全 文 ：金属元素的含量受多种因素影响，不同产地银杏中金属元素
含量不尽相同，即使同株银杏中金属元素含量也会随季节而变
化。为避免金属元素由于银杏生境、树龄、采集部位及粗细的不
同引起较大的含量波动，本研究在样本采集时选取同生境、树龄
相当的植株并在相同部位、粗细一致处取材。
通过雌雄银杏各部位金属元素含量比较分析，二者之间呈现
出一定的差异性，有的元素的含量相差还比较悬殊，这是否与银
杏的性别有直接的关联?因本次实验仅做了一批样品的考察，尚
需做深入研究。
参考文献:
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收稿日期:2010-07-02; 修订日期:2010-12-12
基金项目:国家“十一五”科技支撑计划课题(No． 2007BAI48B04 － 3)
作者简介:韩江伟(1985-) ，男(蒙古族) ，内蒙古赤峰人，现为内蒙古医学
院在读硕士研究生，主要从事中蒙药材的提取分离及质量控制工作．
* 通讯作者简介:王玉华(1959-) ，女(蒙古族) ，内蒙古赤峰人，现任内蒙
古医学院药学院教授，博士学位，主要从事中蒙药材及其方剂药效物质基
础与其质量控制研究工作．
奶制瑞香狼毒中多糖含量的蒽酮 －硫酸法测定
韩江伟，杨 夏，孙丽君，王玉华*
(内蒙古医学院·药学院，内蒙古 呼和浩特 010110)
摘要:目的 建立奶制瑞香狼毒中总多糖含量测定的方法。方法 采用蒽酮 －硫酸法测定，检测波长为 620 nm。结果 样
品中多糖在 10 ～ 50 μg·ml －1范围内呈良好的线性关系(r = 0． 999 3) ;平均加样回收率为 99． 08%，RSD 为 0． 73%(n =
5)。结论 该方法简便、灵敏、准确，可用于奶制瑞香狼毒中总多糖的含量测定。
关键词:奶制瑞香狼毒; 多糖; 蒽酮 －硫酸法
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2011． 06． 019
中图分类号:R284． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2011)06-1332-02
Determination of Polysaccharide in Milk － making Stellera chamaejasme by Anthrone －
sulfuric Acid Colorimetry
HAN Jiang-wei，YANG Xia，SUN Li-jun，WANG Yu-hua*
(Department of Pharmacology，Inner Mongolian Medical College，Hohhot，010110，China)
Abstract:Objective To establish a method for the determination of polysaccharide in milk － making Stellera Chamaejasme．
Methods The content of polysaccharide was determined by anthrone － sulfuric acid colorimetry at 620nm． Results The linear
range was 10 ～ 50 μg·ml －1 and correlation coefficient was 0． 999 3． The average recovery and the relative standard deviation
were 99． 08% and 0． 73%(n = 5) ，respectively． Conclusion This method is simple，sensitive and accurate and can be used for
the determination of polysaccharide in milk － making Stellera Chamaejasme．
Key words:Milk － making Stellera Chamaejasme; Polysaccharide; Anthrone － sulfuric acid colorimetry
瑞香狼毒 Stellera chamaejasme L．为瑞香科狼毒属植物瑞香
狼毒的干燥根。瑞香狼毒为传统蒙药，蒙药名记载是达楞图如，
别名是热吉格［1，2］。瑞香狼毒性味苦平，有大毒，具逐水祛痰、破
积杀虫之功效，有提高免疫功能、抗肿瘤、抑菌及抗癫痫等药理作
用［3，4］，能治疗“奇哈”病和消“粘”病［1，2］。瑞香狼毒主要化学成
分有多糖类、香豆素类、黄酮类、二萜原酸酯类和木脂素类化合物
等［5 ～ 7］。现有文献对瑞香狼毒炮制品的多糖含量采用苯酚 －硫
酸法测定［8］。本文采用蒽酮 －硫酸法对奶制瑞香狼毒中多糖含
量测定方法进行了研究，该方法的建立对奶制瑞香狼毒质量控制
具有一定的意义。
1 材料与仪器
1． 1 试剂 葡萄糖对照品(批号:110833 － 200503，供含量测定
用，中国药品生物制品检定所) ，所用试剂均为分析纯。
1． 2 药材 奶制瑞香狼毒由实验室自行炮制，共 6 批。药材采集
时间为 2009 年 4 月和 5 月，采集地点包括内蒙古呼和浩特市武
川县、锡林浩特市、赤峰市克什克腾旗。药材经内蒙古食品药品
检验所康双龙主任药师鉴定为瑞香科狼毒属植物瑞香狼毒。
1． 3 仪器 DZHW 型调温电热套(北京市永光明医疗仪器厂) ;
9200型可见紫外分光光度计(北京瑞利分析仪器公司) ;ESJ200
－ 1 型电子天平(沈阳龙腾电子有限公司) ;TDZ4 － WS 型低速离
心机(长沙湘仪离心机仪器有限公司)。
2 方法与结果
2． 1 对照品溶液的制备 精密称取 105℃干燥至恒重的葡萄糖
对照品 100 mg，用适量的蒸馏水溶解，制成每毫升中含无水葡萄
糖 1 mg的溶液，摇匀，即得。
2． 2 供试品溶液的制备 称取供试品粉末约 1 g，精密称定，置索
氏提取器中，加水 90 ml，加热回流提取至提取液无色，将提取液
转移至 100 ml 容量瓶中，加水稀释至刻度，精密量取提取液 10
ml，加无水乙醇进行沉淀，使含醇量达到 80%，4℃冰箱中放置 24
h，取出，离心，倾去上清液，沉淀加无水乙醇 10 ml 洗涤两次，然
后将沉淀加水溶解转移至 100 ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇
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时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 6 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL． 22 NO． 6
匀，即得［8，9］。
2． 3 蒽酮 －硫酸溶液的配制 称取 0． 33 g 蒽酮，置于 100 ml 棕
色容量瓶中，用浓硫酸溶解，定容，混合摇匀置于 4℃冰箱中(现
配现用)［10，11］。
2． 4 标准曲线制备 精密量取葡萄糖标准溶液 1． 0，2． 0，3． 0，
4． 0，5． 0 ml分别置于 100 ml容量瓶中，加水定容，摇匀。分别吸
取各溶液 1 ml于 5 支具塞比色管中，以 1 ml 蒸馏水作空白。以
上 6 支比色管中均加入 4 ml 蒽酮 －硫酸试液，摇匀，避光放置，
冷却至室温，置沸水浴中加热 10 min，取出，避光放置。于 620
nm处测定吸光度［10，11］，以吸光度(A)对葡萄糖浓度(C)进行回
归分析。结果表明，葡萄糖浓度在 10 ～ 50 μg·ml －1范围内呈良
好线性关系。回归方程为 Y = 0． 008 9X + 0． 038 4，r = 0． 999 3。
标准曲线见图 1。
图 1 多糖测定标准曲线
2． 5 精密度实验 精密量取对照品溶液 5 份(浓度为 30 μg /
ml) ，各 1 ml，分别加入 4 ml蒽酮 －硫酸试液，按“2． 4”项下方法
操作，分别测其吸光度值 A，结果显示，RSD 为0． 78%(n = 5) ，表
明精密度良好。
2． 6 稳定性考察 精密量取同一供试品溶液 1 ml，加入 4 ml 蒽
酮 －硫酸试液，按“2． 4”项下方法操作，每隔 10 min测定 1 次，连
续 40 min，结果显示，平均吸光度为 0． 236，RSD 为 2． 72%(n =
5) ，表明供试品溶液显色后，稳定时间比较短，在 40 min 之内测
定时，测定结果的稳定性较好。结果见表 1。
表 1 稳定性实验结果
时间 t /min 吸光度 平均吸光度 RSD(%)
0 0． 239
10 0． 235
20 0． 237 0． 236 2． 72
30 0． 233
40 0． 236
50 0． 299
2． 7 重复性实验 取同批供试品 5 份(锡盟 1 批) ，每份取样量约
1 g，精密称定，按“2． 2”项下方法制备供试品溶液，按“标准曲线
制备”项下方法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中多
糖的浓度(μg·ml －1) ，计算供试品中多糖的含量。平均含量为
2． 20%，RSD%为 1． 83%。方法重复性好。
2． 8 加样回收率实验 取已知含量的供试品粉末(锡盟 1 批)5
份，每份约 0． 5 g，精密称定，分别精密加入经 105℃干燥至恒重
的葡萄糖对照品适量，按“2． 2”项下方法制备供试品溶液，按“2．
2”项下方法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中多糖
的浓度(μg·ml －1) ，计算回收率。葡萄糖对照品的平均回收率
为99． 08%，RSD为 0． 73%(n = 5)。方法的准确度好。结果见表
2。
表 2 加样回收率测定结果
试验
序号
供试品
m /g
供试品含
量 m /mg
对照品加入
量 m /mg
测得总
量 m /mg
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
1 0． 502 8 11． 06 11． 04 22． 06 100． 3
2 0． 503 5 11． 06 11． 04 21． 98 98． 91
3 0． 502 2 11． 04 11． 04 21． 88 98． 87 99． 08 0． 73
4 0． 503 2 11． 06 11． 04 21． 90 98． 93
5 0． 502 6 11． 05 11． 04 21． 80 98． 37
2． 9 供试品测定 精密称取供试品约 1． 0 g，按“2． 2”项下方法
制备供试品溶液。精密量取供试品溶液 1 ml 置具塞比色管中，
加入 4 ml蒽酮 －硫酸溶液，摇匀，避光放置，冷却至室温，置沸水
浴中加热 10 min，取出，避光放置。于 620 nm 处测定吸光
度［10，11］，在标准曲线上读取样品中的多糖浓度(μg·ml －1) ，计算
奶制瑞香狼毒中多糖的百分含量。结果见表 3。
2． 10 水浴加热时间的选择 精密量取 1ml供试品溶液，共 5 份，
分别置 5 支具塞比色管中，以 1 ml 蒸馏水作空白。以上 6 支比
色管中均加入 4 ml蒽酮 －硫酸试液，摇匀，避光放置，冷却至室
温，置沸水浴中加热，加热时间分别为 3，5，10，15，20 min，取出，
避光放置。于 620 nm处测定吸光度［10，11］，结果表明，加热 10 min
时，吸光度值最大，故确定水浴加热时间为 10 min。结果见表 4。
表 3 不同批次奶制瑞香狼毒中多糖测定结果
批次 称样量 m / g 含量(%) 平均含量(%)
武川 1 批 1． 003 2 1． 66 1． 66
1． 004 6 1． 65
武川 2 批 1． 003 1 1． 65 1． 66
1． 002 6 1． 66
克旗 1 批 1． 001 1 1． 81 1． 81
1． 006 2 1． 81
克旗 2 批 1． 003 4 1． 83 1． 82
1． 006 4 1． 82
锡盟 1 批 1． 005 2 2． 16 2． 18
1． 000 8 2． 20
锡盟 2 批 1． 004 2 2． 26 2． 25
1． 005 8 2． 24
表 4 水浴加热时间的选择
加热时间 m /min 吸光度(A)
3 0． 176
5 0． 217
10 0． 228
15 0． 221
20 0． 220
3 讨论
含量测定结果表明，奶制瑞香狼毒中多糖含量在 1． 66% ～
2． 25%之间。该结果显示，在不同采集地点及采集季节的药材
中，多糖含量有较大差异。
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