全 文 ：基金项目:湖北省科技攻关计划项目(编号:2006AA301B01)
通讯作者:陈科力 Tel:(027)68890106 E-mail:Kelichen@ 126． com
翠云草的生药鉴别研究
刘义梅 刘葭 陈科力 (中药资源和中药复方教育部重点实验室 湖北中医药大学 武汉 430065)
摘 要 目的:对翠云草进行系统生药鉴别研究，为翠云草的鉴定提供依据。方法:观察药材的性状特征、组织结构和粉末
显微特征; 采用 TLC法以穗花杉双黄酮为对照品定性鉴别翠云草; 测定翠云草的灰分、醇溶性浸出物。结果:建立了翠云草药
材的性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱鉴别方法，初步确定了其总灰分、酸不溶性灰分和醇溶性浸出物的限度标准。结论:为翠
云草药材的鉴定和质量评价提供了参考依据。
关键词 翠云草; 生药学研究; 质量标准
中图分类号:Ｒ282． 5 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2014)02-0232-03
Pharmacognostical Identification of Selaginellae Uncinatae Herba
Liu Yimei，Liu Jia，Chen Keli (Key Laboratory of TCM Ｒesource and Compound Prescription，Ministry of Education，Hubei Universi-
ty of Chinese Medicine，Wuhan 430065，China)
ABSTＲACT Objective:To pharmacognostically identify Selaginellae uncinatae Herba to provide reference for the identification and
utilization of Selaginellae uncinatae Herba． Methods:On the basis of observing the characters，structure and microscopic characteris-
tics of the powder，Selaginella uncinata Herba was identified by a TLC method using amentoflavone as the reference substance． The
contents of total ash，acid insoluble ash and alcohol-soluble extracts in Selaginellae uncinatae Herba were detected as well． Ｒesults:
The morphological identification，microscopic identification and TLC identification of the herb was respectively established． The content
limits of the total ash，acid insoluble ash and alcohol soluble extract were preliminarily determined． Conclusion:The studies provide
reference for the identification and quality evaluation of Selaginellae uncinatae Herba．
KEY WOＲDS Selaginellae uncinatae Herba;Pharmacognostical identification;Quality standard
翠云草［Selaginella uncinata (Desv．)Spring．］
是我国民间应用较为广范的一种中草药，收载于广
西中药材标准［1］，具有清热利湿、止咳止血、抗菌消
炎以及抗肿瘤的作用［2］。文献报道其含有穗花杉
双黄酮(Amentoflavone)以及两种抗病毒的色酮苷
(Uncinoside A 和 Uncinoside B)。药理学研究表明
穗花杉双黄酮具有较好的抗病毒和抗肿瘤作
用［3，4］。本课题组前期研究表明，翠云草提取物具
有明显的抗氧化作用，在活性部位发现含有罗波斯
塔-4-甲醚(Ｒobustaflavone 4-dimethyl ether)、罗波
斯塔双黄酮(Ｒobustaflavone)、7″-甲氧基四氢扁柏双
黄酮 (7″-O-methyltetrahydrohinokiflavone，2″，3″-二
氢-4-甲氧基 穗花杉双黄酮(2″，3″-dihydro-4-O-
methyl Amentoflavone))等［5］，这是一类具有抗病毒
和抗氧化作用的化合物。
翠云草具有丰富的活性成分和较好的临床疗
效，广西中药材标准只对其性状特征进行了描
述［1］，本文对翠云草进行了比较系统的生药鉴别研
究，现报道如下。
1 材料与仪器
药材样品于 2008 年 8 ～ 9 月采自湖北宜昌雾渡
河和湖北通山县九宫山，由中南民族大学万定荣教
授鉴定为卷柏科植物翠云草［Selaginella uncinata
(Desv．)Spring］的干燥全草。穗花杉双黄酮对照品
(实验室自制，经测定纯度达到 99%);甲醇、乙醇、
氯仿为分析纯，水为去离子水。
普通光学显微镜(日本 OLYMPUS 光学工业株
式会社)，显微描绘器及自制显微描绘装置;AP-
9908S 滤过器(Automatic Science lastrument Co． ltd);
BP-211D型十万分之一分析天平(西德 Sartorius)硅
胶 G(青岛海洋化工厂)。
2 方法与结果
2． 1 性状鉴别
取干燥全草，按药材性状鉴定的方法，观察各部
的形态特征。
药材性状特征:全株 30 ～ 60 cm，主茎纤细而弯
曲或扭曲，直径0． 5 ～ 1 mm，有纵棱，淡黄色或黄绿
色。下部分枝或茎顶常具有细长的不定根。小枝互
生，羽状或叉状分枝。主茎上叶较大，疏生，卵形或
卵状椭圆形，全缘。分枝上的叶二型，密生，背腹各
两列，黄绿色到浅绿色，展平后腹叶长卵形，背叶羽
状排列，全缘，矩圆形或长圆形。孢子囊穗四棱拄
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形，长约 1 cm，生于枝端，质较柔嫩，具草腥气，味微
涩微甜。
2． 2 显微鉴别
制作药材茎中段(距地面 10 cm)横切片，用水
合氯醛试液透化后，加稀甘油装片，置显微镜下观
察，结果与文献一致［6］;制作药材茎中部侧叶的表
面片，观察叶缘细胞特征，结果与文献一致［7］;制作
药材粉末片，观察并绘制其粉末显微特征图(图 1)。
1．淀粉粒 2．气孔 3．叶上表皮细胞 4．叶下表皮细胞
5．木栓细胞 6．孢子 7．叶边缘细胞 8．管胞 9．茎表皮
图 1 翠云草粉末显微特征图
药材粉末特征:本品粉末翠绿色，淀粉粒多数，
单粒或复粒。气孔不定式，副卫细胞 5-6 个，多分布
在叶脉左右及叶边缘。木栓细胞呈类方形或不规则
多角形，壁平直或弯曲。孢子类圆形，表面呈刺状突
起。叶边缘细胞长条形，尖端钝圆，微向外延伸;其
内的上表皮细胞呈长条形，垂周壁呈深波状弯曲或
微波状弯曲;近叶脉的下表皮细胞多呈不规则类方
形，向外逐渐变为长条形，壁呈微波浪状弯曲。管胞
常为环螺纹型。
2． 3 薄层色谱鉴别
取本品样品粉末 2 g，置圆底烧瓶中加石油醚
40 ml，水浴回流 40 min，滤过，处理四次，药渣再加
入乙酸乙酯 40 ml 水浴回流 40 min，滤过，处理三
次，合并滤液，挥干，残渣加入甲醇溶解，置 1 ml 量
瓶定容，作为供试品溶液。另取穗花杉双黄酮对照
品 1 mg 加甲醇，置 1 ml 量瓶定容，作为对照品溶
液。照薄层色谱法(《中国药典》2010 年版一部附录
VIB)试验，吸取上述溶液各 5 ul，分别点于同一硅胶
G薄层板上，以甲苯-甲酸乙酯-甲酸(5∶ 4∶ 0． 5)为展
开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254 nm)下检
视，供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显
现相同颜色的斑点。喷以 1%的 FeCl3 乙醇溶液显
色后，检视，供试品色谱中在与对照品色谱相应的位
置上，有相同颜色的斑点(图 2)。
1．穗花杉双黄酮对照品 2．翠云草样品 1 3． 翠云草样品 2
4．翠云草样品 3
图 2 翠云草薄层图谱(可见光下检视)
2． 4 检查
2． 4． 1 灰分测定 灰分测定按照灰分测定法(《中
国药典》2010 年版一部附录ⅨK)测定本品的总灰
分和酸不溶性灰分，根据 3 个样品进行测定，结果见
表 1、2。
表 1 总灰分的测定
样品编号 粉末(g) 灰分 +坩埚(g) 坩埚(g) 总灰分(%)
样品 1 3． 0172 63． 6737 63． 3228 11． 63
样品 2 3． 0428 56． 7718 56． 4195 11． 58
样品 3 3． 0440 65． 4349 65． 0730 11． 89
表 2 酸不溶性灰分的测定
样品编号 粉末(g) 酸不溶灰分+坩埚(g) 坩埚(g)
酸不溶
灰分(%)
样品 1 3． 0172 63． 4004 63． 3228 2． 57
样品 2 3． 0428 56． 4912 56． 4195 2． 36
样品 3 3． 0440 65． 1627 65． 0730 2． 95
据以上测定结果，规定总灰分不得超过 12%，
酸不溶性灰分不得超过 3%。
2． 4． 2 浸出物测定 取本品约 3 g，精密称定，置
150 ml的锥形瓶中，精密加乙醇 100 ml，密塞，称定
重量，静置 1 h后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并
保持微沸 1 h。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重
量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，
精密量取滤液 25 ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，
在水浴上蒸干后，于 105℃干燥 3 h，置干燥器中冷
却 30 min，迅速精密称定重量，结果见表 3。
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中国药师 2014 年第 17 卷第 2 期 China Pharmacist 2014，Vol． 17 No． 2
表 3 醇溶性浸出物的测定
样品编号 粉末(g) 醇溶性浸出物+坩埚(g) 坩埚(g)
醇溶性浸出
物(%)
样品 1 3． 1285 28． 0469 27． 9976 6． 30
样品 2 3． 2717 33． 6222 33． 5711 6． 25
样品 3 3． 3805 33． 7698 33． 7178 6． 15
据以上测定结果，规定本品含醇溶性浸出物不
得少于5． 5%。
3 讨论
本文在前期研究的基础上，系统进行了翠云草
的生药鉴别研究，观察并总结了翠云草的性状特征
和显微特征，建立了翠云草药材的 TLC 鉴别方法，
初步确定了其总灰分、酸不溶性灰分的限度和醇溶
性浸出物的含量，这些为翠云草药材的鉴定和质量
评价提供了参考依据。翠云草是卷柏属药用植物，
这是一组形态极为类似的植物，其干燥皱缩的药材
就更难彼此区别。本文通过研究和重复验证发现，
通过茎的横切面［6］、茎中部叶缘细胞特征［7］或粉末
特征(主要是叶缘特征)能很好地把它们区别开;用
对照品对照的薄层色谱方法能进一步准确地鉴别翠
云草，薄层图谱中，样品的对照品成分斑点较其他主
斑点颜色浅，是一个重要特征。在其 HPLC 指纹特
征研究中［8］，发现翠云草中具有对照品的成分穗花
杉双黄酮(amentoflavone)含量极低，无法进行含量
测定研究，因此本文采用醇溶性浸出物控制其质量。
今后，可考虑对其含量较高的主成分 4 /-甲醚罗波
斯塔双黄酮进行含量测定研究。
参 考 文 献
1 广西壮族自治区卫生厅．广西中药材标准［S］． 1992． 169
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ral chromone glycosides from Selaginella uncinata［J］． Chem Pharm
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5 范晓磊，徐嘉成，林幸华，等． 翠云草中双黄酮类成分研究［J］．
中国药学杂志，2009，44(1):15-19
6 万定荣，陈科力，范晓磊，等． 5 种卷柏科药材的显微与薄层色
谱鉴定［J］． 中国医院药学杂志，2006，26(2):125-128
7 刘葭，陈科力，万定荣． 11 种卷柏属药用植物叶缘细胞特征研究
［J］． 中国药师，2009，12(10):1335-1338
8 范晓磊，万定荣，叶丛进，等． 卷柏属药用植物的 HPLC 指纹特征
研究［J］． 中国中药杂志，2007，32(20):2098-2101
(2013-09-11 收稿 2013-11-27 修回)
通讯作者:郑稳生 Tel:(010)63165233 E-mail :zhengwensheng@ imm． ac． cn
HPLC测定长春西汀注射液中 4 种有关物质含量
张宇佳 相莉 陈少华 郑稳生 (中国医学科学院药物研究所，药物传输技术及新型制剂北京市重点实验室 北京
100050)
摘 要 目的:建立一种测定长春西汀注射液中 4种有关物质含量的方法。方法:采用 Kromasil C18 ( 150 mm ×4． 6 mm，5 μm)
色谱柱;以0． 2 mol·L －1醋酸铵溶液-乙腈( 40∶ 60)为流动相，检测波长为 280 nm，流速为1． 0 ml·min －1，进样量为 20 μl。结果:
注射液中长春西汀与有关物质二氢长春西汀、甲氧基长春西汀、长春胺乙酯和阿朴长春胺达到完全分离; 4 种有关物质均有良好
线性关系，平均回收率均达99． 8%以上。结论:本法灵敏，准确，专属性强，可用于长春西汀注射液中 4种有关物质的检查。
关键词 长春西汀注射液;有关物质;高效液相色谱法
中图分类号:Ｒ917 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2014)02-0234-05
Determination of Ｒelated Substances in Vinpocetine Injections by HPLC
Zhang Yujia，Xiang Li，Chen Shaohua，Zheng Wensheng(Institute of Materia Medica，Chinese Academy of Medical Sciences ＆ Pe-
king Union Medical College，Beijing City Key Laboratory of Drug Delivery Technology and Novel Formulations，Beijing 100050，Chi-
na)
ABSTＲACT Objective:To establish an HPLC method for determining the contents of related substances in vinpocetine injections．
Methods:The chromatographic separation was performed on a Kromasil C18 column (150 mm × 4． 6 mm，5 μm)． The mobile phase
consisted of 0． 2 mol·L －1 ammonium acetate -acetonitrile (40∶ 60)，the flow rate was 1． 0 ml·min －1，the detection wavelength was
280 nm，and the injection volume was 20μl． Ｒesults:Vinpocetine and the related substances such as ethyl vincaminate，apovincamine，
methoxyvinpocetine and dihydrovinpocetine were separated completely． The calibration curves of related substances showed good linear-
ity． The average recoveries of related substances were all above 99． 8% ． Conclusion:The method is accurate，sensitive and specific，
and can be applied in determining the related substances in vinpocetine injections．
KEY WOＲDS Vinpocetine injections;Ｒelated substances;HPLC
长春西汀(vinpocetine，VIN)为夹竹桃科植物小 曼长春花中提取的吲哚类生物碱长春胺的衍生物，
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