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醋制前后京大戟饮片石油醚部位的HPLC指纹图谱比较



全 文 :中国药房 2013年第24卷第39期 China Pharmacy 2013 Vol. 24 No. 39
京大戟为大戟科植物大戟Euphorbia pekinensis Rupr.的干
燥根,是临床常用的有毒中药,具有泻水逐饮、消肿散结的作
用。历版《中国药典》对其均有收载,收载的饮片规格有京大
戟和醋京大戟。临床常用的是京大戟醋制品,因其醋制后毒
性降低、药性缓和,提高了用药安全性。本课题组前期研究表
明,京大戟石油醚部位是其毒效部位之一[1],但醋制后该部位
化学成分是否有变化尚不明确。因此,笔者采用高效液相色
谱(HPLC)法建立了京大戟饮片石油醚部位的指纹图谱,以期
能从整体上追踪京大戟炮制前后化学成分的变化,为醋制减
毒机制提供科学依据。
1 材料
1.1 仪器
2695型HPLC仪、2996型二极管阵列检测器(DAD)(美国
Waters公司);R200D型十万分之一电子天平(德国Sartorius公司)。
1.2 试剂
乙腈为色谱纯,水为超纯水,甲醇、乙醇、乙酸乙酯、醋酸
均为分析纯;大戟二烯醇对照品(中国食品药品检定研究院,
批号:111866-201001)。
1.3 药材
京大戟饮片:京大戟 1(湖北)、京大戟 2(河南)、京大戟 3
(河南)、京大戟4(河南)购自安徽亳州药材市场,京大戟5(南
京)采自南京老山,京大戟 6(河北,批号:20100912)、京大戟 7
(河南,批号:20110215)、京大戟 8(河南,批号:20101214)、京
大戟 9(河南,批号:20101108)、京大戟 10(河南,批号:
20110103)购自龙口新世纪药业有限公司;醋京大戟饮片分别
为上述京大戟饮片的醋制品[按照《全国中药炮制规范》(1988
年版)醋京大戟项下炮制方法进行炮制]。
2 方法与结果
Δ基金项目:国家中医药管理局中医药行业科研专项项目立项计
划(No.200807039);国家中医药管理局全国名老中医药专家传承工作
室建设项目;山东省中医药科技发展计划项目(No.2011-172)
*副研究员,博士。研究方向:中药炮制机制与工艺。电话:
0531-82949829。E-mail:xiuyunge@163.com
#通信作者:研究员。研究方向:中药炮制原理与中药新药。电
话:0531-82949829。E-mail:xingerx@163.com
·中药分析与鉴定·
醋制前后京大戟饮片石油醚部位的HPLC指纹图谱比较Δ
葛秀允*,孙立立 #,张乐林(山东省中医药研究院,济南 250014)
中图分类号 R284.1;R917 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2013)39-3691-04
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2013.39.14
摘 要 目的:建立京大戟饮片石油醚部位的指纹图谱,比较京大戟醋制前后石油醚部位化学成分的变化。方法:以大戟二烯醇
为对照品,采用高效液相色谱法。色谱柱为汉邦 Benetnach C8(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为 0.3%磷酸溶液-乙腈(梯度洗
脱),检测波长为203 nm。结果:10批京大戟和醋京大戟分别有11个共有色谱峰;京大戟和醋京大戟有8个共有峰。相似度均>
0.90。结论:醋制对京大戟化学成分有一定的影响。该方法稳定、准确、可靠,能明显区分京大戟和醋京大戟饮片的内在质量,可
为京大戟饮片的质量控制提供依据。
关键词 京大戟;醋京大戟;指纹图谱;高效液相色谱法;大戟二烯醇
Comparison of HPLC Fingerprint of Petroleum Ether Extract of Euphorbia pekinensis and E. pekinensis
Stir-baked with Vinegar
GE Xiu-yun,SUN Li-li,ZHANG Le-lin(Shandong Provincial Academy of TCM,Jinan 250014,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To establish an HPLC fingerprint of petroleum ether extract of Euphorbia pekinensis and E. pekinensis
stir-baked with vinegar,and to compare the changes of the chemical composition in petroleum ether extracts of E. pekinensis and E. pe-
kinensis stir-baked with vinegar. METHODS:Using euphadienol as control,HPLC method was adopted. The determination was per-
formed on Benetnach C8(250 mm×4.6 mm,5 μm)column with mobile phase consisted of 0.3% phosphoric acid-acetonitrile(gradient
elution). The detection wavelength was set at 203 nm. RESULTS:From 10 batches of petroleum ether extracts of E. pekinensis and E.
pekinensis stir-baked with vinegar,there were 11 peaks,and 8 peaks were common respectively with similarity >0.90. CONCLU-
SIONS:The method of stir-baked with vinegar influences the chemical components of E. pekinensis. The method is stable,accurate
and reliable,and it obviously distinguishes internal quality of E. pekinensis and E. pekinensis stir-baked with vinegar,which provides
reference standard for the quality control of E. pekinensis decoction pieces.
KEY WORDS Euphorbia pekinensis;Euphorbia pekinensis stir-baked with vinegar;Fingerprint;HPLC;Euphadienol
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·· 3691
China Pharmacy 2013 Vol. 24 No. 39 中国药房 2013年第24卷第39期
2.1 色谱条件
色谱柱:汉邦 Benetnach C8(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动
相:0.3%磷酸溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱(洗脱程序见表1);流
速:1 ml/min;柱温:30℃;检测波长:203 nm[2];进样量:10 μl。
表1 梯度洗脱程序
Tab 1 Gradient elution process
时间,min
0
30
40
70
110
流动相A,%
60
40
20
3
0
流动相B,%
40
60
80
97
100
2.2 供试品溶液的制备
取京大戟和醋京大戟饮片粉末各 10 g(过 40目筛),置索
氏提取器内,加石油醚200 ml,水浴提取至无色,回收溶剂,残
渣加甲醇溶解并转移至25 ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤
过,取续滤液,即分别得到京大戟和醋京大戟的供试品溶液。
2.3 对照品溶液的制备
取大戟二烯醇对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1 ml
含20 μg的溶液,即得。
2.4 方法学考察
2.4.1 测定 取对照品溶液10 μl,注入液相色谱仪,按上述色
谱条件测定,记录色谱图。大戟二烯醇对照品的HPLC图见图1。
2.4.2 精密度试验 取醋京大戟1号供试品溶液10 μl,连续进
样 6次,以大戟二烯醇的保留时间和峰面积为参照,分别对各
主要色谱峰的相对保留时间和相对峰面积进行统计。结果表
明,各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积基本一致,RSD<
3.0%,符合指纹图谱技术要求。
2.4.3 稳定性试验 取醋京大戟1号供试品溶液适量,室温下
贮藏,分别于0、3、6、9、12 h按上述色谱条件进样测定,以大戟
二烯醇的保留时间和峰面积为参照,分别对各主要色谱峰的
相对保留时间和相对峰面积进行统计。结果表明,各色谱峰
的相对峰面积和相对保留时间基本一致,RSD<3.0%,符合指
纹图谱技术要求。
2.4.4 重复性试验 取醋京大戟 1号饮片粗粉适量,共 6份,
分别按“2.2”项下方法制成供试品溶液,照上述色谱条件进样
测定,以大戟二烯醇的保留时间和峰面积为参照,分别对各主
要色谱峰的相对保留时间和相对峰面积进行统计。结果表
明,各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积基本一致,
RSD<3.0%,符合指纹图谱技术要求[3]。
2.5 京大戟饮片的指纹图谱
2.5.1 京大戟饮片指纹图谱的建立 取京大戟饮片各供试品
溶液适量,照上述色谱条件进样测定,记录色谱图。以大戟二
烯醇为参照,对各主要色谱峰的相对峰面积进行统计,结果见
表2。
表2 10批京大戟饮片指纹图谱的相对峰面积
Tab 2 Relative peak areas of HPLC fingerprints of 10
batches of E. pekinensis decoction piece
峰号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
保留时间,min
6.20
30.17
41.11
45.45
55.10
60.61
66.59
71.07
83.94
95.54
97.36
98.50
101.74
105.39
样品号
1
3.82
0.21
0.32
2.81
0.38
0.65
0.38
0.12
0.09
0.20
1.00
2.07
0.14
0.21
2
3.82
0.24
0.33
2.48
0.38
0.65
0.38
0.12
0.11
0.20
1.00
2.07
0.14
0.25
3
3.84
0.22
0.32
2.48
0.36
0.65
0.38
0.12
0.09
0.20
1.00
2.07
0.14
4
3.72
0.21
0.32
2.46
0.37
0.64
0.38
0.12
0.10
0.20
1.00
2.05
0.14
5
3.78
0.21
0.32
2.47
0.37
0.64
0.38
0.12
0.11
0.20
1.00
2.06
0.14
0.20
6
3.78
0.21
0.32
2.50
0.37
0.64
0.39
0.20
1.00.
2.07
0.14
0.20
7
3.31
0.22
0.32
2.37
0.37
0.64
0.37
0.12
0.09
0.21
1.00
2.04
0.14
0.18
8
2.12
0.16
0.10
0.29
0.19
0.15
0.08
0.06
1.00
1.89
0.13
9
1.07
0.06
0.06
0.40
0.13
0.02
0.08
0.03
0.05
1.00
1.52
0.05
0.07
10
2.03
1.13
0.09
0.54
0.27
0.14
0.12
0.08
1.00
1.80
0.15
0.05
2.5.2 京大戟指纹图谱共有峰的确定及指纹图谱共有模式的
建立 运用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)”
对 10批京大戟指纹图谱进行相似度分析,以S1为参照图谱,
经过多点校正、自动匹配,以中位数法生成对照图谱R,由匹配
数据的输出结果得到共有峰共 11个,分别为 6.20、30.17、
41.11、45.45、55.10、60.61、66.59、95.54、97.36、98.50、101.74
min处色谱峰,其中 97.36 min处峰为大戟二烯醇。除上述色
谱峰外,在 71.07 min处,京大戟 1~5、7号样品有 1个共有峰;
在83.94 min左右,除京大戟6、8、10号样品外,其他样品有1个
共有峰;105.39 min处,除京大戟 3、4和 8号样品外,其他样品
有1个共有峰。10批京大戟饮片的HPLC图见图2。
2.5.3 指纹图谱的相似度评价 使用“中药色谱指纹图谱相
似度评价系统(2004 A版)”进行相似度分析,结果见表 3。经
分析,10批京大戟饮片与相应对照图谱的相似度均>0.90,符
合要求。
2.6 醋京大戟饮片的指纹图谱
2.6.1 醋京大戟饮片指纹图谱的建立 取醋京大戟饮片各供
试品溶液适量,照上述色谱条件进样测定,记录色谱图。以大
2 751.64
2 063.73
1 375.82
687.91
00 20 40 60 80 100 120
t,min
mA
U
图1 大戟二烯醇对照品的HPLC图
Fig 1 HPLC chromatogram of euphadienol control
2 162.10
1 621.58
1 081.05
540.53
0
mA
U
0 20.00 39.99 59.99 79.99 99.98 119.98
t,min
R
S10
S9
S8
S7
S6
S5
S4
S3
S2
S1
图2 10批京大戟饮片的HPLC图
R.对照图谱
Fig 2 HPLC fingerprints of 10 batches of E. pekinensis de-
coction piece
R. control chromatogram
·· 3692
中国药房 2013年第24卷第39期 China Pharmacy 2013 Vol. 24 No. 39
戟二烯醇为参照,对各主要色谱峰的相对峰面积进行统计,结
果见表4。
表3 与共有模式比较的京大戟饮片的相似度
Tab 3 Similarity degree of E. pekinensis decoction pieces vs.
common model
相似度
样品号
1
0.984
2
0.990
3
0.989
4
0.990
5
.0990
6
0.989
7
0.991
8
0.910
9
0.932
10
0.989
对照指纹图谱
1.000
表4 10批醋京大戟饮片指纹图谱的相对峰面积
Tab 4 Relative peak areas of HPLC fingerprints of 10
batches of E. pekinensis stir-baked with vinegar decoction
piece
峰号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
保留时间,min
6.22
30.18
42.79
43.77
45.51
55.08
58.92
66.69
81.56
96.51
97.32
98.46
101.64
113.41
样品号
1
2.15
0.04
0.04
0.10
0.10
0.20
0.05
0.10
0.02
0.08
1.00
1.90
0.14
2
2.48
0.03
0.04
0.10
0.97
0.21
0.09
0.11
0.03
0.08
1.00
1.88
0.14
3
1.94
0.04
0.04
0.07
0.97
0.21
0.11
0.09
0.02
0.08
1.00
1.89
0.14
4
2.02
0.04
0.04
0.10
0.10
0.21
0.11
0.11
0.03
0.08
1.00
1.90
0.14
5
1.15
0.04
0.04
0.10
1.02
0.21
0.11
0.11
0.03
0.08
1.00
1.88
0.14
0.06
6
2.10
0.04
0.04
0.10
0.97
0.20
0.11
0.09
0.03
0.08
1.00
1.89
0.14
0.11
7
2.15
0.08
0.14
0.35
2.98
0.32
0.25
0.38
0.22
1.00
1.93
0.12
8
2.17
0.06
0.09
0.98
0.18
0.06
0.10
0.08
1.00
1.87
0.13
9
0.89
0.08
0.08
0.43
0.14
0.06
0.09
0.07
1.00
1.86
0.11
10
1.12
0.08
0.12
0.41
2.13
0.29
0.18
0.31
0.27
1.00
1.90
0.11
2.6.2 醋京大戟指纹图谱共有峰的确定及指纹图谱共有模式
的建立 运用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004 A
版)”对10批醋京大戟指纹图谱进行相似度分析,以S1为参照
图谱,经过多点校正、自动匹配,以中位数法生成对照图谱R,
由匹配数据的输出结果得到共有峰共 11个,分别为 6.22、
30.18、43.77、45.51、55.08、58.92、66.69、96.51、97.32、98.46、
101.64 min处色谱峰,其中 97.32 min处峰为大戟二烯醇。除
上述色谱峰外,在 42.79 min处,醋京大戟 1~7、10号样品有 1
个共有峰;在81.56 min左右,醋京大戟1~6号样品有1个共有
峰;在 113.41 min处,醋京大戟 5、6号样品有 1个共有峰。10
批醋京大戟饮片的HPLC图见图3。
2.6.3 指纹图谱的相似度评价 使用“中药色谱指纹图谱相
似度评价系统(2004 A版)”进行相似度分析,结果见表 5。经
比较,10批醋京大戟饮片与相应对照图谱的相似度均>0.90,
符合要求。
表5 与共有模式比较的醋京大戟饮片的相似度
Tab 5 Similarity degree of E. pekinensis stir-baked with vin-
egar decoction piece vs. common model
相似度
样品号
1
0.981
2
0.985
3
0.995
4
0.991
5
.0987
6
0.990
7
0.920
8
0.991
9
0.930
10
0.918
对照指
纹图谱
1.000
2.7 京大戟和醋京大戟指纹图谱的峰面积比较
对京大戟和相应醋制品的峰面积进行了统计,比较京大
戟炮制前后峰面积的变化情况,结果见表6、表7。
表6 京大戟饮片主要色谱峰峰面积积分值
Tab 6 Main chromatographic peaks area of E. pekinensis
decoction piece
保留时间,min
6.20
30.17
41.11
45.45
55.10
60.61
66.59
71.07
83.94
95.54
97.36
98.50
101.74
105.39
峰面积积分值
1
27 349
1 472
2 326
20 105
2 696
4 635
2 735
872
642
1 462
7 157
14 823
990
1 530
2
26 537
1 681
2 273
17 232
2 621
4 529
2 656
842
733
1 410
6 955
14 425
954
1 753
3
26 739
1 535
2 257
17 257
2 530
4 504
2 680
846
628
1 418
6 953
14 406
973
4
26 827
1 498
2 323
17 726
2 656
4 604
2 717
875
694
1 482
7 201
14 787
1 000
5
27 156
1 488
2 329
17 790
2 674
4 617
2 730
862
771
1 473
7 188
14 786
975
1 468
6
27 114
1 480
2 323
17 915
2 684
4 629
2 826
1 475
7 187
14 840
978
1 457
7
23 478
1 527
2 290
16 813
2 636
4 555
2 606
881
613
1 499
7 083
14 420
1 008
1 279
8
18 854
1 443
925
2 597
1 734
1 368
704
586
8 907
16 878
1 169
9
22 556
1 385
1 214
8 546
2 771
508
1 793
658
997
21 091
32 089
972
1 441
10
20 497
11 391
939
5 495
2 709
1 408
1 187
784
10 100
18 227
1 508
504
表7 醋京大戟饮片主要色谱峰峰面积积分值
Tab 7 Main chromatographic peaks area of E. pekinensis
stir-baked with vinegar
保留时间,min
6.22
30.18
42.79
43.77
45.51
55.08
58.92
66.69
81.56
96.51
97.32
98.46
101.64
113.41
峰面积积分值
1
20 627
376
423
972
9 497
1 960
524
983
216
758
9 599
18 218
1 348
2
24 868
280
386
996
9 724
2 067
947
1 081
268
793
10 016
18 799
1 357
3
18 858
356
386
673
9 454
2 008
1 054
840
217
780
9 715
18 367
1 370
4
19 894
380
394
986
9 726
2 064
1 067
1 074
289
792
9 843
18 600
1 373
5
10 688
374
379
955
9 513
1 965
1 038
1 035
276
744
9 309
17 546
1 276
582
6
19 863
372
370
932
9 205
1 922
1 002
818
252
754
9 452
17 866
1 317
1 003
7
18 488
738
1 182
3 014
25 610
2 719
2 188
3 264
1 936
8 608
16 652
1 017
8
23 207
612
1 012
10 499
1 938
628
1 106
837
10 701
20 051
1 404
9
11 012
1 030
1 004
5 359
1 779
687
1 086
897
12 413
23 137
1 361
10
10 356
709
1 068
3 809
19 655
2 684
1 674
2 862
2 524
9 212
17 492
1 055
由表6、表7可以看出,京大戟和醋京大戟在6.22、30.182、
45.508、55.08、66.693、97.32、98.46和 101.64 min处有 8个共有
色谱峰,其中在 6.22、30.182、45.508、55.08和 66.693 min处色
谱峰峰面积醋制后下降,说明极性相对较大的成分醋制后含
量会下降。另外,在 97.32、98.46和 101.64 min处的色谱峰峰
0 20.00 39.99 59.99 79.99 99.98 119.98
t,min
R
S10
S9
S8
S7
S6
S5
S4
S3
S2
S1
2 620.16
1 965.12
1 310.08
655.04
0
mA
U
图3 10批醋京大戟饮片的HPLC图
R.对照图谱
Fig 3 HPLC fingerprints of 10 batches of E. pekinensis
stir-baked with vinegar decoction piece
R. control chromatogram
·· 3693
China Pharmacy 2013 Vol. 24 No. 39 中国药房 2013年第24卷第39期
面积醋制后增加。
3 讨论
本试验采用的是 10批不同产地的京大戟和醋京大戟样
品,可得两种样品中分别有11个共有峰,并且京大戟和醋京大
戟之间有 8个共有峰;京大戟炮制前后色谱图基本一致,说明
京大戟和醋京大戟中群体成分较一致,醋制对京大戟化学成
分有一定的影响,但影响不大。
本试验以京大戟所含成分大戟二烯醇作为参照物,建立
了京大戟和醋京大戟HPLC指纹图谱检测标准。该方法操作
简便、重复性好,为有效地控制京大戟和醋京大戟的内在质量
提供了科学依据,并且可比较京大戟醋制前后化学成分的变
化,为京大戟醋制解毒机制研究奠定了基础。
京大戟醋制后极性相对较大的成分含量有所降低,极性
相对较小的成分如三萜类的大戟二烯醇峰面积增加,说明京
大戟醋制过程中,在酸性和加热条件下,大戟二烯醇立体结构
发生了变化,极性改变,易于溶出。文献报道大戟二烯醇为京
大戟的药效成分[4],醋制后大戟二烯醇的含量增加,推断与京
大戟醋制后毒性药效作用的变化相关。
参考文献
[ 1 ] 张乐林.京大戟炮制原理初步研究[D].济南:山东中医药
大学,2011.
[ 2 ] 苏本正,周倩,孙立立.甘草饮片乙酸乙酯提取部位HP-
LC指纹图谱研究[J].中成药,2011,33(2):203.
[ 3 ] 傅勇,肖武,李达,等.远志与厚朴不同配比水煎液的HPLC
指纹图谱比较研究[J].中国药房,2012,23(43):4 072.
[ 4 ] Akihisa T,Kithsiri WEM,Tokuda H,et al. Eupha- 7,9
(11),24-trien-3β-ol.(“AntiquolC”)and other triterpenes
from euphorbia antiquorum latex and their inhibitory ef-
fects on epstein-barr virus activation[J]. J Nat Prod,2002,
65(2),158.
(收稿日期:2012-10-16 修回日期:2013-01-18)
Δ基金项目:国家“重大新药创制”科技重大专项课题(No.
2010ZX09102)
*硕士研究生。研究方向:中药分析。E-mail:shme44@sohu.com
#通信作者:副教授,硕士研究生导师,硕士。研究方向:中药分
析。电话:010-84738618。E-mail:duantx@sina.com
HPLC法测定注射用黄芩苷原料中黄芩苷及其有关物质的含量Δ
沈 蒙*,段天璇 #,林宏英,孙毅坤,于继平(北京中医药大学,北京 100102)
中图分类号 R283;R917 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2013)39-3694-04
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2013.39.15
摘 要 目的:建立测定注射用黄芩苷原料中黄芩苷及其有关物质含量的方法。方法:以高效液相色谱法测定注射用黄芩苷原料
中黄芩苷及其有关物质千层纸素A-7-O葡糖醛酸苷、汉黄芩苷的含量,并以不加校正因子的主成分自身对照法计算总杂质的含
量。色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 ml/min,
柱温为30℃,检测波长为274 nm。结果:黄芩苷、千层纸素A-7-O葡糖醛酸苷、汉黄芩苷的质量浓度分别在50.00~300.00、0.21~
6.57、0.16~0.80 μg/ml范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r分别为0.999 9、0.999 3、0.999 3);平均加样回收率分别为
99.16%、100.69%、99.18%,RSD分别为1.2%、2.4%、4.6%(n均为9)。黄芩苷与有关物质分离良好,千层纸素A-7-O葡糖醛酸苷
与汉黄芩苷的检出限分别为0.43、0.64 ng。结论:该方法专属性强,结果准确、可靠,可用于注射用黄芩苷原料中黄芩苷及其有关
物质的含量测定。
关键词 高效液相色谱法;注射用黄芩苷原料;有关物质;含量测定
Content Determination of Baicalin and Its Related Substances in Baicalin for Injection by HPLC
SHEN Meng,DUAN Tian-xuan,LIN Hong-ying,SUN Yi-kun,YU Ji-ping(Beijing University of TCM,Beijing
100102,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To establish a method for the content determination of baicalin and related substances in Baicalin for
injection. METHODS:The contents of baicalin and related substance,such as oroxylin A 7-O-glucuronide,wogonoside,were de-
termined by HPLC. The contents of the total impurities were computed by main constituent self-control method without calibration
factor. The separation was performed on Agilent ZORBAX SB-C18(150 mm×4.6 mm,5 μm)column with mobile phase consisted of
methanol-0.1%phosphoric acid solution(gradient elution)at the flow rate of 1.0 ml/min. The column temperature was 30 ℃ and
the detection wavelength was set at 274 nm. RESULTS:The linear ranges of baicalin,oroxylin A 7-O-glucuronide and wogonoside
were 50.00-300.00 μg/ml(r=0.999 9),0.21-6.57 μg/ml(r=0.999 3)and 0.16-0.80 μg/ml(r=0.999 3). Average recovery rates were
99.16%(RSD=1.2%,n=9),100.69%(RSD=2.4%,n=9)and 99.18%(RSD=4.6%,n=9). Baicalin was separated from related
substance well. The detection limits of oroxylin A 7-O-glucureonide and wogonside were 0.43,0.64 ng. CONCLUSIONS:The meth-
od is specific,accurate and reliable,and it can be used for the content determination of baicalin and related substance in baicalin for
injection.
KEY WORDS HPLC;Baicalin for injection;Related substance;Content determination
􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋􀤋
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