全 文 :收稿日期:2016-06-01
基金项目:国家自然科学基金项目(21272136)
通信作者:尉小琴(1992-),女,硕士研究生,研究方向为药理学.E-mail:262480010@qq.com
DOI:10.13393/j.cnki.issn.1672-948X.2016.05.021
华泽兰中的苷类成分研究
尉小琴 贺海波 邹 坤 汪鋆植 刘呈雄 汪 蕾
(天然产物研究与利用湖北省重点实验室,三峡大学 生物与制药学院,湖北 宜昌 443002)
摘要:研究了菊科泽兰属植物华泽兰中的苷类成分.通过正相硅胶、反相硅胶柱色谱、薄层色谱和
高效液相色谱等方法,从该植物乙酸乙酯部位分离纯化得到4个苷类化合物,利用 MS和NMR等
波谱学方法2,结合文献数据,鉴定化合物结构分别为icariside C4(1)、longifloroside A(2)、cis-me-
lilotoside 3'-methyl ester(3)、2-hydroxy-5-methoxyphenyl-1-O-glucoside(4).化合物1-4均为首次
从华泽兰中分离得到.
关键词:华泽兰; 苷类; 分离; 结构鉴定
中图分类号:R914 文献标识码:A 文章编号:1672-948X(2016)05-0107-03
Glycosides fromEupatoriumChinenseL.
Yu Xiaoqin He Haibo Zou Kun Wang Junzhi Liu Chengxiong Wang Lei
(Hubei Key Laboratory of Natural Products Research &Development,Colege of Biological &Pharmaceuti-
cal Sciences,China Three Gorges Univ.,Yichang 443002,China)
Abstract To study the glycosides fromeupatoriumchinenseL.,normal phase silica gel column chromatogra-
phy,thin-layer chromatography,and preparative HPLC are used for seperation and purification.Their struc-
tures are determined by various spectral data.Four glycosides,namely icariside C4(1),longifloroside A(2),
cis-melilotoside 3'-methyl ester(3),2-hydroxy-5-methoxyphenyl-1-O-glucoside(4),are isolated from ethyl
acetate extract of eupatorium chinense L.for the first time.
Keywords eupatorium chinense L.; glycosides; seperation; structure identification
华泽兰系菊科泽兰属植物,又名大金刀,六月雪
等,在我国除新疆地区外均有分布[1].华泽兰是我国
土家族药物之一,传统药理研究表明,华泽兰具有解
热、镇痛、消炎等功效.其干燥根在广东地区多被用来
治疗白喉、咽炎等疾病[2].华泽兰化学成分以萜类及
黄酮为主,含有少量的生物碱及苯丙酯类化合物[3],
该植物中的苷类成分鲜少有文献报道.
实验从华泽兰乙酸乙酯部位分离得到4个苷类
化合物,分别鉴定为icariside C4(1)、longifloroside A
(2)、cis-melilotoside 3'-methyl ester(3)、2-hydroxy-
5-methoxyphenyl-1-O-glucoside(4)(化合物结构如图
1所示).以上化合物均为首次从华泽兰中分离得到.
图1 化合物1-4结构
1 仪器和试剂
AmozonSL+1200液相色谱-双重漏斗传输离子
第38卷 第5期
2016年10月
三峡大学学报(自然科学版)
J of China Three Gorges Univ.(Natural Sciences)
Vol.38No.5
Oct.2016
阱质谱仪(德国布鲁克·道尔顿公司);Bruker AV
400核磁共振波谱仪(瑞士布鲁克公司);Dionex Ul-
timate 3000型高效液相色谱仪(美国戴安公司);Ve-
nusil XBP C18色谱柱(10μm,250×10mm 半制备
型;5μm,250×4.6mm分析型);低温冷冻干燥机(美
国Labconco公司);WZZ-2S数字式自动旋光仪(上
海精科公司);正相色谱硅胶(烟台化学工业研究所);
反相色谱硅胶(日本 YMC公司);Sephadex LH-20
(美国Pharmacia公司);高效液相用甲醇、乙腈均为
色谱纯,水为三蒸水,其它试剂均为分析纯.
实验所用华泽兰植物样本采自湖北省长阳土家
族自治县乐园,经三峡大学生物与制药学院王玉兵教
授鉴定为Eupatorium chinense L..植物标本现保存
于三峡大学天然产物研究与利用湖北省重点实验室.
2 提取与分离
华泽兰干燥全草4.4kg,粉碎,用20L95%乙醇
浸泡过夜,采用加热回流方式提取3次,每次2h,合
并提取液减压浓缩至无醇味,利用水悬浮混匀后,依
次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,减压浓缩得
到石油醚部位浸膏50g,乙酸乙酯萃取部位浸膏67g,
正丁醇部位浸膏35g.
取上述乙酸乙酯部位浸膏67g,经正相硅胶柱层
析色谱,以氯仿-甲醇(10%氯仿/甲醇→100%甲醇)
梯度洗脱,经薄层色谱分析合并后,得到160个馏分
Fr.1-160.其中Fr.60-100经薄层色谱分析合并后,
经反相硅胶柱层析色谱,以甲醇-水(10%甲醇→
100%水)梯度洗脱,馏分Frr.70-80采用中压制备液
相(42%乙腈/水,30min,3.0mL/min,203nm)进行
分离纯化,得到化合物1(78mg)和2(52mg).Frr.
100-120经过中压制备液相(42%乙腈/水,30min,
3.0mL/min,203nm)进行分离纯化,得到化合物3
(45mg)和4(49mg).
3 结构鉴定
化合物1:白色粉末状物质.EI-MS m/z:418.2
[M]+;C21H38O8.1 H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:
5.96(1H,dd,J=17.4,10.8Hz,H-6),5.92(1H,d,
J=10.8Hz,H-1),5.24(1H,d,J=1.5Hz,H-2),
5.22(1H,dd,J=10.8,1.6Hz,H-1),4.47(1H,d,
J=7.8Hz,H-1′),3.91(1H,d,J=2.5Hz,H-6′),
3.9(1H,d,J=2.5Hz,H-10),3.88(1H,d,J=2.4
Hz,H-6′),3.77(1H,d,J=4.9Hz,H-4′),3.76(1H,
d,J=2.5Hz,H-2′),3.75(1H,d,J=4.9Hz,H-3′),
3.37(1H,m,H-5′),3.27(1H,m,H-4′),2.27(1H,
m,H-8),2.19(1H,m,H-8),2.19(1H,m,H-5),
2.08(1H,m,H-5),2.05(1H,m,H-4),1.92(1H,s,
H-4),1.62(3H,s,14-CH3),1.57(1H,s,H-9),1.52
(1H,m,H-9),1.28(3H,s,15-CH3),1.20(3H,
s,12-CH3),1.16(3H,s,13-CH3);13 C-NMR(100
MHz,CD3OD)δ:110.9(C-1),145.4(C-2),73.8(C-
3),42.5(C-4),22.7(C-5),125.2(C-6),135.0(C-7),
29.8(C-8),36.0(C-9),89.3(C-10),72.9(C-11),
22.9(C-12),25.4(C-13),15.1(C-14),26.5(C-15),
105.4(C-1′),75.0(C-2′),77.4(C-3′),70.5(C-4′),
76.9(C-5′),61.7(C-6′).以上数据与文献[4]报道对
照基本一致,故鉴定化合物为icariside C4.
化合物2:白色粉末状物质.EI-MS m/z:534.2
[M]+;C27H34O11.1 H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:
7.01(1H,s,H-6),6.97(1H,d,J=2.5Hz,H-2),
6.85(1H,d,J=1.5Hz,H-2′),6.83(1H,d,J=7.5
Hz,H-5),6.77(1H,d,J=1.5Hz,H-6′),6.65(1H,
d,J=15.9Hz,H-1′),6.27(1H,dt,J=15.8,6.3
Hz,H-8′),5.60(1H,d,J=6.1Hz,H-7),4.86(1H,
d,J=7.9Hz,H-1″),4.19(1H,dd,J=5.0,1.5Hz,
H-2),3.92(3H,s,3-OCH3),3.85(3H,s,4-OCH3),
3.77(3H,s,3′-OCH3),3.71(1H,m,H-8),3.52
(2H,dd,H-9);13C-NMR(100MHz,CD3OD)δ:131.5
(C-1),109.8(C-2),148.4(C-3),149.7(C-4),112.0
(C-5),118.5(C-6),88.1(C-7),54.2(C-8),63.9(C-
9),129.3(C-1′),111.3(C-2′),144.5(C-3′),149.4
(C-4′),134.9(C-5′),115.7(C-6′),133.2(C-7′),
123.3(C-8′),74.2(C-9′),55.5(3-OCH3),55.8(4-
OCH3),55.5(3′-OCH3),102.2(C-1″),70.8(C-2″),
77.2(C-3″),69.9(C-4″),77.0(C-5″),61.9(C-6″).以
上数据与文献[5]报道对照基本一致,故鉴定化合物
为longifloroside A.
化合物3:白色粉末状物质.EI-MS m/z:340.1
[M]+;C16H20O8.1 H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:
7.52(1H,dd,J=7.7,1.4Hz,H-7),7.37(1H,t,
J=7.2Hz,H-6),7.32(1H,m,H-4),7.22(1H,d,
J=7.6Hz,H-3),7.01(1H,dd,J=11.3,3.8Hz,H-
5),6.00(1H,d,J=12.5Hz,H-8),4.95(1H,dd,J=
8.7,4.8Hz,H-1′),3.34(3H,dt,J=3.3,1.6Hz,H-
10);13 C-NMR(100MHz,CD3OD)δ:121.7(C-1),
155.7(C-2),115.4(C-3),130.5(C-4),125.7(C-5),
128.9(C-6),139.4(C-7),119.4(C-8),167.8(C-9),
801 三 峡 大 学 学 报(自 然 科 学 版) 2016年10月
50.8(C-10),101.7(C-1′),73.9(C-2′),77.1(C-3′),
70.3(C-4′),77.2(C-5′),61.5(C-6′)..以上数据与文
献[6]报道对照基本一致,故鉴定化合物为cis-me-
lilotoside 3'-methyl ester.
化合物4:白色粉末状物质.EI-MS m/z:302.1
[M]+;C13H18O8.1 H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:
7.64(1H,d,J=3.1Hz,H-2),7.34(1H,dd,J=
9.0,3.1Hz,H-6),6.92(1H,d,J=9.1Hz,H-5),
4.97(1H,d,J=7.4Hz,H-1′),3.7(6H,m,H-Glc),
3.15(3H,s,H-OCH3);13 C-NMR (100 MHz,
CD3OD)δ:118.1(C-2),150.5(C-3),112.5(C-4),
117.7(C-5),126.3(C-6),102.7(C-1′),73.9(C-2′),
77.0(C-3′),70.4(C-4′),77.3(C-5′),61.6(C-6′).以
上数据与文献[7]报道对照基本一致,故鉴定化合物
为2-hydroxy-5-methoxyphenyl-1-O-glucoside.
4 结 论
华泽兰系菊科泽兰属植物,该属植物化学成分种
类较多,且以萜类和黄酮类化合物为主.本实验中分
离得到的4个苷类成分,均为首次从华泽兰中分离得
到的.为华泽兰化学成分的研究奠定了一定的基础.
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[责任编辑 周文凯]
勘误
2016年第4期第31页《大中型泵站管理现代化评价指标体系及其应用》一文中,增加第五作者
“许媛,江苏省江都水利工程管理处,江苏 扬州 225200”;基金项目“中央高校基金前瞻性项目
(2014B05814)”更改为“国家自然科学基金(51309076)和中央高校业务费科技前瞻性研究专项
(2014B05814)联合资助”。
2016年第4期第60页《补偿收缩混凝土研究进展》一文中,作者单位“2.河海大学 高性能土木
工程材料国家重点实验室”更正为“2.高性能土木工程材料国家重点实验室”。
901第38卷 第5期 尉小琴,等 华泽兰中的苷类成分研究