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紫外分光光度法检测水皂角总多酚的含量



全 文 :!#年第 $期
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紫外分光光度法检测水皂角
总多酚的含量
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(湖南农业大学天然产物研究中心,长沙 !#$%) 刘硕谦 刘仲华 黄建安
摘 要 目的 建立水皂角提取物中总多酚类化合物含量的测定
方法,以控制其质量。方法 采用紫外分光光度法,以表儿
茶素为指标,测定波长在 &’#()。结果 对照品的量在
#*#+$,#*!’)- 范围内,吸光度呈良好的线性关系 (./
#*000’)1回归方程为 2/ #*3#’3 45 #*##3%$1平均回收
率为 00*36,789/*#$6 :(/3;。结论 本法操作简单、结
果准确、重现性好,可作为该提取物的质量控制方法。
关键词 水皂角 多酚 紫外分光光度法 测定方法
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中图分类号:!#$%&’ 文献标识码:(
文 章 编 号 :)$$#*$’$+(#$$’)$+*$$%+*$#
收稿日期:#$$#*))*$#
作者简介:刘硕谦(0&&5),男,在读硕士研究生,研究方向:天然产物
化学。
水 皂 角 (!##$ ’$%&#&)$(# *+,-+ %&’’(
./$%&)是一年生豆科植物,有清肝明目,和脾利水
之功效,民间用于治黄疸,利尿,清心,明目等。现代
药理研究表明,水皂角中的多酚类化合物对脂肪酶
有明显的抑制作用,能有效阻止脂肪的摄入,有减
肥、降血脂之功效,是水皂角的有效成分之一 ,)-+.。在
日本,已将水皂角提取物与其它植物提取物配伍制
成各种剂型的天然减肥药品、食品、饮料等产品,但
国内外对水皂角的研究尚未见对其提取物多酚含量
测定方法的报道。为了更好地开发利用水皂角,有效
控制水皂角提取物的质量,本实验对水皂角提取物
中多酚含量的测定方法进行了研究。
% 材料与仪器
试剂 均为分析纯;表儿茶素对照品 购于
/012公司;所有供试样品 均为自制。
3/12456 78*#99$型紫外分光光度计。
! 实验方法与结果
!&% ’()*+,-*(-.)/01试剂溶液的配制
精密称取 )$$0 钨酸钠和 #90 钼酸钠,于 #: 的
磨口回流装置中,量取 %$$1:蒸馏水,再加入 ;9<的
磷酸及 )$$1:浓 =>?,充分混匀后,以小火加热回流
)$3。再加入 )9$0硫酸锂,9$1:蒸馏水及数滴溴,然
后开口继续沸腾 )91/@,以便驱除过量的溴,冷却定
容到 ):,过滤置棕色试剂瓶中。再以 )1A? B : 的
C2D=标准液滴定,以酚酞为指示剂,然后适当稀释,
使最后浓度为 )1A? B :E 此即为 FA?/@*G/AG2?HI6 试剂,
贮存于冰箱中备用。
!&! 对照品溶液的配制
精密称取对照品 #$10 表儿茶素,于 #$$1: 容
量瓶中,%$J加热 )$1/@,放冷定容即得。
!&# 供试样品溶液的配制
取水皂角提取物 #$10,精密称量,置 )$$1: 容
量瓶中,加 ;$1: 蒸馏水,%$J下加热 )$1/@,放冷定
容即得。
!&2 标准曲线的制备
精密吸取上述对照品溶液 $&#、$&K、$&+、$&;、)&$、
)&#、)&K、)&+1: 于 )$$1: 容量瓶中,加 9$1: 蒸馏
水,再加 91: FA?/@*G/AG2?HI6 试剂,摇匀后再加入
)91:#$<的 C2#>D’ 溶液,于 ’$J反应 #3。同时加
91:FA?/@ *G/AG2?HI6 试 剂 , 再 加 入 )91: #$<的
C2#>D’溶液,于 )$$ 1: 容量瓶中,定容即得空白溶
液,’$J反应 #3。随行空白,在 %+$@1波长处测定对
照品溶液的吸光度。以对照品的量为纵坐标,吸光度
为横坐标,绘制标准曲线。线性回归方程为:LM
$&9$+9) N* $&$$9;#E OM$&PPP+,在 $&$’#-$&)K+10
范围内对照品的量与吸光度有良好的线性关系。
!&3 供试样品的测定
精密吸取上述样品溶液 )1:,于 )$$1: 容量瓶




%+
DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2003.06.031
!#年第 $期
!#$%&’($)’%**+ 食品工业科技
! 邱立友汪世山余功德 吴云汉#几丁质酶产生菌的筛选及
产酶条件的研究#微生物学通报!$$!!%&’(
) 郑连英#壳聚糖水解酶的筛选#材料研究学报!$$$*’&!(
’ 裘迪红张芝芬吴汉民娄永红#甲壳低聚糖制备的研究#食
品与机械!$$*&)(
+ 方祥年杜昱光黄秀梨 洪炯 #球孢白僵菌高壳聚糖酶突变
株的筛选#微生物学通报!$$*!,&)(
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粮食学院《食品分析方法》翻译组译# 食品分析方法 # 四川科
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中加 +$6\蒸馏水,再加 +6\<5H3>JA35A/H4D2 试剂,摇
匀后再加入 *+6\!$_的 I/!K9) 溶液,于 )$‘反应
!:。按上述方法配制空白溶液,在 %-$>6波长处测定
样品溶液吸光度,从标准曲线上读出相当于水皂角
提取物中总多酚的量,计算即得。
!%$ 稳定性试验
取一样品按上述样品配制及测定方法,分别在
样品与 <5H3>JA35A/H4D2 试剂反应完全(!:)后 $、*、!:
测定吸光度值,吸光度值 S@]a$#-)_&>a)(,证明水皂
角提取物总多酚在 ):内测定结果均稳定。
!%& 精密度试验
取一样品按上述样品配制及测定方法测定吸光
度值,共测 +次,结果 S@]a$#*N_。
!%’ 重复性试验
取一样品称取 + 份,测定含量,结果多酚含量的
S@]a$#,*_。
!%( 回收率试验
采用加样回收法,精密称取 *$6L 表儿茶素依
法用蒸馏水溶解,定容到 *$$6\。另定量称取水皂角
提取物 *$6L,依法用蒸馏水溶解,定容到 *$$6\,各
取 $#+6\分置 +个 !+6\容量瓶中,再加入上述对照
品溶液 $#+6\,按上述样品测定方法测定吸光度,平
均回收率为 NN#+_,S@]a*#$!_。
!%) 样品测定
按样品配制及测定方法测定了 - 个样品中的总
多酚含量,结果见表 *。
# 讨论
#%) 水皂角主要有效成分为原花青素、二聚黄烷醇
等多酚类化合物,由于这些物质的标准品很难购买
得到,且分离困难,无法利用 ZC\K,\KJ.@等现代手
段进行定量分析,用紫外分光光度法测定水皂角总
多酚含量是简单可行的好方法。
#%! 样品在水中的溶解度不大,所以称样量控制在
*$P!$6L,并需要加热才能完全溶解。
参考文献
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样品 * ! ) ’ + -
水皂角总多酚含量(_)*N#+- *N#,N *N#%, *N#%) *N#’- *N#,!
表 * 样品水皂角总多酚含量测定结果
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