全 文 ：显齿蛇葡萄离体快繁体系的建立
张 霞1，杨朝东1，倪德江2* (1．长江大学园艺园林学院，湖北荆州 434025;2．华中农业大学园艺林学学院，农业部亚热带农业资源与
环境重点开放实验室，湖北武汉 430070)
摘要 ［目的］利用组织培养的方法建立快速、高效的显齿蛇葡萄快速繁殖体系。［方法］以显齿蛇葡萄带芽茎段为材料，研究了不同灭
菌方法、培养基和激素组合对显齿蛇葡萄离体快繁的影响。［结果］外植体采用 75%乙醇浸泡 20 s +0． 1% HgCl2 处理 8 min +吐温 － 80
1 ～2 滴灭菌效果较好;腋芽诱导适宜的培养基为 B5 + 1． 00 mg /L BA + 0． 05 mg /L NAA;增殖培养以 MS/B5 + 1． 50 mg /L BA + 0． 05
mg /L NAA为宜;生根以 1 /2MS +0． 50 mg /L IBA的培养基效果好。［结论］建立了一个显齿蛇葡萄离体快繁的高频率发生体系，为其愈
伤再生体系、遗传转化及无性系变异筛选奠定了技术基础。
关键词 显齿蛇葡萄;外植体;离体培养
中图分类号 S687． 3 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2011)17 －10157 －03
Establishment of Rapid Propagation System in vitro of Ampelopsis grossedentata
ZHANG Xia et al (College of Horticulture and Gardening，Yangtze University，Jingzhou，Hubei 434025)
Abstract ［Objective］The research aimed to establish the fast and efficient of Ampelopsis grossedentata rapid propagation system by using the
tissue culture method． ［Method］ Ampelopsis grossedentata stem with the bud was the material，and the influences of different sterilization
methods，media and hormone combinations on the rapid propagation in vitro of Ampelopsis grossedentata were studied． ［Result］The explant
sterilization effect of 75% ethanol dipping 20 s + 0． 1% HgCl2 treating 8 min + Tween-80 1 － 2 drop was better． The optimal medium for axilla-
ry bud induction was B5 + 1． 00 mg /L BA + 0． 05 mg /L NAA． The optimal multiplication medium was MS /B5 + 1． 50 mg /L BA + 0． 05 mg /L
NAA． 1 /2MS + 0． 50 mg /L IBA was the best medium for rooting． ［Conclusion］The high frequency occurrence system of Ampelopsis grossed-
entata rapid propagation in vitro was established． It laid the technology basis for the callus regeneration system，genetic transformation and
clonal mutation screening．
Key words Ampelopsis grossedentata;Explant;Isolated culture
基金项目 农业部农业结构调整重大技术研究专项(06-08-02B)。
作者简介 张霞(1981 － ) ，女，湖北天门人，讲师，硕士，从事生物技术
研究。* 通讯作者，教授，博士，从事茶叶加工和茶叶生物
利用研究，E-mail:nidj@ mail． hzau． edu． cn。
收稿日期 2011-02-23
显齿蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata W． T ． Wang)系葡
萄科蛇葡萄属的一种野生藤本植物［1］，俗称藤茶，别名野藤
茶、甜茶藤等，是一种具有悠久历史的瑶族药用植物［2］。显
齿蛇葡萄具有清热润肺、平肝益血、消炎解毒、降压减脂、消
除疲劳等功效［3］。近年来，由于显齿蛇葡萄制茶市场看好，
村民过度采摘野生显齿蛇葡萄;同时，显齿蛇葡萄作为药材
资源也被大量挖掘，致使其野生种质资源破坏严重。因此，
野生显齿蛇葡萄种质资源的遗传多样性和保育研究显得尤
为重要［4］。对显齿蛇葡萄种质资源的有效管理、引种、驯化、
栽培、遗传育种改良是十分迫切的研究任务。目前，有关显
齿蛇葡萄的研究多集中在活性成分的提取分离［5］、功能评
价［6］、加工工艺优化［7］、安全性分析［8］等方面，而对其资源利
用、组织培养等方面的研究较少。笔者以显齿蛇葡萄带芽茎
段为试材，研究不同的培养基类型、附加不同的激素配比对
其离体快繁的影响，找出最适条件，建立一个离体快繁的高
频率发生体系，以期为其愈伤再生体系、遗传转化及无性系
变异筛选奠定技术基础。
1 材料与方法
1． 1 材料 选取植株健壮、无病虫害的显齿蛇葡萄当年抽
幼嫩茎段，剪去叶片，截取带芽茎段。
1． 2 培养条件 腋芽的萌发、幼芽增殖和无菌苗生根的培
养基均添加琼脂粉 7． 0 g /L、蔗糖 30 g /L和不同浓度的植物
生长调节剂及其他营养附加成分，pH调至 5． 8 ～ 6． 0，121 ℃
灭菌 20 min。所有培养物的温度均为(24 ± 2)℃，每天光照
14 h，光照强度为 1 000 lx左右。
1． 3 材料处理 所有材料均用肥皂水洗净，然后于自来水
下冲洗 1 ～2 h，并将其截成 2． 0 ～ 3． 0 cm的茎段。在超净工
作台上用 75%乙醇浸泡 20 s，然后放入滴有 1 ～ 2 滴吐温-80
的0． 1% HgCl2 溶液中消毒，每次消毒后都要用无菌水冲洗4
～5 次。采用 4 种不同的消毒方式消毒，消毒好的材料放在
预先消毒过的滤纸上以除去水分，切成 0． 5 ～ 1． 0 cm长的带
芽茎段，然后接入诱导培养基中。
2 结果与分析
2． 1 材料消毒 将带芽茎段先用 75%乙醇浸泡 20 s，再用
0． 1%HgCl2 溶液分别消毒 5、8、12、17 min，接入 MS + 0. 50
mg /L BA培养基。由表 1 可知，0． 1% HgCl2 溶液处理 8 min
的芽成活率最高，达73． 67%，而处理17 min的芽成活率仅为
53． 33%;污染率则是随着消毒时间的延长而逐渐降低，处理
5 min和其他 3个处理时间差异显著，处理 17 min也和其他
处理时间差异显著，处理 8和 12 min无显著差异。
表 1 不同消毒处理对显齿蛇葡萄带芽茎段成活率和污染率的影响
Table 1 Effects of different Ampelopsis grossedentata sterilizing treat-
ments on the survival ratio and pollution ratio of stem with
the bud
处理时间
Treatment
time∥min
接种数
Number of
inoculation∥个
污染率
Pollution
ratio∥%
成活率
Survival
ratio∥%
5 70 45． 67 ±0． 04 a 51． 33 ±0． 02 b
8 68 18． 33 ±0． 03 b 73． 67 ±0． 05 a
12 82 13． 67 ±0． 04 b 68． 00 ±0． 05 a
17 63 3． 67 ±0． 04 c 53． 33 ±0． 07 b
注:同列不同小写字母表示在 0． 05水平差异显著。
Note:The different small letters at the same column indicated the signifi-
cant difference at 0． 05 level．
2． 2 不同基本培养基对腋芽诱导的影响 试验共采用 3 种
培养基，考察不同培养基配方对腋芽诱导的影响。由表 2可
知，腋芽在MS培养基萌发过程中，新芽和外植体的接触部位
安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2011，39(17):10157 － 19159，10166 责任编辑 郑丹丹 责任校对 傅真治
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.17.169
易形成较多的愈伤组织(图 1a) ，这些愈伤组织在很大程度
上影响了增殖幼苗对水分和养分的吸收，从而抑制其生长，
且这些愈伤组织在 14 d内一般都会褐化死亡，从而导致新芽
无法吸收营养而死亡。而在 B5培养基上萌发的腋芽极少发
生类似的情况，所产生的愈伤组织要少得多(图 1b)。由此
可见，B5培养基比较适合显齿蛇葡萄腋芽的诱导。
表 2 不同培养基对腋芽诱导的影响
Table 2 Effects of different media on the axillary bud induction
培养基
Media
萌发率
Germination
ratio∥%
生长状况
Growth state
平均高度
Average
height∥cm
萌发数
Number of
germination∥个
诱导时间
Induction
time∥d
B5 50 生长健壮，色绿，芽基部形成少量愈伤组织 1． 14 a 1 ～2 6
MS 24 生长缓慢，黄绿色，芽丛基部形成大量愈伤组织，30 d左右部分死亡 0． 61 b 1 10
1 /2MS 31 生长健壮，色绿，芽基部形成少量愈伤组织 0． 51 b 1 8
注:所用培养基均附加 1． 00 mg /L BA +0． 05 mg /L NAA。同列不同小写字母表示在 0． 05水平差异显著。
Note:The media all added to 1． 00 mg /L BA + 0． 05 mg /L NAA，and the different small letters at the same column indicated the significant difference at
0． 05 level．
注:a． MS +1． 00 mg /L BA +0． 05 mg /L NAA;b． B5 +1． 00 mg /L BA +0． 05 mg /L NAA。
Note:a． MS +1． 00 mg /L BA +0． 05 mg /L NAA;b． B5 +1． 00 mg /L BA +0． 05 mg /L NAA．
图 1 不同培养基下腋芽萌发情况
Fig． 1 Germination situation of axillary bud in the different media
2． 3 不同激素组合对腋芽萌发的影响 将灭菌后的带芽茎
段接种到腋芽诱导培养基中，培养基组分为 B5 并附加不同
浓度的 BA 和 NAA。由表 3 可知，在 NAA 浓度相同时，BA
浓度为 1． 00 mg /L 时腋芽诱导率显著高于 0． 50 和 2． 00
mg /L，而苗生长状态及腋芽高度最理想。随着 BA浓度的增
加诱导率升高，苗生长快，有徒长趋势，同时愈伤组织增加，
对腋芽后期的生长存在明显的抑制作用，且白化苗和玻璃化
现象有加重的趋势。故 BA浓度在 1． 00 mg /L左右是最适合
的萌发浓度。当 BA浓度相同时，随着 NAA浓度的增加，苗
的愈伤情况加重，节间变短，NAA 浓度为 0． 05 mg /L时最适
合腋芽生长。结合腋芽萌发率和生长状况来看，培养基为 1．
00 mg /L BA +0． 05 mg /LNAA时适合腋芽的诱导。
表 3 不同浓度的 BA与 NAA对腋芽诱导的影响
Table 3 Effects of different concentrations of BA and NAA on the axillary bud induction
激素组合
Hormone combination∥mg /L
BA NAA
腋芽萌发率
Germination ratio
of axillary bud∥%
腋芽高度
Height of
axillary bud∥cm
腋芽生长状态
Growth state of axillary bud
0． 50 0． 05 58． 98 ±0． 13 b 2． 20 ±0． 26 b 芽基部无愈伤组织，茎节间长，芽叶生长旺盛，色绿
0． 50 0． 50 43． 22 ±0． 07 c 1． 93 ±0． 42 bc 芽基部有愈伤组织或愈伤组织团大，茎节间长或短，芽叶生长旺盛，色绿
0． 50 1． 00 31． 36 ±0． 01 d 2． 23 ±0． 49 b 芽基部愈伤组织团大，茎节间长或短，生长较弱
1． 00 0． 05 88． 24 ±0． 04 a 3． 27 ±0． 68 a 芽基部无愈伤组织，茎节间长，芽叶生长旺盛，色绿
1． 00 0． 50 56． 18 ±0． 04 bc 3． 50 ±0． 44 a 芽基部有愈伤组织或愈伤组织团大，茎节间长或短，芽叶生长旺盛，色绿
1． 00 1． 00 53． 94 ±0． 07 bc 1． 53 ±0． 25 c 芽基部愈伤组织团很大，茎节间短，植株矮小，水浸状，失绿，玻璃化
2． 00 0． 05 61． 00 ±0． 04 b 3． 63 ±0． 35 a 芽基部无愈伤，茎节间稍短，芽叶生长旺盛，色绿
2． 00 0． 50 53． 99 ±0． 01 bc 3． 47 ±0． 38 a 芽基部愈伤组织团大，茎节间长或短，生长较弱
2． 00 1． 00 58． 83 ±0． 09 b 3． 00 ±0． 20 ab 芽基部愈伤组织团很大，茎节间短，植株矮小，水浸状，失绿，玻璃化
注:同列不同小写字母表示在 0． 05水平差异显著。
Note:The different small letters at the same column indicated the significant difference at 0． 05 level．
2． 4 不同激素组合对试管苗增殖的影响 将腋芽萌发而来
的高 1 cm左右的试管无菌苗接种到不同的增殖培养基中。
由表 4可见，NAA浓度相同时，BA浓度为 1． 50和 1. 00 mg /L
时的增殖系数显著高于 0． 50 mg /L，且 BA浓度 1. 00与 1. 50
mg /L间的增殖系数不存在显著差异。随着 BA浓度的增加，
芽的增殖系数增加，苗的高度也有所增加，但茎芽节间短，叶
85101 安徽农业科学 2011 年
浓密、面积小，嫩茎伸长生长缓慢，难于分切，同时基部愈伤
组织也随之增多，这对于后续的继代和生根都不利。不同浓
度的 NAA也显著地影响芽的增殖系数，随着 NAA浓度的增
加，基部的愈伤组织随之增多，并出现白化苗的现象，说明
NAA浓度的加大对腋芽的增殖有一定的抑制作用。根据
LSD分析，0． 05 mg /L NAA 的增殖系数显著高于 0． 50 与
1. 00 mg /L，同时 0． 50与 1． 00 mg /L间差异不显著。如果继
代的苗是用来生根的，BA的浓度用 1. 00 mg /L 左右为好，如
果单纯是为了无菌苗的扩繁，BA浓度适当增加即 1. 50 mg /L
左右为好。NAA浓度对苗的高度有显著的影响，随着 NAA
浓度的增加，苗的高度呈下降趋势，说明高浓度的 NAA也抑
制了试管苗的伸长生长。在最佳增殖培养基 B5 +1． 50 mg /L
BA +0． 05 mg /L NAA上显齿蛇葡萄的腋芽增殖情况见图 2。
2． 5 生根培养 将继代培养3代以上的1 cm以上嫩茎接种
表 4 不同浓度的 BA与 NAA对芽增殖的影响
Table 4 Effects of different concentrations of BA and NAA on the bud multiplication
激素组合∥mg /L
Hormone combination
BA NAA
增殖倍数
Multiplication times
平均高度∥cm
Average height
苗生长状态
Growth state of seedling
0． 50 0． 05 3． 40 b 3． 53 b 芽基部无愈伤组织，茎节间长，芽叶生长旺盛，色绿
0． 50 0． 50 2． 03 c 3． 30 bc 芽基部有愈伤组织或愈伤组织团大，茎节间长或短，芽叶生长旺盛，色绿
0． 50 1． 00 1． 97 c 2． 90 bc 芽基部愈伤组织团大，茎节间长或短，生长较弱
1． 00 0． 05 4． 43 a 4． 33 a 芽基部无愈伤组织，茎节间长，芽叶生长旺盛，色绿
1． 00 0． 50 3． 33 b 3． 53 b 芽基部有愈伤组织或愈伤组织团大，茎节间长或短，芽叶生长旺盛，色绿
1． 00 1． 00 3． 13 b 2． 77 c 芽基部愈伤组织团很大，茎节间短，植株矮小，水浸状，失绿，玻璃化
1． 50 0． 05 4． 70 a 4． 70 a 芽基部无愈伤，茎节间稍短，芽叶生长旺盛，色绿
1． 50 0． 50 3． 30 b 3． 47 bc 芽基部愈伤组织团大，茎节间长或短，生长较弱
1． 50 1． 00 3． 07 b 3． 30 bc 芽基部愈伤组织团很大，茎节间短，植株矮小，水浸状，失绿，玻璃化
注:同列不同小写字母表示在 0． 05水平差异显著。
Note:The different small letters at the same column indicated the significant difference at 0． 05 level．
图 2 B5 +1． 50 mg /L BA +0． 05 mg /L NAA培养基上腋芽增殖
情况
Fig． 2 Multiplication situation of axillary bud in B5 + 1． 50
mg /L BA +0． 05 mg /L NAA medium
在生根培养基中，一般 10 d后嫩茎基部膨大，可观察到乳白
色根芽，30 d 后统计生根系数、生根数和生根长度。由表 5
可知，在不加任何激素的 1 /2MS培养基中，显齿蛇葡萄无性
试管苗的生根能力较好，生根诱导率为 50%左右，诱导的不
定根数较少。当培养基中附加 0． 05 ～ 0． 50 mg /L IBA时，试
管苗的生根能力得到明显改善，不仅生根率大幅提高，每苗
诱导的不定根数也明显增加。当 IBA 的浓度为 0． 50 mg /L
时，不仅可以大大提高试管苗的生根能力，还可促进其快速
生长(图 3)。且添加了生长素 IBA 的不定根明显表现出侧
根发达、根毛丰富等特点。不同生长素 IBA的浓度对不定根
的伸长生长并无显著影响，这可能是由于在含有生长素的培
养基中，诱导的不定根数较多，平均后显示不出长度优势，或
是培养时间较短，差异尚未完全显现。
2． 6 试管苗的移栽 将生长茁壮的试管苗(图4)从瓶内取
表 5 IBA对嫩茎生根的影响
Table 5 Effect of IBA on the young stem rooting
激素浓度 Hormone
concentration∥mg /L
生根率
Rooting rate∥%
生根长度
Rooting length∥cm
生根根数
Number of rooting∥根
苗生长状态
Growth state of seedling
0． 05 81 b 5． 24 a 3． 08 d 地上部分生长健壮，主根明显
0． 50 93 a 5． 34 a 3． 44 b 地上部分生长健壮，主根明显
1． 00 84 b 5． 26 a 3． 26 c 地上部分生长健壮，主根明显
1． 50 82 b 5． 03 a 3． 54 b 地上部分生长较弱，主根较明显，苗基部愈伤组织较多
2． 00 82 b 5． 13 a 3． 69 a 地上部分生长弱，无效根多、粗，苗基部愈伤组织多
0 52 c 5． 01 a 2． 45 e 生长健壮，主根明显，较细
注:同列不同小写字母表示在 0． 05水平差异显著。
Note:The different small letters at the same column indicated the significant difference at 0． 05 level．
出，洗净黏附在根上的培养基，移植在以菜园土∶珍珠岩∶蛭
石 =1∶ 1∶ 1(体积比)为介质的塑料花盆中，置于阴凉潮湿处。
30 d后喷施液肥一段时间后新芽萌动，待植株长大后移栽到
较大花盆中，成活率达 90%以上。
3 结论与讨论
试验证明，显齿蛇葡萄腋芽的诱导、增殖、生根等受试验
材料、消毒时间、培养基成分等诸多因素的制约和影响。取
自室内盆栽的外植体带菌量少，降低了污染率。采用生长季
中的近副梢类的嫩茎段，通常细胞分裂旺盛，生长势旺，易成
活。材料消毒时间过长，污染率虽低，但褐死严重;而过短，
尽管褐死降低，但污染率偏高。该试验于 3 月采摘嫩茎段，
以 75%乙醇浸泡 20 s后再以 0． 1%HgCl2 溶液处理 8 min消
毒效果最理想。
(下转第 10166页)
9510139卷 17期 张 霞等 显齿蛇葡萄离体快繁体系的建立
雁，黎孟枫，等，译． 2版．北京:科学出版社，1995．
［2］UWANOGHO D，REX M，CARTWRIGHT E J，et al． Embryonic expression
of the chicken Sox2，Sox3 and Sox11 genes suggests an Interactive role in
neuronal development［J］． Mech Dev，1995，49:23 －36．
［3］FOSTER J W，DOMINGUEZ-STEGLICH M A，GUIOLI S，et al． Campomel-
ic dysplasia and autosomal sex reversal caused by mutations in an SRY-re-
lated gene［J］． Nature，1994，372:525 －530．
［4］BRITSCH S，GOERICH D E，RIETHMACHER D，et al． The transcription
factor Sox10 is a key regulator of peripheral glial development［J］． Genes
Dev，2001，15:66 －78．
［5］BELL D M，LEUNG K K，WHEATLEY S C，et al． Cheah:Sox9 directly reg-
ulates the type-Ⅱcollagen gene［J］． Nat Genet，1997，16:174 －178．
［6］STOCK D W，BUCHANAN A V，ZHAO Z Y，et al． Numerous members of
the Sox family of HMG box-containing genes are expressed in developing
mouth teeth［J］． GENOMICS，1996，37:234 －237．
［7］常重杰．两种泥鳅性别决定的遗传分析［D］．武汉:武汉大学，1998:2 －10．
［8］陈少坚，郭风劲． Sox9基因促软骨形成作用机制研究进展［J］．国际骨
科学杂志，2010，31(2):
檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
65 －67．
(上接第 10159页)
图 3 1 /2MS +0． 50 mg /L IBA培养基上无菌苗的生根情况
Fig． 3 Rooting situation of aseptic seedling in 1 /2MS + 0． 50
mg /L IBA medium
图 4 移栽 7 d后的试管苗
Fig． 4 Test-tube plantlet after transplanted 7 d
植物组织培养中，不同植物的遗传特性、生物学特性都
不同，甚至同一种植物不同部位的组织、同一部位组织不同
生长阶段对营养的要求也不同［9］。该试验结果表明，茎段初
次培养(芽诱导)中，选择嫩茎段，在 B5培养基的发芽率和芽
的生长状态都要比 MS培养基中表现好。这与易诚等［10］认
为 MS培养基适合芽的生长有一定的出入。可能是因为 MS
培养基无机盐浓度高，有加速愈伤组织产生的作用。B5 培
养基含有较低的铵盐，该营养成分可能更适合显齿蛇葡萄腋
芽的萌发。而 1 /2MS培养基中腋芽的长势位于以上 2 种培
养基之间，这可能是由于 1 /2MS培养基的无机盐浓度适合芽
的诱导，但并不适宜芽的增殖所致。腋芽诱导过程中，在 MS
培养基上，腋芽基部产生大量淡黄色的愈伤组织，而在 B5培
养基中没有或有少量的愈伤组织产生，这表明不同的基本培
养基对植株的出愈率有一定的影响。这与樊青峰等［11］在李
叶片愈伤诱导中的研究结果一致。
生长素与细胞分裂素的比值对离体器官的调控起着关
键性的作用［12］，同时激素之间也有一定的协同作用。严姜
黎等［13］在研究红肉猕猴桃的离体繁殖时发现，在含有 BA的
培养基中添加 IBA，芽的分化率明显提高，一般来说，生长素
与细胞分裂素的比值低有利于芽的分化，生长素与细胞分裂
素的比值高，有利于根的分化［14］。该试验芽的诱导和增殖
培养中，在一定范围内，随着 BA浓度的增加，诱导芽的节间
变短，芽的数目增多;当 BA的浓度增加到 1． 50 mg /L时，芽
基部的愈伤组织增多，玻璃化现象严重。而 NAA 在一定浓
度范围内，芽的数目增多，但当浓度增加到 1． 00 mg /L后，随
着浓度的增加，愈伤组织增多，黄化和玻璃化现象严重，芽苗
不能生长。增殖培养中，NAA 浓度增加到 1． 00 mg /L后，继
续增加浓度，产生一定数量的不定根。
添加一定浓度的 IBA 对生根有促进作用［15］，该试验也
验证了这一点。同时 IBA 浓度要适宜［16］，过高茎段基部会
产生大量愈伤组织［17］，抑制发根抽茎;过低会出现茎段基部
不发根或生根条数少的现象;而适当浓度的 IBA不仅发根、长
根速度快，而且根生长粗壮，侧根多，呈白色。经试验，显齿蛇
葡萄在 1 /2MS +0． 50 mg /L IBA培养基上生根效果较好。
参考文献
［1］刘建新，周天达．藤茶的生药学研究［J］．中草药，1999，30(6):459 －
463．
［2］中国科学院中国植物志编委会．中国植物志:第48卷第2分册［M］．北
京:科学出版社，1990:35 －53．
［3］周天达，周雪仙．藤茶中双氢黄酮醇的分离、结构鉴定及药理活性［J］．
中国药学杂志，1996，31(8):458 －461．
［4］易诚．湖南省藤茶资源开发现状及发展对策［J］．中国林副特产，2002，
62(3):62 －63．
［5］杨铃，郑成．从藤茶中提取二氢杨梅素的微波萃取工艺研究［J］．天然
产物研究与开发，2005，17(5):636 －638．
［6］郑作文．藤茶总黄酮在 2215 细胞培养中对乙型肝炎病毒 HBsAg、
HBeAg和HBV-DNA的抑制作用［J］．山东中医杂志，2003，22(9):561
－563 ．
［7］陈玉琼，曾维超，孟燕，等．藤茶新工艺加工过程品质化学成分的变化
［J］．华中农业大学学报，2008，27(3):441 －444．
［8］陈玉琼，倪德江，吴谋成．恩施富硒藤茶安全性毒理学实验研究［J］．茶
叶科学，2005，25(3):295 －299．
［9］GELLA R，ERREA P． Application of in vitro therapy for ilarvirus elimina-
tion in three Prunus species［J］． Journal of Phtopathology，1998，146:445 －
449．
［10］易诚，郑意生，钟声，等．显齿蛇葡萄组培育苗实验［J］．经济林研究，
2005，23(2):33 －35．
［11］樊青峰，李国怀，浦艳，等．中国李 Nubiana离体叶片愈伤组织诱导的
研究［J］．华中农业大学学报，2007，26(5):680 －683．
［12］HAMMATT N． Promotion by phloroglucinol of adventitious root formation
in micropropagated shoots of adult wild cherry(Prunus avium L．) ［J］．
Plant Growth Regulation，1994，14(2):127 －132．
［13］严姜黎，张翼，邢梅，等．红肉猕猴桃的离体快速繁殖技术研究［J］．华
中农业大学学报，2008，27(1):101 －104．
［14］马庆虎，宋艳茹．植物激素的基因工程［J］．植物学报，1993，35(4):318
－328．
［15］张智乾，何秀丽，义鸣放．唐菖蒲离体直接再生技术的研究［J］．华中
农业大学学报，2008，17(1):110 －116．
［16］曹孜义，刘中民．实用植物组织培养技术教程［M］．兰州:甘肃科学技
术出版社，1996:21 －86．
［17］吴月燕，陶伟芳．葡萄离体培养及快速繁殖［J］．浙江林学院学报，
2001，18(2):188 －192．
66101 安徽农业科学 2011 年