全 文 ：西北林学院学报 ２０１４，２９（２）：１９６～２０１
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－７４６１．２０１４．０２．３５
收稿日期：２０１３－０６－２７ 修回日期：２０１３－０８－１５
基金项目：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项基金（中国农业科学院草原研究所）。
作者简介：吴洪新，男，助理研究员，研究方向：牧草资源开发与利用。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｕｈｏｎｇｘｉｎ１６８＠１６３．ｃｏｍ
尖叶胡枝子总黄酮提取与纯化研究
吴洪新１，陈 晨２
（１．中国农业科学院 草原研究所，内蒙古 呼和浩特０１００１０；２．内蒙古农业大学，内蒙古 呼和浩特０１００１０；）
摘 要：以总黄酮提取率为考查指标，采用单因素试验和正交试验方法对尖叶胡枝子中黄酮类化合
物的提取工艺进行优化，最佳提取工艺为：７０％的乙醇，提取温度为７０℃，固液比为１∶２０，提取时间
为２ｈ。同时，将提取的粗黄酮进一步的分离纯化，最终得到８个黄酮类的化合物，分别为荭草素、异
荭草素、牡荆苷、异牡荆苷、异杨梅树皮苷、槲皮素－３－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖苷、木犀草素－７－Ｏ－葡萄糖苷及６－ｘｙ－
ｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌｕｔｅｏｌｉｎ。尖叶胡枝子富含有较好药理活性的碳苷黄酮，作为一种植物资源，具有广阔的开
发利用前景。
关键词：尖叶胡枝子；黄酮；提取；分离与纯化
中图分类号：Ｓ７１８．４３ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１－７４６１（２０１４）－０２－０１９６－０６
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ＦｒｏｍＬｅｓｐｅｄｅｚａ ｈｅｄｙｓａｒｏｉｄｅｓ
ＷＵ Ｈｏｎｇ－ｘｉｎ１，ＣＨＮＥ Ｃｈｅｎ２
（１．Ｇｒａｓｓｌａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ ＣＡＡＳ ，Ｈｕｈｈｏｔ，Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｏｌｉａ ０１００１０，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｏｌｉａ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｕｈｈｏｔ，Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｏｌｉａ ０１００１０，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｆｒｏｍｌｅｓｐｅｄｅｚａ ｈｅｄｙｓａｒｏｉｄｅｓ ｗｅｒｅ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ ｂｙ
ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ．Ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｗａｓ ｆｕｒｔｈｅｒ ｐｕｒｉｆｉｅｄ．Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｓｏｌｖｅｎｔ：
７０％ｅｔｈａｎｏｌ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ：７０℃，ｒａｔｉｏ ｏｆ ｍａｔｅｒｉａｌ ｔｏ ｓｏｌｖｅｎｔ：１∶２０，ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ：２ｈ．Ｅｉｇｈｔ ｆｌａ－
ｖｏｎｏｉｄｓ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｂｙ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｍｅｔｈｏｄ，ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｓ ：ｏｒｉｅｎｔｉｎ，
ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ，ｖｉｔｅｘｉｎ，ｉｓｏｖｉｔｅｘｉｎ，ｉｓｏｍｙｒｉｃｉｔｒｉｎ，ｍｅｌｅｔｉｎ－３－Ｏ－β－ｄ－ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ，ｌｕｔｅｏｌｉｎ－７－Ｏ－ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ，ａｎｄ ６－ｘｙ－
ｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌｕｔｅｏｌｉｎ．ｉｎ ｗｈｉｃｈ ｉｎ ｔｈｅ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｗｅｒｅ ｍｏｓｔｌｙ Ｃ－ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｌｅｓｐｅｄｅｚａ ｈｅｄｙｓａｒｏｉｄｅｓ；ｆｌａｖｏｎｏｉｄ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ
胡枝子属（Ｌｅｓｐｅｄｅｚａ Ｍｉｃｈｘ．）隶属于豆科（Ｌｅ－
ｇｕｍｉｎｏｓａｅ），全世界约有６０余种，分布区域较广，横
跨太平洋形成东亚－北美洲间断分布，向北可达亚寒
带，寒带边缘，向南可到澳大利亚。《中国植物志》记
载我国有胡枝子属植物２６种，其中有２个变种［１］。
胡枝子属植物多为民间常用中草药，２０世纪六、七
十年代国内外就有科研人员开展了对其化学成分的
研究，已从该属的圆叶胡枝子、兴安胡枝子、短梗胡
枝子、大叶胡枝子、山豆花、美丽胡枝子等中分离出
６４ 种黄酮类化合物［２］，尖叶胡枝子（Ｌｅｓｐｅｄｅｚａ
ｈｅｄｙｓａｒｏｉｄｅｓ）为胡枝子属多年生植物，抗逆性强，
适应性广，营养丰富，家畜喜食，是保持水土、改良草
地和建植人工草地的优良豆科牧草［３］。尖叶胡枝子
具有较好的药用价值，据《全国中草药汇编》记载：全
株可入药，用于止泻、利尿，有一定的止血功效，主要
用于治疗痢疾、吐血、遗精及子宫下垂。黄酮类化合
物是尖叶胡枝子的主要活性物质且含量较高，据笔
者测定其叶含黄酮类占风干重的２％～４％，茎为０．
５％～０．８％。黄酮类化合物具有抗氧化清除自由
基［４－５］、雌激素作用［６－７］、扩张心血管作用、降血脂、阻
断动脉粥样硬化［８－９］、抑菌抗病毒［１０－１１］、调节免疫机
能等方面的作用。尖叶胡枝子作为牧草与药用兼用
植物，提供优质牧草的同时可为医药、保健及食品提
供高效、优质、价廉的黄酮类化合物原料，会为人类
健康做出积极长远的贡献。本研究选取分布于内蒙
古自治区的尖叶胡枝子为原料，对尖叶胡枝子黄酮
的提取、分离与纯化工艺进行研究，研究结果有望为
胡枝子的资源利用提供理论依据。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
１．１．１仪器 岛津紫外可见分光光度计２０１４、半制
备高效液相色谱仪用ＬＣ－６ＡＤ／ＲＩＤ－１０（日本Ｓｈｉ－
ｍａｄｚｕ）；ＥＳＩＭＳ用 ＡＰＩ ２０００ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ （美国
Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ），甲醇为溶剂，直接进样测定；
′Ｈ ＮＭＲ和 １３Ｃ ＮＭＲ用Ｂｒｕｋｅｒ ＤＲＸ４００型超导核
磁共振仪波谱测定（瑞士Ｂｒｕｋｅｒ），以二甲基亚砜
（ＤＭＳＯ）为内标。
１．１．２ 材料 尖叶胡枝子全株，２００７年７月２日
采于内蒙古林西县。暗处自然风干后，茎叶分离，粉
碎备用。
１．１．３ 试剂 芦丁（分析纯）、乙醚（分析纯，天津化
学试剂有限公司）、无水乙醇（分析纯，天津市化学试
剂三厂）、亚硝酸钠（分析纯，北京化工厂）、硝酸铝
（分析纯，北京化工厂）、氢氧化钠（分析纯，北京化工
厂）、蒸馏水（自制）、大孔吸附树脂柱色谱硅胶（１００
～２００目）青岛海洋化工厂；反相硅胶Ｒｐ－１８为日本
Ｎｏｍｕｒａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．Ｌｔｄ；凝胶Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ－２０
（瑞典Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）；硅胶薄层色谱板（烟
台黄务硅胶开发试验厂）、反相硅胶薄层色谱板（德
国 Ｍｅｒｃｋ公司）、柱色谱聚酰胺及聚酰胺薄层色谱
薄膜（浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂）。氘代试
剂（ＤＭＳＯ－ｄ６），甲醇（ＨＰＬＣ级）。
１．２ 试验方法
１．２．１ 胡枝子黄酮的测定 ＮａＯＨ－Ａｌ（ＮＯ３）３－
ＮａＮＯ２ 比色法测定提取物总黄酮含量［１２］。
１．２．１．１ 芦丁标准贮备液的制备 精密称取
１２０℃干燥至恒重的芦丁标准样品２０ｍｇ，用７０％乙
醇溶解后移至１００ｍｌ棕色容量瓶中，用７０％乙醇
定容至刻度，放入冰箱中备用。
１．２．１．２ 标准曲线的制备 精密吸取芦丁标准液
各０．０、１．０、２．０、３．０、４．０、５．０、６．０ｍＬ，分别置于
２５ｍＬ具塞试管中，加水至６ｍＬ起加５％亚硝酸钠
溶液１ｍＬ，使混匀，放置６ｍｉｎ，加１０％硝酸铝溶液
１ｍＬ，使混匀，放置６ｍｉｎ，加４％氢氧化钠试液１０
ｍＬ，再加水至刻度，摇匀，放置１５ｍｉｎ后在５１０ｎｍ
处测吸光值。通过吸光度得标准曲线，回归方程Ａ
＝０．０１１ ２ｘ－０．０００ ３，相关系数ｒ２＝０．９９９ ４。以
芦丁标准曲线作参照物测算总黄酮的含量，按下式
求出提取率Ｗ（％）。
Ｃ＝（Ａ＋０．００３）／０．０１１ ２ （１）
Ｗ＝（Ｃ１×Ｖ２×Ｖ１／１ ０００／Ｍ）×１００％ （２）
式中：Ｃ为待测液的浓度，Ａ为吸光值，Ｖ１ 为原虑液
定容的体积（１００ｍＬ），Ｖ２ 从原液中移取１ｍＬ定容
的溶液体积（２５ｍＬ），Ｍ 为称取的胡枝子茎（或叶）
粉末的质量，Ｃ１ 为３次重复的浓度平均值，Ｗ 为总
提取率。
１．２．２ 尖叶胡枝子总黄酮提取影响因素 取尖叶
胡枝子茎与叶各１ｇ，采用不同的醇浓度、不同浸提
时间、不同温度和固液比分次加热回流浸提，考察其
各因素对尖叶胡枝子黄酮提取率的影响。
１．２．３ 尖叶胡枝子黄酮提取条件的选择 根据１．
２．２尖叶胡枝子黄酮的影响因素的结果，分别选取提
取时间、乙醇浓度、温度及固液比４个因素进行正交
试验，以确定最佳提取条件（表１）。
表１ 正交提取的因素与水平
Ｔａｂｌｅ １ Ｆａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ Ｌ１６（４５）ｔｅｓｔ
水平
因素
Ａ（乙醇浓度／％） Ｂ（温度／℃） Ｃ（固液比） Ｄ（时间／ｈ）
１ Ａ１（５０） Ｂ１（４０） Ｃ１（１∶２０） Ｄ１（２）
２ Ａ２（６０） Ｂ２（５０） Ｃ２（１∶３０） Ｄ２（３）
３ Ａ３（７０） Ｂ３（６０） Ｃ３（１∶４０） Ｄ３（３．５）
４ Ａ４（８０） Ｂ４（７０） Ｃ４（１∶５０） Ｄ４（４）
１．２．４ 化学成分的提取 尖叶胡枝子草（２．５ｋｇ）
粉碎后放入多功能提取罐内加热回流提取，其中提
取条件按所得的最佳提取条件进行。提取３次，合
并乙醇提取液，减压浓缩后得粗提物，加水使成悬浮
液；用石油醚萃取除叶绿素后，依次乙酸乙酯、正丁
醇萃取，减压浓缩后得乙酸乙酯部及正丁醇部。
１．２．５ 化合物的分离 乙酸乙酯部经硅胶柱色谱
（１００～２００目），氯仿－甲醇（９８∶２－７０∶３０）梯度洗
脱，ＴＣＬ检测合并相同组分，黄酮类化合物集中于
氯仿－甲醇８０∶２０洗脱部分，且部分流份有黄色晶
体析出，过滤洗涤得黄色沉淀，经凝胶色谱（Ｓｅｐｈａ－
ｄｅｘ ＬＨ－２０）分离甲醇洗脱得化合物１（３０ｍｇ）及化
７９１第２期 吴洪新 等：尖叶胡枝子总黄酮提取与纯化研究
合物３（２０ｍｇ）。将滤液浓缩成浸膏，经聚酰胺柱
（８０～１００目）分离，乙醇水溶液洗脱，ＴＣＬ检测合
并，黄酮集中于乙醇水３０％与５０％部。３０％部经凝
胶柱甲醇洗脱得化合物２（２８ｍｇ）及化合物４（１５
ｍｇ），将其他未分开的流分合并，经反相柱，不同浓
度梯度甲醇水（２０％～４０％）洗脱，将得到３５％的甲
醇水流分浓缩，经高效液相制备色谱制备，流动相为
３５％的甲醇水，得到化合物６（１５ｍｇ）、化合物７（１３
ｍｇ）、化合物８（１６ｍｇ），５０％部经凝胶柱分离，甲醇
洗脱得化合物５（２７ｍｇ）。整个分离过程中的薄层
定位用５％硫酸乙醇溶液喷雾、加热、显色。
１．２．６ 化合物的结构鉴定 得到的８个黄酮类化
合物用 ＨＮＭＲ、ＣＮＭＲ、ＭＳ等方法进行结构鉴定。
２ 结果与分析
２．１ 尖叶胡枝子总黄酮最佳提取工艺的确定
２．１．１ 尖叶胡枝子黄酮提取单因素试验
２．１．１．１ 乙醇浓度对尖叶胡枝子总黄酮提取率的
影响 由图１可知，尖叶胡椒子叶中，随着乙醇浓度
的升高，黄酮提取量增大，而对茎中黄酮的提取影响
不大。
图１ 乙醇浓度对总黄酮提取率的影响
Ｆｉｇ．１ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｅｈａｎｏｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
２．１．１．２ 温度对总黄酮提取率的影响 由图２可
知，当提取温度＜７０℃时叶中黄酮提取量随着提取
温度的升高而变大，当提取温度＞７０℃后随着温度
的升高提取量反而变小，可能是由于叶中蛋白含量
较大，温度过高蛋白质变性，从而影响浸提效果。提
取温度对茎中黄酮提取量影响不大。
２．１．１．３ 料液比对尖叶胡枝子总黄酮量提取的影
响 由图３可知，当固液比＜１∶４０时，随着溶剂的
增大提取的黄酮量增大，当固液比＞１∶４０时，得到
的黄酮的量降低。固液比对茎中黄酮的提取量影响
不大。
２．１．１．４ 时间变化对总黄酮提取的影响 由图４
可知，当提取时间＜２．５ｈ时，随着提取时间的延长
提取的黄酮量增大，当提取时间＞２．５ｈ，随着提取
时间的增大，提取的黄酮量变化不大，当提取时间＞
４ｈ时，提取量却变小。
图２ 温度对总黄酮提取的影响
Ｆｉｇ．２ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｈｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
图３ 固液比对总黄酮提取率的影响
Ｆｉｇ．３ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｍａｔｅｒｉａｌ ｔｏ ｓｏｌｖｅｎｔ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
图４ 时间对尖叶胡枝子总黄酮提取率的影响
Ｆｉｇ．４ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｈｅ ｔｉｍｅ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
２．１．２ 尖叶胡枝子黄酮提取正交试验 由直观表
２及方差分析表３可知，影响尖叶胡枝子黄酮提取
率的因素由大到小依次为：Ａ（乙醇浓度）、Ｃ（料液
比）、Ｄ（时间ｈ）、Ｂ（温度），其中Ａ以Ａ３ 为好，Ｂ以
Ｂ４ 为好，Ｃ以Ｃ１ 为好，Ｄ以Ｄ１ 为好，因素Ａ与因素
Ｃ对提取率的影响达到极显著，而因素Ｄ对提取率
的影响较显著，因素Ｂ对提取率的影响不显著，由
于不考虑交互作用，故处理Ａ３Ｂ４Ｃ１Ｄ１ 应较优，但该
处理未在试验之列，故需作进一步的验证工作。从
正交结果中不难发现，试验组 Ａ３Ｂ３Ｃ１Ｄ２ 条件下提
取率达最高，提取率之和为８．８％，平均提取率为
２．９６％。经验证试验，在处理 Ａ３Ｂ４Ｃ１Ｄ１ 条件下进
行了５次平行试验，得到平均提取率为３．２８５％，高
８９１ 西北林学院学报 ２９卷
于在处理 Ａ３Ｂ３Ｃ１Ｄ２ 条件下的提取率２．９６％，故确
定Ａ３Ｂ４Ｃ１Ｄ１ 条件下即乙醇浓度为７０％、温度为
７０℃、料液比为１∶２０、提取时间为２ｈ为尖叶胡枝
子黄酮类化合物的最佳提取条件。
表２ 尖叶胡枝子正交试验方案及试验结果计算
Ｔａｂｌｅ ２ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ％
试验号 列 号
考察指标
Ⅰ Ⅱ Ⅲ 和Ｔｉｊｋｌ
１ Ａ１ Ｂ１ Ｃ１ Ｄ１ １ ２．９０１ ２．７１ ２．８５３ ８．４６４
２ Ａ１ Ｂ２ Ｃ２ Ｄ２ ２ ２．３３８ ２．３９５ ２．１６５ ６．８９８
３ Ａ１ Ｂ３ Ｃ３ Ｄ３ ３ ２．４４８ ２．４２１ ２．３９６ ７．２６５
４ Ａ１ Ｂ４ Ｃ４ Ｄ４ ４ ２．２４７ ２．２５８ ２．２１ ６．７１５
５ Ａ２ Ｂ１ Ｃ２ Ｄ３ ４ ２．３９９ １．９８７ ２．１３１ ６．５１７
６ Ａ２ Ｂ２ Ｃ１ Ｄ４ ３ ２．６７９ ２．６５４ ２．６８８ ８．０２１
７ Ａ２ Ｂ３ Ｃ４ Ｄ１ ２ ２．５７６ ２．６４０ ２．６５５ ７．８７１
８ Ａ２ Ｂ４ Ｃ３ Ｄ２ １ ２．８６０ ２．９５６ ２．８５３ ８．６６９
９ Ａ３ Ｂ１ Ｃ３ Ｄ４ ２ ２．９２９ ２．９３７ ２．９１７ ８．７８３
１０ Ａ３ Ｂ２ Ｃ４ Ｄ３ １ ２．７８２ ２．９３６ ２．８２４ ８．５４２
１１ Ａ３ Ｂ３ Ｃ１ Ｄ２ ４ ２．９６９ ２．８１ ３．０２１ ８．８００
１２ Ａ３ Ｂ４ Ｃ２ Ｄ１ ３ ２．９３６ ２．８５７ ２．８７６ ８．６６９
１３ Ａ４ Ｂ１ Ｃ４ Ｄ２ ３ ２．８１９ ２．９０９ ２．７８６ ８．５１４
１４ Ａ４ Ｂ２ Ｃ３ Ｄ１ ４ ２．６７１ ２．８０５ ２．８８２ ８．３５８
１５ Ａ４ Ｂ３ Ｃ２ Ｄ４ １ ２．８６０ ２．８０４ ２．９０６ ８．５７０
１６ Ａ４ Ｂ４ Ｃ１ Ｄ３ ２ ２．７５８ ２．９３８ ２．９６９ ８．６６５
Ｋ１ ２９．３４２ ３２．２７８ ３３．９５０ ３３．３６２ １２９．３２１（Ｔ…）
Ｋ１
Ｋ２
Ｋ３
Ｋ４
Ｒ
２９．３４２
３１．０７８
３４．７９４
３４．１０７
４．７６５
３２．２７８
３１．８１９
３２．５０６
３２．７１８
０．４４０
３３．９５０
３０．６５４
３３．０７５
３１．６４２
２．４２１
３３．３６２
３２．８８１
３０．９８９
３２．０８９
２．３７３
Ｃ＝Ｔ
２…
４８
表３ 尖叶胡枝子方差分析
Ｔａｂｌｅ ３ Ｖａｒｉａｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｔａｂｌｅ ｏｆ Ｌ．ｈｅｄｙｓａｒｏｉｄｅｓ
方差来源 ｄｆ ＳＳ ＭＳ Ｆ Ｆａ
Ａ ３ １．６４ ０．５５ ２０．９８＊＊ Ｆ０．０５（３，３５）＝２．２８
Ｂ ３ ０．０４ ０．０１ ０．４７ Ｆ０．０１（３，３５）＝４．４０
Ｃ ３ ０．５４ ０．１８ ６．８８＊＊
Ｄ ３ ０．２７ ０．０９ ３．４３＊
误差ｅ１ ３ ０．６６
误差ｅ２ ３２ ０．２５
误差ｅ３ ３５ ０．９１ ０．０３
总和 ４７ ３．４０
２．２ 尖叶胡枝子黄酮分离与化合物鉴定结果
尖叶胡枝子７０％乙醇提取物经石油醚、乙酸乙
酯和正丁醇萃取分部，其中乙酸乙酯部通过正相硅
胶柱层析、聚酰胺、反相硅胶、ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ－２０等柱
色谱和 ＨＰＬＣ方法分离纯化，分离得到了８个黄酮
类化合物，分别为：（１）荭草素，（２）牡荆苷，（３）异荭
草素，（４）异牡荆苷，（５）槲皮素－３－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖苷，
（６）木犀草素－７－Ｏ－葡萄糖苷，（７）６－ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ－
ｌｕｔｅｏｌｉｎ，（８）异杨梅树皮苷。鉴定了这些化合物的
化学结构［１３］，其化合物结构如图５所示。
３ 结论与讨论
从单因素试验中不难发现，提取温度、乙醇浓
度、固液比及提取时间对尖叶胡枝子叶中黄酮提取
的影响较茎中黄酮提取的影响大，且茎中提取的黄
酮量低于叶中提取黄酮的量。产生这以上现象的原
因可能是由于茎中黄酮含量不如叶中的高，另外茎
的木质化程度比较高，所以改变提取条件茎中黄酮
提取的影响效果不显著。在考察单因素对黄酮提取
的影响中发现，当总黄酮达到极值后随着提取温度、
时间、的增大而提取总量会降低。说明提取温度过
高可能会破坏某些不稳定黄酮类物质的结构，提取
时间过长，会使原材料对黄酮类物质产生一定的吸
附作用，导致提取液中黄酮类物质含量降低，进而
影响到黄酮类物质的提取。
正交试验结果表明：在影响尖叶胡枝子总黄酮
的提取因素中，溶剂浓度和固液比及提取温度是影
响提取率的主要因素，提取时间影响相对较小，其中
９９１第２期 吴洪新 等：尖叶胡枝子总黄酮提取与纯化研究
最佳工艺参数：乙醇浓度为７０％、温度为７０℃、料液 比为１∶２０、时间为２ｈ。
图５ 化合物结构
Ｆｉｇ．５ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ
对尖叶胡枝子黄酮进行了单体分离及结构鉴
定，最终得到８个黄酮类的化合物，分别为：荭草素、
异荭草素、牡荆苷、异牡荆苷、异杨梅树皮苷、槲皮
素－３－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖苷、木犀草素－７－Ｏ－葡萄糖苷及６－
ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌｕｔｅｏｌｉｎ。其中异杨梅树皮苷、槲皮
素－３－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖苷、木犀草素－７－Ｏ－葡萄糖苷、６－
ｘｙｌｏｐｙｒａｎｏｓｙｌｕｔｅｏｌｉｎ这４个化合物均为首次从胡
枝子属植物中分离得到。尖叶胡枝子所含的黄酮类
以碳苷黄酮为主，包括荭草素（Ｏｒｉｅｎｔｉｎ）、异荭草素
（Ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ）、牡荆苷（Ｖｉｔｅｘｉｎ）和异牡荆苷（Ｉｓｏｖｉ－
ｔｅｘｔｉｎ）。据文献报道，这些化合物均有较好的生理
活性：具有一定的保肝及抗氧化作用［１４－１５］，可抑制甲
状腺过氧化酶活性及抗甲状腺和致甲状腺肿作
用［１６－１７］，具有抗Ｐａｒａ３（副流感病毒）病毒的活性、对
金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌有较强的抑制作
用［１８－１９］，对人类癌细胞显示了一定的细胞毒作
用［２０］，对心血管疾病有一定的效果。
黄酮类在大部分植物中都有分布，但受资源与
成本的限制真正用于黄酮提取的植物较少，尖叶胡
枝子作为黄酮提取的原料具有黄酮含量高、价格低、
资源丰富、无污染等优势。所以，尖叶胡枝子作为一
种植物资源具有一定的开发利用价值。
参考文献：
［１］ 赵杨，陈晓阳，骈瑞琪，等．胡枝子属研究进展［Ｊ］．西北林学院
学报，２００６，２１（２）：７１－７５．
ＺＨＡＯ Ｙ，ＣＨＥＮ Ｘ Ｙ，ＰＩＡＮ Ｒ Ｑ，ｅｔ ａｌ．Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｄｖａｎｃｅｓ ｏｆ
Ｌｅｓｐｅｄｅｚａ Ｍｉｃｈｘ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉ－
ｔｙ，２００６，２１（２）：７１－７５．（ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［２］ 王威，闫喜英，王永奇．胡枝子属植物化学成分及药理活性研
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１０２第２期 吴洪新 等：尖叶胡枝子总黄酮提取与纯化研究