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密腺小连翘提取物抗衰老作用实验研究



全 文 :密腺小连翘提取物抗衰老作用实验研究
龙 斌,陈雪明
(阳江市食品药品检验所,广东 阳江 529500)
摘要:目的 通过实验研究密腺小连翘提取物抗衰老的药理作用。方法 测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、单胺氧化酶 B
(MAO-B)、乙酰胆碱酯酶(AChE)在小鼠脑组织和血清中的活性。结果 密腺小连翘提取物能提高小鼠体内 SOD的活性,降低 MAO-
B、AChE的活性及 MDA的含量。结论 密腺小连翘提取物具有一定的抗衰老作用。
关键词:密腺小连翘;抗衰老;小鼠
中图分类号:R285. 5 文献标志码:A 文章编号:1673 - 4610(2013)10 - 0648 - 02
作者简介:龙 斌,主管药师,Tel:0662 - 3220466,E-mail:yjslb@ foxmail. com
Studies on Anti-Aging Effect of Hypericum Seniavinii
LONG Bin,CHEN Xue-ming
(Yangjiang Institue for Food and Drug Control,YangJiang,Guangdong 529500,China)
Abstract:Objective To analyze the anti-aging effect of Hypericum seniavinii by experiment. Methods To determine the
activity of MDA,SOD,MAO-B,and AChE in the brain and serum of mice. Results The extracts of Hypericum seniavinii
can enhance the activity of SOD in mice,decrease the activity of MAO-B,AChE and the level of MDA in mice. Conclusion
The extracts of Hypericum seniavinii have certain anti-aging effect.
Key words:hypericum seniavinii;anti-aging;mice
密腺小连翘(Hypericum seniavinii)又名小叶连翘、
元宝草等,为藤黄科金丝桃属植物;多年生草本,产安
徽、浙江、江西、福建、湖北、湖南、广东、广西、四川及贵
州等地;生于山坡草地和田埂上,全草入药,主要用于
调经活血、解毒消肿[1]。该属植物所含的金丝桃素类、
黄酮类等物质具有抗抑郁、抑制中枢神经、抗病毒和增
强免疫功能等作用,从而引起医药界的广泛重视[2]。
本文通过实验对密腺小连翘的提取物抗衰老的药理作
用进行初步的研究。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 实验动物 昆明种老年小白鼠,14 ~ 15 月龄,
体重 35 ~ 45 g;昆明种青年小鼠,18 ~ 22 g,雌雄兼用,
由广东省医用实验动物中心提供。
1. 1. 2 实验药物及试剂 密腺小连翘 90%乙醇提取物
(使用前用 0. 5%羧甲基纤维素钠超声混悬) ,超氧化物
歧化酶 (SOD)测定试剂盒、丙二醛 (MDA)测定试剂盒、
单胺氧化酶 B(MAO-B)测定试剂盒、乙酰胆碱酯酶
(AChE)测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
1. 1. 3 实验仪器 TDL-5型离心机(上海市安亭电子仪
器厂) ,岛津 UV2450型紫外可见分光光度计,组织匀浆
机(宁波新芝科器研究所) ,梅特勒 AG135型电子天平。
1. 2 方法
1. 2. 1 小鼠分组 用 Morris 水迷宫实验[3]筛选出老
年痴呆鼠(定位航行试验逃避潜伏期大于青年鼠上
限) ,将筛选出的老年痴呆鼠随机分组,每组 10 只。分
别为密腺小连翘提取物高剂量组(100 mg /kg) ,密腺小
连翘提取物低剂量组(50 mg /kg) ,老年痴呆对照组,老
年正常对照组,青年对照组,按剂量连续灌服 7 d;对照
组均给予 0. 5%羧甲基纤维素钠。3 个对照组的逃避
潜伏期具有显著差异,表明不同的衰老水平,能更好地
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Pharmacy Today ·2013 10 Vol. 23 No. 10·
评价小鼠给药后各项指标的变化。
1. 2. 2 小鼠脑组织和血清中 MDA、SOD、MAO-B、
AChE的测定 小鼠末次给药后次日取脑组织匀浆和
血清,参考测定试剂盒说明书用紫外分光光度计测定。
1. 2. 3 统计方法 所有数据以均数 ±标准差(珋x ± s)表
示,组间差异采用 t检验。P <0. 05代表有显著性差异。
2 结果
2. 1 对脑和血清中 MDA含量的测定
测定方法参考丙二醛(MDA)测定试剂盒说明书
进行。取小鼠 10% 的脑组织匀浆 50 μL 和血清 50
μL,分别在 523 nm 波长出用紫外分光光度法测定。
结果表明,给药小鼠血清和脑中的 MDA 含量明显减
少(见表 1)。
表 1 对脑和血清中MDA含量的测定
组别
血清
MDA
(nmol /mL)
降低
(%)
脑组织
MDA
(nmol /mL)
降低
(%)
青年组 5. 1 ± 1. 7** 37. 8 26. 8 ± 1. 3* 26. 8
老年正常组 7. 2 ± 1. 6 13. 2 36. 6 ± 3. 2 21. 6
老年痴呆组 8. 3 ± 2. 2 - 46. 7 ± 7. 2 -
高剂量组 5. 2 ± 1. 2** 37. 0 26. 8 ± 5. 3* 27. 0
低剂量组 5. 4 ± 1. 4** 34. 3 26. 9 ± 2. 7* 26. 7
注:* P < 0. 05,**P < 0. 01 vs 老年痴呆组降低(%)=(C老痴 -
C给药)/C老痴 × 100%
2. 2 对脑和血清中 SOD活性的影响
测定方法参考超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒
说明书进行。取小鼠脑组织匀浆 50 μL和血清 10 μL,
分别在 550 nm 波长处用紫外分光光度法测定小鼠脑
和血清中 SOD的活力,酶活性规定为每毫升反应液中
SOD抑制率达到 50%时所对应 SOD 量为一个亚硝酸
盐单位(NU /m)。结果表明,给药小鼠血清和脑中的
SOD活性显著升高,见表 2。
表 2 对脑和血清中 SOD活性的影响
组别
血清
SOD活力
(NU/mL)
升高
(%)
脑组织
SOD活力
(NU/mL)
升高
(%)
青年组 176. 9 ± 32. 4* 50. 1 45. 5 ± 4. 2* 49. 3
老年正常组 139. 2 ± 26. 5 36. 2 30. 5 ± 3. 5 8. 8
老年痴呆组 102. 2 ± 26. 9 - 28. 3 ± 5. 6 -
高剂量组 172. 9 ± 12. 8* 45. 1 40. 3 ± 5. 5* 32. 0
低剂量组 171. 5 ± 17. 7* 43. 9 37. 2 ± 4. 7 22. 0
注:* P < 0. 05,**P < 0. 01 vs 老年痴呆组 升高(%)=(C给药 -
C老痴)/C老痴 × 100%
2. 3 对脑组织中 MAO-B活性的影响
测定方法参考单胺氧化酶 B(MAO-B)测试盒说明
书。取小鼠 10%脑组织匀浆 500 μL,在 242 nm波长处
用紫外分光光度法测定吸光度,计算 MAO-B 酶活性。
MAO-B活性定为 37 ℃每 3 h 产生 0. 01 个 OD 值改变
为 1 个活性单位,相当于产生 1 nmol 苄醛,以 U·h -1
·mgprot - 1表示。结果表明,给药小鼠的 MAO-B 活力
显著降低(见表 3)。
表 3 对脑组织中MAO-B活性的影响
组别
脑组织
MAO-B活力(U·h -1·mgprot - 1)降低(%)
青年组 10. 9 ± 2. 0** 66. 0
老年正常组 22. 8 ± 3. 1* 29. 1
老年痴呆组 32. 2 ± 5. 6 -
高剂量组 19. 6 ± 2. 3** 39. 2
低剂量组 19. 9 ± 3. 4** 36. 1
注:* P < 0. 05,**P < 0. 01 vs 老年痴呆组 降低(%)=(C老痴 -
C给药)/C老痴 × 100%
2. 4 对脑组织中 AChE活性的影响
方法参考乙酰胆碱酶(AChE)测定试剂盒说明书。
取 10%脑组织匀浆 50 μL,在 412 nm 波长处以紫外分
光光度法测定吸光度计算乙酰胆碱酯酶活性。结果表
明,给药小鼠的 AChE活力降低,见表 4。
表 4 对脑组织中 AChE活性的影响
组别
脑组织
AChE活力(umol /mL) 降低(%)
青年组 0. 534 ± 0. 03 27. 8
老年正常组 0. 709 ± 0. 05 4. 2
老年痴呆组 0. 740 ± 0. 07 -
高剂量组 0. 572 ± 0. 03* 22. 7
低剂量组 0. 595 ± 0. 05 19. 6
注:* P < 0. 05,**P < 0. 01 vs 老年痴呆组 降低(%)=(C老痴 -
C给药)/C老痴 × 100%
3 讨论
目前认为衰老与自由基有一定的关系。清除自由
基最好的方法就是用抗氧化及帮助人体提高抗氧化能
力,通过提高人体抗氧化能力来降低体内自由基的积
蓄[4]。丙二醛(MDA)的积累在一定程度上反映了体内
自由基活动的状态。单胺氧化酶(MAO)能催化生物体
内的胺氧化生成过氧化氢。在正常生理条件下,活性
氧自由基的生成与清除处于平衡状态。超氧化物歧化
(下转第 653 页)
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损伤、促进胰岛 β 细胞的修复等作用有关。韦乃球
等[6]研究发现白子菜对 HepG2 细胞增殖无影响,并可
促进正常 HepG2 细胞和胰岛素抵抗 HepG2 细胞的葡
萄糖消耗。曾春晖等[7]研究发现白子菜提取物对高血
压引起的主要器官损伤具有明显的保护作用。黄开珍
等[8]研究发现白子菜水提物可能通过降低血清 ET 含
量和升高 NO含量来发挥对 SHR 大鼠的降压效应,并
能提高 SOD活性。俞浩等[9]研究表明白背三七能增强
小鼠胃肠蠕动功能。本实验为进一步研究白子菜以及
对肝炎的治疗提供了实验依据,有利于白子菜的进一
步开发和利用。
参考文献
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(收稿日期:2013 - 08 - 01

)
(上接第 649 页)
酶(SOD)是一种含金属离子的保护酶,能催化超氧化
物阴离子自由基发生的歧化反应,从而清除氧自由基。
乙酰胆碱酶(AChE)能通过水解乙酰胆碱,控制胆碱能
神经元突触间的信息传递实现对脑功能的调控。
青年组小鼠中,MDA的含量和 SOD的活性明显高
于老年痴呆组,而 MAO-B 和 AChE 的活性明显低于老
年痴呆组。通过对老年痴呆组的给药,使得 MDA 的含
量明显降低,表明小鼠体内的自由基活动减弱;给药小
鼠 MAO-B活性的降低,能够减少体内过氧化氢的生
成;SOD活性的提高能更有效地清除体内的自由基;
AChE活性的降低,则能间接促进小鼠的记忆能力,延
缓痴呆。这些都表明密腺小连翘提取物能够通过调节
自由基代谢和提高抗氧化能力达到延缓衰老的目的。
参考文献
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(收稿日期:2013 - 03 - 19)
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