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白花败酱中总黄酮的提取研究



全 文 :《广州食品工业科技》 Guangzhou Food Science and Technology Vol.20 No.4(总 82)
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中图分类号:R284.1;文献标识码:A;文章篇号:1007-2764(2004)04-0042-015

白花败酱中总黄酮的提取研究

徐洁昕 周方钦
(湘潭大学化学学院,湘潭 411105)

摘要:本文采用四种方法(水提法、有机溶剂提取法、索式抽提法、超声波法),分别提取白花败酱不同部位(根、茎、叶、全
草)的总黄酮,以紫外分光光度法测定其含量,确定最佳提取方法为索式有机溶剂提取法,白花败酱不同部位的总黄酮含量变化规律
为:叶>全草>根>茎。
关键词:白花败酱;总黄酮;提取;不同部位
Flavonoids Extracting Study on Different Parts of Patrinia Villosa Juss
by Four Methods
Xu Jiexin, Zhou Fangqin
(Department of chemistry, Xiangtan University, Xiangtan 411105)

Abstract: To exact flavonoids in different parts of P.Villosa.Juss by four extraction methods(water boiled extraction method;ethanol
refluent extraction method;suoshi extraction method;supersonic extraction method),and to measure the flavonoids content by UV spectrum.
The best extraction method was suoshi extraction method, the sequence of flavonoids content from different parts of P.Villosa. Juss was : leaf,
whole grass, root, slim.
Key words: Patrinia Villosa Juss; Flavonoids; Extraction; Different parts

白花败酱俗称苦斋、苦菜、鹿肠等,为败酱科多年
生草本植物,广泛分布于全国各地,是我国的传统中
药和野生蔬菜,其根茎及全草均可入药。[1]白花败酱
营养价值很高,含有丰富的蛋白质、氨基酸、维生素
及微量元素;其药用价值也高,具有镇静镇痛、抗菌
抗病毒、抗肿瘤、保肝利胆、止血和增强免疫力等多
方面的药理作用。临床用于治疗肠痈、肺痈、燥热便
秘、痢疾、肠炎、肝炎、结膜炎、产后淤血、腹痛、
痔疮肿痛、疔疮肿毒等症。[2]因此,白花败酱兼具营
养药用价值,具有广阔的开发前景。
研究表明:黄酮类化合物具有降血糖、降血脂、
抗菌消炎、抗氧化抗衰老、消除体内自由基等药理作
用。白花败酱中黄酮化合物的提取研究未见报道,研
究其总黄酮含量,可为进一步开发利用败酱资源提供
科学依据。本文所用原料经生药鉴定和紫外吸收光谱
鉴定为败酱科白花败酱 Patrinia Villosa(Thunb) Juss的
带根全草。[2],[5]
收稿日期:2004-06-26
徐洁昕:硕士研究生,研究方向:药物分析
1 仪器、 材料和方法
1.1 仪器
UV-9200紫外分光光度计(北京瑞利分析仪器公
司);UV-265 紫外可见分光光度计(日本岛津公司);
KQ-250B型超声波清洗机(昆山超声仪器有限公司);
AE电子天平(Mettler—Toledo仪器公司);DF-101B集
热式恒温磁力搅拌器(浙江乐清市乐成电器厂);LD5-
—10 离心机(北京医用离心机厂);索式提取器;回
流装置等。
1.2 试剂与材料
芦丁对照品:中国医药(集团)上海化学试剂公
司;乙醇、硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠:均为分析
纯;白花败酱:购于湘潭市福寿堂大药房。
1.3 方法
1.3.1 黄酮类化合物的提取
水提取法 :精确称取败酱粉 2.5g 左右,共加水
20倍,分三次煮沸提取,提取时间分别为 2h、1.5h、
1h,合并提取液,抽滤后定容至 250ml,备用。
DOI:10.13982/j.mfst.1673-9078.2004.04.015
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有机溶剂提取法:精确称取败酱粉 2.5g左右,共
加 70%乙醇 20 倍,分三次回流提取,提取时间分别
为 2h、1.5h、1h,合并提取液,抽滤后用蒸馏水定容
至 250ml,备用。
索式提取法:精确称取败酱粉 2.5g 左右,共加
70%乙醇 20 倍,在索式提取器中提取 4h,提取液抽
滤,加蒸馏水定容至 250ml,备用。
超声波提取法:精确称取败酱粉 2.5g左右,共加
70%乙醇 20倍,进行超声波提取三次,提取时间均为
45 min,合并提取液,抽滤后定容至 250ml,备用。
不同部位总黄酮的提取:分别精确称取白花败酱
不同部位(根、茎、叶、全草)粉末各 2.5g,按前述
提取方法提取总黄酮,合并滤液,抽滤后定容至
250ml,备用。
1.3.2 总黄酮含量的测定
芦丁标准溶液的制备:称取芦丁标准品 20mg,
用 60%乙醇溶解并定容至 100ml容量瓶中,摇匀得浓
度为 0.2mg/ml的芦丁标准溶液。
标准曲线的制作:精密吸取标准芦丁溶液 0.5,
1.0,1.5,2.0,3.0ml,置于 25ml容量瓶中,加 5%NaNO2
溶液 0.75ml,摇匀,放置 6min,再加 10%Al(NO3)3
溶液 0.75ml,摇匀,放置 6min,加入 1.0mol/lNaOH
溶液 10ml,用 30%乙醇稀释至刻度,放置 10min。同
时加相应试剂作空白和样液,然后在紫外分光光度计
510nm处测吸光度,以浓度C对吸光度A作线性回归,
其回归方程为 A=0.881C+0.0016,r=0.9994(n=6),其线
性关系在 0.1-0.6mg/ml范围内良好。
样品含量的测定:精密吸取样液 5ml,置于离心
管中,转速 3000r/min,离心 10min,取上清液 1ml
按标准曲线操作工序,然后在紫外分光光度计 510nm
处测吸光度,根据回归方程计算样品总黄酮含量。
2 结果与分析
根据不同提取方法的白花败酱总黄酮含量变化,
考察四种提取方法的优劣,结果见表1。
表 1 四种方法提取的白花败酱总黄酮含量(mg.g-1)
根 茎 叶 全草
水提取法 24.4 18.1 47.9 34.2
有机溶剂提取法 30.3 24.1 51.6 39.8
索式提取法 34.9 29.2 57.4 43.3
超声波提取法 32.8 27.5 54.1 41.2
由表 1可知:索式提取法的总黄酮含量最高,超
声波提取法次之,再次是乙醇提取法,水提取法总黄
酮含量最低。因此,我们确定索式提取法作为提取白
花败酱总黄酮的最好方法。
同样,从表 1可知,白花败酱的不同部位所含的
总黄酮不同,即:叶中的总黄酮含量最高,为 57.4mg/g,
其次为全草,总黄酮含量为 43.3mg/g,根和茎中较少,
分别为 35.9mg/g和 29.2mg/g。
3 讨论
3.1 采用四种方法提取白花败酱不同部位的总黄
酮,结果有较大差异。黄酮类化合物易溶于甲醇、乙
醇、乙酸乙酯等有机溶剂,有机溶剂提取率明显高于
水提取,因为乙醇原料易得,成本低廉、提取率较高,
故选用乙醇作提取溶剂。索式抽提法为连续回流抽提
方式,可以充分提取药物中的有效成分,提取率最高;
超声提取可以加速植物有效成分进入溶剂,提高有效
成分提取率,提取效率也较高。
3.2 通过白花败酱不同部位的总黄酮含量比较,确
定白花败酱的叶中总黄酮含量最高,其次是根,最后
为茎。由此可以确定,白花败酱不同部位的化学成分
有差别,其药用效果也有差别,因此可以根据其变化
规律,确定治疗具体疾病的药用部位。
3.3 白花败酱中的总黄酮含量较高,索式提取法得到
的叶中总黄酮含量高达 57.4mg/g,全草中为 43.3mg/g,
证明了白花败酱中含有较多的黄酮化合物,为白花败
酱具有较多的药理作用提供了科学依据。
3.4 在我国,白花败酱资源丰富,分布广泛,食用药
用价值都很高,有必要进一步开发利用,以充分利用
天然植物资源。
参考文献
1 卢寅熹. 败酱草的本草考证[J]. 时珍国药研究. 1996.7
(3):129-130
2 赵喜元,田珍. 败酱草的紫外光谱鉴定[J]. 中国中药杂志.
1992.17(7):394-396
3 余旭亚,王洪钟等. 核桃油总黄酮含量的测定[J]. 中国油
脂, 2002.27(1):59-60
4 陈炳华. 白花败酱食疗价值高[J]. 植物杂志. 2002(6):1
5 江苏新医学院主编. 中药大辞典.上海:上海科学技术出版
社. 1988,1340