全 文 ：　2003年第六期 　　　　　　　　　　　
赣 南 师 范 学院 学 报
Journal of Gannan Teachers College
　　　　　　　　　　 No.6
Dec.2003
分光光度法测定山香圆片中黄酮的含量
赖闻玲 ,薛　王君
(赣南师范学院 化学与生命科学系 ,江西 赣州　341000)
摘　要:采用不同溶剂经超声 、微波 、热回流三种方法提取山香圆片 ,以芦丁为对照品 , 用分光光度法测定总黄
酮含量.结果表明:以 70%乙醇作溶剂 ,回流 3 h 的条件下 ,黄酮的提取量最高.
关键词:山香圆片;黄酮;芦丁;分光光度法
中图分类号:O657.3　　　文献标识码:A　　　文章编号:1004-8332(2003)06-0037-02
山香圆(Turpinia Arguta Seen)为省沽油科属植物 ,别名千打捶 、七寸钉 、蛾子药 、蛇舌草 、百花蛇舌草等 ,
主产于江西 、福建 、广东 、广西等省.性寒味甘苦 ,具有清热解毒 、利尿消肿的功效.主要治疗咽喉炎 ,扁桃体炎
等 ,亦用于治疗多种肿痛 、毒蛇咬伤等[ 1] .现已研制出山香圆片 、山香圆含片 、山香圆口服液等药剂.
到目前为止 ,人们对山香圆的研究并不多 ,早期的研究表明:山香圆叶中含熊果酸 、齐墩果酸 、对香豆酸 、
异山梗菜酮碱等成分[ 2 ～ 4] :在 1997年 ,有人先后用薄层比色法和薄层扫描法对山香圆中熊果酸的含量进行
测定[ 5～ 6] .此后 ,罗宪堂等人用分光光度法法对山香圆叶和山香圆口服液中黄酮类成分含量进行了测
定[ 7 ～ 8] .
本文选用山香圆片为材料 ,使用常规的回流法 、微波法和超声法提取其中的黄酮 ,用分光光度法以芦丁
为对照品对其黄酮含量进行测定.
1　实验部分
1.1　仪器与试剂
紫外可见分光光度计(WFZUV-2102 PCS型 ,尤尼柯公司)三乐牌家用微波炉(WP650D型);超声波清
洗器(DQ218型 昆山市超声仪器有限公司);乙醇 (A.R)甲醇 (A.R);芦丁对照品(B.R)正丁醇(C.P.);
NaOH (C.P.)NaNO2(C.P .);Al(NO3)3(C.P.)山香圆片(批号:030301 南昌华依制药有限公司).
表 1　A类样品制备
编号 样品质量/g 溶剂(均 50m L) 萃取剂
A1 1.522 6 99.7%乙醇 /
A2 1.372 2 蒸馏水 /
A3 1.383 5 蒸馏水 正丁醇
A4 1.355 5 70%乙醇 /
A5 1.369 3 30%乙醇 /
1.2　方法与结果
1.2.1　样品的制备
A类样品的制备(热回流法)　取 5粒山香圆片去糖
衣研细 ,精确称量 ,加不同溶剂加热回流 3 h ,过滤 ,滤液
蒸馏除去溶剂 ,最后用甲醇溶解定容至 25mL.(所用溶
剂见表 1)
B类样品的制备(超声提取法)　取 5粒山香圆片去
糖衣 、研细 ,精确称量 ,以甲醇为溶剂超声提取 ,过滤 ,滤
液用甲醇稀释定容至 25mL .(超声所用时间见表 2)
C 类样品的制备　取 5粒山香圆片 ,去糖衣 、研细 ,精确称量 ,加不同溶剂 ,用微波提取 15min ,过滤 ,滤
液蒸馏除去溶剂 ,用甲醇溶解定容至 25mL .(所用溶剂见表 3)
以上三类提取方法中 ,如果以水为溶剂 ,均用正丁醇萃取提取液.
表 2　B类样品的制备
编号 样品质量/ g 时间/min
B1 1.063 9 30
B2 1.172 4 45
B3 1.060 6 60
表 3　C 类样品的制备
编号 样品质量/ g 溶剂(均 50mL) 萃取剂
C1 1.150 8 蒸馏水 正丁醇
C2 1.111 9 30%乙醇 /
C3 1.122 0 30%乙醇 /
1.2.2　黄酮含量的测定
芦丁标准曲线的测定　按文献[ 9]报道方法 ,准确称取干燥的芦丁对照品 0.0500 g ,以甲醇为溶剂超声溶
解 ,得 500μg/mL 的芦丁标准储备液.分别取 500μg/mL 的芦丁标准液 0.0 ,0.1 ,0.5 ,1.0 ,2.0 ,3.0 ,5.0 ,8.0
mL 置于 25mL 比色管中.先加入 10mL 30%乙醇溶液 ,0.7mL NaNO2(1∶20)溶液 ,摇匀 ,放置 5min;加 0.7
mL Al(NO3)3(1∶10)溶液 ,摇匀 ,放置 6min ,再加入 10%NaOH 溶液 5mL ,摇匀 ,用 30mL 乙醇的定容 ,在
500 nm 处测定吸光度 ,得浓度与吸光度标准曲线线性方程:A=0.009 939 C+0.007 849(R=0.9 956).
收稿日期:2003-07-02
　作者简介:赖闻玲(1973—),女 ,江西赣县人 ,硕士,赣南师范学院化学与生命科学系讲师.
DOI :10.13698/j.cnki.cn36-1037/c.2003.06.014
方法回收率试验　在样品中加入一定量的芦丁标准品 ,在 500 nm 处测定吸光度 ,计算回收率(结果见表
4).
表 4　样品芦丁回收率实验
样品编号 样品中芦丁平均量(μg) 芦丁标准加入量(μg) 测得量(μg) 回收率(%)平均回收率(%) RSD(%)
1
2
3
4
5
6
7934.0
400
400
400
800
800
800
1 220.3
1 237.9
1 243.0
1 610.2
1 677.9
1 630.3
103.3
105.5
106.2
102.0
103.0
104.6
104.1
7
8
9
10
11
12
328.2
400
400
400
800
800
800
747.3
732.3
734.9
1 137.3
1 147.4
1 131.3
105.9
101.3
102.0
102.9
105.9
101.3
103.2
0.62
表 5　样品中黄酮含量的测定
样品编号 A C 样品中黄酮含量/mg
A1 0.686 68.2 5.60
A2 0.193 18.6 1.70
A3 0.467 46.2 4.17
A4 0.797 79.4 7.32
A5 0.344 33.8 3.09
B1 0.299 29.3 3.44
B2 0.425 42.0 4.47
B3 0.366 36.0 4.25
C1 0.565 56.1 6.09
C2 0.141 13.4 1.51
C3 0.344 32.8 3.66
　　样品测定　精密吸取样品 5.00mL ,置于25mL 比色
管中 ,在 500 nm处测定吸光度 ,得样品中所含黄酮量(以
芦丁计)(结果见表 5).
实验结果表明:对于山香圆片中黄酮的提取 ,用 70%
乙醇作为溶剂 ,回流 3 h ,效果最好.而微波水提的效果仅
次于之.
2　讨论
对于天然产物中黄酮类的提取 ,从传统的热回流法发
展到现在的超声和微波法 ,一般认为后两种方法对原料的
破坏较小 ,而且直接振碎细胞壁 ,提取率应较高.从实验结
果看 ,这两种方法的提取率适中 ,但所需时间短 ,操作简
单 ,尤其是微波水提法 ,溶剂便宜 、时间短 ,且提取率高 ,可
作为最佳提取法.
对于黄酮类的测定 ,多用可见分光光度法测定其总
量 ,但这种方法一是受多酚类物质的干扰大 ,二是与 Al3+形成的络合物易分解 ,在实验过程中 ,显色后须及
时测定 ,放置一段时间后吸光度下降.如采用 HPLC 法 ,这些问题可避免 ,但需多种黄酮类标准品以分别测
定.
参考文献:
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[ 3] 　方乍浦.山香圆叶化学成分的研究(二)[ J] .中草药 , 1985, 16(2):5～ 7.
[ 4] 　方乍浦.山香圆叶化学成分的研究(六)[ J] .中草药 , 1985, 16(12):4～ 6.
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[ 8] 　罗宪堂 ,余世平 ,熊友香.UV 法测定山香圆叶中黄酮类成分含量[ J] .中医药研究 , 2002 , 18(5):48～ 50.
[ 9] 　敢毓铭.中药化学实验操作技术[ M] .北京:中国医药科技出版社 , 1988 , 212～ 213.
Determinating the Content of Flavone in Turinia Arguta
Pills by Spectrophotometry
LAI Wen-ling ,XUE Jun
(Department of Chemistry and Llife Science of Gannan Teachers College , Ganzhou 341000 , China)
Abstracts:We Extract the Turpinia A rguta Pills by meas of ultrasound , microw ave and heat refluence in different solvents , use
rutin as contrast to determine the flavone content of the ex tractives by spectrophotometry.The experiment result show that the
flavone extract rate is the highest by means o f heat refluence w ith 70% alcohol as solv ents.
Key words:Turpinia A rguta Seen;flavone;Rutin;Spectrophotometry
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