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沿海滩涂中华补血草化学成分研究



全 文 :沿海滩涂中华补血草化学成分研究
刘兴宽 (江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室 ,江苏盐城师范学院生命科学与技术学院 ,江苏盐城 224051)
摘要 [目的 ]研究沿海滩涂中华补血草[ Limoniumsinense(Girard)Kuntz]全草的化学成分。 [方法]利用萃取、制备薄层、反复硅胶、
Sephadex-LH20、开放 ODS柱色谱等方法进行分离纯化 ,根据理化常数测定及波谱分析对分离得到的化合物进行结构鉴定。 [结果]分离
得到 11个化合物 ,分别鉴定为异鼠李素(1)、甘露醇(2)、β-谷甾醇(3)、齐墩果酸(4)、槲皮素(5)、槲皮素 3-O-β-D-葡萄糖苷(6)、没食子
酸乙酯(7)、山柰酚(8)、山柰酚 -3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(9)、(+)-儿茶素(10)、异鼠李素-3-芸香糖甙(11)。 [结论]化合物 4, 6, 7, 10, 11
为首次从沿海滩涂中华补血草中分离得到。
关键词 沿海滩涂中华补血草;化学成分;结构鉴定
中图分类号 S567.23  文献标识码 A  文章编号 0517-6611(2010)30-16862-03
TheResearchonChemicalConstituentsofCoastLimoniumsinense(Girard)Kuntz
LIUXing-kuan (JiangsuProvincialKeyLaboratoryofCoastalWetlandBioresearchesandEnvironmentalProtection, ColegeofLifeScience
andTechnology, YanchengNormalUniversity, Yancheng, Jiangsu224051)
Abstract ThispaperaimstostudythechemicalconstituentsofcoastLimoniumsinense(Girard)Kuntz.Elevencompoundswereisolatedby
extraction, preparation-TLC, repeatedsilicagel, Sephadex-LH20, opened-ODScolumnchromatography, andtheseparatedcompoundswerei-
dentifiedonthebasisofphysical-chemicalconstantandspectralanalyses.Elevencompoundswereisolatedandtheirstructureswereidentified
asisorhamnetin(1), mannitol(2), β-sitosterol(3), Oleanolicacid(4), quercetin(5), quercetin-3-O-β -D-glucoside(6), ethylgalate
(7), kaempferol(8), kaempferol-3-O-α-L-rhamnopyranoside(9), (+)-catechin(10), isorhamnetin-3-rutinoside(11).Compounds4, 6,
7, 10, 11wereobtainedfromcoastLimoniumsinense(Girard)Kuntzforthefirsttime.
Keywords  CoastLimoniumsinense(Girard)Kuntz;Chemicalconstituent;Structuralidentification
基金项目 江苏省滩涂生物资源与环境保护重点建设实验室资助项
目;江苏省盐城师范学院引进人才科研启动基金项目。
作者简介 刘兴宽(1969-),男 ,江苏东海人 ,硕士 ,讲师 ,从事天然活
性成分的分离及检测研究。
收稿日期  2010-06-28
  中华补血草 [ Limoniumsinense(Girard)Kuntz]又名匙叶
草 、盐云草 、海菠菜 、海赤芍等 ,为蓝雪科补血草属多年生泌
盐草本植物 ,喜生于盐渍化的低洼湿地上 ,广泛分布于我国
东北 、华北等地区 ,尤以江苏省沿海滩涂分布甚广。在江苏
主要分布于苏北沿海的连云港 、灌云 、射阳 、东台 、如东 、南通
等沿海地区的滩涂及盐碱湿地上 [ 1-2] 。植物蕴藏量大 ,资源
丰富 ,但其开发利用相对薄弱 。目前除用于观赏 、脱盐外还
可用于临床。据记载 ,全草入药可起到清热解毒 、止血散瘀 、
祛风消炎 、抗衰老和抗癌等功效。主治功能性子宫出血 、尿
血 、痔疮出血 、脱肛 、痈疽 、月经过多 、白带 、子宫内膜炎和宫
颈糜烂等。根可治体弱 、食欲不振 ,叶可治胃溃疡和胃癌 ,花
枝可治功能性子宫出血 、宫颈癌及其他出血 [ 3] ,作为新资源
有着良好的药用研发前景。为进一步阐明中华补血草药效
的物质基础 ,笔者对其化学成分进行了研究 。
1 材料与方法
1.1 供试药材  2008年 8月采自江苏东台农村 ,经盐城师
范学院生命科学与技术学院于延球教授鉴定为蓝雪科补血
草属中华补血草 [ Limoniumsinense(Girard)Kuntz] 。
1.2 仪器 熔点用 X-4显微熔点测定仪测定 ,温度计未
校正;红外光谱用 NICOLETFT-IR50X型红外光谱仪测定;
FAB-MS用 VGZAB-HS型质谱仪测定;NMR用 Varian
INOVA500型超导脉冲傅立叶变换核磁共振波谱仪测定。薄
层色谱用硅胶 GF254 (10 ~ 40 μm,青岛海洋化工厂),柱色谱
用硅胶(51 ~ 71 μm,青岛海洋化工厂),葡聚糖凝胶 Sephadex
-LH20(瑞典 Pharmacia公司),其他试剂为分析纯(市售)。
1.3 提取与分离 中华补血草全草 20 kg,粉碎 ,用体积分
数为 75%的乙醇溶液加热回流提取 3次 ,每次 2.5 h;过滤 ,
合并滤液 ,减压浓缩回收溶剂至无醇味后 ,以石油醚去除浓
缩物中的叶绿素。分别用与浓缩液等量的氯仿 、乙酸乙酯 、
正丁醇各萃取浓缩物 3次 ,回收溶剂得各部分萃取物 ,分别
合并萃取物 ,得氯仿部 、乙酸乙酯部 、正丁醇部和水部。利用
各种色谱手段 ,包括硅胶柱色谱 、凝胶柱色谱 、制备薄层色
谱 、开放 ODS柱色谱 、Sephadex-LH20纯化等 ,从中华补血
草的氯仿萃取物中分离得到化合物 1(150 mg)、化合物 2(80
mg)、化合物 3(95 mg)、化合物 4(50 mg)。从乙酸乙酯部分
离得到化合物 5(450 mg)、化合物 6(40 mg)、化合物 7(75
mg)、化合物 8(170 mg)、化合物 9(190 mg)、化合物 10(55
mg)、化合物 11(100 mg)。
2 结构鉴定 
化合物 1(150mg):黄色粉末 , mp:306~ 308℃(MeOH),
易溶于甲醇 。1 H-NMR(400 MHz, DMSO-d6 )δ:3.84(3H, s,
OCH3 ), 6.19(1H, s, H-6), 6.47(1H, s, H-8), 6.95(1H, d, J=
8.4 Hz, H-5′), 7.70(1H, d, J=8.4 Hz, H-6′), 7.79(1H,
H-2′), 9.39(1H, s, 3-OH), 9.70(1H, s, 4′-OH), 10.75(1H, s,
7-OH), 12.45(1H, s, 5-OH);H-2′较 H-6′处于较低场 ,表明 B
环的氧取代方式是 3′-OMe, 4′-OH;13 C-NMR(100 MHz, DM-
SO-d6 )δ:147.3(C-2), 135.8(C-3), 175.7(C-4), 156.1
(C-5), 98.1(C-6), 163.9(C-7), 93.5(C-8), 160.6(C-9),
103.0(C-10), 121.9(C-1′), 115.5(C-2′), 146.6(C-3′), 148.8
(C-4′), 111.7(C-5′), 121.6(C-6′), 55.7(OCH3)。以上数据
与文献 [ 4]报道的异鼠李素(isorhamnetin)基本一致 。
化合物 2(80 mg):无色针状结晶(甲醇), mp:165 ~ 167
℃,易溶于水。IRvKBrmax(cm
-1 ):3 288(-OH), 1 422, 1 281,
1 082, 1 019。1H-NMR(300 MHz, DMSO-d6)谱中 ,给出 δ3 46
~ 4 44(10H, m)质子信号。13 C-NMR(75 MHz, DMSO-d6)谱
中 ,给出 δ71.4(C-3、4)、69.8(C-2、5)、63.9(C-1、6)碳信号。
与甘露醇标准品点于同一硅胶 G板上 ,醋酸乙酯 -吡啶 -水
责任编辑 王淼 责任校对 卢瑶安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(30):16862-16864DOI :10.13989/j.cnki.0517-6611.2010.30.140
(7∶2∶1)展开 ,取出晾干后用 KMnO4溶液显色 ,样品与标准品
Rf值完全一致 ,共 TLC为单一斑点。样品与标准品混合物
熔点不降低。以上数据与文献 [ 5]数据基本一致 ,故鉴定为
甘露醇(mannitol)。
化合物 3(95 mg):无色针晶(CHCl3 -MeOH), mp:132 ~
134 ℃, [ α] D +35.2°(CHCl3 )。 IRvKBrmax(cm
-1 ):3 430
(OH), 1 640(C=C)。FAB-MS(m/z):414[ M] +, 396, 330,
329, 273, 255, 138, 120, 107, 105, 95, 69, 55(基峰)。1H-NMR
(CDCl3 , 500 MHz)δ:5.35(-1H, brd, J=5.0 Hz, H-6), 3.53
(1H, m, H-3), 1.01(3H, s, H-19), 0.92(3H, d, J=6.4Hz,
H-21), 0.86(3H, t, J=7.6Hz, H-29), 0.84(3H, d, J=6.8Hz,
H-26), 0.82(3H, d, J=6.8Hz, H-27), 0.68(3H, s, H-18)。13C-
NMR(CDCl3 , 125 MHz)δ:140.75(C-5), 121.70(C-6), 71.80
(C-3), 56.76(C-14), 56.05(C-7), 50.13(C-9), 45.83
(C-24), 42.30(C-13), 40.47(C-4), 39.77(C-12), 37.25
(C-1), 36.50(C-20), 36.13(C-10), 33.94(C-22), 31.89
(C-7), 31.65(C-2), 29.14(C-8), 28.90(C-25), 28.23
(C-16), 26.07(C-23), 24.29(C-15), 23.06(C-28), 21.20
(C-11), 19.81(C-27), 19.03(C-19), 18.97(C-16), 18.77
(C-21), 11.97(C-18), 11.85(C-29)。
Liebemann-Burchard反应阳性 ,提示为不饱和甾醇类化
合物 , MS为典型的甾醇类裂解方式。其 1H-NMR、13 C-NMR
与文献 [ 6]报道的 β-谷甾醇基本一致。经与标准品(购自
Sigama公司)共熔点 、共 TLC,证明为同一化合物 。因此 ,化
合物 3的结构鉴定为 β-谷甾醇(β -sitosterol)。
化合物 4(50 mg):白色针晶 , mp:309 ~ 310℃, [ α]D +
80°(CH3OH),易溶于氯仿 、丙酮以及甲醇。 IRvKBrmax(cm
-1):
3 427, 3 074, 2 942, 2 869, 1 687, 1 640, 1 452, 1 382, 1 377, 1
320, 1 274, 1 237, 1 190, 1 132, 1 107, 1 045, 1 040, 984,
883;1H-NMR(400 MHz, CDCl3 )δ:5.28(S, 1H), 3.23(1H,
dd, 7.2, 8.0), 2.83(1H, d, 11.2), 2.97(1H, m, 3-H), 2.95
(1H, m, 19-H), 2.22(1H, m, 13-H), 2.13(2H, S, 22-H), 1.64
(3H, S, 26-H), 0.93(3H, S, 25-H), 0.86(6H, S, 23-H, 24-H),
0.76(3H, S, 30-H), 0.64(3H, S, 27-H)。13 C-NMR(400 MHz,
CDCl3 )δ:183.06(S, C-28), 30.72(S, C-20), 32.51(T, C-
29), 79.11(D, C-3), 46.59(S, C-17), 55.43(D, C-5), 47.82
(D, C-9), 41.19(D, C-18), 46.02(D, C-19), 41.74(S, C-14),
39.42(S, C-8), 38.83(S, C-4), 32.79(T, C-22), 143.58(D, C-
13), 38.63(T, C-1), 23.14(T, C-16), 33.08(T, C-7), 33.89
(T, C-21), 27.34(T, C-2), 23.49(Q, C-30), 27.77(T, C-15),
122.74(T, C-12), 23.62(T, C-11), 17.18(Q, C-26), 18.43(T,
C-6), 25.88(Q, C-27), 15.52(Q, C-24), 28.18(Q, C-23),
15.33(Q, C-25);EI-MSM/Z456(M+, 5.56%), 395, 316,
302, 287, 273, 259, 248, 234, 220, 203, 189, 175, 161, 147, 133,
119, 107。有关波谱数据与文献 [ 7]值基本相符。断定该化
合物是齐墩果酸(Oleanolicacid)。
化合物 5(450 mg):黄色针晶(MeOH);盐酸 -镁粉反应
阳性;mp:316 ~ 318℃,易溶于甲醇。IRvKBrmax(cm
-1 ):3 379,
3 287, 1 672, 1 616, 1 516, 1 456, 1 430, 1 357, 1 315, 1 246,
1 211, 1 163, 1 098, 1 003, 934, 882, 822, 788;DMSO;1H-NMR
(400 MHz, CD3OD):6.18(1H, d, J=2.0Hz, H-6), 6.39(1H,
d, J=2.0 Hz, H-8), 6.89(1H, d, J=8.5Hz, H-5′), 7.64(1H,
dd, J=1.8, 8.5 Hz, H-6′), 7.73(1H, d, J=1.8Hz, H-2′);13 C-
NMR(100 MHz, CD3OD)δ:148.1(C-2), 136.5(C-3), 177.1
(C-4), 158.6(C-5), 99.6(C-6), 165.9(C-7), 94.7(C-8),
162.8(C-9), 104.0(C-10), 124.5(C-1′), 116.3(C-2′), 146.5
(C-3′), 149.1(C-4′), 116.5(C-5′), 121.9(C-6′);以上数据与
文献 [ 8]报道的槲皮素(quercetin)基本一致。
化合物 6(40mg):黄色粉末;mp:227 ~ 229 ℃;盐酸 -镁
粉反应阳性;1 H-NMR(CD3OD, 400 MHz)δ:7.70(1H, d, J=
2.0Hz, H-2), 6.18(1H, s, H-6), 6.38(1H, s, H-8), 6.89(1H,
d, J=8.4Hz, H-5′), 6.95(1H, dd, J=2.0, 8.4Hz, H-6′), 5.25
(1H, d, J=7.2Hz, GlcH-1), 3.02-3.06(4H, m, GlcH-2, 3,
4, 5), 3.72(1H, dd, J=2.4, 18.0Hz, GlcH-6α), 3.57(1H, J
=5.4, 18.0Hz, GlcH-6β)。13 C-NMR(CD3OD, 100 MHz)δ:
147.3(C-2), 134.2(C-3), 177.3(C-4), 157.6(C-5), 98.7
(C-6), 164.4(C-7), 93.6(C-8), 161.2(C-9), 103.9(C-10),
122.1(C-1′), 115.0(C-2′), 144.6(C-3′), 148.5(C-4′), 116.5
(C-5′), 121.4(C-6′), glucoseδ:103.2(C-1″), 74.3(C-2″),
76.8(C-3″), 70.6(C-4″), 76.8(C-5″), 62.2(C-6″)。以上光谱
数据与文献 [ 8]报道的槲皮素 3-O-β-D-葡萄糖苷(quercetin-
3-O-β-D-glucoside)数据一致 。
化合物 7(75 mg):白色针晶(氯仿 -甲醇), mp:157-
158℃。 FeCl3反应显蓝黑色 ,易溶于丙酮和甲醇 ,微溶于氯
仿和水 。IRvKBrmax(cm
-1):3 450, 3 299(OH), 1 706(C=O),
1 619、1 535、1 400、1 384、1 315、1 255、1 041、763。FAB-MS
m/z:198[ M] +。1 H-NMR(400 MHz, CD3 OD)δ:7.10(2H, s,
H-2, 6), 4.28(2-H, q, J=7.0Hz, O-CH2CH3 ), 1.36(3H, t, J=
7.0Hz, O-CH2 CH3 )。13 C-NMR(400 MHz, CD3OD)δ:167.3(s,
C=O), 144.4(s, C-3, 5), 137.0(s, C-4), 120.5(s, C-1), 108.9
(d, C-2, 6), 60.5(t, O-CH2), 13.8(q, CH3 )。与文献 [ 9]报道
的没食子酸乙酯(ethylgalate)数据一致。
化合物 8(170 mg):黄色粉末 , mp:274 ~ 276 ℃,易溶于
甲醇 ,盐酸 -镁粉反应呈阳性 [ 10] 。1 H-NMR(400 MHz, DMSO-
d6)δ:6.18(1H, s, H-6), 6.39(1H, s, H-8), 8.08(2H, d, J=
8.0Hz, H-2′, 6′), 6.90(2H, d, J=8.0Hz, H-3′, 5′)。13 C-NMR
(100 MHz, DMSO-d6)δ:146.8(C-2), 135.6(C-3), 175.8(C-
4), 156.1(C-5), 98.1(C-6), 163.8(C-7), 93.4(C-8), 160.7
(C-9), 103.0(C-10), 121.6(C-1′), 129.3(C-2′, 6′), 115.5(C-
3′, 5′), 159.1(C-4′)。以上光谱数据与文献 [ 11]报道的山柰
酚(kaempferol)数据一致。
化合物 9(190 mg):黄色颗粒状结晶(MeOH), mp:246 ~
248℃(MeOH),易溶于甲醇。1H-NMR(400 MHz, DMSO-d6 )
δ:0.81(3H, d, J=5.6Hz, CH3 ), 3.37(1H, m, H-5″), 4.60(1H,
s, H-4″), 4.70(1H, s, H-3″), 4.94(1H, s, H-2″), 5.30(1H, brs,
H-1″), 6.21(1H, d, J=1.7Hz, H-6), 6.41(1H, d, J=1.7 Hz,
H-8), 6.92(2H, d, J=8.7 Hz, H-3′, 5′), 7.76(2H, d, J=8.7
1686338卷 30期                刘兴宽 沿海滩涂中华补血草化学成分研究
Hz, H-2′, 6′), 10.21(1H, s, 4′-OH), 10.80(1H, s, 7-OH),
12.62(1H, s, 5-OH);13C-NMR(100 MHz, DMSO-d6 )δ:156.5
(C-2), 134.2(C-3), 177.7(C-4), 161.3(C-5), 98.7(C-6),
164.2(C-7), 93.7(C- 8), 157.2(C-9), 104.1(C-10), 120.5
(C-1′), 130.6(C-2′, 6′), 115.4(C-3′, 5′), 159.9(C-4′), 101.8
(C-1′), 70.3(C-2′), 70.5(C-3′), 71.1(C-4′), 70.0(C-5′),
17.4(C-6′)。以上数据与文献 [ 12]报道的山柰酚 3-O-α-L-
吡喃鼠李糖苷 (kaempferol-3-O-α-L-rhamnopyranoside)基本
一致。
化合物 10(55 mg):无色针晶(甲醇), mp:254 ~ 256 ℃。
TLC展开 ,紫外(254nm)灯下显紫黑色 ,喷 FeCl3显色为深蓝
色 ,提示结构中有酚羟基;盐酸镁粉反应呈阴性。1H-NMR
(500 MHz, MeOD)δ:2.52(1H, dd, H-4″′), 2.88(1H, dd,
H-4″), 4.00(1H, m, H-3), 4.58(1H, d, H-2), 5.88(1H, d, H-
6), 5.95(1H, d, H-8), 6.73(1H, dd, H-6′), 6.78(1H, d, H-
5′), 6.86(1H, d, H-2′)。13 C-NMR(500 MHz, MeOD)δ:28.95
(C-4), 68.6(C-3), 82.6(C-2), 95.3(C-6), 96.1(C-8), 100.6
(C-4′), 1115.0(C-2′), 115.9(C-5′), 119.8(C-6′), 131.9
(C-1′), 145.9(C-3′), 156.6(C- 7), 157.3(C-5), 157.5
(C-8′)。其数据与文献 [ 13]报道一致。鉴定该化合物为
(+)-儿茶素 [ (+)-catechin] 。
化合物 11(100mg):黄色粉末(甲醇), mp:167 ~169℃,
TLC紫外灯(254nm)下显黄色 ,硫酸乙醇显淡黄色 ,显示为
黄酮类化合物。 IRvKBrmax(cm
-1):3 435(OH), 1 651, 1 607,
1 507, 1 456(苯环), 1 355, 1 205, 1 128, 1 063。1 H-NMR(DM-
SO-d6)δ:6.2(1H, t, J=2.0 Hz, H-6), 6.40(1H, s, H-8), 7.92
(1H, d, J=2.0Hz, H-2′), 6.90(1H, d, J=8.4 Hz, H-5′), 7.60
(1H, dd, J=1.6, 8.4 Hz, H-6′), 3.92(3H, s, OCH3 ), 5.23
(1H, d, J=7.2Hz, H-1″), 4.52(1H, d, J=1.6Hz, H-), 1.09
(3H, d, J=6.0 Hz, H-6″);13 C-NMR(DMSO-d6 )δ:158.6
(C-2), 104.4, 135.4(C-3), 180.0(C-4), 163.1(C-5), 99.5
(C-6), 164.1(C-7), 95.0(C-8), 158.7(C-9), 105.3(C-10),
123.1(C-1′), 114.4(C-2′), 148.2(C-3′), 150.0(C-4′), 116.2
(C-5′), 124.4(C-6′), 56.3(OCH3 ), 102.5(C-1″), 75.9
(C-2″), 78.2(C-3″), 71.6(C-4″), 77.4(C-5″), 68.5(C-6″),
104.4(C-1 ), 72.1(C-2 ), 78.2(C-3 ), 73.8(C-4 ), 69.8(C-
5), 17.9(C-6)。以上数据与文献 [ 14]对照一致 ,故确定该
化合物为异鼠李素-3-芸香糖甙(isorhamnetin-3 -rutino-
side)。
3 结论
从中华补血草体积分数为 75%的乙醇提取物中分离并
鉴定出 11个化合物:异鼠李素(1)、甘露醇(2)、β-谷甾醇
(3)、齐墩果酸(4)、槲皮素(5)、槲皮素 3-O-β-D葡萄糖苷
(6)、没食子酸乙酯(7)、山奈酚(8)、山奈酚 -3-O-α-L-吡喃鼠
李糖苷(9)、(+)-儿茶素(10)、异鼠李素-3-芸香糖甙(11)。
化合物 4, 6, 7, 10, 11为首次从沿海滩涂中华补血草分离
得到。
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参考文献表按顺序编码制组织时 ,各篇文献要按正文部分标注的序号依次列出 。
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