全 文 ：[公共卫生]
大风子的薄层色谱鉴别
Differentiation of Hydnocarpus anthelmintica Pierre by thin layer chromatography.LIN Yi -xing.
(Hainan Provincial Institute for Drug Inspection , Haikou 571101 , Hainan , P.R.China)
林一星
摘要:目的　建立大风子药材的鉴别方法 ,以便对其质量进行控制。 　方法　采用薄层色谱法对大风子药材进
行鉴别。 　结果　各省市药检所提供的大风子药材的薄层色谱均一致。 　结论　用此法对大风子药材进行鉴别 , 方
法简便 、专属性强 、重现性好。
关键词:大风子;薄层色谱;鉴别
中图分类号:R282.5　　文献标识码:A　　文章编号:1009-9727(2005)05-1148-02
　　大风子为大风子科植物大风子 Hydnocarpus
anthelmintica Pierre的干燥成熟种子[ 1] 。有祛风燥湿 、
攻毒杀虫的功效 ,临床用于风寒湿痹 、鹅掌风 、湿癣 、
杨梅疮 、麻风病[ 1]的治疗 ,其脂肪油中的主要成分大
风子油酸 、次大风子油酸 、告尔酸 、阿立普酸等均有抑
制麻风杆菌增殖的作用[ 2] 。本品我国主要从东南亚
进口 ,原收载于卫生部“进口药材质量暂行标准” ,只
有一项理化鉴别 ,专属性差 ,重现性不理想 。本文采
用薄层色谱法进行鉴别研究 ,测定不同省 、市药检所
提供的大风子药材 ,取得良好的效果。该法具有简
便 、专属性强 、分离度高和重现性好的特点。
1　材料与方法
1.1　材料
大风子 采自华南热带作物研究院热带作物标本
园 ,中国医学科学院植物研究所海南分所标本园 ,以
及上海 、福建 、广州 、武汉 、云南 、天津 、重庆 、厦门 、江
苏等地药检所提供的样品 。
大风子对照药材采自华南热带作物研究院热带
作物标本园 ,经鉴定后作为对照药材 。硅胶 G购自青
岛海洋化工集团公司 。化学试剂均为市售分析纯 。
1.2　方法
1.2.1　薄层板的制备与处理　取硅胶 G适量加蒸馏
水研匀后铺板 ,晾干 ,临用前 105℃活化 1h 。
1.2.2　供试品溶液及对照液的制备　(1)分别取样品
种仁1g ,粉碎 ,加 2mol/L 盐酸乙醇溶液 30ml ,加热回
流1.5h ,滤过 ,滤液加水 20ml ,水浴蒸至无醇味 ,移入
分液漏斗中 ,加醋酸乙酯 40ml提取 ,分取醋酸乙酯液 ,
置水浴上蒸干 ,残渣加无水乙醇 2ml 使溶解 ,作为供
试品溶液。(2)取大风子对照药材 1g ,同上法制备 ,作
为对照药材溶液 。
2.3　色谱鉴别
吸取上述 11种溶液各 1μl ,分别点于同一硅胶 G
薄层板上 ,以环己烷 —醋酸乙酯(10:0.3)为展开剂 ,展
开 ,晾干 ,喷以 1%香草醛硫酸溶液 ,105℃烘至斑点清
晰。
2　结果
供试品色谱中 ,在与对照药材色谱相应的位置
上 ,显示相同颜色的斑点 ,结果如图 1所示 。
图 1　大风子鉴别药材色谱图
(1-上海;2-福建;3-广州;4-武汉;5-云南;6-天
津;7-重庆;8-厦门;9-对照药材(华南热带作物研究院热带作物标本园);10-海南(中国医学科学院植物研究所
海南分所标本园);11-江苏)
3　讨论
3.1　本品种仁含脂肪油约 50%,油的脂肪酸有
大风子油酸 、次大风子油酸及少量饱和脂肪酸 、不饱
和脂肪酸。本品目前无适当的对照品 ,故采集华南热
带作物研究院热带作物标本园的样品作为对照药材。
3.2　在筛选试验方法时 ,最初的方向是以石油醚提
取大风子脂肪油用以鉴别 ,结果色谱斑点较多且 11
份样品不能完全相符(可能与样品储存的条件有关);
通过参考牵牛子的薄层色谱鉴别的样品制备方法和
展开系统[ 3] ,通过改变展开系统的极性 ,将比移值调
整在合适的范围 ,建立本文试验方法。
3.3　取上述 11份大风子依法试验 ,结果 11个样品均
呈负反应 ,与原标准(卫生部“进口药材质量暂行标
准” ,1977)所述不一致 ,且反应专属性差。(下转第 984页)
1148 CHINA TROPICAL MEDICINE Vol.5 No.5 August 2005 　中国热带医学 2005年第 5卷第 5期
作者单位:海南省药品检验所 ,海南 海口　570216。
(表 1),阳性率为Murex-Abbott试剂的 29.55%,这一
现象虽然可能由Murex-Abbott试剂的检测假阳性所
致 ,但也不排除科华酶免试剂因灵敏度不高而造成的
漏检 。
表 1　罗氏 COBAS HCV RNA 单人份检测结果
与 ELISA法和 Murex的比较
Table 1　Comparison of results in determination of HCV RNA
by using COBAS AmpliScreen kits with ELISA AND Murex
罗氏
COBAS
ELISA
(+) (-)
Murex
(+) (-) 合计
(+) 2 1 3 0 3
(-) 11 30 41 0 41
合计 13 31 44 0 44
2.2　罗氏 COBAS AmpliScreen HCV RNA 单人份检测
　使用罗氏 COBAS 检测 ,发现 3 份标本为 HCV RNA
阳性(表 1),与酶免结果比较 , 3份标本全部为 Murex
检测抗-HCV阳性 ,但有 1份标本为科华抗-HCV阴
性 ,这意味着如果仅单独采用科华酶免试剂进行血液
筛检 ,出现漏检而引起输血后丙型肝炎的可能性较
大。
2.3　罗氏 COBAS AmpliScreen 对合格献血标本的 24
份混合筛检　使用罗氏 COBAS AmpliScreen方法以 24
份样品混合的形式 ,共检测 486份血液标本中的 HBV
DNA 、HCV RNA和 HIV RNA。结果有 3份标本为 HBV
DNA阳性 ,阳性率为 0.62%,所有标本 NAT 检测 HCV
RNA和HIV RNA 均为阴性。
3　讨论
罗氏 COBAS AmpliScreen检测技术是一种专门运
用于血液筛检的核酸扩增技术 ,能检测 HBV DNA 、
HCV RNA和 HIV RNA ,该方法已于 1999年 3月起在
美国 FDA新药审核下应用于常规血液筛检 ,并于 2002
年10月正式获得 FDA认证 。在包括美国 、日本和欧
洲等国家中的应用经验证明 ,该方法具有高度的敏感
性和特异性 ,能大大缩短HBsAg 、抗-HCV和抗-HIV
-1的检测窗口期 ,值得在血液筛检体系中推广 。本
研究分别使用阳性标本单独检测和正常献血标本 24
人份混合检测 2种分析方法对该试剂以及目前的血
液筛检模式进行了初步评估。
44份抗-HCV阳性的标本 ,复检只有 13份抗-
HCV阳性 ,HCV RNA检测结果表明 3份为阳性 ,其中
1份为国产试剂检测抗 -HCV 阴性 。抗 -HCV 与
HCV RNA的检测结果并不平行一致是因为 HCV感染
后 ,血清中抗-HCV并不与 HCV RNA同时出现 ,二者
并没有相关性 。虽然 NAT 比酶免抗体检测能早诊断
HCV感染 ,但单独使用 NAT 方法检测血清中的 HCV
RNA并不能筛检出所有 HCV 感染者 ,在常规血液筛
检中 ,NAT 检测只能作为酶免抗体检测的一种补充手
段以进一步保障血液安全 ,而不能完全代替酶免抗体
检测 。
Murex-Abbott 和科华试剂的酶免抗体检测结果
并不一致 。而采用两种不同的国产试剂检测同一批
标本 ,所得结果之间的差异会更大。这主要是由于两
种不同试剂的灵敏度和特异性不同所致 ,而这种不同
在常规血液筛检中则会造成不必要的巨大的浪费 。
有研究曾经对两次酶免血液筛检模式进行了探讨[ 2] ,
提出将NAT 检测代替第 2 次酶免检测的设想 。本研
究结果也证明 ,随着 NAT 技术的日渐成熟 ,如果能将
第2次酶免检测用NAT 技术代替 ,将更能确保血液的
安全性。
本研究对 486 份合格献血标本进行罗氏 COBAS
AmpliScreen 24人份混合筛检后 ,发现 3 例 HBV DNA
阳性标本 ,阳性率为 0.62%。这一结果表明 ,在我国
HBV感染率较高的地区 ,HBsAg 筛查阴性的血液仍有
漏检的可能 ,这种漏检主要由 HBsAg ELISA检测的窗
口期所致 ,因此 ,为了进一步保障用血安全 ,有必要在
我国的血液筛检体系中引进NAT 筛检方法 。
致谢:深圳市疾病预防控制中心分子生物学研究室同仁与上海市
血液中心王博士在本文的研究中给予了指导及技术支持 ,在此表示衷
心感谢 !
参考文献:
[ 1] 王迅 , 高峰 , 张钦辉.上海地区输血后丙型肝炎感染的历史与现
状[ J] .中国输血杂志 , 2001 , 14(6):395.
[ 2] 高峰,张晰 ,王迅 ,等.血液病毒标志物两次检测模式的探讨[ J] .
中国输血杂志 , 2001 , 14(4):205.
[ 3] 王迅 , 郑岚 , 张晰 ,等.核酸扩增技术(NAT)在上海血液筛检中的
初步应用[ J] .中国输血杂志 , 2003 , 16(3):157.
收稿日期:2005-06-02
(上接第 1148页)
本文所建立的薄层色谱鉴别方法 , 11个样品在色谱相
同的位置均只显一个相同颜色的斑点 ,故用此法对大
风子药材进行鉴别 ,方法简便 、专属性强 、重现性好 ,
是目前较为行之有效的鉴别方法。
参考文献:
[ 1] 江苏新医学院编.中药大辞典[M] .上海人民出版社 ,1975:119
[ 2] 江纪武等.植物药有效成分手册[M] .北京:人民卫生出版社 , 1986:
202, 578 , 528 , 33 , 32
[ 3] 中华人民共和国药典.一部[M] .北京:化学工业出版社 , 1998:27
收稿日期:2005-06-30
984 CHINA TROPICAL MEDICINE Vol.5 No.5 August 2005 　中国热带医学 2005年第 5卷第 5期