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Cr~(3+)胁迫对荠菜幼苗叶绿素含量及抗氧化酶活性的影响



全 文 :湖 北 农 业 科 学 2009 年
收稿日期:2009-04-04
基金项目:南京晓庄学院重点课程生态学资助项目(200401)。
作者简介:王小平(1969-),男,江苏南京人,讲师,(电话)025-86178270(电子信箱)wangxpb@163.com。
第 48 卷第 8 期
2009年 8 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol. 48 No.8
Aug.,2009
随着人类社会生活的不断进步、现代工业的发
展,使环境污染问题倍受人们关注。 在工业排放的
“三废”中,尤其是废水中可能含有有毒重金属,如
汞、铅、铬等,这些重金属离子通过各种途径进入农
业生态系统环境中,使土壤和水体受到污染,进而
影响农作物的生长和品质。野生植物荠菜(Capsella
bursa-pastoris var.sativa)营养丰富,有着食用、药用
等多种价值[1]。 在一些地区已进行人工栽培荠菜来
满足市场需求。 目前,关于重金属对农作物中小麦、
番茄和玉米等的研究较多[2-4],而对荠菜的研究尚属
少见, 本文研究了不同浓度 Cr3+胁迫下荠菜幼苗叶
中叶绿素含量的变化, 以及植物体中 SOD、POD 和
CAT 几种抗氧化酶活性的变化规律,以探讨荠菜在
生长过程中受重金属胁迫后,植株生长生理变化的
情况,从而为生产提供相关的参考。
1 材料与方法
1.1 材料
荠菜(Capsella bursa-pastoris var.sativa)为十字
花科荠菜属草本植物,也是一种耐寒植物,在我国
分布广泛[5]。 本次试验的种子由辽宁省清原县野菜
繁育研究所提供。
1.2 方法
1.2.1 荠菜的幼苗培养与胁迫 荠菜种子用 6%的
Cr3+胁迫对荠菜幼苗叶绿素含量及抗氧化酶活性的影响
王小平,华 春,陈全战,张边江
(南京晓庄学院生命科学系,南京 211171)
摘要:采用室内砂培试验,研究了不同浓度的 Cr3+对荠菜(Capsella bursa-pastoris var.sativa)幼苗叶绿素
含量和几种抗氧化酶活性的影响。 结果显示,在低浓度 Cr3+(5~15 mg·L-1)胁迫时,荠菜叶中的叶绿素含
量略有增加,表现出低浓度 Cr3+能刺激叶绿素的合成、而高浓度 Cr3+(25~45 mg·L-1)胁迫则叶绿素含量呈
下降的趋势,这也表明随 Cr3+浓度增大对叶绿素伤害也增大。植株在受到 Cr3+胁迫时,叶片中超氧化物岐
化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的活性均受到影响,呈现出一定地规律性变化,表现
为先上升后下降的趋势,当 Cr3+浓度分别在 5 mg·L-1和 15 mg·L-1时,POD 和 SOD、CAT 的活性分别达到
最大值,而后随 Cr3+浓度增加则各酶活性呈下降趋势。
关键词:荠菜;Cr3+;叶绿素;抗氧化酶
中图分类号:S647;O614.61+1;Q845.78 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2009)08-1938-03
Effects of Cr3+ Stress on the Content of Chlorophyll and the Activity of Antioxidant
Enzymes in Shepherdspurse Seedlings
WANG Xiao-ping,HUA Chun,CHEN Quan-zhan,ZHANG Bian-jiang
(Life Science Department of Nanjing Xiaozhuang University, Nanjing 211171, China)
Abstract: Effects of different Cr3+ concentration on the contents of chlorophyll and the activity of antioxidant enzymes in
shepherdspurse (Capsella bursa-pastoris var.sativa) were studied with the method of indoor sand-culture. The results showed
that lower concentration of Cr3+ (5~15 mg·L-1) ion led the content of chlorophyll in the leaves to increase, higher concentra-
tion of Cr3+ (25~45 mg·L-1) ion led the content of chlorophyll to decrease. When the plant was stressed by Cr3+,its activity
of SOD, CAT and POD gradually increased first and decreased then. When the concentration of Cr3+ was 5 mg·L-1, the POD
activity reached the maximum, and when it was 15 mg·L-1, SOD and CAT activity reached the maximum.
Key words:Shepherdspurse(Capsella bursa-pastoris var.sativa); Cr3+; chlorophyll; antioxidant enzymes
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2009.08.053
第 8 期

绿



/m

g-
1
0 5 15 25 35 45
Cr3+/mg·L-1
H2O2消毒 1 h后,用自来水冲洗干净,然后放入清水
浸泡 24 h,播种于装有石英砂的塑料盆中。 萌发后,
用 Hoagland培养液(用去离子水配制)浇灌。待苗长
至 4 叶 1 心时,选取长势一致的植株移入含有石英
砂的盆中,每盆植 6 株;6 盆为一试验组,其中 5 盆
为处理组,并编号为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ,另 1 盆为对
照组Ⅵ;置于智能人工气候箱中培养,培养条件是
温度 20℃、每天光照 12 h、光强 100 μmol·m-2·s-1、相
对湿度 70%。 开始用 Hoagland培养液浇灌,每天浇
灌 1~2 次,15 d后开始用 Hoagland 溶液作为母液配
制 CrCl3浓度为 5、15、25、35 和 45 mg·L-1的新鲜培
养液,并分别对应浇灌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ盆中的植
株,且用 Hoagland 溶液浇灌对照组Ⅵ,第 7 天开始
进行生理生化指标的测定。 各处理及测定均设 3 次
重复。
1.2.2 叶绿素含量、SOD、POD、CAT 的测定 叶绿
素含量的测定参照文献[6]中的分光光度法,测定
结果用 mg·g-1表示。 SOD的测定采用南京建成生物
工程公司的 SOD 试剂盒测定,SOD 抑制率达 50%
为 1个亚硝酸盐单位,以 U·mL-1表示。 POD的测定
按参照文献[6]中的愈创木酚法测定,酶活性以每
克植物鲜重每分钟吸光度变化值(△470·g-1·min-1)表
示。 CAT 的测定参照文献[7]中的过氧化氢酶活性
分光光度法测定,酶活性以每克植物鲜重每分钟吸
光度的变化值(△240·g-1·min-1)表示。
2 结果与分析
2.1 不同浓度 Cr3+对荠菜叶绿素含量的影响
不同浓度的 Cr3+胁迫对叶绿素含量的影响较为
明显(图 1)。 当植株受到低浓度 Cr3+(5~15 mg·L-1)
胁迫时,叶绿素的含量有一定幅度地增加,且当浓
度为 15 mg·L-1时,含量达到最高,此时比对照组增
加了 37.7%。但随着胁迫浓度的增加,叶绿素含量呈
下降趋势,且 Cr3+浓度为 45 mg·L-1时,植株叶绿素
含量最低,为对照组的 41.8%。 试验过程表明,植株
受到 Cr3+胁迫后,叶绿素 a、叶绿素 b 的变化情况较
为相似,但从数据上看,低浓度仅对叶绿素 b 影响
较大,高浓度对叶绿素 a、b的影响均较大。
2.2 不同浓度的 Cr3+胁迫对荠菜 SOD活性的影响
SOD 是植物体内清除自由基的关键酶之一,它
能催化生物体内分子氧活化的第一个中间产物·O2-
发生歧化反应,生成 O2和 H2O2[8]。试验结果表明,当
植株受到低浓度 Cr3+胁迫后, 荠菜幼苗叶中的 SOD
活性呈上升趋势, 且在浓度为 15 mg·L-1时达到最
大值,比对照组植株增加了 51%;随着 Cr3+浓度的增
加,荠菜幼苗 SOD 活性呈下降的趋势,且 45 mg·L-1
Cr3+处理的荠菜幼苗 SOD 的活性最低, 比对照组植
株少了 60%(图 2)。这些变化与 SOD在植物体中的
作用有关,如植株处于逆境时,它可以及时清除自
由基和活性氧,提高植物的抗氧化能力,但此作用
是在一定范围表现的,超过这个范围则作用会降低。
2.3 不同浓度的 Cr3+胁迫对荠菜 POD活性的影响
试验表明,当 Cr3+浓度≤5 mg·L-1时,荠菜幼苗
叶中的 POD活性明显增强,且浓度在 5 mg·L-1时达
到最大值,随着 Cr3+胁迫浓度的增加,则与前面 SOD
的变化类似, 同样也表现出先上升后下降的趋势
(图 3)。 在 5~25 mg·L-1 Cr3+处理范围内,POD 活性
下降的幅度较为平缓; 而在 25~45 mg·L-1 Cr3+处理
下,POD 活性下降的幅度较大,且在 35 mg·L-1时出
现低于对照组的现象, 并且以浓度为 45 mg·L-1时
最低。
图 1 Cr3+胁迫下叶绿素含量的变化
叶绿素 b 含量
叶绿素 a 含量
叶绿素总含量
图 2 Cr3+胁迫下 SOD 活性的变化
0 5 15 25 35 45
Cr3+/mg·L-1
300
250
200
150
100
50
0
SO
D/

m
L-
1
0 5 15 25 35 45
Cr3+/mg·L-1
0.30
0.25
0.20
0.15
0.10
0.05
0
PO
D
/△
47

g-
1 ·
m
in
-1
图 3 Cr3+胁迫下 POD 活性的变化
1.0
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0.0
王小平等:Cr3+胁迫对荠菜幼苗叶绿素含量及抗氧化酶活性的影响 1939
湖 北 农 业 科 学 2009 年
2.4 不同浓度的 Cr3+胁迫对荠菜 CAT活性的影响
CAT 能有效地降低植物体内的过氧化氢对细
胞的氧化作用,因此,植物体内存在 CAT 是其保护
自身免受活性氧自由基毒害的关键因素之一 [8]。 试
验表明,当植株受到低浓度 Cr3+胁迫时,CAT 活性呈
增加趋势,当浓度为 15 mg·L-1时活性达到最大(图
4), 这可能与植株在低浓度 Cr3+胁迫下, 植物体内
H2O2出现积累有关。 随着胁迫浓度的进一步增大,
CAT 活性呈下降趋势, 并在浓度为 35 mg·L-1 时,
CAT 活性低于对照组。 这可能是由于在此浓度时,
SOD 和 POD 的活性都减弱了, 使植物体内的·O2-、
自由基等含量升高,从而造成 CAT受损。
3 讨论
研究表明, 在低浓度 Cr3+胁迫下,SOD、POD 和
CAT 的活性受到活性氧自由基的诱导而上升以清
除·O2-等活性自由基。 试验表明,在≤5 mg·L-1Cr3+处
理时,荠菜叶中的 POD活性明显升高,且达到最大,
随着 Cr3+浓度的逐渐增大,POD活性呈下降趋势;在
5~15 mg·L-1 Cr3+处理时,SOD和 CAT的活性也呈增
加趋势, 随着 Cr3+浓度的进一步增大,SOD 和 CAT
的活性都呈下降趋势。 这表明在重金属离子的胁迫
下,SOD、POD 和 CAT 等抗氧化酶在活性氧等的清
除中起着重要的作用,这些酶活性的高低与植物抗
逆性的大小有一定地相关性。 但它们只能在一定程
度上清除植物体内活性氧等有害物质,以维持活性
氧的代谢平衡,降低脂质过氧化作用[9],减轻重金属
离子对细胞的伤害; 当胁迫离子浓度超过一定量
时,植物体受害明显,大量的·O2-使膜脂过氧化、影
响了蛋白质合成 [10],导致 SOD、POD 和 CAT 的活性
下降。
重金属 Cr3+胁迫荠菜幼苗时, 荠菜幼苗中叶绿
素含量变化呈先升后降的趋势,这和荠菜的防御机
制有关,当低浓度的重金属刺激荠菜幼苗时,其体
内产生防御性反应,生成相应的解毒物质。 研究表
明,植物受重金属离子胁迫时,可使活性氧、自由基
清除酶的活性增加,清除由于重金属作用而生成的
活性氧[11],使叶绿素的伤害减少或合成速度有所加
快,叶绿素的含量呈上升趋势。 但是当胁迫浓度进
一步加大以至超过了荠菜的承受能力时,超量的重
金属直接破坏解毒物质, 而且形成大量的活性氧、
自由基等, 这些物质直接把叶绿素等作为靶分子,
破坏叶绿素分子结构。 从而使叶绿素的含量降低,
影响植物的光合作用。 Cr3+在低浓度时,荠菜幼苗的
叶绿素含量增加, 而高浓度时则叶绿素含量下降,
这也说明了荠菜对重金属离子胁迫产生的适应性
是有一定条件的。
参考文献:
[1] 江苏植物研究所. 江苏植物志 (下)[M]. 南京: 江苏科技出版
社,1982.247.
[2] 陈 宏,徐秋曼,王 葳,等.镉对小麦幼苗脂质过氧化和保护酶
活性的影响[J].西北植物学报,2000,20(3):399-403.
[3] 杨双春,刘 玲,潘 一,等.Hg2+,Cd2+胁迫对玉米生理生态的影
响[J].辽宁石油化工大学学报,2004,24(3):62-65.
[4] 丁海东,万延慧,齐乃敏,等.镉和锌对番茄幼苗抗氧化酶活性的
影响[J].仲恺农业技术学院学报,2004,17(2):37-41.
[5] 吴征镒.中国植被[M].北京:科学出版社,1983.1203.
[6] 张志良,瞿伟菁.植物生理学实验指导[M]. 北京:高等教育出版
社,2003.67-70,123-124.
[7] 徐镜波,袁晓凡,郎佩珍 .过氧化氢酶活性分光光度法测定[J].
环境化学,1997,16(1):73-76.
[8] 潘瑞炽 . 植物生理学 [M]. 第五版 . 北京: 高等教育出版社,
2004.282-286.
[9] 吴雪霞, 查丁石, 邰 翔. 低温胁迫对茄子幼苗生长、 抗氧化
酶活性和渗透调节物质的影响 [J]. 江苏农业学报,2008,24
(4):471-475.
[10] 常福辰,施国新,丁小余,等. Cd2+、Hg2+复合污染下金鱼藻的细
胞膜脂过氧化和抗氧化酶活性的变化[J].南京师范大学学报
(自然科学版),2002,25(1):44-48.
[11] 何翠屏,王慧中.重金属镉、铅对草坪植物根系代谢和叶绿素水
平的影响[J]. 湖北农业科学,2003(5):60-63.
0.12
0.10
0.08
0.06
0.04
0.02
0
图 4 Cr3+胁迫下 CAT 活性的变化
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(责任编辑 王 珞)
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