全 文 ：基金项目:湖南省外国专家局 2007年引智基金(编号:200786)
作者简介:涂佳(1983-), 女 ,中南林业科技大学在读硕士研究生。
E-mail:tu jia469@h otmail.com
通信作者:邓学良
收稿日期:2009-12-30
第 26卷第 2期
2 0 1 0 年 3 月
Vo l.26 , No.2
Mar .2 0 1 0
野生毛葡萄常规营养成分和原花青素含量分析
Analysis on the routine nutrit ive components contents
and proanthocynaidins of vitis quinquangularis Rehd.
涂　佳
TU J ia
　 邓学良
DENG Xue-ling 　
周文化
Z HOU Wen-hua　
李忠海
L I Zhong-hai 　
薛敏敏
XUE Min-min
(中南林业科技大学食品科学与工程学院 ,湖南 长沙　410004)
(Food College of Central South University o f Forestry & Technology , Changsha , Hunan 410004 , China)
摘要:对湖南南岳产的野生毛葡萄原花青素含量和常规营养
成分进行分析。结果显示 , 原花青素在 0 ～ 0.4 mg/ mL 范围
内呈线性关系 , 线性回归方程为 A =2.08C-0.016 , 测得野
生毛葡萄子籽原花青素 、野生毛葡萄皮原花青素含量分别
是:85.54 mg/ g、68.75 mg/ g;新鲜野生毛葡萄:蛋白质
0.90%, 粗脂肪 2.60%, 粗纤维 6.90%, 灰分 2.0%, VC
100.88 mg/ 100 g , 还 原 糖 10.57%, 水 分 68.02%, 钙
4.68 mg/ g ,钾1.05 mg/ g , 镁 0.757 mg/ g , 铁 0.103 mg/ g , 亚
油酸 42.70 g/ 100 g , 亚麻 酸 452.37 g/100 g , 油 酸
2 025.44 g/100 g , 棕 榈 酸 705.23 g/100 g , 组 氨 酸
711.6 mg/100 g , 苏 氨 酸 496.9 mg/ 100 g , 缬 氨 酸
542.8 mg/100 g , 蛋 氨 酸 60.9 mg/ 100 g , 赖 氨 酸
287.2 mg/100 g , 异 亮氨 酸 272.0 mg/100 g , 亮氨 酸
76.6 mg/ 100 g , 苯 丙 氨 酸 216.2 mg/100 g , 色 氨 酸
254.7 mg/100 g。与其他品种相比原花青素含量和常规营养
成分含量存在一定差异。
关键词:野生毛葡萄;原花青素;营养成分
Abstract:Th e proanthocy naidin s and rou tine nut rit ive components
con tained in Viti s quinquangu lari s Rehd.Were determined , gathered
f rom Heng mountain Hu-nan province.The result s sh ow ed that:A
good linear correlation w as fou nd in the range of 0 ～ 0.4 mg/ L of
proanthocynaidins , the proanthocynaidins con tent of Viti s quinquan-
gularis Rehd.seeds and Vit is quinquangulari s Rehd. peel w ere
85.54 m g/ g and 68.75 mg/g.Th e contents of routine nut riti ve com-
ponents in the f resh Viti s quinquangularis Rehd.w ere as follow s:
0.9% of protein , 2.6% of cru de fat , 6.9% of crude fiber , 2.0% of
ash , 100.88 mg/ 100 g of vitamin C , 10.57% of reducing sugar , 78.0%
of water , 4.68mg/ g of Ca , K of 1.05 mg/ g , 0.757 mg/ g of Mg ,
0.103 mg/ g of Fe , 42.70 mg/ 100 g of linoleic acid , 452.37 mg/ 100 g of
linolenic acid , 2 025.44 mg/ 100 g of oleic acid , 705.23 m g/ 100 g of
palmit ic acid , 711.6 mg/100 g of H is , 496.9 mg/ 100 g of T hr ,
542.8 m g/ 100 g of Val , 60.9 mg/ 100 g of Met , 287.2 mg/ 100 g of
Lys , 272.0 mg/100 g of Ile , 76.6 mg/ 100 g of Leu , 216.2 mg/ 100 g
of Phe , 254.7 mg/100 g of Try.T he determinat ion show ed that
there w ere di fferences in con tents of p roanthocynaidins contents and
nut rit ive com ponents among other varieties.
Keywords:vi ti s quin qu angu lari s rehd.;proan th ocy naidin s;nu t ri ti ve
comp onents
野生毛葡萄(vitis quinquangularis rehd.)是葡萄科(vita-
ceae)葡萄属(vitis L)真葡萄亚属(E-uv itis)东亚种群的一种 ,
原产于中国 , 是中国葡萄属东亚种群中分布最广的一个野生
品种 , 生长在山区林缘和灌木丛中 , 在海拔 100 m 至3 000 m
均有发现 , 主要分布于秦岭 、泰山以南 17 个省份[ 1] 。野生葡
萄鲜果含多种维生素 、各种氨基酸 、矿物质等营养物质 , 还含
有丰富的花色素双糖苷 、超氧化歧化酶(SOD)及白藜芦醇
(RES)物质 ,具有软化血管 、抗衰老 、防癌的作用[ 2] 。近十年
来 , 各地区非常重视野生毛葡萄的开发利用 , 并开展了资源
收集 、种质评价 、遗传品种选育等科学研究[ 3] 。
虽然国内外对葡萄原花青素含量有所报道[ 4-8] ,但目前
尚未见系统地分析野生毛葡萄常规成分含量的报道。 为了
更好地开发和利用野生葡萄植物中的营养成分和药用价值 ,
本试验定量测定了南岳衡山野生毛葡萄原花青素和常规营
养成分含量 , 希望能为野生毛葡萄的合理利用和开发提供一
定的理论依据。
1　材料与方法
1.1　材料与仪器
1.1.1　材料与试剂
葡萄鲜果:野生毛葡萄 , 于 2008 年 10 月 25 日采自
南岳;
82
DOI :10.13652/j.issn.1003-5788.2010.02.039
原花青素标准:含量>95%, 天津尖峰天然产物研究开
发有限公司;
Fe , Ca ,Mg , K 标准溶液:含量均为 1 000μg/ mL , 国家标
准物质研究中心;
棕榈酸甲酯标准品 , 亚油酸甲酯标准品 , 亚麻酸甲酯标
准品 , 油酸标准品:法国 F luka公司;
L-色氨酸(L-T ryptophan)标准品 , L-苏氨酸(L-Threo-
nine)标准品 , L-赖氨酸(L-Lysine)标准品 , L-亮氨酸(L-Leu-
cine)标准品 , L-蛋氨酸(L-Methionine)标准品 , L-组氨酸(L-
H istidine)标准品 , L-苯丙氨酸(L-Pheny lalanine)标准品 , L-
缬氨酸(L-Valine)标准品 , L-异亮氨酸(L-I so leucine)标准品:
美国 Sigma 公司;
乙腈 , 甲醇:色谱纯(≥99.8%), 美国 FISH ER公司;
NaOH 、HCl、纯氮 、浓硝酸 、浓盐酸 、浓硫 、95%乙醇 、硼
酸 、石油醚 、硫酸铜 、石英砂 、乙酸 、氧化镧 、氨水等:均为市售
分析纯。
1.1.2　仪器与设备
旋转蒸发仪:4003 ,德国 Heidolph 公司;
紫外可见分光光度计:UV-1700 ,日本岛津公司;
原子吸收分光光度计:H ITACHI Z-2000 型 , 日本日立
公司;
微波消解仪:ZXS-PX-92 , 美国 MILESTONE 公司;
气相色谱仪:6890N , 美国 Agilent公司;
氢火焰离子化检测器:123-3262 , 美国 Agilent公司;
w aters 高效液相色谱仪:包括 Wate rs 2695 分离单元 ,
AccQ.Tag 分析柱 , 2487紫外检测器 ,美国Waters 公司。
1.2　方法
1.2.1　原花青素含量的测定
(1)标准原花青素溶液的制备:精密称取原花青素标准
品 0.05 g , 置 50 m L 容量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至刻度 , 得
标准原花青素溶液。
(2)样品原花青素溶液的制备:参考文献[ 9] 。毛葡萄
籽洗净晾干后 , 研磨过 40 目筛后 , 立即置入在 30 ℃石油醚
中脱脂 8 h ,晾干 ,冷冻保存备用;毛葡萄皮经真空冷冻干燥 、
研磨后 , 立即置入在 30 ℃石油醚中脱脂 8 h ,晾干 , 冷冻保存
备用。按 1∶7(m∶v)的料液比 , 64%乙醇 , 35 ℃水浴提取提
取 40 min 后离心过滤 , 过滤 , 滤渣进行下次提取 2 次 , 用
64%乙醇定容至 25 m L ,即得样品原花青素溶液。
(3)最大吸收光谱的测定:将制备好的原花青素提取液
0.5 m L与 2.5 mL 30 g/ L 香草醛和2.5 m L 30%硫酸 , 30 ℃
避光反应 15 min 后 , 利用可见 -紫外分光光度计在
200～ 800 nm波长范围内扫描 ,确定测定原花青素的检测波
长。原花色素与香草醛的酚醛缩合反应生成的红色物质在
500 nm 波长处有最大吸收 , 据此试验中采用分光光度法于
在 500 nm 处测定原花色素含量。
(4)线性关系的考察:精密吸取标准品槟榔碱溶液
0.01 , 0.05 , 0.10 , 0.15 , 0.20 , 0.25 , 0.30 , 0.35 ,
0.40 mg/ mL ,分别置分液漏斗中 , 按(3)操作 , 测定吸光度。
(5)样品原花青素含量的测定:精密吸取样品原花青素
溶液 0.5 m L 加入 30 g/ L 香草醛的甲醇溶液 2.5 mL 及
30% H 2SO 4 的甲醇溶液 2.5 mL ,混匀后于 30 ℃水浴保温
20 min后利用紫外可见光分光光度计 , 在 500 nm 处测其吸
光度 , 并代入标准曲线公式中计算含量。
1.2.2　常规营养成分的测定
水分含量的测定:按 GB/ T 5009.3———2003 进行;
灰分含量的测定:按 GB/ T5009.4———2003进行;
蛋白质含量的测定:按 GB/ T5009.5———2003 进行;
粗脂肪含量的测定:按 GB/ T5009.6———2003 进行;
粗纤维含量的测定:按 GB/ T5009.10———2003 进行;
还原糖含量的测定:按 GB/ T5009.7———2003 进行;
可滴定总酸的测定:按文献[ 10] 进行;
V C 的测定:按文献[ 11] 进行;
脂肪酸的测定:采用甲基化气相色谱法;
必需氨基酸的测定:采用衍生反相液相色谱法;
元素分析:采用原子吸收分光光度测定 , 原子吸收分光
光度计工作条件见表 1。
表 1　工作条件
Table 1　Working conditions o f the inst rument
元
素
波长/
nm
狭缝/
nm
灯电流/
mA
乙炔流量/
(L·min-1)
空气流量/
(L ·min-1)
Mg 285.2 1.3 1.3 2.0 15
K 769.9 1.3 1.3 2.1 15
Ca 422.7 1.3 6.5 2.2 15
Fe 213.9 0.2 10.0 2.0 15
2　结果与讨论
2.1　最大吸收光谱的测定结果
原花青素标准溶液的吸收光谱图见图 1 , 野生毛葡萄中
原花青素的吸收光谱图见图 2。
图 1　原花青素标准溶液的吸收光谱图
F igure 1　Spectra of standard proanthocynaidins
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营养与功能 　 2010年第 2期
图 2　野生毛葡萄中原花青素的吸收光谱图
Figure 2　Spectr a of pro anthocynaidins in
vitis quinquangula ris Rehd.
比较图 1 和图 2 的吸收曲线可知 , 原花青素标准溶液与
野生毛葡萄中原花青素都是在 500 nm 处吸收最强 , 因此选
500 nm 作为测定波长。
2.2　原花青素标准曲线的绘制
原花青素工作曲线见图 3。由图 3 可知 , 线性回归方程
为 A =2.08 C-0.016 , 相关系数 R2 为 0.998 , C表示浓度
(mg/ mL), A 表示吸光度 , 结果表明原花青素含量在 0.010
～ 0.400 mg/m L范围内与吸光值线性关系良好 。符合朗伯
比尔定律 , 该方程可用于原花青素的定量测定。
2.3　不同产地野生毛葡萄原花青素含量
南岳衡山毛葡萄籽和皮原花青素含量与郑燕升[ 7-8] 报
道的广西野生毛葡萄籽和皮籽原花青素含量的对比见表 2。
由表 2 可知 , 南岳野生毛葡萄原花青素含量无论是籽还是皮
均高于广西野生毛葡萄籽和皮籽原花青素的含量。
图 3　原花青素工作曲线
Figure 3　S tandard curve of pro anthocynaidins
表 2　野生毛葡萄原花青素含量测定结果
Table 2　Results o f proanthocynaidins in
V itis quinquangularis Rehd.
样品 含量/ %
南岳衡山野生毛葡萄籽 8.55
南岳衡山野生毛葡萄皮 6.86
广西野生毛葡萄籽 5.75
广西野生毛葡萄皮 5.02
2.4　常规营养成分测定结果
野生毛葡萄的主要营养成分以及与其他葡萄的比较见
表 3。
表 3　南岳衡山野生毛葡萄常规成分的含量与其他葡萄品种比较
Table 3　Results o f Conventional ing redients in Vitis quinquangula ris Rehd.and compare w ith o ther s
成分 野生毛葡萄 丽江山葡萄[ 12] 大泽山葡萄[ 13] DRIs＊
水分 68.02% 48.25% - -
灰分 2.13% 3.02% - -
粗蛋白 0.85% 1.85% - 35～ 110 g/ d
粗脂肪 2.60% 3.14% - -
还原糖 10.57% - - -
粗纤维 6.90% 5.27% - -
总酸 0.625 5 g/ L - - -
VC 100.88 mg/ 100 g 288 mg/ 100 g - -
Fe 10.32 mg/ 100 g - - 15～ 20 mg/ d
Mg 75.67 mg/ 100 g - - 350 mg/ d
C a 468.18 mg/ 100 g - - 800 mg/ d
K 104.70 mg/ 100 g - - 2 000 m g/ d
亚麻酸 42.70 mg/ 100 g - - -
亚油酸 452.38 mg/ 100 g - 86 480 mg/ 100 g -
油酸 2 025.44 mg/ 100 g - 360 mg/ 100 g -
棕榈酸 705.24 mg/ 100 g - 6290 mg/ 100 g -
His 711.6 mg/ 100 g - - -
Th r 496.9 mg/ 100 g 340 mg/ 100 g - -
Val 542.8 mg/ 100 g 420 mg/ 100 g - -
Met 60.9 mg/ 100 g 290 mg/ 100 g - -
Lys 287.2 mg/ 100 g 350 mg/ 100 g - -
Ile 272.0 mg/ 100 g 230 mg/ 100 g - -
Leu 76.6 mg/ 100 g 620 mg/ 100 g - -
Ph e 216.2 mg/ 100 g 560 mg/ 100 g - -
Try 254.7 mg/ 100 g - - -
　　　　　　＊2000年制定的中国居民膳食营养参考摄入量(18～ 50岁)-C hinese DRIs。
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第 26卷第 2期 涂　佳等:野生毛葡萄常规营养成分和原花青素含量分析 　
　　由表 3 可知 , 南岳野生毛葡萄含有人体所需的所有必须
氨基酸包括婴幼儿所需的必需氨基酸———组氨酸。对比丽
江山葡萄 , 其蛋白质 、脂肪 、VC 、蛋氨酸 、赖氨酸 、亮氨酸和苯
丙氨酸含量相对不高 , 其他已测成分均高于丽江山葡萄;VC
含量明显高于湖南省湘潭市郊三益葡萄基地出产的无污染
绿色食用葡萄[ 14] ;以 DRIs 为参考标准 , 18 ～ 50 岁的人每天
食用 100 g 野生毛葡萄即能满足身体每天对钙 、镁 、钾和铁元
素的需要量;与大泽山葡萄相比 ,油酸含量较高 。总体来说
野生毛葡萄中氨基酸含量不高。
3　结论与讨论
南岳衡山的野生毛葡萄是湖南山区分布较多的一种可
食用野生葡萄。试验结果表明 , 采自南岳衡山的野生毛葡萄
籽和皮中的原花青素含量分别高达为 85.54 mg/g 和
68.75 mg/g ,与其他地区(广西)野生葡萄籽皮中原花青素含
量相比含量要高。可能与南岳地区独特地理环境条件等因
素有关。
南岳衡山的野生毛葡萄中含有的常规营养成分种类丰
富。由于其生长地地处深山 , 没有工业以及生活污染 ,是其
含有较高含量的元素和 VC 的原因之一。尽管其蛋白质含量
不高 , 但其所含的人体八种必需氨基酸种类齐全 , 是一种营
养成分完整的植物。野生毛葡萄中不饱和脂肪种类也较丰
富。这几种不饱和脂肪酸能促进脑细胞代谢 、防止血栓形
成 、软化血管 、调节脂肪代谢和降低血中胆固醇 , 有益于老年
人和婴儿的健康 , 因而 ,野生毛葡萄油具有广阔的开发前景。
本试验仅对野生毛葡萄常规成分和原花青素含量进行
了测定 , 但对其功能主效成分的价值尚须进一步开发研究;
对其有效成分含量的化学组成 、性质需进一步研究。
参考文献
1　瞿汝糜.中国高等植物图鉴补编(第二册)[ M ] .北京:科学出版
社 , 1983:342～ 345.
2　王西锐 ,王华 ,阮仕立.野生葡萄种质资源及其利用研究进展[ J] .
中外葡萄与葡萄酒 , 2001(2):24～ 26.
3　刘涛 ,马龙 ,堵年生.葡萄的生物学作用研究进展[ J] .自然杂志 ,
2008 , 24(2):82～ 85.
4　Oszmianski J.Meh tod of ob taniing biologically active oligomers of
proanthocyanidins f rom plan t :PL 169082[ P] .1996.
5　A riga T.Antioxidan t composing proan th ocuanidins as prinecipal
com ponen t:US 4797421[ P] .1989.
6　T okutake Shoihci.Produ ction of poranthocyaidins:JP 74654871
[ P] .1999.
7　郑燕升 ,莫倩 ,廖政达 ,等.野生毛葡萄皮中原花青素提取工艺研
究[ J] 广西工学院学报.2007 , 18(4):45～ 49.
8　郑燕升 ,莫倩 ,廖政达.野生毛葡萄籽中原花青素提取工艺研究
[ J] 安徽农业科学, 2008 , 36(2):408～ 409.
9　涂佳 ,邓学良 ,李忠海 ,等.响应面优化醇提野生毛葡萄中原花青
素含量的研究[ J] .湖南林业科技 , 2010(1):1～ 6.
10　周荣祖.无标准分析法中电位滴定法测定有色配置酒总酸的方
法[ J] .酿酒.1998 , 128(5):20～ 21.
11　田兴彩.橙汁饮料中 VC 的测定[ J] .青海大学学报(自然科学
版), 2005 , 23(5):70～ 71.
12　李玉鹏 ,黄燕 ,吴绍华.野葡萄营养成分的测定[ J] .云南化工.
2008 , 35(2):50～ 51.
13　刘建华 ,程传格 ,董福英 , 等.大泽山葡萄籽油中脂肪酸成分的
GC/MS分析[ J] .化学分析剂量 , 2000 , 9(1):16～ 17.
14　庄红卫 ,谷战英.8个葡萄品种的果实品质比较分析[ J] .食品与
机械 , 2009 , 25(6):47～ 48.
85
营养与功能 　 2010年第 2期