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新疆产羊角子草不同部位中总黄酮的含量测定



全 文 :第 22卷 第 4期
2010年 12月                    
塔 里 木 大 学 学 报
JournalofTarimUniversity                    
Vol.22 No.4
Dec.2010
  文章编号:1009-0568(2010)04-0075-04
新疆产羊角子草不同部位中总黄酮的含量测定①
孟庆艳 1, 2 孔星芸1  田龙 2 方 玉2
(1塔里木盆地生物资源保护利用兵团重点实验室 , 新疆 阿拉尔 843300)
(2塔里木大学生命科学学院 , 新疆 阿拉尔 843300)
摘要 目的 建立羊角子草中总黄酮含量的测定方法 ,并分析该类成分在羊角子草不同部位的分布情况。方法 用超声法提取
羊角子草中总黄酮;采用紫外 -可见分光光度法于 508 nm处测定总黄酮的含量。结果 总黄酮在 22.78 ~ 113.88 μg· mL-1
浓度范围内与吸光度有良好的线性关系(r=0.999 9),羊角子草中总黄酮的含量为:根 0.28%, 茎 0.77 %,叶 1.60 %,花
1.06 %,果实 0.49%, 平均回收率为 98.62 %, RSD为 1.58 %(n=9)。结论 该方法简便 、快速 、准确 , 可用于羊角子草中
总黄酮含量的测定。
关键词 羊角子草;芦丁;紫外 -可见分光光度法;鹅绒藤属
中图分类号:R282.71      文献标识码:A      DOI:10.3969/j.issn.1009-0568.2010.04.017
DeterminationoftheContentofFlavonoidinDiferentParts
ofCynanchumcathayensefromXinjiang
MengQingyan1, 2 KongXingyun1 TianLong2 FangYu2
(1 KeyLaboratoryofBiologicalResourceProtectionandUtilizationofTarimBasin,
XinjiangProduction&ConstructionGroup, Alar, Xinjiang843300)
(2 ColegeofLifeScience, TarimUniversity, Alar, Xinjiang843300)
Abstract  Objective:ToestablishanmethodforthedeterminationofflavonoidinCynanchumcathayense, andanalyzethecontentof
flavonoidindiferentpartsofCynanchumcathayense.Methods:Theflavonoidwasextractedbytheultrasonicmethod.Thecontentof
flavonoidwasdetectedbyUVatwavelengthof508 nm.Results:Thecalibrationcurvewaslinearwiththeconcentrationrangesof
22.78~ 113.88μg· mL-1(r=0.999 9).Thecontentsintheroot, bark, leaf, flowerandfruitareseparately0.28%, 0.77%,
1.60%, 1.06 %and0.49%.Averagerecoverywas98.62 %, withRSDof1.58%(n=9).Conclusions:thiswayishandy、celer-
ity、nicety.ItcanbeusedtodiscriminateanddominatethemassofCynanchumcathayens.
Keywords  Cynanchumcathayense;Flavonoid;UV;Cynanchum
  羊角子草为罗摩科鹅绒藤属植物羊角子草
CynanchumcathayenseTsiangetzhang的干燥全草 ,
维语名为勤 z克立克 ,本品产于河北 、甘肃 、宁夏 、新
疆等省区[ 1] 。鹅绒藤属全世界约 200种 ,我国有 53
种 , 12变种 ,全国各省均有分布。鹅绒藤属植物大
部分为药用植物 ,很早就有学者对该属植物化学成
分和药理作用进行了研究 [ 2-5] 。羊角子草耐盐碱 ,
广泛生长于新疆南疆地区的路边 、地头 ,一般成片生
长 ,生长能力极强。目前 ,同属植物研究较多 ,但对
羊角子草的研究较少 ,本试验首次建立羊角子草中
总黄酮含量的测定方法 ,并分析该类成分在羊角子
草不同部位中的分布情况 ,为羊角子草的开发利用
① 收稿日期:2010 -04-08
基金项目:塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室开放课题(BRYB1005)
作者简介:孟庆艳(1982-),女 ,助理研究员 ,硕士 ,主要从事民族药物品种 、品质研究及资源开发。   E-mail:hongyan meng@sina.com
塔 里 木 大 学 学 报 第 22卷
提供基础数据。
1 仪器与试药
Cary-100紫外 -可见分光光度计 (澳大利
亚),超声波 (SK3200H上海科导超声仪器公司),
Sartorious电子天平(北京赛多利斯天平有限公司);
芦丁对照品(含量测定用 ,纯度≥98%,德国生产),
试验用水为蒸馏水 ,试剂均为国产分析纯 。
羊角子草采于新疆阿拉尔市塔里木河畔 ,经鉴
定为罗摩科鹅绒藤属植物 Cynanchumcathayense
Tsiangetzhang的干燥全草。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
称取 105 ℃干燥至恒重的芦丁对照品 28 mg,
精密称定 ,置 100 mL棕色容量瓶中 ,加 60%乙醇溶
液至刻度 ,摇匀 ,即得 。
2.2 样品溶液的制备
称取药材粉末(60目)1 g,精密称定 ,置 150 mL
锥形瓶中 ,精密加入 60%乙醇 20 mL,超声处理 1 h,
过滤 ,用少量溶剂洗涤滤渣 ,合并滤液于 25 mL容量
瓶中 ,定容 ,摇匀 ,即得 。
2.3 测定波长的选择
精密量取 “2.1”项下对照品溶液 4.0 mL,于 25
mL容量瓶中 , 加 60%乙醇溶液至 10 mL,加 5%
NaNO3溶液 1 mL,摇匀 , 放置 5 min, 加入 10%Al
(NO3)3溶液 1 mL,摇匀 ,放置 5 min,加入 4%NaOH
溶液 10 mL,再以 60%乙醇溶液定容至刻度 ,摇匀 ,
放置 15 min,于 400 ~ 800 nm处进行扫描 ,结果对照
品溶液在 508 nm处有最大吸收 。
2.4 标准曲线的绘制
精密量取 “2.1”项下对照品溶液 0.0 mL, 2.0
mL, 4.0 mL, 6.0 mL, 8.0 mL, 10.0 mL,于 25 mL
容量瓶中 ,加 60%乙醇溶液至 10 mL,加 5%NaNO2
溶液 1 mL,摇匀 ,放置 5 min,加入 10%Al(NO3)3溶
液 1 mL,摇匀 ,放置 5 min,加入 4%NaOH溶液 10
mL,再以 60 %乙醇溶液定容至刻度 ,摇匀 ,放置 15
min,于 508 nm处测定吸光度值 ,以吸光度(Y)为纵
坐标 ,浓度(X)为横坐标 ,绘制标准曲线 ,得回归方
程 Y=0.011 6X+0.010 9, r=0.999 9(n=5),结
果表明总黄酮在 22.78 ~ 113.88 μg· mL-1的范围
内与吸光度线性关系良好。 (见图 1 ,表 1)
表 1 标准曲线的绘制测定结果
浓度(μg/mL) 22.78 45.55 68.33 91.10 113.88
A 0.277 0.536 0.800 1.073 1.329
图 1 标准曲线图
2.5 精密度试验
精密吸取 “ 2.1”项下对照品溶液 , 6份 ,按照
“ 2.4”项下方法显色 ,测定吸光度值 ,结果 RSD% =
0.78 %(n=6),精密度良好 。
2.6 重现性试验
称取干燥花粉末(60目)1g, 6份 ,精密称定 ,按
照 “2.2”项下方法制备 ,按照 “2.4”项下方法显色 ,
测定吸光度值 ,结果 RSD为 0.82 % (n=6),重现
性良好 。(结果见表 2)
表 2 重现性试验结果
样品 1 2 3 4 5 6 RSD(%)
A 0.79 0.78 0.79 0.77 0.81 0.79 0.82
2.7稳定性试验
称取羊角子草干燥花粉末(60目)1g, 1份 ,精
密称定 ,按照 “ 2.2”项下方法制备 ,按照 “ 2.4”项下
方法显色 ,每隔 10 min测定吸光度值 ,结果 RSD为
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第 4期 孟庆艳等:新疆产羊角子草不同部位中总黄酮的含量测定
1.61 % (n=7), 1 h内稳定性良好 。(结果见表 3)
表 3 稳定性试验结果
时间(min) 0 1 2 3 4 5 6 RSD(%)
A 0.737 0.727 0.716 0.709 0.714 0.722 0.739 1.61
2.8 加样回收率试验
精密称取已知含量的羊角子草花干燥粉末(60
目)1 g, 9份 ,分别精密添加不同量芦丁对照品(相
当于羊角子草中总黄酮含量的 80%、 100%、
120%),按照 “ 2.2”项下方法制备 , 分别精密吸取
4.0mL,于 25 mL容量瓶中 ,按照 “2.4”项下方法显
色 、测定吸光度值 ,平均回收率为 98.62%, RSD为
1.58%(n=9)。结果表明 ,加样回收良好。
2.9 样品的测定
分别称取羊角子草根 、茎 、叶 、花 、果实干燥粉末
(60目)1 g,精密称定 ,按照 “ 2.2”项下方法制备 ,分
别精密吸取 4.0 mL, 于 25 mL容量瓶中 , 按照
“2.4”项下方法显色 ,测定吸光度值 ,结果见表 1。
表 1 样品测定结果(n=3)
部位 根 茎 叶 花 果实
平均含量(%) 0.28 0.77 1.60 1.09 0.49
  结果:羊角子草不同部位总黄酮的含量为:叶 >
花 >茎 >果实 >根 。其中地上部位总的含量为
3.92 %,约为地下部分的 5倍 。
3 讨论
3.1 本试验采用超声法处理样品 ,以芦丁为对照
品 ,采用紫外可见分光光度法于 508 nm处进行测
定 ,此方法准确 、简单 、易操作 ,可用于羊角子草中总
黄酮含量的测定 。
3.2 羊角子草地上部分总黄酮的含量约为地下部
分的 5倍 ,建议在利用与开发该资源时 ,根据二者在
产量上的比例衡量 ,仅采集其地上部分使用 ,地下部
分予以保留 ,以促进资源的再生 ,达到资源的合理利
用与开发。
3.3 羊角子草分布广泛 ,但是该资源利用率较低 ,
一般被视为田间杂草 。目前针对羊角子草的研究报
道很少 ,但其同属植物的化学成分及药理研究的报
道较多 ,鹅绒藤属植物的一些特征性成分 ,例如 C21
甾体类成分在羊角子草中的分布 、组成以及含量等
均使羊角子草的进一步研究有一定的意义。
参考文献
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科学出叛社.1977:379.
[ 2]  杨怡 ,张淑雅 , 芦晓红.鹅绒藤全植株中巯基蛋白酶的
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2006, 28(6):551-553.
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