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·中药与天然药物·
中 华 补 血 草 抗 氧 化 活 性 研 究
曲有乐1 ,高 欣1 ,崔宇鹏2(1.浙江海洋学院食品与药学院 舟山 316000;2.佳木斯大学 佳木斯 154007)
摘要:中华补血草〔Limonium sinense(Girard)Kuntze〕是一种极具观赏价值的传统植物 , 同时以其重要的药用价值而受到人们的广泛关注。其
化学成分种类多 ,含有多种的蛋白质 、多糖 、氨基酸 、维生素 、矿物质 ,还有少量的黄酮类 、皂苷 、有机酸 、生物碱和鞣质等。研究发现 ,中华补血草
不但具有止血 、祛湿 、清热等作用 ,更有良好的抗氧化活性 ,普遍认为与其含有丰富的多酚 、黄酮类物质有关。
关键词:中华补血草;抗氧化活性;化学成分;多酚;黄酮
中图分类号:R969.4 文献标识码:B 文章编号:1006-3765(2012)-12-0033-04
作者简介:曲有乐 ,男(1960.7-)。毕业于佳木斯医学院。职称:教
授。
Study on the antiorideat act ivity of Limonium sinense(Girard)kuntze
QU You-le1 , GAO Xin1 ,CUI Yu-peng2(1.Zhejiang Ocean University , Zhoushan 316000 ,China;2.Jiamusi Univer-
sity ,Jiamusi 154007 ,China)
ABSTRACT:The Limonium sinense (Girard)Kuntze is a t raditional plant and have highly ornamental value w ith
has important medicinal value and be paid much attention.It has kinds of chemical consti tuents , contains a variety
of protein , polysaccharide , amino acids , vitamins , minerals , and a small amount of flavonoids , soap tw o , organic
acids , alkaloids and tannins , etc.Researchs found that the Limonium sinense(Girard)Kuntze can not only has the
effect of hemostasi 、Wet spleen 、clearing heat ,but also has antio xidant activity ,which releted to it s rich polyphe-
nols , f lavonoids.
KEY WORDS:Limonium sinense(Girard)Kuntze;Antioxidant;Chemical composition;Polyphenols;Flavonoids
中华补血草(L imonium sinense(Girard)Kuntze)属白丹
花科补血草属植物 ,又名匙叶草 、盐云草 、海菠菜 、海赤芍等。
中华补血草为多年生泌盐草本植物 ,喜生于盐渍化的低洼湿
地上 ,广泛分布于我国东北 、华北 、华东等地区 , 尤以江苏 、福
建 、浙江省沿海滩涂分布甚广。据不完全统计 , 全世界约有补
血草 180 种 , 我国现存仅 4 属 7 种 , 江苏沿海分布 3 种(1.中
华补血草〔Limonium sinense(Girard)Kuntze〕;2.二色补血草
(Limonium bicolor);3.紫花补血草(L imonium ranchetii)。
由于近年来 , 我国人口增长速度加快 ,人们对保护资源意识匮
乏 , 过度利用湿地 ,导致这些盐生和湿生的植物数量减少 , 种
群退化 , 有的植物甚至悄然消失。为了保存体系 , 保护好盐生
植物资源 、推进生物多样性保护 , 加强对盐生植物-中华补血
草的研究和保护工作 , 具有十分重要的意义〔1〕。
据记载 , 人们最初以中华补血草作为妇女产后补血品服
·33·
Strait Pharmaceutical Journal Vol 24 No.12 2012
用 ,并兼治产后外感 、头痛 、胃溃疡 ,后来发现其更具有止血 、
祛湿 、清热等作用。民间采集后水煎服用 ,对治疗贫血 , 特别
是急性失血性贫血有显著疗效〔2〕。近年来 ,已有报道分析中
华补血草的有效成分及药理作用 ,包括其止血 、祛湿 、清热 、抗
癌 ,保肝及抗氧化等作用 , 为中华补血草的合理开发利用提供
图 1 中华补血草
了有力的依据。
1 中华补血草基本成分分析
1.1 基本成分含量 1991
年 ,肖振发等〔2〕对中华补血草
进行了基本的成分分析 , 结果
表明 , 中华补血草中含有多种
的蛋白质 、多糖 、氨基酸 、维生
素 、矿物质 , 还有少量的黄酮
类 、皂贰 、有机酸 、生物碱和鞣
质等。其中 , 氨基酸种类高达
18 种以上 ,包括人体所需的必
需氨基酸及非必需氨基酸 , 其
中谷氨酸 、脯氨酸含量较高 ,
而蛋氨酸 、半胱氨酸含量较
低。无机元素中 ,常量元素 K 、Na、Ca、Mg 含量较大 , K 、Na含
量最高。微量元素 Ni 、Zn 、Cr和 Co含量较高。但是 , 其中 Pb
的含量超过 FAO/WHO 食品标准委员会规定的限量〔3〕。中
华补血草含有丰富的维生素 C、B1 、B2、B12和类胡萝卜素.维
生素 C 含量高达 12mg/100g以上。
实验结果表明 , 中华补血草含有丰富的维生素 C 、B1、B2 、
B12和类胡萝卜素.维生素 B2 、B12 、C 是红血细胞的造血物
质 ,推测中华补血草富含各类维生素与其补血功能有关系。
值得注意的是 ,中华补血草富含维生素 B12 ,维生素B12对恶性
贫血 、失血性贫血有特殊疗效早已为有关研究和临床所证实。
1.2 中华补血草化学成分分析 1994年 , 郭洪祝〔4〕等采用回
流提取的方法 ,对中华补血草地上部分的化学成分进行了分
析 ,共得到 4 个化合物 , 根据理化常数测定 , 波谱分析及与有
关图谱的对照 , 分别鉴定为杨梅树皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷
(I), 杨梅树皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(Ⅱ), 槲皮素-3-O-α-L-鼠
李糖苷(Ⅲ)和槲皮素(Ⅳ)。这 4 种化合物系首次由该植物中
分得。
据文献报道 , 杨梅树皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷具有升高血
压 ,兴奋心脏及抗炎利胆的作用〔5〕 ,槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷
具有抗病毒 、抗炎和利尿的作用〔6〕 , 槲皮素亦具有降低血压 ,
增加冠脉流量 、抗自由基抗氧化作用 , 此外还具有抗癌作
用〔7〕。上述成分可能是中华补血草祛风 、清热 、散痕的有效成
分。因其有效成分均有抗氧化活性 , 推测其具有良好的抗氧
化活性。
2 中华补血草生物活性研究
Lin LC 等〔8〕发现从中华补血草根乙醇提取物中分离得
到的 10 种黄酮类化合物均能抑制 HSV-1(herpes simplex virus
type.1)病毒在 Ve to(绿猴肾细胞)中的复制 , 其中化合物 1
((-)-epig alloca techin 3-0.gallate, IC50 =11.4μM)、化合物 2
(samarangenin B , IC50=38.6μM)的抑制能力最强 , 比阳性对
照抗疱疹病毒剂无环鸟昔(Acydovir , IC50=55.4μM)具有更
高的抑制活性。 Kuo YC 等〔9〕通过进一步的研究阐明了
samarangenin B抑制 HSV.1 复制的分子机制 , samarangenin B
通过抑制 HSV-1a 基因 、ICP0(infected.cell pro tein 0)和 ICP4
(infected.cell protein 4)基因的表达 , 阻止 β 转录 , 从而遏制
HSV-1 DNA的合成以及 Veto结构蛋白的表达以阻止 HSV-1
病毒的复制。 Chanung S S 等〔10〕研究发现中华补血草根水提
取物及叶甲醇提取物对 CCl4 和 D.GaIN 诱导的小鼠肝损伤
具有保护作用 , 试验小鼠经过两种提取物处理后 , 血清中的谷
草转氨酶(SGOT)和谷丙转氨酶(SGPT)水平均显著降低 , 甘
油三酸酯水平则显著提高 , 体外试验研究进一步发现叶甲醇
提取物经氯仿萃取分级后的部分对人肝癌细胞(Hep3B)具有
潜在的细胞毒性。汤新慧等〔11〕研究了中华补血草根水提取
物对小鼠急性肝损伤的防护作用及药理机制 , 发现提取物能
有效抑制 CCl4 引起的小鼠天冬氨酸转移酶(AST)及丙氨酸
转移酶(ALT)活性的上升 、减轻肝损伤引起的小鼠肝脏线粒
体形态结构的破坏 、抑制线粒体膜电位的降低以及线粒体对
外加高钙诱发肿胀敏感性的下降 , 其药理机制可能与其对线
粒体的保护作用有关。
目前 , 有关中华补血草化学成分的研究主要集中在黄酮
类化合物 , 活性主要是抗病毒 、抗癌及对小鼠肝损伤的保护作
用等 , 而抗氧化等方面的作用有待更加系统的研究。
3 中华补血草根提取物抗氧化活性的研究
2008年 ,李均〔12〕等对中华补血草根提取物的抗氧化活
性进行了初步研究。实验利用还原能力 、DPPH 法 、TEAC 法
和脂质体过氧化法评价了中华补血草根提取物的抗氧化活
性。
3.1 中华补血草根提取物总酚 、黄酮及原花青素质量分数的
测定 实验分别采用 Folin-ciocalteu 试剂比色法〔13〕、NaNO2-
Al(NO 3)3-NaOH 比色法〔14〕、香草醛-浓 H2SO 4法〔15〕测定了其
总酚 、黄酮和原花青素的质量分数。
结果显示 , 中华补血草根提取物中总酚(包括简单酚 、单
宁)质量分数很高 , 达 55.55%, 其中简单酚质量分数为
26.68%,占 48.04%;黄酮和原花青素的质量分数很接近 , 分
别为 24.60%、23.86%。
3.2 中华补血草根提取物还原力的测定
3.2.1 实验采用 Oyaizu(1986)〔16〕的方法对中华补血草根提
取物的还原能力进行评价。结果表明 , 中华补血草根提取物
的还原能力随样液质量浓度的增大而增强 , 在检测的质量浓
度范围内呈现明显的量效关系(P <0.01)。当提取物质量浓
度为 0.20mg·mL-1时 , 其在 700nm 处的吸光值为 1.472 , 高
于相同质量浓度下的对照品槲皮素的吸光值(1.310)。
3.2.2 DPPH 法是目前使用最为广泛的检测自由基清除能
力的方法之一。 结果显示 , DPPH 溶液加入样液(0.20mg·
mL -1)后 ,在 0 ~ 4min 内 , A517nm 值下降很快 , 且降幅明显 ,
4 ~ 16min 内趋缓 , 16 ~ 20min 内基本稳定 ,吸光值不变。由此
确定 20min 作为最佳反应时间。中华补血草根提取物对
DPPH 自由基的清除率随样液质量浓度的增大而增大 ,当质
量浓度达到 0.20mg·mL-1时 ,中华补血草根提取物对 DPPH
·34·
海峡药学 2012年 第 24卷 第 12期
自由基的清除率达到 93.23%, 略低于同质量浓度的对照品
VitC 对 DPPH 自由基的清除率(清除率为 93.33%)。若将对
DPPH 自由基清除率达 50%时样液的质量浓度定义为半抑制
质量浓度(即ρIC
50
)来衡量样品的清除自由基能力 , 那么根提
取物的ρIC
50
为 0.098mg·m L-1 , 略低于对照品 VitC(其ρIC
50
为
0.105mg·m L-1),显示该物质具有很强的自由基清除活性。
3.2.3 TEAC 法是一种广泛采用的检测抗氧化活性的方法。
本研究所参照的为 Re等〔17〕所改进的 ABTS+脱色方法。不
同质量浓度(0.05 ~ 0.25mg·m L-1)的中华补血草根提取物
对ABTS 自由基清除能力结果显示 , 在样液质量浓度范围内
(0.05 ~ 0.25mg·m L-1)TEAC 值从 0.39 升高至 1.36 , 提取
物对 ABTS 自由基的清除能力随质量浓度增大而增大。
3.2.4 前人的研究显示〔18〕 , 脂质体过氧化是人类很多疾病
(如动脉粥样硬化 、冠心病)的根源 , 抗氧化剂在抑制脂质体过
氧化以及延缓此类疾病中的作用已经获得证实〔19〕。研究参
照樊金玲等〔20〕的方法 , 采用 Cu2+诱导大豆卵磷脂脂质体氧
化的方法评价中华补血草根提取物的抗氧化活性 , 分别测定
了不同氧化时期共轭二烯氢过氧化物(conjuga ted diene hy-
droperoxide , CD-POV)和丙二醛(malonaldehyde ,MDA)的生成
质量。
实验结果显示 ,中华补血草根提取物对 CD-POV 的抑制
率较高 , 近 80%, 与槲皮素相比略低;而对 MDA 的抑制率更
高 ,达 90%以上 , 但仍略低于槲皮素。
3.3 中华补血草根多酚提取物的抗氧化活性评价 2011年 ,
李均等〔21〕对中华补血草的抗氧化性进行了深入的研究。实
验以中华补血草根多酚提取物为研究对象 , 采用 8 种体外抗
氧化评价体系 , 包括还原能力〔22〕、FRAP 法〔23〕、羟自由基(·
OH)体系〔24〕、超氧阴离子自由基(·O -2)体系〔25 ~ 28〕、DPPH 自
由基(DPPH·)法〔29 ~ 31〕、TEAC 法〔32 ~ 34〕、β-胡萝卜素/亚油酸
脂质体体系和大豆卵磷脂脂质体体系〔35 ~ 37〕 , 探究了中华补
血草根多酚的抗氧化性能。根多酚提取物具有很强的还原能
力 ,还原能力显著高于芦丁 ,与 BHT 相当 , 但低于 VitC;根多
酚提取物的总抗氧化能力(FRAP 值为 3.84)高于芦丁
(FRAP 值为 2.14), 与 BHT(FRAP 值为 3.62)差异不显著 ,
但显著低于 VitC(FRAP 值为 4.38);根多酚提取物具有很强
的清除·OH 能力 , 其对·OH 半数清除率浓度(ρIC50值)为
0.061mg·mL-1 , 略低于芦丁(0.068mg·mL-1), 显著低于
VitC(0.210mg·m L-1),可见 , 根多酚提取物清除·OH 的能力
强于芦丁和 VitC;多酚提取物对·O-2 具有很强的清除能力 ,
清除·O-2 的ρIC
50
值为 0.022mg·m L-1 , 分别为芦丁(ρIC50=
0.078)、VitC(ρIC
50
=0.039)的 0.28 倍 、0.56 倍;根多酚提取
物具有很强的清除 DPPH·能力 ,对 DPPH·半数清除率浓度
(ρIC
50
值)为 0.093mg·mL-1 ,比 BHT(ρIC
50
=0.142mg·mL-1)
和芦丁(ρIC
50
=0.109mg·m L-1)低 ,而比 VitC(ρIC
50
=0.074mg
·mL-1)高 , 可见 , 根多酚提取物清除 DPPH·能力强于 BHT
和芦丁 ,而比 VitC 弱。根多酚提取物对 ABTS +具有较强的
清除能力 , TEAC 值为 2.514 , 与 VitC 差异不显著(P >
0.05),分别为 BHT 、芦丁的 1.50 倍 、2.83 倍。根多酚提取物
对 β-胡萝卜素/亚油酸体系过氧化均具有一定的抑制作用 , 当
质量浓度为 0.4mg·m L-1时 , 对 β-胡萝卜素/亚油酸体系氧化
的抑制能力(抑制率为 51.63%)要弱于 BHT , 与芦丁相当。
根多酚提取物对大豆卵磷脂脂质体系过氧化的抑制具有一定
的浓度依赖性 , 当质量浓度为 0.50mg·mL-1时 , 根多酚提取
物的抑制率(71.95%)与芦丁(72.30%)差异不显著(P >
0.05), 低于 BHT(80.38%)。实验结果显示 , 中华补血草根
多酚提取物在 8 种评价体系中均表现出不同程度的抗氧化活
性 , 且抗氧化能力与浓度均呈现不同程度的正相关性。
以上研究结果显示中华补血草根部丙酮提取物中总酚质
量分数很高 , 达 55.55%, 具有很强的还原能力和较强的清除
DPPH 自由基 、ABTS 自由基能力。实验证明 , 中华补血草根
提取物清除自由基能力强与其多酚质量分数高呈正相关 , 这
与 Sanchez-moreno 等〔38〕和 Mohamed〔39〕等关于“酚类物质的
质量分数与其抗氧化活性和清除自由基能力呈正相关性”的
结果相符合。这些结果显示中华补血草有望作为一种新的天
然抗氧化剂资源加以开发利用。当然 , 有关中华补血草提取
物的抗氧化活性及其成分的分离鉴定还有待于进一步研究。
4 小结
中华补血草具有来源广泛 , 蛋白质含量高 , 氨基酸种类较
齐全 , 无机元素种类多 , 微量元素含量高 ,维生素含量丰富等
优点〔40〕 ,此外 , 还含有黄酮类 、鞣质 、多糖等多种生理 、药理活
性物质。该属植物除具有补血 、止血 、抗菌消炎 、保肝 、抗癌 、
抗病毒功效外 , 还具有抗氧化活性 ,普遍认为 , 其抗氧化活性
与其含有丰富的多酚及黄酮类物质有关 , 但具体抗氧化活性
成分未见报道 , 有待深入研究。近年来 ,研究者对中华补血草
药理及药效不断深入的研究 , 已经进一步阐明其有效成分及
药理作用 , 为将来的合理开发利用奠定了坚实的基础。
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海峡药学 2012年 第 24卷 第 12期