全 文 ：一九八九年
第 一 期
宁 夏 农 学 院 学 报
J o以 r n al o f Nin gx i a A gr i e ul t ur al C ol l e g e
19 89
掩 I
鹅绒藤乳汁中蛋白酶活性
和蛋白质含量生长季节变化测定
李明 张凤英
(湖南省卫 生职工医学院 )
萝蘑科植物鹅绒藤 (C yn n a o h。 m o hin o e s e R. Br . )在宁夏黄灌区分布很广 ,该植物茎
中存在一种白色乳汁 , 民间用其治疗寻常性虎赓 ,效果 良好二` 〕 。 据分析 , 该植物乳汁中含 有
丰富的蛋 白质和蛋白酶 , 为主要药用成分 。 明确上述成分的季节变化对开发此种中草药资源
具有实际意义 。 为此 , 我们观察测定了一年内不同月份乳汁中蛋白酶活性及蛋白质含量的变
化 , 现报道如下 。
1 材料与方法
1
.
, 乳汁的采集
从发芽约半月后的 5月 2 日开始 , 至 1 0月 2 日植株开始枯萎为止 , 每月 2 日采集一 次 ,
每次采集均固定在同一地点 , 样本数 20 株 。 采集时 , 剪断茎部 , 让乳汁流出 , 用血色素吸管吸
取 20 时乳汁 , 立 即吹入冰冷的 5 m 10 . l m o ol / L醋酸钠。 . l m m ol / L醋酸汞苯溶液中 , 摇匀 ,
置冰壶中 , 取够 20 份后全部置低温冰箱中 (一 20 ℃ ) 保存 。
飞· 2 蛋白质的测定
取出 上述标样 , 化冰后摇匀 , 3 0 0。转 / 分离心 10 分钟 , 取上清液 1 0 0时 , 按照 B r a df o r d
M
.
M
. 的方法 〔 “ 〕测定蛋 白质含量 , 以m g / 。 1乳汁表示 。
1
.
3 蛋白酶活性测定
取上述离心上清液 o . 95 m l , 加入琉基酶激 活 剂 ( 3 m m ol / L E D T A 和 1 4 . 6m m ol / L
琉基 乙醇液 ) 0 . 5m l ,摇匀 ,在室温下激活 10 分钟 , 用微量进样器取 1闪 ,按 S al e e m u d d in M 。
。 t 。 1的方法 吕 〕测定蛋白酶活性 , 以万单位 / m l乳汁表示 。
2 结果与讨论
鹅绒藤在宁夏地区一般 5 月 _仁旬开始发芽 , 6一 7月旺盛生长 , 8 月开始结果 , 10 月下旬
逐步落叶枯萎 。 我们将采样期定为 5~ 10 月 , 这样可观测 到 植株从发芽至枯萎全过程乳汁 中
蛋白酶活性和蛋白质含量的变化 。 通过试验发现鹅绒藤蛋白酶系琉基酶 , o . l m m 。 1/ L醋酸
汞苯可 以抑制其活性 , 故我们在乳汁取出后 , 立即注入至 0 . l ln m 。 1/ L醋酸汞溶液中将其抑
制 , 避免它分解其它蛋白质和自我分解 , 故测定的蛋白酶活性和蛋白质含量应代 表 真 实情
况 。
乳汁中蛋 白酶活性和蛋白质含量各月测定结果列于表 1 。
本文于 19 8 8年 4月 17 日收到。
宁 夏 农 学 院 学 报 1期
表 l 鹤绒藤乳汁中蛋白酶活性和蛋 白质含量月际比较 (平均值 士标准差 )一~ 一 - - - - - - - - - -, - ~ ~ ~ - - ~ - - -月 一 一 s 一醉 活 性(万单位 /。 1)P值 .P值二
蛋 白 质
(二 g /m l )
P值 ,
P 值二
4 0 9
。
6 6
士 2 0 2 。忿5
40
。
8 1
士 15 。 4 2
3 2 6
。
0 3
士 7 0 。 1 7
> 0
。
0 5
> 0
。
0 5
5 6
。
5 3
士 1 0 。 4 4
< 0
。
0 1
< 0
。
0 1
3 54
。
7 0
士 8匀。 3 1
> 0
。
05
> 0
。
0 5
5 5
。
7 2
土 8 。 1 7
< 0
。
0 1
> 0
。
0 5
6 8
。
2 8
士 3 1 。 4 1
< 0
。
0 1
< 0
。
0 1
2 6
。
6 2
士 6。 9 4
< 0
。
0 1
< 0
。
0 1
4 C
。
3 8
士含遴。 2 4
< 0
。
0 1
》 0 。 0 5
2 5 。 2 2
二 7 。 12
< 0
。
0 1
卜 0 。 0 5
5 3
。
9 0
生 4 6 。 7 7
( 0
0
0 1
) 0
。
0 5
2 1
。
2 3
土 0 。 匀S
< 0
。
0 1
> 0
。
0 5
. 与 5月值 比较 , 二与上月值比 较 。
由表 1 可见 , 鹅绒藤在发芽不久 , 其活性最高 , 6~ 7月为鹅绒藤迅速生长期 , 蛋 白酶活
性有所降低 , 但差异不显著 ; 至 8月下旬植株开花结果 , 蛋白酶活性迅速降低 , 与前几 月 相
比差异极显著 ; 此后 , 继续缓慢降低 。 蛋 白质含量发芽初较高 , 在营养生长期继续增高 ; 8
月开花后迅速降低 , 差异极显著 ; 此后 , 仍不斯降低 , 但幅度不大 , 直至植株枯萎 。 上述结-
果表明 , 鹅绒藤乳汁中蛋 白酶活性和蛋白质含量随季节的变化而变化 , 亦即与植株生长发育
状况有关 。 开花结果后 , 乳汁中蛋白酶 活性和蛋白质含量急剧下降 , 似系营养物质大量消耗
所致 。 从药用价值考虑 , 采收以在开花结果前为宜 。
参考文献
〔 1 〕 宁夏 中草药手册编写组 。 宁夏 中草药手册 。 银川 : 宁 夏人民 出版社 , 19 7 1
〔 2 〕 B r a d f o r d M M 。 A n e l B i o e h e m 。 2 9 7 6 , 72 : 2 4 8 ~ 2 5 4
〔 3 〕 S a l e e m u d d i n 人丁 e t a l . A n e l B i o e l, e m . 19 80 ; 10 5 ( 1 ] : 2 0 2 ~ 2 0 6