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大叶藜不同部位的化学成分预试验及薄层色谱分析



全 文 :第 44 卷第 2 期
2016 年 1 月
广 州 化 工
Guangzhou Chemical Industry
Vol. 44 No. 2
Jan. 2016
大叶藜不同部位的化学成分预试验及薄层色谱分析*
武 芸1,马世荣2,胡浩斌1,王春林2,张小伟1
(1 陇东学院化学化工学院,甘肃 庆阳 745000;
2 陇东学院生命科学与技术学院,甘肃 庆阳 745000)
摘 要:采用系统预试法结合薄层色谱分析对比研究了民间常用中药大叶藜不同药用部位的化学成分类型。结果表明,大
叶藜茎、叶中所含化学成分基本相同,均含有水溶性蛋白质、二肽、皂苷、还原糖、多糖、苷类、酚类和鞣质、有机酸、生物碱、
黄酮类、内酯、香豆素、挥发油和油脂类成分,不含多肽、甾体、强心苷、蒽醌类成分。本试验初步确定了大叶藜不同药用部位
的化学成分类型,为进一步研究提供了理论依据。
关键词:大叶藜;化学成分;预试验;薄层色谱
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-9677(2016)02-0098-03
* 基金项目:庆阳市自然科学基金资助项目“大叶藜化学成分及 HPLC 指纹图谱研究”(ZJ201304) ;甘肃省应用化学重点学科资助项目 (No.
GSACK20130113)。
第一作者:武芸 (1982-) ,女,硕士,讲师,研究方向:天然药物提取分离技术。
Preliminary Test and Thin Layer Chromatography of Chemical Components
in Different Parts of Chenopodium hybridum L. *
WU Yun1,MA Shi-rong2,HU Hao-bin1,WANG Chun-lin2,ZHANG Xiao-wei1
(1 College of Chemistry and Chemical Engineering Longdong University,Gansu Qingyang 745000;
2 College of Life Science and Technology,Longdong University,Gansu Qingyang 745000,China)
Abstract:The chemical components in different medicinal parts of Chenopodium hybridum L. was studied by
comprehensive preliminary tests and thin layer chromatography (TLC)analysis respectively. The results showed that the
stem and leaf of Chenopodium hybridum L. both contained water soluble protein,dipeptide,saponin,reducing sugar,
polysaccharide,glycoside,phenols and tannin,organic acid,alkaloid,flavonoid,lactone,coumarin,essential oil and
grease,and they didnt contain polypeptide,sterides,cardenolide and anthraquinone. The results of preliminary tests
determined the types of chemical components,providing evidence for further study.
Key words:Chenopodium hybridum L. ;chemical components;preliminary tests;thin layer chromatography
大叶藜为藜科[Chenopodiaceae]藜属[Chenopodium]一年生
草本植物,别名杂配藜、八角灰菜、血见愁等,我国各地均有
分布[1],其地上部分可做中药,主治月经不调、子宫出血、吐
血、衄血、咯血、尿血等症[2]。相关文献表明,大叶藜叶可用
作调经剂[3-4],哈萨克族采用大叶藜等几种中药材制成黑药皂,
可治疗牛皮癣、疖肿、丘疹等皮肤疾病[5]。目前国内外关于大
叶藜的报道多见于作为外来入侵植物与某地区植物区系关系的
研究[6-8],而有关大叶藜化学成分及药用活性的研究尚属空白。
本文采用系统预试法结合薄层色谱分析对比研究了大叶藜茎、
叶中所含的化学成分类型,旨在为进一步研究其有效成分的提
取分离提供依据。
1 材料与方法
1. 1 仪 器
FZ102 植物粉碎机,北京中兴伟业仪器有限公司;
FA1204B电子分析天平,上海精密科学仪器有限公司;HH·
S11-Ni2 恒温水浴锅,北京三二八科学仪器有限公司;RE-52C
旋转蒸发器,上海科升仪器有限公司;SHK-Ⅲ循环水式多用
真空泵,郑州科泰实验设备有限公司;ZF-1 三用紫外分析仪,
上海聚昆仪器设备有限公司;DZF-6210 真空干燥箱,上海岛
韩实业有限公司。
1. 2 材 料
薄层层析用硅胶 GF25(化学纯) ,青岛胜海化工有限公司;
羧甲基纤维素钠(化学纯) ,上海酶联检测技术有限公司;其余
试剂均为国产分析纯;实验用水为二次蒸馏水,自制;95%乙
醇为提取溶剂。
实验所用大叶藜采自甘肃省庆阳市 (E 107°410. 8″,N
35°4341. 8″) ,由陇东学院生命科学与技术学院马世荣副教授
鉴定,植物标本保存在陇东学院生命科学与技术学院
(20140620)。
1. 3 供试品溶液的制备
1. 3. 1 水供试液
第 44 卷第 2 期 武芸,等:大叶藜不同部位的化学成分预试验及薄层色谱分析 99
称取原料 10. 0 g置于 100 mL 蒸馏水中,浸泡过夜,次日
过滤,取 20 mL 滤液供做氨基酸、蛋白质、多肽等成分的检
查,其余滤液和滤渣混合于 60 ℃水浴上加热 30 min,过滤,滤
液供做糖及多糖、酚类及鞣质、皂苷、有机酸等成分的检查。
1. 3. 2 乙醇供试液
称取原料 10. 0 g,置于 250 mL 圆底烧瓶中,加 95%乙醇
100 mL,水浴回流 l h,冷却、过滤,滤液中加入蒸馏水使其醇
含量为 70%,冷却,用 50 mL石油醚分别萃取三次,分出下层
浓缩至三分之一,将浓缩液分为两份:①加入 50 mL 95%乙醇
溶解,减压蒸馏至无醇味,供酚类及鞣质、黄酮、有机酸、甾
体、蒽醌、强心苷、香豆素、萜类等的检查;②加 5%硫酸乙
醇溶液 100 mL,水浴回流 l h,冷却、过滤、取滤液减压除去
过量乙醇,残留液供生物碱成分的检查。
1. 3. 3 石油醚供试液
称取原料 5. 0 g,置于 100 mL的锥形瓶中,加入 25 mL 石
油醚,室温下密封放置 2 h,过滤,待滤液中石油醚自然挥干,
残余液供油脂、挥发油、萜类等成分的检查。
1. 4 实验方法
采用《天然药物化学实验》[9]和《中药化学》[10]中介绍的
预试方法对大叶藜茎、叶的化学成分分别进行系统预试验,根
据成分预试结果,如果检查某类成分的结果均为正反应,则判
断植物该部位含有某类成分;如果检查某类成分的结果均为负
反应,则判断植物该部位不含某类成分;如果部分为正反应或
干扰,则结合薄层色谱分析,综合判断,得出结论。
2 结果与讨论
2. 1 大叶藜茎、叶的化学成分预试验结果
大叶藜茎、叶的化学成分预试验结果如表 1 所示,薄层色
谱分析结果如表 2 所示。
表 1 大叶藜茎、叶的化学成分预试验结果
Table 1 The results of preliminary tests for the stem and leaf of C. hybridum L.
预试项目 预试方法 正反应现象
预试结果
茎 叶
氨基酸、
多肽、蛋白质
加热或 H2SO4 试验 变浑浊 + ++
缩二脲试验 呈蓝色 + ++
茚三酮试验 呈红棕色或蓝紫色 - -
甾体、三萜皂苷
泡沫试验
三萜皂苷产生相同量的泡沫 + ++
甾体皂苷产生不同量的泡沫 - -
Pb(Ac)2 试验 白色沉淀 +++ +++
糖和苷类
斐林试剂 砖红色沉淀 ++ ++
Tollens试剂 银灰色斑点 + +
α-萘酚实验 交界面出现紫红色环 + ++
多糖试验 水解滤液出现较多沉淀 ++ +++
酚类和鞣质
FeCl3 试验 暗绿色沉淀 + ++
香草醛-盐酸试验 呈红色 - -
FeCl3 -K3Fe(CN)6 试验 蓝色斑点 ++ ++
重氮化试剂 溶液显红色 +++ +++
明胶沉淀试验 出现白色沉淀 + +++
有机酸
pH试纸检查 pH<7 5. 45 5. 50
溴酚蓝试验 蓝色背景黄色斑点 - -
沉淀试验 白色混浊 +++ +++
溴钾酚绿试验 蓝色背景黄色斑点 - -
生物碱
HgIK试验 白色沉淀 ++ +++
I2 -KI试验 浅棕色沉淀 +++ +++
BiI3·KI试验 橘红色沉淀 ++ +++
H4[Si(W3O10)4]·xH2O 浅黄色沉淀 +++ +++
C6H2OH(NO2)3 试验 黄色沉淀 ++ +++
甾体、三萜类
Salkowshi试验 氯仿层呈红色或青色,浓硫酸层有绿色荧光 - -
SbCl3 试验 溶液呈红色 - -
黄酮类
盐酸-Mg试验 加 Mg粉者呈现红色 +++ +++
AlCl3 络合试验 呈现黄绿色荧光 ++ ++
NH3 熏试验 亮绿色荧光 +++ +++
硼酸-柠檬酸试验 浅蓝色荧光 ++ +++
内酯、香豆素
开环闭环试验 先澄清后变浑浊 +++ +++
异羟肟酸铁试验 溶液变为红色 - -
重氮化试验 溶液变为红色 +++ +++
强心苷
PDAB试验 呈紫红色 - -
碱性 C6H2OH(NO2)3 呈橙色或橙红色 - -
Na2[Fe(CN)5NO]试验 呈红色或紫色 - -
100 广 州 化 工 2016 年 1 月
续表 1
蒽醌类
10%NaOH,30%H2O2 加减变红,加酸褪色 - -
Mg(Ac)2 反应 斑点变为红色 - -
硼酸试验 斑点变黄色,紫外光下有荧光 - -
挥发油和油脂类
油斑实验 有油斑,部分挥发 +++ +
H3[P(Mo3O10)4]试验 黄绿色背景深蓝色斑点 +++ +++
注:“+”表示正反应,“++”或“+++”分别表示正反应现象比较剧烈和剧烈,“-”表示负反应。
表 2 大叶藜茎、叶的成分预试薄层层析检查结果
Table 2 The results of preliminary test by TLC from stem and leaf of C. hybridum L.
预试项目 展开剂 (体积比) 显色剂 正反应现象
检查结果
茎 叶
氨基酸、多肽、蛋白质 正丁醇︰冰醋酸︰水 (4 ︰ 1 ︰ 1) 茚三酮-丙酮试液 紫红色斑点 + +
糖和苷类 丁酮︰冰醋酸︰水 (6 ︰ 1 ︰ 3) 斐林试剂 红色斑点 + +
酚类和鞣质 正丁醇︰乙酸乙酯︰水 (5 ︰ 4 ︰ 1)
1% FeCl3 乙醇溶液与 1%
K3[Fe(CN)6]水溶液 (1 ︰ 1)
蓝色斑点 + ++
有机酸 苯︰乙醇︰冰醋酸 (79 ︰ 14 ︰ 7) 0. 1%溴酚蓝-乙醇溶液 蓝色背景黄色斑点 +++ ++
生物碱 氯仿︰丙酮︰二乙胺 (5 ︰ 4 ︰ 1) 改良 BiI3·KI 橘黄色斑点 - +
甾体、三萜类 氯仿︰甲醇︰水 (65 ︰ 35 ︰ 10) 10% H2SO4 乙醇溶液 棕色斑点 - -
黄酮及其苷类 乙酸乙酯︰丁酮︰甲酸︰水(5 ︰ 3 ︰ 1 ︰ 1) NH3 紫外灯下有荧光斑点 + ++
内酯、香豆素及其苷类 石油醚︰乙酸乙酯 (5 ︰ 1) 重氮盐试剂 红色斑点 + ++
强心苷 乙酸乙酯︰吡啶︰水 (5 ︰ 1 ︰ 4) 紫外光 10% NaOH溶液 红色或紫红色斑点 - -
蒽醌类 氯仿︰乙酸乙酯 (5 ︰ 8) 香草醛-浓盐酸试剂 红色斑点 - -
挥发油和油脂类 石油醚︰乙酸乙酯 (95 ︰ 5) 斑点呈现不同颜色 + +
注:“+”表示正反应,“++”或“+++”分别表示正反应现象比较剧烈和剧烈,“-”表示负反应。
2. 2 讨 论
由表 1 和表 2 可知: (1)大叶藜茎、叶中所含的化学成分
极为相似; (2)根据表 2 的预试结果,可初步判断大叶藜茎、
叶中均含有水溶性蛋白质、二肽、皂苷、还原糖、多糖、苷
类、酚类和鞣质、生物碱、黄酮类、内酯、香豆素、挥发油和
油脂类,不含甾体、强心苷、蒽醌类成分; (3)结合表 2 中的
薄层色谱分析可判断出大叶藜茎、叶中均含有水溶性蛋白质、
二肽、有机酸,可能含有氨基酸、二氢黄酮类化合物,但是不
含多肽,不含或含有极少量间苯二酚或间苯三酚等多元酚类成
分; (4)通过对比实验现象发现,氨基酸、蛋白质、糖和苷
类、酚类和鞣质、生物碱、皂苷、黄酮类等成分预试验中,叶
的正反应现象较茎明显,而在挥发油和油脂类成分的预试验
中,茎的正反应现象较叶明显; (5)藜属植物富含黄酮、酚酸
和萜类物质,现代药学研究表明,许多藜属植物具有止痒、抗
菌、抗癌活性,本研究通过预实验发现,黄酮类成分的预实验
现象极为明显,并且与茎相比,大叶藜叶中的黄酮类成分的含
量可能更为丰富。
3 结 论
本研究初步确定了大叶藜不同药用部位所含化学成分的类
型,茎、叶均含有水溶性蛋白质、二肽、皂苷、还原糖、多
糖、苷类、酚类和鞣质、有机酸、生物碱、黄酮类、内酯、香
豆素、挥发油和油脂类成分,可能含有氨基酸、二氢黄酮类成
分,不含多肽、甾体、强心苷、蒽醌类成分,为大叶藜的进一
步研究提供了理论依据。
参考文献
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