全 文 ：京:中国医药科技出版社，2010:123-124．
［2］陶弘景 . 名医别录［M］. 北京:人民卫生出版社，1986:
152.
［3］唐慎微 . 证类本草［M］. 北京:人民卫生出版社，1957:
225.
［4］苏颂 . 本草图经［M］. 合肥:安徽科学技术出版社，
1994:200.
［5］林泉 . 浙江植物志［M］. 第 69 卷 . 杭州:浙江科学技
术出版社，1993:370-372，33-36 .
［6］李时珍 . 本草纲目［M］. 北京:人民卫生出版社，1977:
1285-1287.
［7］杨时泰 . 本草述钩元［M］.上海:上海科技卫生出版社，
1958:329.
［8］黄宫绣 . 本草求真［M］. 上海:上海科学技术出版社，
1959:210.
［9］吴其濬 . 植物名实图考［M］. 上海:商务印书馆，1957:
540.
［10］中国科学院北京植物研究所 . 高等植物图鉴［M］. 第
5 册 . 北京:科学出版社，1976:419 .
［11］张彤，张亚中，陶建生，等 . 中药百部中原百部碱的分
离及含量测定［J］. 中国药学杂志，2007，42(11) :812-
814.
苍耳子与刺苍耳子有效成分含量比较研究
贾 鑫，康小兰，禹惠婧，张百通，苏克梅，付雪艳*
(宁夏医科大学药学院，宁夏 银川 750004)
摘要 目的:测定苍耳子与混伪品刺苍耳子中绿原酸和总黄酮含量，通过二者含量的差异来鉴别苍耳子与刺
苍耳子。方法:采用 HPLC测绿原酸含量，色谱柱为 ODS-HYPERSIL (250 mm ×4. 6 mm，5 μm) ;流动相为 0. 5%磷
酸水溶液-甲醇梯度洗脱;流速:0. 8 mL / min;检测波长为 327 nm;柱温为室温。采用紫外分光光度法测总黄酮含
量，以芦丁为对照品，于 504 nm处测定吸光度。结果:苍耳子中绿原酸平均含量为 0. 275%，RSD 为 0. 641%，总黄
酮平均含量为 12. 68 %，RSD为 0. 59%;刺苍耳子中绿原酸平均含量为 0. 057%，RSD 为 1. 87%，总黄酮平均含量
为 5. 52%，RSD为 0. 98%。苍耳子中绿原酸含量约是刺苍耳子中绿原酸含量的 4. 8 倍，苍耳子中总黄酮含量约是
刺苍耳子中总黄酮含量的 2. 3 倍。结论:苍耳子中绿原酸和总黄酮含量都明显高于刺苍耳子中的含量，绿原酸和
总黄酮含量差异可以作为苍耳子与刺苍耳子的鉴别依据。
关键词 苍耳子;刺苍耳子;绿原酸;总黄酮
中图分类号:R282. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2011)11-1703-03
收稿日期:2011-07-13
作者简介:贾鑫(1986-) ，女，在读研究生，主要从事天然药物化学研究;Tel:15296900705，E-mail:jiaxin198761231@ 163． com。
* 通讯作者:付雪艳，Tel:13469502661，E-mail:fuxueyan1215@ yahoo，com． cn。
苍耳子为菊科植物苍耳 Xanthium sibiricum
Patr. 的干燥成熟带总苞的果实，具有散风除湿、通
鼻窍的功效，用于风寒头痛，鼻塞流涕，风疹瘙痒，湿
痹拘挛等〔1〕。目前临床上多用其复方制剂治疗各
种急慢性鼻炎，但在药品检验中有时发现以菊科植
物刺苍耳 Xanthium spinosum L. 的干燥成熟带总苞
的果实混充苍耳子药用，由于果实形态与苍耳子相
似，混入正品中很难发现。目前，主要从性状、显微、
薄层等方面〔2〕鉴别二者，但用以上方法还是很难将
二者严格区分。因此，本实验采用 HPLC 和紫外分
光光度法分别测定苍耳子与刺苍耳子中有效成分绿
原酸和总黄酮含量，通过二者所含绿原酸和总黄酮
含量的差异来区分苍耳子和刺苍耳子，为今后药材
的合理利用提供实验依据。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 日本岛津高效液相色谱仪(型号:D-
2000 ELite ) ;日本岛津紫外分光光度计(型号:UV-
2550) ;超声波清洗器(型号:KQ-500B) ;电子分析天
平(型号:Mettler EL104)。
1. 2 药品与试药 甲醇(美国 Fisher 公司，色谱
纯)、纯净水(杭州娃哈哈集团)、其余试剂均为分析
纯;芦丁对照品(购自中国药品生物制品检定所，批
号 A0130)、绿原酸对照品(中国药品生物制品检定
所，批号 MUST-11042802) ;药材均采摘自宁夏银川
市内并经宁夏医科大学药学院生药学教研室分别鉴
定为苍耳子 Xanthium sibiricum Patr. 和刺苍耳子
Xanthium spinosum L. 的干燥带总苞的果实。
2 方法与结果
2. 1 绿原酸含量测定
2. 1. 1 色谱条件〔3-5〕:色谱柱为 ODS-HYPERSIL
(250 mm ×4. 6 mm，5 μm) ，流动相 A为 0． 5 %磷酸
水溶液，B为甲醇，梯度洗脱(0 min:A∶ B = 80∶ 20;
·3071·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 34 卷第 11 期 2011 年 11 月
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2011.11.025
20 min:A∶ B = 60∶ 40;50 min:A∶ B = 50∶ 50;60 min:
A∶ B = 80∶ 20) ，流速:0. 8 mL / min，检测波长为 327
nm，柱温为室温，进样量为 20 μL。理论板数按绿原
酸峰计算应不低于 3 000。对照品和供试品色谱图
见图 1。
图 1 绿原酸对照品(A)和苍耳子样品(B)、
刺苍耳子样品(C)的 HPLC谱图
2. 1. 2 对照品溶液的制备〔6〕:精密称取绿原酸对
照品 25 mg置于 25 mL棕色容量瓶中，加入 50 %甲
醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，得 1 mg / mL 的绿
原酸对照品溶液，作为母液备用。
2. 1. 3 供试品溶液的制备:取苍耳子、刺苍耳子粉
末(过 40 目筛)各约 0. 5 g，精密称定，置 250 mL 锥
形瓶中，加入 50%甲醇溶液 90 mL，室温超声提取
30 min，过滤，将滤液用 50%甲醇定容至 100 mL，再
用 0. 45 μm的微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。
2. 1. 4 线性试验:分别精密吸取绿原酸对照品溶
液 0. 10、0. 20、0. 30、0. 40、0. 50 mL，置于 10 mL 棕
色容量瓶中，加 50 %甲醇溶液溶解并定容至刻度，
摇匀，得浓度为 10、20、30、40、50 μg /mL 的对照品
溶液，按照“2. 1. 1”项下的色谱条件分别进样，检测
吸收峰面积，以浓度 C(μg / ml)为横坐标，以峰面积
积分值 S 为纵坐标，绘制标准曲线，并计算回归方
程。结果表明:绿原酸在 10 ～ 50 μg / mL 浓度范围
内与峰面积呈良好线性关系，回归方程为 S =
28180C + 3803. 9，相关系数 r = 0. 9995(n = 5)。
2. 1. 5 稳定性试验:按照供试品溶液制备方法，将
苍耳子样品制成供试品溶液，室温下放置，分别于
0、2、8、12、24 h 进样测定，结果色谱峰面积在 24 h
内无显著差异，RSD为 0. 560%，表明供试品溶液在
24 h内稳定。
2. 1. 6 重复性试验:称取苍耳子粉末 6 份，各约
0. 5 g，精密称定，按“2. 1. 3”项下的方法制成供试品
溶液，以“2. 1. 1”项下色谱条件进样分析，结果绿原酸
峰面积的 RSD 为 1. 670%，表明该方法重现性良好。
2. 1. 7 精密度试验:取苍耳子药材，按“2. 1. 3”项
下方法制备供试品溶液，以“2. 1. 1”项下色谱条件
进行测定，连续进样 6 次，检测绿原酸峰面积积分
值，RSD 为 1. 856 %，表明精密度良好。
2. 1. 8 加样回收试验:取已知含量的苍耳子供试
品溶液，加入一定量的绿原酸对照品，按供试品溶液
测定方法操作，计算回收率，加样回收率为
98. 42%，RSD为 1. 23%，结果表明，该方法损失少，
回收率高，完全可行。
2. 1. 9 样品测定:分别称取苍耳子和刺苍耳子粉
末各约 0. 5 g，精密称定，按“2. 1. 3”项下方法制成
供试品溶液，以“2. 1. 1”项下色谱条件进样分析，测
定苍耳子与刺苍耳子样品中绿原酸的含量(n = 3) ，
结果见表 1。从表 1 可知苍耳子中绿原酸含量约是
刺苍耳子中绿原酸含量的 4. 8 倍。
表 1 宁夏野生苍耳子与刺苍耳子中
绿原酸与总黄酮含量(n =3)
样品 绿原酸含量 /%
RSD /
%
总黄酮
含量 /%
RSD /
%
苍耳子 0. 275 0. 641 12. 68 0. 59
刺苍耳子 0. 057 1. 87 5. 52 0. 98
2. 2 总黄酮含量测定
2. 2. 1 对照品溶液的制备:精密称取干燥的芦丁
对照品 10 mg置 25 mL容量瓶中，加入 60%乙醇溶
解并稀释至刻度摇匀，即得浓度为 0. 4 mg /mL 芦丁
对照品溶液。
2. 2. 2 供试品溶液的制备:取苍耳子、刺苍耳子粉
末各 3 份，每份约 2. 0 g，精密称定，置 250 mL 的具
塞锥形瓶中，加50 mL 60%乙醇溶液超声处理30 min
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(功率 500W，频率 40kHz，温度 40℃) ，过滤，用 60%
乙醇溶液定容至 50 mL，摇匀，作为供试品溶液。
2. 2. 3 测定波长的选择:精密吸取 0. 4 mg /mL 芦
丁对照品溶液 0. 8 mL 于 10 mL 容量瓶中，加 60%
乙醇至 2. 00 mL处，加入 5%亚硝酸钠试液 0. 4 mL，
摇匀，静置 6 min，加 10%三氯化铝 0. 4 mL，摇匀，静
置 6 min，再加 1 mol /L 氢氧化钠试液 4. 00 mL，用
65%乙醇定容至刻度，摇匀，静置 15 min，同时做空
白液，于 450 ～ 550 nm波长范围内扫描测定，结果最
大吸收波长为 504 nm。
2. 2. 4 标准曲线的绘制:精密吸取“2. 2. 1”项下
对照品溶液 0. 00、0. 40、0. 60、0. 80、1. 00、1. 20 mL
分别于 10 mL 容量瓶中，各加 60%乙醇至 2. 00 mL，
分别加入 5%亚硝酸钠溶液 0. 4 mL，摇匀，静置 6
min，加 10%三氯化铝 0. 4 mL，摇匀，静置 6 min，再
加 1 mol /L氢氧化钠试液 4. 00 mL，用 60%乙醇定
容至刻度，摇匀，静置 15 min，同时做空白液，以芦丁
对照品的最大吸收波长 504 nm 处测上述溶液的吸
光度，以吸光度 A 为纵坐标，取样浓度 C (mg /mL)
为横坐标制作标准曲线，得标准曲线回归方程 A =
11. 439C － 0. 0017，r = 0. 9998(n = 6) ，线性范围为
0. 016 ～ 0. 048 mg /mL。
2. 2. 5 稳定性试验:精密吸取刺苍耳子供试液 2
mL于 10 mL容量瓶中，按照“2. 2. 4”项下方法每隔
一段时间测定 1 次吸光度，结果吸光度在 2 h 内无
明显差异，RSD为 1. 5574%。表明显色后的供试液
在 2 h内稳定性良好。
2. 2. 6 精密度试验:精密吸取对照品溶液 0. 4
mL，按照“2. 2. 4”项下方法依次连续测定 6 次吸光
度，结果 RSD为 1. 3938%，表明该方法精密度良好。
2. 2. 7 重复性试验:取同一批刺苍耳子样品 6 份，
按样品溶液的制备方法分别制备供试液，并且精密
吸取供试液 2 mL于 10 mL容量瓶中，按照“2. 2. 4”
项下方法测定吸光度，结果显示 RSD 为 1. 4086%，
说明本方法重复性良好。
2. 2. 8 加标回收率试验:精密称取已知含量的刺
苍耳子粉末6份，每份约0. 2g，均加入已知含量的
表 2 刺苍耳子总黄酮加样回收率(n =6)
称样量
/ g
样品中
含量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
RSD
/%
0. 2006
0. 2004
0. 2004
0. 2005
0. 2005
0. 2005
1. 1214
1. 1202
1. 1202
1. 1208
1. 1208
1. 1208
1. 2
1. 2
1. 2
1. 2
1. 2
1. 2
2. 3207
2. 2772
2. 2989
2. 2881
2. 3098
2. 2989
99. 969
98. 147
99. 082
98. 591
99. 526
99. 056
99. 062 0. 654
芦丁标准品 1. 2 mg，按“2. 2. 2”项下的方法制备供
试品溶液;每份取 4 mL，按“2. 2. 4”项下的方法显
色，测定各份样品中吸光度，计算回收率。结果见表
2，RSD 小于 2%，说明用该方法测定样品中总黄酮
含量完全可行。
2. 2. 9 样品含量测定:分别精密量取 3 组苍耳子
供试品溶液 0. 6 mL，3 组刺苍耳子供试品溶液 1. 0
mL各于 10 mL容量瓶中，按“2. 2. 4”项下操作分别
测定吸光度，各组待测样品平行测定 3 次，计算总黄
酮含量，结果见表 1。从表 1 可知苍耳子中总黄酮
含量约是刺苍耳子中总黄酮含量的 2. 3 倍。
3 讨论
3. 1 苍耳子与刺苍耳子性状类似，极易混淆，从性
状特征和显微结构上很难将二者严格区分，本文通
过测定二者中有效成分绿原酸和总黄酮含量发现，
苍耳子中绿原酸和总黄酮含量均明显高于刺苍耳子
的含量。苍耳子中绿原酸含量约是刺苍耳子中绿原
酸含量的 4. 8 倍，苍耳子中总黄酮含量约是刺苍耳
子中总黄酮含量的 2. 3 倍。通过比较二者所含绿原
酸和总黄酮含量的差异可将二者有效区分。
3. 2 在总黄酮含量测定试验过程中，曾选取 60%
乙醇为提取溶剂，在 70℃的恒温水浴中回流提取 2
h，结果发现，回流提取方法存在耗时、耗能、提取效
率低、加标回收率较低等问题，因此实验最终选用了
超声提取法，该方法不仅提高了提取率，缩短了提取
时间，节约了溶剂，并且免去了高温对提取成分的影
响，这为今后苍耳子和刺苍耳子的提取工艺研究奠
定了一定基础。
3. 3 绿原酸与总黄酮含量可为宁夏地区野生苍耳
子与刺苍耳子的质量控制提供参考依据。
参 考 文 献
［1］国家药典委员会。中华人民共和国药典［S］. 一部 . 北
京:中国医药科技出版社，2010:151.
［2］魏有良 . 苍耳子及其混伪品的鉴别［J］. 中药材，1996，
19(10) :503-505.
［3］苟占平，万德光 . HPLC法测定 5种变种金银花中绿原酸
含量［J］. 中国中医药信息杂志，2004，11 (5) :421-423.
［4］白喜婷，朱文学，罗 磊，等 . 杜仲雄花及花茶中绿原酸
含量分析［J］. 食品工业科技，2007，28 (6) :127，216-
217.
［5］崔岚，李肖玲，祝德秋，等 . RP-HPLC 法测定石韦药材
中绿原酸的含量［J］. 中国中医药信息杂志，2003，10
(12) :31-32.
［6］明乾良，高翔，张宏，等 . 用 HPLC法测定不同地区三种
苍耳子中绿原酸的含量［J］. 药学服务与研究，2008，8
(4) :258-259.
·5071·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 34 卷第 11 期 2011 年 11 月