河镇 G. erian thum
050041 长白老鹳草 吉林省长白山二道白河镇 G. pa ishanens
050054 突节老鹳草 辽宁省千山 G. krameri
图 1 没食子酸高效液相色谱图
图 2 样品高效液相色谱图
2.3  供试品溶液制备 精密称取 8种老鹳草粉末
各 1 g, 50%甲醇超声提取 0.5 h,放冷称重 ,补至原
重 ,摇匀 ,过滤 ,弃粗滤液 ,续滤液浓缩至小体积 ,定
量转移至 10 m l容量瓶中 ,用甲醇稀释至刻度 ,备
用 。
2.4  对照品溶液制备 精密称取没食子酸对照品
7.8mg,置 100 m l容量瓶中 ,加甲醇适量溶解定容
至刻度 ,摇匀 ,制成每 1 m l含 0.078 mg的对照品溶
液 。
2.5  线性范围考察 精密吸取对照品溶液 1μl、5
μl、10μl、15μl、25 μl,注入高效液相色谱仪 ,以进
样量为纵坐标 ,色谱峰面积为横坐标 ,得回归方程 Y
=0.002855X-0.07888 , r=0.9998。对照品在 0.078
~ 1.56 μg范围内线性关系良好。
2.6  精密度试验考察 取本品粉末 1 g,按含量测
定项下方法操作 ,重复进样五次 ,根据峰面积积分值
计算 RSD(%)=0.77。
2.7  稳定性试验考察 取本品粉末 1 g,加 50%的
甲醇 25m l,称重 ,超声提取 0.5 h,放冷称重 ,补至原
重 ,摇匀 ,过滤 ,弃粗滤液 ,续滤液作供试溶液;精密
吸取 20 μl,按 0、2、4、6、8 h ,分别测定峰面积 ,计算
结果 RSD(%)=0.43。
2.8 重复性试验考察 取样品五份 ,按含量测定
项下方法操作 ,根据峰面积积分值计算 RSD(%) =
0.86。
2.9 加样回收率试验考察 取本品已知准确含量
的样品 1 g,精密称定 ,置 25 m l具塞锥形瓶 ,精密加
入没食子酸对照品 0.3276 mg,按样品含量测定方
法操作 ,结果回收率平均值为 100.23%, RSD(%)
=2.81。
2.10 样品含量测定 各样品液 ,每种平行操作 3
次 ,结果见表 2。
 表 2  8种老鹳草没食子酸含量 (n=3)
样品 含量(%)
突节老鹳草 0.044
鼠掌老鹳草 0.301
块根老鹳草 0.038
老鹳草 0.080
毛蕊老鹳草 0.041
北方老鹳草 0.019
灰背老鹳草 0.014
长白老鹳草 0.029
3 讨论与结论
3.1 据报道 ,没食子酸为老鹳草属植物抗菌的有
效成分〔4〕。本实验采用 HPLC测定 8种老鹳草的没
食子酸含量 ,方法稳定 、可靠 ,分离度较好。
3.2 没食子酸的水溶性较强 ,在选择流动项时 ,极
性与保留时间有一定的关系:极性越大保留时间越
长 ,但流动项配比超过 1∶99时 ,色谱柱的吸附几乎
不存在 ,故选择流动项配比为 2∶98。
3.3 测量结果鼠掌老鹳草的没食子酸含量最高为
0.301%,且资源较老鹳草丰富 ,建议若以没食子酸
作为有效成分 ,鼠掌老鹳草可作为药材老鹳草的一
种药用来源。
参 考 文 献
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(2006 - 10 -27收稿)
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