全 文 ：参皂苷 Rg1、 Re、 Rb1为其有效成分 ,在这些成分中
Rb1的含量较高 ,一些文献报道对两种药材所含人参
皂苷 Rg1、 Re、 Rb1成分 ,是采用 HPLC梯度分析〔4〕 ,
但药品质量标准一般不提倡采用梯度洗脱 ,我们通
过 HPLC法 ,采用乙腈 -水 ( 35∶ 65)为流动相 ,检测
波长 203nm,经反复试验研究 ,在此条件下 ,处方中
西洋参、三七中共有成分人参皂苷 Rb1与其他成分
能够达到很好的分离 ,人参皂苷 Rg1、 Re因结构较相
似 ,含量较低 ,不能得到较好的分离效果。益安宁中
西洋参、三七所占比例较大 ,经查阅大量相关文献资
料 ,最终选择其共有成分人参皂苷 Rb1作为本品的
质量控制指标性成分 ,建立了 HLPC对其中所含共
有成分人参皂苷 Rb1的含量测定方法。结果表明该
方法简便、准确、专属性好。
3. 2　从益安宁的处方来看 ,西洋参、三七为方中的
贵重药材 ,故选用西洋参、三七作为含量测定研究对
象 ,西洋参、三七中含有多种单体皂苷成分 ,参照
2005年版药典 ,选择 Rg1、 Rb1作为对照品进行试验。
样品按正文含量测定项下的方法制成供试液 ,同法
制成阴性对照液 ,以乙腈-水 ( 30∶ 70)为流动相〔 5〕 ,流
速 0. 6mL· min- 1 ,上述各液经 HPLC法进样 20μL
测定 ,供试品色谱中 ,人参皂苷 Rg1阴性对照有干
扰 ,为排除干扰 ,逐步改变其流动相比例 ,当乙腈比
例降至 25,水的比例升至 75时 ,仍不能达到很好分
离 ,且保留时间延长 ,而在相同条件下 ,人参皂苷 Rb1
达到很好分离 ,阴性无干扰 ,故将人参皂苷 Rb1作为
含量测定对象。调整色谱条件 ,当流动相乙腈-水 ( 35
∶ 65) ,流速为 10mL· min- 1时 ,阴性无干扰 ,且保留
时间缩短 ,快速达到分离 ,故选用该方法。
参考文献
〔1〕刘成红 ,姜华君 . 高效液相法测定硬肝复康丸中人参皂苷 Rb1的
含量〔 J〕 .中国药品标准 , 2002, 3( 2): 54～ 56.
〔2〕赵汝海 ,王泽芳 ,傅小英 . 双波长薄层扫描法测定三七片中三七
皂甙 R1人参皂甙 Rb1和人参皂甙 Rg1的含量〔 J〕. 国外分析仪器
与应用 , 1996, ( 2): 62～ 64.
〔3〕董林 ,杨模坤 .大孔树脂吸附 -分光光度法测定三七蜂王浆中三七
皂甙〔 J〕 .中国中药杂志 , 1991, 16( 7): 418～ 419.
〔4〕陈闽军 ,吴永江 ,程翼宇 . 高效液相色谱用于参麦注射液人参皂
苷的含量测定和批次一致性考察〔 J〕 . 中国药学杂志 , 2003, 38
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〔5〕国家药典委员会编 . 中华人民共和国药典〔M〕 . 北京:化学工业
出版社 , 2005年版一部 , 10.
RP-HPLC法 测定辣蓼中没食子酸的含量
赖东美 1 ,施连印 2 ( 1. 厦门市药品检验所 厦门 361012; 2. 福建中医学院 福州 350000)
摘要: 目的　建立辣蓼中没食子酸的含量测定方法。方法　采用 Agi lent Hypersil ODS柱 ( 4. 0× 250mm , 5μm);以甲醇 -水 -冰醋酸为流动相 ;检
测波长: 274nm。 结果　没食子酸的平均回收率为 100. 7% , RSD为 1. 0% (n= 6)。结论　方法简便、快速、准确 ,可用于辣蓼的质量控制。
关键词: 辣蓼 ;没食子酸 ;高效液相色谱 ;含量测定
中图分类号: R927. 2　文献标识码: A　文章编号: 1006-3765( 2006) 02-0050-03
Determination of Gallic Acid in PolygonumFlaccidumMeisn by HPLC
LAI Dong -mei
1
,SHI Lian-yin
2
( 1. Xiamen institute for Drug control , Xiamen 361012,China ; 2. Fujian College of
Traditional Chinese Medicine ,Fuzhou 350001,China )
ABSTRACT: OBJECTIVE　 To establish the determination of gallic acid in Polygomum flaccidum Meisn.
METHODS　 A agilent hypersi l ODS column was used as the analytical column and methanol-w ater-acetic acid
g lacial as the mobile phase. The detection waveleng th was at 274nm. RESULTS　 The average recoveries w ere
100. 7% ( RSD= 1. 0% , n= 6) . CONCLUSION　 The method is simple, accurate, sensi tiv e and can be used to
determine gallic acid in Polygonum flaccidum M eisn.
KEY WORDS: Polygonum flaccidum Meisn; Gallic acid; RP-HPLC; Content determination
作者简介:赖东美 ,女 ( 1974. 2～ )。 毕业于中国药科大学中药鉴定专业。 学士。
职称:主管药师。 联系电话: ( 0592) 5619842, E-mai l: ldmx myjs@ 163. com
·50·
海峡药学　 2006年　第 18卷 第 2期
　　辣蓼为蓼科植物水辣蓼 ( Polygonum hydropiper
L. )或旱辣蓼 ( Polyg onum flaccidum Messin. )的干燥
全草 ,用于痢疾、肠炎、食滞 ,外治皮肤瘙痒。具有除
湿化滞、消肿止痛之功效。试管实验表明 , 20% ～
60%辣蓼煎剂对各种痢疾杆菌均有抑制作用 ,新鲜
或干燥辣蓼全草的流浸膏或煎剂涂于皮肤 ,能预防
小鼠感染血吸虫。其起作用的主要成分是没食子酸 ,
是没食子酸鞣质的单体。参考相关文献〔 1～ 4〕 ,我们选
择 RP-HPLC法测定了药材中没食子酸的含量 ,该
方法可靠、灵敏、重现性好 ,因此可以很好的控制药
材的质量 ,并为辣蓼质量标准的制定提供依据。
1　仪器与试药
高效液相色谱仪: Agilent 1100 series; Agilent
1100 series可变波长检测器 (VWD);惠普 A\ D化学
工作站。没食子酸 (中国药品生物制品检定所提供 ,
11083-200302) ;辣蓼药材由市场购得。 经厦门市药
品检验所叶基荣主任药师鉴定为旱辣蓼原植物。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件与系统适用性试验　色谱柱为
Agilent Hypersil ODS柱 ( 4. 0× 250mm, 5μm);检测
波长: 274nm;流速: 0. 9mL· min- 1 ;柱温: 30℃ ;进样
量: 5μL;流动相:甲醇 -水-冰醋酸 ( 10∶ 88∶ 2) ,理论
板数不低于 5000。
图 1　对照品色谱图
图 2　供试品色谱图
2. 2　溶液的制备
2. 2. 1　对照品溶液的制备: 精密称取干燥至恒重的
没食子酸对照品约 10mg置 100mL量瓶 ,用 10%盐
酸溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,再吸取 5mL溶液置
25mL量瓶中 ,加 10%盐酸稀释至刻度 ,制成约
0. 02mg· m L- 1没食子酸的对照品溶液。
2. 2. 2　供试品的制备:取辣蓼药材粗粉 ,精密称取
约 0. 1g,置三角瓶中 ,加入 15mL的 10%的盐酸溶
液 ,称定重量 ,水浴回流 3h,放冷 ,用 10%的盐酸溶
液补足减失的重量 ,再用 0. 45μm的水相滤膜过滤 ,
即得。
2. 3　线性关系的考察　精密称取干燥至恒重的没
食子酸对照品约 10mg置 100mL量瓶中 ,用 10%盐
酸溶液溶解并稀释至刻度 (储备液 )。 精确吸取储备
液 1mL、 5mL、 10mL、 15mL、 25mL分别置于 25mL
量瓶中 ,用 10%盐酸溶液定容 ,每一浓度各进样 2
次 ,每次进样 5μL,以峰面积积分值 A对进样浓度 C
作图得回归方程: Y= 15. 72X- 3. 927( r= 0. 9999, n
= 5) ,试验结果表明 ,没食子酸在 0. 02112～ 0. 528μg
范围内 ,呈良好的线性关系。
2. 4　精密度试验　没食子酸对照品进样 6次 ,每次
进样 5μL,平均峰面积为 568. 4, RSD为 0. 7% 。
2. 5　重现性试验　精密称取样品 5份 ,分别制备成
样品溶液 ,测定含量 , RSD= 0. 9%。
2. 6　加样回收试验　精密称取样品 6,分别加入一
定量的对照品 ,依样品测定项下操作 ,测定含量 ,计
算回收率为 100. 7% , RSD= 1. 0% ( n= 6)。
2. 7　稳定性试验　取同一对照品溶液分别在 0, 5,
10, 15, 20, 25h进样 5μL,测定峰面积 ,无显著变化 ,
RSD= 0. 90% ( n= 6) ,说明没食子酸对照品在 25h
内是稳定的。
2. 8　样品测定　取 3批样品 ,按上述方法制备供试
品溶液。 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液
5μL,注入液相色谱仪 ,测定 , 计算 ,结果分别
0. 472% , 0. 491% , 0. 527% 。
3　讨论
3. 1　供试品溶液的制备的溶剂选择和提取时间的
确定　因辣蓼中所含的游离没食子酸较少 ,而主要
以没食子酸鞣质的形式存在。 实验中比较了用不同
的溶剂 25mL水浴提取 2h ,酸、碱、酶或水煮均能使
没食子酸鞣质水解 ,较缓和的水解则可产生不同量
的没食子酸 ,用 10%盐酸使没食子酸鞣质的水解最
完全 ,所以用 10%盐酸作为提取溶剂。回流提取 1h、
2h测得没食子酸的含量较低 ,回流提取 3h、 4h测得
的没食子酸含量基本相同。所以提取方法为提取 3h。
·51·
Strai t Pharmaceutical Journal Vol 18 No. 2 2006
参考文献
〔1〕颜玉贞 ,唐婉清 . HPLC法测定伏克龙胶囊中没食子酸的含量〔 J〕
. 中药新药与临床药理 , 2000, 11( 3): 167～ 169.
〔2〕沙明 ,曹受民 ,陈吉文 . 高效液相色谱法测定地榆中没食子酸的
含量〔 J〕. 中国中药杂志 , 1999, 24( 2): 99～ 100.
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定〔 J〕. 中药新药与临床药理 , 2000, 11( 1): 39～ 40.
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〔 J〕. 中成药 , 1999, 21( 10): 532～ 534.
HPLC法测定盐酸米诺环素中甲醛的残留量
黄 婧 ,苏智阳 ,王红梅 (厦门市药品检验所厦门 361012)
摘要: 目的　用高效液相色谱法测定盐酸米诺环素中甲醛的残留量 ,方法　采用 C18色谱柱 ,柱温为 30℃ ,以 0. 06mol· L- 1磷酸溶液
( pH2. 85)-乙腈 ( 50∶ 50)为流动相 ,检测波长为 336nm。结果　甲醛在 0. 21～ 2. 47μg· mL- 1范围内线性关系良好。结论　本法准确、简便、快
捷 ,适用于测定盐酸米诺环素中甲醛的残留量。
关键词: 盐酸米诺环素 ;甲醛 ;高效液相色谱
中图分类号: R927. 2　文献标识码: A　文章编号: 1006-3765( 2006) 02-0052-02
Determination of the Residual Formaldehyde in Minocycline Hydrochloridev by
HPLC
HUANGJing ,SU Zhi-yang ,WANGHong -mei (Xiamen Institute for Drug Control ,Xiamen 361012,China )
ABSTRACT: OBJECTIVE　 To determinate the residual Formaldehyde in Minocycline Hydrochloridev by HPLC.
METHODS　 A C18 ( 4. 6mm× 250mm, 5μm) column w as used with mobile phase of 0. 06mol· L- 1 Phosphoric
solution ( pH2. 85) -acetoni t rile ( 50∶ 50) at detection wavelength of 336nm; The temperature of column w as
30℃。 RESULTS　 The calibration curve w ad liner in the concentration rang of 0. 21～ 2. 47μg· mL- 1 .
CONCLUSION　 The HPLC method is accurate simple and rapid i t can be used to determination the residual
Formaldehyde in Minocycline Hydrochloridev .
KEY WORDS: Minocycline Hydrochloridev ; Fo rmaldehyde; HPLC
　　盐酸米诺环素 ,又名二甲胺四环素 ,是四环素类
抗菌作用最强的品种 ,对大肠杆菌、产气杆菌、志贺
杆菌、流感嗜血杆菌、克雷白杆菌等敏感菌所致的系
统或局部感染均有疗效 ,临床主要用于立克次病、支
原体肺炎、淋巴肉芽肿等病的治疗。现已收载于中国
药典 2005年版、美国药典 27版及英国药典 2003年
版。为有效控制产品质量 ,本文采用 HPLC法测定盐
酸米诺环素中甲醛的残留量 ,并能将甲醛峰与干扰
峰完全分离 ,准确度高 ,结果满意。
1　仪器与试药
1. 1　仪器　 Agilent1100型 HPLC仪 ,VWD。
1. 2　试药　甲醛溶液 ,无水乙醇 ,磷酸 , 2, 4二硝基
苯肼均为分析纯
作者简介:黄婧 ,女 ( 1980. 1- )。 毕业于中国药科大学。
职称:药师。 从事药品检验工作。 联系电话: 0592- 5619833
2　方法与结果
2. 1　色谱条件　 ZO RBAX Ex tend-C18 ( 4. 6mm×
250mm, 5μm) ,流动相:以磷酸溶液 (取磷酸 5. 75g ,
加水至 1000mL,用浓氨水调 pH值至 2. 85) -乙腈
( 50∶ 50) ,柱温为 30℃ ,检测波长为 336nm。
2. 2　系统适用性实验　取供试品约 2. 0g ,置 25mL
量瓶中 ,加 1mL对照溶液 B,和 19mL无水乙醇 ,充
分混匀 ,离心分离 ;取 5mL上清液 ,置 10m L量瓶中 ,
精密加入 3mL磷酸水溶液 ( 1→ 50)、 1mL 2, 4二硝
基苯肼无水乙醇溶液 ( 0. 05→ 100) ,并用无水乙醇稀
释至刻度 ,在约 30℃放置 7h,作为分离度溶液。
在上述色谱条件下 ,分离度溶液所得图谱中 ,相
对甲醛峰保留时间约为 0. 8的溶剂干扰峰与甲醛峰
的分离度应不小于 3. 5。本法中甲醛峰与溶剂干扰峰
的分离度达到 6. 44。典型色谱图 (见图 1) ,空白图谱
(见图 2)。
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海峡药学　 2006年　第 18卷 第 2期