免费文献传递   相关文献

田皂角水提物药理作用的实验研究



全 文 :*基金项目:广西中医药管理局中医药科技专项课题(编号:GZKZ09-45)
 作者简介:李燕婧(1979~),女,助理研究员,主要从事中药药理研究工作。
田皂角水提物药理作用的实验研究*
李燕婧,钟正贤,陈家源,卢文杰
(广西中医药研究院,广西 南宁 530022)
  摘 要:目的:观察田皂角水提物的药理作用。方法:采
用试管法抗菌、耳廓肿胀法、扭体法、皮肤过敏试验和急性毒
性试验,进行抗菌、抗炎、镇痛、抗过敏试验。结果:田皂角水
提物可抗菌;减轻小鼠耳廓肿胀;减少小鼠扭体次数;降低皮
肤过敏反应。急性毒性试验表明,田皂角水提物的最大给药
量为150g生药/kg。结论:田皂角水提物具有一定的抗菌、抗
炎、镇痛和抗过敏作用。
关键词:田皂角水提物;药理试验;抗菌;抗炎;镇痛;抗
过敏
中图分类号:R285 文献标识码:A
文章编号:1007-2349(2011)12-0063-02
田皂角(Aeschynornene indicaL.)别名合萌、水皂角。为
蝶形花科植物田皂角,分布于华北、华东、中南、西南等地。味
甘、苦,性微寒。可清热利湿,祛风明目,通乳。主治热淋、血
淋、水肿、泄泻、痢疾、目赤肿痛等症[1]。关于其化学成分和药
理研究未见报道。本文根据其民间功用,对田皂角水提物进
行相关药理试验,以期发现新的药用途径,为临床应用提供科
学依据。现将研究报告如下。
1 实验材料
1.1 受试药物 田皂角水提物(5.19g生药/g膏),由本院中
药化学研究所提供。实验时用蒸馏水研磨配制成药液备用。
阿司匹林肠溶片为武汉远大制药集团股份有限公司产品,批
号:081101。地塞米松为天津药业集团新郑股份有限公司产
品,批号:090611。息斯敏,西安杨森制药有限公司产品,批
号090218967。
1.2 动物 昆明种小鼠,清洁级,体重18~22g,雌雄各半。
由广西医科大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK 桂
2003—0003。小鼠分性别饲养于空调实验室内,室温:(22±2)℃,
相对湿度:(60±2)%,喂颗粒标准饲料,自由饮水和摄食。
1.3 仪器 722型光栅分光光度计,上海分析仪器三厂产品。
FA1004-型万分之一电子天平,上海精密科学仪器有限公司
产品。
1.4 统计学方法 采用PEMS 3.1统计软件分析数据。所
得实验数据以均数±标准差(-x ±s)表示,组间比较采用t
检验。
2 方法与结果
2.1 抗菌试验 取田皂角水提物用水配制成试验药液,
115℃高压灭菌20min,备用。采用液体试管二倍稀释法,用
营养肉汤培养基、改良马丁培养基将供试液作系列稀释,使药
液浓度为1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、
1∶256、1∶512、1∶1024,分装试管,每管1.0mL,第11管作
为阳性对照,第12管作为阴性对照。除阴性对照管外,每管
接种100,000CFU/mL相应菌液0.1mL,分别接种大肠埃希
菌、乙型副伤寒沙门菌、福氏志贺氏菌、铜绿假单胞菌、金黄色
葡萄球菌、表皮葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌。细菌
置35℃~37℃培养24h,真菌置25 ℃~28 ℃培养24~
48h,将各管培养物分别接种于相应的不含药物的琼脂培养
基平板上,细菌置35 ℃~37 ℃培养24h,真菌置25℃~
28℃培养24~48h,以生长菌落不超过5个者为田皂角水提
物的最小抑菌浓度(MIC)。结果见表1。
表1 田皂角水提物体外抑菌试验结果
试验菌种 菌号
药物最低抑菌浓度(MIC)
稀释度 药物浓度/mg·mL-1
金黄色葡萄球菌 26003  1∶32  11.71
表皮葡萄球菌 26069  1∶16  23.43
大肠埃希杆菌 44102  1∶16  23.43
乙型副伤寒沙门菌 50094  1∶4  93.75
福氏志贺氏菌 51572  1∶8  46.87
铜绿假单胞菌 10104  1∶8  46.87
枯草芽孢杆菌 63501  1∶32  11.71
白色念珠菌 10104  1∶16  23.43
  结果表明,田皂角水提物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆
菌有较强抗菌作用;对白色念珠菌、大肠杆菌、表皮葡萄球菌
具有中度的抗菌作用;对乙型副伤寒沙门菌、福氏志贺氏菌、
铜绿假单胞菌具有低度抗菌作用。
2.2 对醋酸所致小鼠扭体次数的影响[2] 取小鼠50只,雌
雄各半,随机分为空白对照组,田皂角水提物高、中、低剂量
(15.0、7.5、5.0g/kg)组和阳性药阿斯匹林(0.2g/kg)组,每
组10只。每天灌胃给药1次,空白对照组给予等体积蒸馏
水,连续给予5d。于末次给药后1h,每只小鼠腹腔注射
0.6%醋酸溶液0.2mL/只,立即观察并记录20min内各小鼠
362011年第32卷第12期          云 南 中 医 中 药 杂 志
DOI:10.16254/j.cnki.53-1120/r.2011.12.034
的扭体次数。比较给药组与对照组之间的差异,评价受试药
物的镇痛作用。结果见表2。
表2 田皂角水提物对醋酸所致小鼠扭体反应的影响(-x ±s,n=10)
组别 剂量/g·kg-1 扭体次数
空白对照组 — 19.8±13.9
阿司匹林 0.2  7.8±5.3*
田皂角水提物 15.0  8.8±6.1*
田皂角水提物 7.5  8.2±4.5*
田皂角水提物 5.0  12.9±10.3
  与空白对照组比较,*P<0.05
结果表明,与空白对照组比较,田皂角水提物大、中剂量
组及阿司匹林组均明显减少小鼠扭体次数,提示田皂角水提
物具有一定镇痛作用。
2.3 对巴豆油所致小鼠耳廓肿胀的抑制作用[3] 取小鼠50
只,雌雄各半,随机分为空白对照组,田皂角水提物高、中、低
剂量(15.0、7.5、5.0g/kg)组和阳性药地塞米松(0.0045g/
kg)组,每组10只。用药各组每天灌胃给药1次,空白对照组
给予等体积蒸馏水,连续给予7d。于末次给药0.5h后,用微
量注射器取(0.05mL 2%)巴豆油溶液涂于小鼠右耳,待4h
后处死小鼠。立即用口径为8mm的打孔器,沿着小鼠左右
耳廓相同部位打孔取材,然后在电子天平上分别称重,以两耳
片重量(mg)的差值作为肿胀程度指标,并求出百分抑制率
(%)。结果见表3。
表3 田皂角水提物对巴豆油引起小鼠耳廓肿胀的影响(-x ±s,n=10)
组别 剂量/g·kg-1 肿胀度/mg 抑制率(%)
空白对照组 — 17.09±4.39 —
地塞米松 0.0045  11.62±4.14* 32.0
田皂角水提物 15.0  13.25±2.55* 22.5
田皂角水提物 7.5  12.98±3.11* 24.0
田皂角水提物 5.0  13.90±5.63  18.7
  与空白对照组比较,*P<0.05
  结果表明,与空白对照组比较,田皂角水提物大、中剂量
组及地塞米松组均可明显降低小鼠耳廓肿胀度,提示田皂角
水提物具有抗炎作用。
2.4 小鼠被动皮肤过敏试验[4] 抗原:医用天花粉。佐剂:
4%氢氧化铝凝胶。临用时以3.75mg天花粉溶于1.5mL氢
氧化铝凝胶中。致敏:健康小鼠10只,体重18~22g,将上述天花
粉氢氧化铝凝胶混悬液脚掌注射,两只后脚掌各注入0.05mL,共
注射0.1mL。15d后,断头取血,离心取抗血清备用。
被动皮肤致敏:另取小鼠50只,雌雄各半,随机分为空白
对照组,田皂角水提物高、中、低剂量(15.0、7.5、5.0g/kg)组
和阳性药息斯敏(0.01g/kg)组,每组10只。每天ig给药1
次,正常对照组给予等体积蒸馏水,连续给予7d。取上述血
清(10只致敏小鼠的混合抗血清)加生理盐水稀释成1∶5,每
鼠腹壁皮内注射两个点(相距0.2cm),每点0.03mL。并再
连续给药2d,于末次给药12h后,每只小鼠进行抗原攻击,尾
静脉注射天花粉2.5mg/mL(用1%伊文思蓝—生理盐水配
制)0.2 mL/只,20 min后处死动物,剪下腹部蓝斑皮肤
(0.5g),剪碎,浸泡于丙酮生理盐水溶液(7:3)5mL中48h,
离心取上清液,用分光光度计610nm波长测定吸收度,并作
组间比较,评价药物的抗过敏作用。结果见表4。
表4 田皂角水提物对小鼠被动皮肤过敏反应的影响(-x ±s,n=10)
组别 剂量/g·kg-1 光密度值(OD)
空白对照组 - 0.369±0.150
息斯敏 0.01  0.083±0.045**
田皂角水提物 15.0  0.246±0.057*
田皂角水提物 7.5  0.253±0.041*
田皂角水提物 5.0  0.222±0.081*
  与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01
  结果表明,与空白对照组比较,田皂角水提物大、中、小剂
量组及息斯敏组均明显降低小鼠皮肤蓝斑吸光度,提示田皂
角水提物具有抗皮肤过敏作用。
2.5 急性毒性试验 取昆明种小鼠40只,雌雄各半,分为对
照组和给药组,小鼠禁食24h不禁水。将田皂角水提物用蒸
馏水配制成最大浓度,以最大给药体积(0.4mL/10g体重)的
药液灌胃给药,24h内给药3次,对照组给予蒸馏水,连续观
察14d,记录动物体重、外观、食欲、行为活动、死亡等毒副反
应情况。结果小鼠体重正常增长,无明显毒副作用。测出田
皂角水提物的最大给药量为150g生药/kg体重。
3 小结与讨论
根据田皂角具有清热解毒、止痛杀虫的功效及民间应用,
临床上也有以合萌为主治疗肾炎取得良效的报道[5],本研究
对田皂角提取物设计了抗菌、抗炎、镇痛、抗过敏等实验。结
果表明,田皂角水提物具有抗菌;减轻小鼠耳廓肿胀;减少小
鼠扭体次数;降低皮肤过敏反应,具有一定的抗菌、抗炎、镇
痛、抗过敏等药理作用,且毒性很小。目前研究也从田皂角中
分离出多种化学成分,推测这些药理作用可能与该植物所含
的生物碱、黄酮类、多糖等化学物质有关,对于其他方面的药
理作用仍待进一步研究。
参考文献:
[1]国家中医药管理局 .中华本草[M].上海:上海科技出版社,1999:
4~2939.
[2]吴虹,魏伟,宋礼华 .栀子总苷的抗炎镇痛作用[J].中国中医药信
息杂志,2006,13(7):31.
[3]王璐,高菊珍,张红宇,等 .雪上一枝蒿速效止痛搽剂的抗炎镇痛
作用研究[J].中药药理与临床,2005,21(4):52.
[4]徐叔云 .药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,2003:1409.
[5]李渡 .以合萌为主药治疗肾脏病体会[J].河南中医,1991,
11(6):33.
(收稿日期:2010-09-13)
46 云 南 中 医 中 药 杂 志          2011年第32卷第12期