全 文 ：人参研究 GINSENG RESEARCH 2011 年第 3 期
不同采收期小叶丁香皮中黄酮和多糖含量的比较研究
徐 蕊 郑友兰 韩佳宏 蔡恩博 田 阳 王慧珠 汪 瑶
（吉林农业大学中药材学院·吉林 长春·130118）
张凤吉
（长春国家生物产业基地大明辐照灭菌集团有限公司·吉林 长春·130033）
摘 要： 目的 测定不同采收期小叶丁香皮中黄酮类及多糖的含量，对小叶丁香皮的质量进行综合评价。
方法 采用比色法测定黄酮及多糖含量，以芦丁和葡萄糖为对照品，在 500nm 波长下测定吸光
度，测定黄酮的含量，在 620nm 波长下测定总多糖吸光度，分别测定可溶性多糖和粗多糖的含
量。 结果 0.05mg-0.5mg 范围内，芦丁质量与吸光度 A 值线性关系良好，R2=0.9990；在 0.052mg～
0.20mg 范围内，葡萄糖质量与吸光度 A 值线性关系良好 R2=0.9974。黄酮在 4 月 29 日含量最高
为 14.86%，总多糖在 6 月 23 日含量最高为 33.24%。 结论 通过 T-TEXT 比较不同采收期小叶
丁香皮中的总黄酮和多糖含量，差异显著，多糖随着黄酮的增加呈上升的趋势。 本方法简便、快
速、可靠、适合小叶丁香黄酮及多糖的含量测定。
关键词：小叶丁香；黄酮；多糖；比较研究
小叶丁香（Syringa Pubescens Turcz.）又名巧玲花、
雀舌花、毛丁香，为木樨科（Oleaceae）丁香属（Syringa）
植物，分布于我国河南、河北、陕西、山西、甘肃等地，
生长在海拔 800～2400m 的山地、沟内或崖石上 [1]。 民
间对其药用价值早有认识，曾采其花、果实泡茶饮用，
有消炎、镇咳、治疗肝炎和肝硬化之疗效[2~5]，但至今未
被药典收录。 研究表明，黄酮类化合物是一类低分子
天然植物成分，可以作用于中枢神经系统，黄酮类化
合物有明显的抗溃疡、解痉、抗炎及降血脂等系列的
生物活性 [6~7]，丁香叶中含有多糖类成分，此类成分普
遍具有增强免疫功能，抗流感，抗肿瘤，防衰老及抗辐
射，改善心肌收缩性能，缩小梗塞面积，减轻心肌损伤
Comparative Studies on the flavonoids and polysaccharides from skin
of Syringa Pubescens Turcz. in different harvest
Abstract: Purpose: To determine the contents of flavonoids and polysaccharides form skin of Syringa Pubescens Turcz. in different har-
vest, and evaluates quality control the skin of Syringa Pubescens Turcz.. Method: Determination of flavonoids and polysaccha-
rides by chromatometry. The reference standards are rutin and glucose, and determined contents of flavonoids at 500nm wave-
length, and determined of total polysaccharides which content soluble polysaccharide and crude polysaccharide at 620nm
wavelength. Result: Rutin quality and value of the absorbance A has a good linear relationship within 0.05mg-0.5mg, R2=0.
9990; in the range of 0.052mg ~ 0.20mg of glucose and the absorbance value A has a good linear relationship, R2=0.9974.
Flavonoid content of the highest in the April 29 up to 14.86%, the total polysaccharide content in the June 23 up to 33.24%
Conclusion: The differences of the polysacharides and total flavonoid in the skin of Syringa Pubescens Turcz is Significant dif-
ference at different growth stages when texted by T-TEXT . Polysaccharide increased with the flavonoids were rising.This
method is simple, fast, reliable and suitable for determination of flavonoids and polysaccharides.
Keywords: Syringa Pubescens Turcz.; flavonoids; polysaccharide; comparative study
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人参研究 GINSENG RESEARCH 2011 年第 3 期徐 蕊等：不同采收期小叶丁香皮中黄酮和多糖含量的比较研究
等作用[8~11]。 为了更好地研究、开发和利用小叶丁香，
本文对小叶丁香皮中黄酮和多糖的含量进行分析研
究，以综合评价小叶丁香的质量。
1 材料、仪器与试剂
药材：药材采自吉林农业大学校园，由吉林农业
大学园艺学院胡全德教授鉴定为木樨科（Oleaceae）丁
香属（Syringa）植物小叶丁香（Syringa Pubescens Tur-
cz．）的皮。
仪器：T6 新世纪紫外可见分光光度计（北京普析
通用仪器有限责任公司）； 紫外分光光度计 Spec-
trophotometer （上海精密科学仪器有限公司 ）；KQ-
250DB型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；
电子计数天平（500g/0.001g，金羊天平仪器厂）；百灵
LAI14 型电子天平（110g/0.0001g，常熟市百灵天平仪
器有限公司）。
药品：芦丁标准品；无水乙醇（分析纯）；亚硝酸
钠；硝酸铝；氢氧化钠；葡萄糖标准品（中国药品生物
制品检定所，批号:086 - 9303），蒽酮、乙醇等均为分
析纯。
2 实验方法与结果
2.1 供试液的制备
2.1.1 标准品溶液的制备
2.1.1.1 芦丁标准品溶液的制备
将芦丁标准品于烘箱中 105℃恒重 6h，精密称取
10.00mg，75%乙醇 50mL 溶解后定容至 100mL 容量
瓶中，摇匀，备用。
2.1.1.2 葡萄糖标准液的制备
将葡萄糖于烘箱中 60℃烘 1h， 再逐渐升温至
105℃干燥至恒重。 精密称取 20.00mg,置 100mL 容量
瓶中,用蒸馏水溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。
2.1.2 样品待测液的制备
2.1.2.1 黄酮待测液的制备
精密称定干燥的小叶丁香的样品 (过 40 目筛)各
2.000g，置 50mL 具塞锥形瓶中,分别精密加入 75%乙
醇 30mL，30mL，30mL，密塞超声 30min(共 3 次)，合并
提取液，摇匀，过滤，转移至 100mL 容量瓶中定容，备
用。
2.1.2.2 可溶性多糖待测液的制备
精密称定干燥的小叶丁香样品 (过 40 目筛 )各
2.000g，置 50mL 具塞锥形瓶中,分别精密加入 75%乙
醇 30mL，30mL，30mL，密塞超声 30min(共 3 次)，合并
提取液，摇匀，过滤，转移至 100mL 容量瓶中定容，备
用。
2.1.2.3 粗多糖待测液的制备
将提取过可溶性多糖后的滤渣蒸干， 加 2％的盐
酸 30mL，置沸水浴中提取 lh，充分放冷，于 100mL 容
量瓶中滤过，重复提取 2 次，过滤，洗涤滤纸，以 2%
HCL定容至刻度，备用。
2.2 含量测定
2.2.1 标准曲线的绘制
2.2.1.1 黄酮标准曲线的绘制
分别精密量取芦丁标准品溶液 0.0、0.5、1.0、2.0、
3.0、4.0、5.0mL，分别移入 25mL 容量瓶中，分别加入
75%乙醇至 5mL， 加入质量分数为 5%的亚硝酸钠溶
液 1.0mL，摇匀，静置 6min；加入质量分数为 10%的硝
酸铝溶液 1.0mL，摇匀，静置 6min，加入质量分数为
4% 的氢氧化钠溶液 10mL， 再加体积分数为 75%的
乙醇至刻度，摇匀，放置 15min。 以 75%乙醇为空白对
照液，分别于 500nm波长处测定吸光度。 以吸光度值
（A）对质量(m)进行线性回归，将所得数据进行统计处
理，其回归方程为 y=0.4751x+0.0031﹙R2﹦0.999﹚,结
果表明， 芦丁检测质量在 0.05~0.5mg 范围内线性关
系良好。
2.2.1.2 多糖标准曲线的制备
以吸光度值（A）对质量(m)进行线性回归，将所得
数据进行统计处理， 其回归方程为 y=5.917x-0.0039
﹙R2＝0.9974﹚, 结果表明， 葡萄糖检测质量在 0.04~
0.20mg范围内线性关系良好。
2.2.2 方法学考察
2.2.2.1 回收率实验
a.多糖回收率实验：称取已知总多糖含量的样品
约 0.6g，6 份，精密称定，置于磨口锥形瓶中分别加入
27.53mg/mL的葡萄糖对照品溶液 0 .5mL，按前面样品
处理法提取，并按样品测定项操作，计算总多糖含量和
回收率，平均回收率为 100.26%，RSD=0.216%(n=6)。
b.黄酮回收率实验：精密称取已知黄酮含量的小
叶丁香皮粉末约 0.5g，5 份， 置于磨口锥形瓶中分别
加入 0.0343mg/mL 的芦丁标准品溶液 2mL，按前面样
品处理法提取，并按样品测定项操作，计算黄酮含量
和回收率，平均回收率为 100.58% ， RSD=0.81% (n=
5)。
2.2.2.2 精密度实验
a.多糖精密度实验：称取已知总多糖含量样品粉
末约 0.6g，精密称定，按样品测定方法，连续测 6 次，
测得吸光度并计算含量，RSD=0.216%(n=6)。
b.黄酮精密度实验：精密称取已知黄酮含量的小
叶丁香皮粉末约 0.5g， 按样品测定操作连续测 5 次，
测得吸光度并计算含量，RSD=0.227%(n=5)。
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人参研究 GINSENG RESEARCH 2011 年第 3 期
2.2.2.3 稳定性实验
取样品按 2.1.2 项下样品溶液的制备方法分别制
备黄酮和多糖待测溶液， 每隔 10min 测一次吸光度，
记录在 60min 内的吸光度值， 计算 RSD 值。 得 RSD
值分别为 1.23%(n=6)和 1.31%（n=6）。
2.2.3 样品的测定
2.2.3.1 黄酮的测定
分别吸取供试品液 1ml 于 25ml 容量瓶中, 再用
75%乙醇定容至刻度。 加入质量分数为 5%的亚硝酸
钠溶液 1.0mL，摇匀，静置 6min；加入质量分数为 10%
的硝酸铝溶液 1.0mL，摇匀，静置 6min，加入质量分数
为 4% 的氢氧化钠溶液 10mL， 再加体积分数为 75%
的乙醇至刻度，摇匀，放置 15min。 以 75%乙醇为空白
对照液， 分别于 500nm 波长处测定吸光度， 重复 3
次，结果见表 1。
2.2.3.2 可溶性多糖的测定
各取可溶性多糖提取液 5mL，分别置于 25mL 容
量瓶中， 用 75％的乙醇定容至刻度， 混匀。 分别取
1.0mL 可溶性多糖提取液加入具塞试管中， 加入蒽
酮-浓硫酸试剂 5.0mL，混匀，重复 3 次，同时另取一
支具塞试管加 75％EtOH1.0ml，加入蒽酮-浓硫酸试剂
5.0mL，作为空白实验。 置沸水浴中加热 10min，冷却
至室温。 于 620nm 处测定吸光度，记录数据，结果见
表 1。
2.2.3.3 粗多糖的测定
各取粗多糖提取液 2.5mL， 分别置于 25mL 容量
瓶中，用 2%的盐酸定容至刻度，混匀，分别取 1.0mL
粗多糖提取液加入具塞试管中， 再加入蒽酮-浓硫酸
试剂 5.0mL，混匀，重复 3 次，同时另取一支具塞试管
加入 2％的盐酸 1.0mL， 再加入蒽酮-浓硫酸试剂
5.0mL，混匀，作空白实验。 置沸水浴中加热 10min，冷
却至室温，于 620nm 处测定吸光度，记录实验数据，
结果见表 1。
表 1 小叶丁香皮样品中黄酮及多糖含量 （%）
测定结果
Tab. 1 measured results of flavonoids and
polysaccharides content (%)
In skin of Syringa Pubescens Turcz. samples
3.3 结果分析
实验数据采用 SPSS16.0进行分析。
3.3.1 描述统计量分析及 S-W 正态检验 （Tests of
Normality）
对不同采收期样品中黄酮及多糖含量进行描述
统计量分析，统计量包括平均值(mean)和标准偏差(std
deviation)。标准偏差表示变量值的变异情况或离中趋
势，标准偏差越大，资料间的差异、离散程度均越大；
标准偏差小表示变异小， 数值较集中。 Shapiro-Wilk
正态检验是将某一组观测量的累积分布函数(即经验
分布函数)与理论正态分布函数相比较，以检验一个
样本是否来自正态分布的样本，当双尾渐进显著性概
率 [AsymP.sig.(2-tailed)]大于 0.05，则接受假设，即所
检验样本服从于指定的分布。将样品中不同采收期的
黄酮及多糖含量的描述统计量分析及 S-W 检验结果
见表 2。
部位 采收日期 黄酮
可溶性
多糖（％）
粗多糖
（％）
总多糖
（％）
皮 09.03.19 10.44 18.32 9.12 27.44
皮 09.03.25 11.87 16.54 7.77 24.31
皮 09.04.01 6.65 9.16 11.86 21.02
皮 09.04.22 7.32 16.49 8.92 25.41
皮 09.04.29 14.86 10.61 9.43 20.04
皮 09.05.06 8.50 8.96 9.83 18.79
皮 09.05.13 7.53 5.22 11.12 16.34
皮 09.05.21 3.83 6.34 12.37 18.71
皮 09.05.27 5.47 6.32 12.16 18.48
皮 09.06.02 8.37 2.97 19.87 22.84
皮 09.06.23 3.36 10.76 22.47 33.23
皮 09.07.03 8.75 6.83 16.19 23.02
皮 09.07.08 7.24 4.32 17.13 21.45
皮 09.09.01 4.04 3.28 17.10 20.38
皮 09.09.08 2.82 6.84 20.24 27.08
皮 09.09.16 7.49 7.28 19.09 26.37
皮 09.09.24 5.81 5.47 20.95 26.42
皮 09.09.29 3.70 7.23 20.30 27.53
皮 09.10.05 4.21 6.22 18.21 24.43
皮 09.10.12 5.13 6.66 15.78 22.44
皮 09.10.27 5.38 13.75 8.78 22.53
皮 09.04.08 7.74 11.05 13.11 24.16
皮 09.04.15 13.34 9.87 11.52 21.39
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表 2 描述统计量分析及 S-W检验结果
Tab.2 Results of descriptive statistics and Tests
of Normality
Tests of Normality
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
由表 2 可以看出，小叶丁香因采收期不同，黄酮
和多糖含量的 S-W 检验的显著性概率(Asmyp.sig.)均
大于 0.05，可以认为其总量均服从于正态分布。 各组
样本的标准偏差都很高，说明含量因采收期不同差异
较大。
3.3.2 T检验（T-test for Equality of Means）
为了判断不同时期小叶丁香中黄酮与多糖的含
量差别是否显著，我们需要进行 T 检验， T 检验结果
见表 3。
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
黄酮 .131 23 .200* .929 23 .106
可溶性多糖 .198 23 .020 .908 23 .057
粗多糖 .154 23 .167 .923 23 .077
总多糖 .086 23 .200* .970 23 .692
Test Value=0
95% Confidence Interval of the
Mean Difference
t df Sig.（2-tailed） Difference Lower Upper
黄酮 10.711 22 .000 7.122894 5.74377 8.50202
可溶性多糖 9.904 22 .000 8.716739 6.89155 10.54192
粗多糖 14.903 22 .000 14.493048 12.47618 16.50992
总多糖 29.142 22 .000 23.209787 21.55807 24.86150
表 3 方差齐性检验及 T（T’）检验结果
Tab.6 Results of homogeneity of variance test and t-test for Equality of Means
One-Sample Test
由表 3可以看出，不同生长环境各指标的 T 检验
的双尾渐进显著性概率 [AsymP.sig.(2-tailed)]均小于
0.05，接受假设，可以认为不同时期小叶丁香中黄酮
和多糖的含量差异显著。
3.3.3 相关性分析（test of Correlations）
通过描述统计量分析及 S-W 正态检验， 我们
知道小叶丁香中黄酮和多糖的含量均随采收期的
不同而呈正态分布，但如果想了解黄酮和多糖之间
是否因采收期的不同而呈現某种相关性，就需要进
行多个变量之间的相关性分析 （test of Correla-
tions）。 这里我们采用统计学中的 Pearson 积距相关
系数 （product-moment correlation coefficient）来描述
二者之间的相关性，简称相关系数。 相关系数 ρ 是
一个无量纲的数值，且-1≤ρ≤1，ρ>0 为正相关，ρ<
0 为负相关 ，ρ 的绝对值接近于 1， 说明相关性越
好，ρ 的绝对值接近于 0，说明相关性越差。 检验结
果见表 4。
表 4 相关性分析结果
Tab.4 Results of test of Correlations
Correlations
3 讨论
3.1由表 1可知， 随着采收期的不同总黄酮的含量也
不同， 从 3月到 10 月黄酮含量出现过一次高峰期，3
月黄酮含量较高，4 月出现高峰， 随后黄酮含量明显
下降，而 9月出现最低值，在 10 月又比 9 月黄酮含量
有所升高。不同采收期小叶丁香皮中的多糖含量也不
同，从 3 月中旬到 10 月，5 月的含量较低，3 月、4 月、
黄酮 总多糖
黄酮 Pearson Correlation 1 .221
Sig. (2-tailed) .311
N 23 23
总多糖 Pearson Correlation .221 1
Sig. (2-tailed) .311
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人参研究 GINSENG RESEARCH 2011 年第 3 期
6 月、9 月的含量较其它月份相比较高， 其中 6 月 23
日的含量最高。 所以综合黄酮和多糖为指标，小叶丁
香的黄酮和多糖含量高峰期并不在同一月份，但综合
来说，小叶丁香的最佳采收期为 4月。
3.2 由于小叶丁香枝叶中其主要有效成分为皂苷类、
黄酮类化合物和多糖，所以不能只通过黄酮和多糖的
含量来评价药材质量，应以多指标综合评价药材的质
量。
3.3实验应用紫外分光光度法测定小叶丁香枝中的黄
酮含量， 采用蒽酮－硫酸比色法测定小叶丁香枝中的
多糖含量，从回收率和精密度可看出，本方法简便、快
速、可靠、适合小叶丁香枝黄酮和多糖的含量测定，以
控制其质量。
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