全 文 ：一九 / k/狡年 蟹 南 .理 盔 学 报 第三期
气相色谱法测定磨芋多糖粗成
蔡端仁 哀嘉民
(化学系 )
摘 要
用单糖的三 甲基硅烷化 ( T M S)衍生物的气相色谱 法测 定四川磨 芋 多 糖 的组
成 , 确 定该多糖的组 成为 荀萄糖和 甘露糖 , 摩 尔比 为 1 : 2 。
关键词 : 磨芋 (药翁) , 葡甘 聚糖 ; 葡萄糖 , 甘露糖 ; 摩尔比
1 前言 丫 ,一 _ 一 ; ,
磨芋学名竭 翡 , 其主要成分是葡甘聚糖 。 据报导这种多糖可作为天然食品 保 鲜 剂 ` 为
此测定磨芋多糖组成对确定其结构有重要的意义 。
测定多糖的组成 , 有化学法 、色谱法等。 气相色谱法 (简称 G )C 是研究多糖结构 的一种
常用方法 , 也是二种确定多糖组成的常用手段 。 ’由子多糖水解产物单糖不具挥发性 , 不能直
接用 G C分析 , 必须制备具挥发性的衍生物 。 其中制备单糖的三甲基硅烷化 ( T M )S 衍生物较
简易 , 但由 于单糖的变旋作用 , 往往存在多个异构体 , 用这种衍生化法 , 一个单糖往往对应
一个以上的色谱峰 , 造成峰的多重性和谱图的复杂性 。 但如果对应于单糖的若干个色谱峰中
有一个是完全分离的话 , 则该糖其他异构体的峰面积可通过该糖在变旋平衡条件下的百分组
成计算出来 , 从而确定该糖响应的总面积 。 用这种定量方法国内外已有报导 川 。 本文就是用
这种方法来确定四川磨芋多糖的组成和摩尔比 , 分析结果表明 , 除葡萄搪和甘露糖外 , 未发
现其他单糖 , · 其摩尔比为 1 : 2 。
2 实验部分
2
.
1 试剂与样 品
2
.
1
。
I 试剂 三 甲基氯硅烷 ( T M C )S , 六甲基二硅烷 ( H M D )S ; 无水毗咙 (色谱
纯 , 上海试剂厂 ) ; 山梨醇 (上海进口分装 )
标准多糖 : 日一 D 葡萄糖 , -D .甘露糖 (进 口生化试剂 ) ; a D葡萄糖 (分析纯 ,广州试剂厂 )
其他试剂 : 国产分析纯 …
2
.
1
.
2 样品 磨芋多糖 (四川磨芋粉经乙醇分离提纯所得 , 经检验无还原性单糖存
在 )
「 州 ” 、 今一 娇 曰 熟 件 : `一 ’二
收稿 日期 : 1 9 8 7 一 1 1 2
3它 处 南 理 医 学 报 1 98 8 年
2
.
2衍生物的制备 !“
2
.
2
.
1样品水解 称取样品 s o om g, 加入 o . S N H : 5 0 ` l o m l , 在室温下放置过夜 , 加
两倍水稀释后于沸水浴中回流水解 24 小时 ,水解液用固体 B a C O : 中和至 p H 二 7 . 0 ,过滤浓缩 ,
滤液配成 S Om l试液 。
2
.
2
.
2 单糖硅烷化 取 l m l试液 (水解试液或标准单搪试液 ) , 在 40 ℃下 , 真空 蒸发
至干 , 加入一定量山梨醇内标物 , 用 1 m l无水毗吮溶解后立 即加入 o . Zm l H M D s和 0 . 1 m l
T M C s
, 振荡 1分钟 , 室温下放置 30 分钟 , 生成三甲基硅烷化衍生物 。
3 色带条件
仪器 : 1 02 G气相色谱仪 , FI D C 一 E BI 色谱数据处理机
色谱柱 : 5 % S E 一 5 2 / C h r o m o s o r b W ( A 。 W . ) 8 0 一 1 0 0目 , 小3 m X ZM
条件 : 柱温 : 17 ℃ , 气化 、 检测室 : 2 50 .cC
N
: : 1 5 (柱前压 2 . s k g / e m “ ) , H : : 3 5 m ] /分
空气 : 4 0 0 m l /分 进样量 : o . Zm l
4 绷定结果
4
.
1 水平衡体系单旅异构体百分组成
结果见表 1 。
表 1 单箱异构体百分组成
a % 一 石舜一 ~ 一 {-
糖 澹 G -
日%a %
,1J.19自QU通任` .上QJ月
.…寸月门勺一口二口J工勺互ó匕Q口O01.ù匕d八6b1口.…ó口连ō力任月月任J往ù性生7 6 。 8 37 8 。 6 920口连占5 。 2 2 2 3 。 6 62 2 。 9 32 1 。 3 1
相对偏差 7 7 。 2 9 士 0 。 9 4 2 2 。 7 1 士 0 . 9 4 4 4 。 9 2 士 0 。 3 4 5 5 。 0 8 士 0 。 3 4
235
。
2 9
相对偏差
7 3
。
3 7 2 6
。
6 3 4 4
。
7 8 5 5
。
2 2
7 5
。
0 4 2 4
。
9 6 4 7
。
5 5 5 2
。
4 5
7 5
。
3 7 2 4
。
6 3 4 4
。
8 0 5 5
。
2 0
7 4
。
5 9 士 0 . 8 2 2 5 . 4 1 士 0 。 8 2 4 5 。 7 1士 1 。 2 3 5 4 。 2 9 士 1 . 2 5
以山梨醇 白内标物的单糖校正因子测定结果 : 甘露搪 1 . 20 ,葡萄糖 1 . 12 。 出峰时间 (分 )
如下 : a 一 D甘露糖 1 5 . 0 9 , 日一 D 甘露糖 2 3 . 9 2 , a 一 D 葡萄糖 2 3 . 0 2 , 日一 D 葡萄糖 3 4 . 5 9 , 山 梨醇
2 7
。
9 2
。
4
。
2 甘皿璐和有萄璐混合物的测试
第 3期 气相 色谱法测 定磨芋多糖组成
结果见表 2
表 2单特混合物的比值测试寮
制样 日期 实际称量比
5
.
2 2
5
。
2 9
甘 露糖 ( m一 )
8 1
。
6 6
15
。
2 1
荀萄糖 ( G一 )
8
。
0 7
5
。
2 1
摩尔比
2
。
3 1: 1
2
。
97
:
1
2
。
16. 1
2
。
8 2: 1
.用同一 日 期在相 同条件下制样所浏 出的单糖异构体百分组成 %( 见表 1)计算未分 离
的卜 甘露糖和 a一 荀萄糖的峰面积 A, 如 A日一 m 二 A a 一 m · A日一 m%
A 。 一 m不。
4
.
3 在相同条件下磨芋多抽样品测定
测定结果见表 3 和谱图 。
表 3 磨竿多旅组分分析及牵尔比测定
测 定 甘宋糖 葡萄糖 摩 尔比 平均位
次 数
1 4
。
6 3 2
.
4 7
4 。 4 6
4
。
7 4
2
。
2 7
2
。
3 9
l
。
8 7 : 1
1
。
9 6 : l
1
。
9 8 : 1
2
。
0 8 : 1
9 7 : l260
4
。
5 7 2
。
2 0
1
、 L价 D 甘露糖
2
、 。 一 D 简萄糖
3
、 日一 D 甘露糖
4
、 内标物 山架糖
5
、 日一 D 简萄糖
样品谱图
赞 南 理 医 学 报 18 98年
5 结果肘论
在不 同溶剂体系中 , 单糖异构休的百分组成是不同的 川 , 即使同一溶剂体 系 , 由 于平
衡条件 (如温度 、 时 间 、 p H等 ) 不完全一致 , 而使异构体百分组成发生变化 。 我们发现 不同
日期制样所测定的异构体百分组成不一致 , 重现性不好 , 但 同一 日期在相同条件下制样所测
出的结果比较一致 (见表 1 ) 。 因此 , 必须严格控制平衡条件 , 使摩尔比测定与异构体百分
组成的确定在尽可能相同条件下进行 , 以确保摩尔比测定的可靠性 , 否则 , 由异构体百分组
成计算出来的日 D 甘露糖与a D 葡萄糖峰面积之和 , 就不等于由色谱图直接测量出来 的 未分
离异构体的实际峰面积 。
参 考 文 献
1 B r o w e r H E
,
Je f f e r y J E
, e t
S w e e l e y C C
,
B e n t l e y
。
R
。 ,
R : id P E
,
D o n a ld s o n B
, e t a l
a I A n a l
.
C h e m
。
1 9 6 6 ; 3 8
:
3 6 2
e t a 1
. ,
J
。
A m e r
.
C h e rn
.
S o e
. , 1 9 6 3 ; 8 5 : 2 4 9 7
.
J
。
C h r o tn a t o g r
.
1 9 7 0 ; 1 7
: 1 9 q
32
D e t e r m i n at i o n o f T h e M o l a r R a t i o o f G lu e o m a n n a n b y
aG
s e h r o m a t o g r a p h v
’
C h a j D u a n r e n Y u a n 于i a m i n
( D e p t o f C h e m
,
J i n a n U n i v e r s i t y )
A B S T R A C T
T h e C o m p o n o n t a n d m o l a r r a t i o o J t h e g l u e o m a n n a n i s s l a t e d f r o m S z e e hw a n
k o n j
a e f l o w e r w a s id e n t i f i e d a n d d e t e r m i n e 〔! . I t 1 5 f o u n d 才h a t rh e g l u e o m a n n a n
1 5 o n l y e o m p o s e d o f D
一
g l u e o s e a n d D
一 m a n n o s e w i t h D g l u e o s e : m a n n o : e = 1 : 2
K E Y W O R D S : K o n }a
e ; G I一; e o m a n n a n ; G l u e o s e M a n n o s e ; M o l a : ; a t i o
」