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黄花补血草组织培养试验



全 文 :陕西林业科技  2006, ( 1): 10~ 12
Shaanxi Fo rest Science and Techno log y
黄花补血草组织培养试验
赵顺邦 1 ,耿生莲 2
( 1.西宁市南山绿化指挥部 ,青海西宁  810008; 2.青海省林业科学研究所 ,青海西宁  810016)
摘 要: 黄花补血草既是很好花材又可作药材。 通过组织培养试验筛选出了诱导培养基 M S+ BA0. 5+
N AA0. 5 ,诱导率达 92. 9% ;增殖培养基 M S+ BA0. 2+ N AA0. 2增殖系数为 8. 7;生根培养基采用 1 /2M S+
N AA0. 1生根率较高 ,为 65. 3%。
关键词: 黄花补血草 ;培养基 ;筛选 ;诱导
中图分类号: S722. 3+ 7  文献标识码: A  文章编号: 1001-2117( 2006) 01-0010-03
The Tissue Culture Test of Limonium aureum
ZHAO Shun-bang
1 , GEN G Sheng-lian
2
( 1. South Mount ian of X ining City ,X ining , Qinghai  810008; 2. Institute of
Forestry ,Qinghai Academy of Agriculture and Forestry ,X ining , Qinghai  810016)
Abstract: Limonium aureum was not only f low er but also medicine. by tissue culture test the induce
medium was M S+ BA0. 5+ N AA0. 5 , the ra te of induce was 92. 9 percent; the multiplica tion medium was
M S+ BA0. 2+ N AA0. 2 , the mul tiplication coef ficient w as mone than 8. 7; the st rike medium was 1 /2M S
+ N AA0. 1 , the ra te o f st rike was 65. 3 percent.
Key words: Limonium aureum L. ; M edium; Selectiom; Imduce

  黄花补血草 (Limonium aureum )属白花丹科
补血草属多年生草本 ,高 10~ 40 cm。青海产于玉
树、玛多、格尔木、德令哈、大柴旦、乌兰、都兰、西
宁、门源、刚察。生于林缘、荒漠、盐碱滩、山坡 ,海
拔 2 230~ 4 200 m。
黄花补血草在我国呼伦贝尔沙地、浑善达克
沙地、毛乌素沙地、乌兰布和沙漠、腾格里沙漠及
甘肃河西走廊沙地、华北北部等均有分布。多生于
滩地、湖盆、戈壁、石质山坡、流动沙丘等干旱荒漠
环境下。其金黄色膜质花萼长时间不落 ,在干旱、
植物稀少的荒漠地区极为醒目。 因其具有补血作
用 ,故又称金色补血草、金匙叶草。叶基生 ,灰绿
色 ,矩圆状匙形至倒披针形 ,花期枯萎 ,伞房状花
序 ,花萼金黄色 ,漏斗状 ,膜质。尤为奇特的是黄色
膜质花在 6~ 9月高燥无风季节 ,宿存不落 ,如一
团团金色火焰傲立于荒漠戈壁甚至流动沙丘上。
黄花补血草是干旱荒漠地区为数不多的野生
花卉之一 ,花色艳美 ,繁密华贵 ,保持时间极长 ,可
作插花中的配材和衬花 ,也可用来制作干花 ,其韵
味独特 ,是插花艺术中不可多得的花材。花萼可入
药 ,具有止痛、消炎、补血之功效 ,又是防风固沙的
优良植物 [1 ]。 经调查 ,黄花补血草结种量少 ,且根
蘖繁殖速度慢 ,对其进行快繁技术研究 ,为规模化
生产提供科学依据。
1 试验材料与方法
1. 1 外殖体及其处理
外殖体为 2003年 9月采集的黄花补血草种
子。用清水清洗 30 min 无菌水清洗 2次 75%
乙醇浸 30 s 无菌水冲洗 4次 0. 1%升汞 ( Hg-
⒇收稿日期: 2006-01-13
作者简介:赵顺邦 ( 1967— ) ,男 ,青海西宁人 ,林业工程师 ,主要从事造林工作。
CL2 )浸泡 10 min 无菌水冲洗 8次 吸干水分接
种。接种时将种子一分为二。
1. 2 培养基筛选 [2~ 3 ]
1. 2. 1 初代培养 设 5个初代培养基 , ( 1)
M S+ BA1+ N AA0. 1; ( 2) M S+ BA1+ N AA0. 2; ( 3)
M S+ BA2+ N AA0. 1 ; ( 4) M S+ BA0. 5+ N AA0. 1;
( 5) M S+ BA0. 5+ N AA0. 5。各 14瓶 ,共计 60瓶 ,每
瓶 3粒种子。
1. 2. 2 增殖培养 根据诱导成的组织体配制成
不同类型的 3个增殖培养基。 Ⅰ 、 M S+ BA1+
N AA0. 1 (无菌肿块 ) ;Ⅱ、 MS+ BA0. 2+ N AA0. 2 (丛
生芽 ) ;Ⅲ、 MS+ BA0. 5+ N AA0. 1 (愈伤组织 )。
1. 2. 3 壮苗培养基  BF1: 1 /2M S+ N AA0. 3;
BF2: M S+ BA0. 2+ N AA0. 04; BF3: M S+ BA0. 1+
N AA0. 1; BF4: M S+ BA0. 1+ N AA0. 05。
1. 2. 4 生根培养基  Bsh1: 1 /2M S; Bsh2: 1 /2M S
+ N AA0. 1 ; Bsh3: 1 /2M S+ N AA0. 5; Bsh4: 1 /2M S
+ N AA1 ; Bsh5: M S+ N AA1。
1. 3 培养条件
温度 25℃左右 ,光照度 2 000~ 2 500 lx,
14 h /d。试验用培养基以 M S为基本培养基 , pH5.
8,琼脂 7% ,用白砂糖代替蔗糖 ,用量为 6. 5 g /L。
2 结果与分析
2. 1 诱导愈伤组织发生与不定芽的分化
于 2004年 12月 6日接种 , 12月 17日观察发
现少量的外殖体长出红色结晶块 ,之后随着培养
时间增长 ,外殖体先产生肿块 ,再产生愈伤组织 ,
继而分化出不定芽。12月24日大量外殖体有诱导
组织。 从调查结果看 (表 1) , 5种培养基诱导率排
序为 ( 5)> ( 4)、 ( 1)> ( 3)> ( 2) ;前 3种培养基诱
导率均高于 85% ,说明高浓度的NAA对黄花补血
草组织诱导有明显的作用 ,而高浓度的 BA不利
于诱导组织的产生。试验证明 ,细胞分裂素 BA和
细胞生长素 NAA二者合理配置 ,其诱导效果最
好 ,如 ( 5)号培养基诱导率达 92. 9% 。
2. 2 不同诱导组织增殖培养基的确定及壮苗培

通过黄花补血草外殖体的诱导 ,诱导出 3种
不同的诱导体 ,即愈伤组织、丛生不定芽和红色肿
块 ,参考有关文献 [4 ] ,配置出了 3种增殖培养基 ,
经调查发现 ,Ⅲ号增殖培养基上分化出的小芽玻
璃化现象严重 ,增殖系数 1. 8;Ⅰ号培养基上分化
出的小芽细弱 ,叶片发白 ,生长不健康 ,增殖系数
3. 0;Ⅱ号培养基上分化的小芽数多且叶色正常 ,
增殖系数达 8. 7。故选择出Ⅱ号培养基为黄花补血
草增殖培养的最佳培养基。
表 1 黄花补血草组织诱导效果调查
诱导培养基号 BA N AA 诱导率 /% 诱导组织生长情况
( 1) 1 0. 1 85. 7
2瓶外殖体有红色结晶块 , 6瓶产生淡红色愈伤组织 , 4
瓶产生浅绿色丛生不定芽。
( 2) 1 0. 2 57. 1 4瓶外殖体有红色结晶块 , 4瓶产生淡红色愈伤组织。
( 3) 2 0. 1 64. 3 5瓶外殖体有红色结晶块 , 4瓶产生淡红色愈伤组织。
( 4) 0. 5 0. 1 85. 7
5瓶外殖体有红色结晶块 , 4瓶产生淡红色愈伤组织 , 3
瓶产生浅绿色丛生不定芽。
( 5) 0. 5 0. 5 92. 9
4瓶外殖体有红色结晶块 , 5瓶产生淡红色愈伤组织 , 4
瓶产生浅绿色丛生不定芽。
表 2 不同壮苗培养基壮苗效果
培养基号 分芽成苗率 /% 不定芽生长情况
BF1 34. 9 小芽细弱 ,叶片发白。
BF2 30. 5 少量出现玻璃化现象 ,叶焦黄 ,芽分化不明显。
BF3 51. 0 小芽细弱 ,叶片绿 ,少数发白。
BF4 85. 8 叶色嫩绿 ,小芽粗壮。
  增殖培养后的黄花补血草小芽生长弱 ,且不 易生根 ,针对这一情况 ,本次试验采取了壮苗措
·11·2006年第 1期            赵顺邦 等 黄花补血草组织培养试验                 
施 [5 ] ,筛选出了最佳壮苗培养基 (表 2) ,即 BF4壮
苗效果最佳 ,分芽成苗率高于 85% ,叶色嫩绿 ,小
芽粗壮 ,其余的培养基 BF1、 BF2和 BF3分芽成苗
率较低 ,叶色焦黄 ,叶芽生长与Ⅱ号增殖培养基上
培养的小芽没有明显的差异。
2. 3 不同激素浓度对黄花补血草不定芽生根的
影响
将 2 mm左右的无菌芽接种在 NAA浓度不
同的 5种培养基上 , 15 d后陆续生根 , 30 d后统计
生根情况 (图 1) , Bsh2培养基生根率最高 ,为 65.
3% ,其余 4种生根率都很低 ,均在 41%以下 ,生根
率不是很理想 ; 从图 1也可看出 ,用低浓度的砂
糖 ,比砂糖含量高的培养基生根率高 , Bsh5即 MS
+ NAA的生根率最低 ,只有 24. 4% ;生根初期 ,
各配方的无菌芽生出的根浅色 ,光滑 ,略透明 , 30
d后根变绿且较粗 ,有 3~ 5条毛根。
图 1 黄花补血草在不同生根培养基中的生根率
2. 4 炼苗及移栽
选择根系完整、健壮的小苗 ,在温度和湿度与
培养间的条件相近的炼苗间 ,炼苗 3~ 4 d,移入温
室 ,去掉瓶盖 ,过渡环境炼苗 3~ 7 d。 之后洗去根
部培养基 ,移入基质 ,基质为泥炭+ 珍珠岩 ,比例
为 7∶ 3,并用质量浓度为 10~ 30 g /L的 Fe2 SO3溶
液消毒。移栽后覆盖遮阳网。每天适量喷水 ,利用
自然光照 ,保持室温 20~ 30℃、空气相对湿度 70%
以上 , 10~ 15 d去遮阳网。定植一周后 ,可适当叶
面追肥 ,用 1 500倍 KH2 PO4喷施 ,每周 2次。 3周
后调查成活率 ,为 87. 3% 。
3 小结与讨论
( 1)黄花补血草种子作为外殖体 ,先用 75%乙
醇浸 30 s,再用 0. 1%升汞 ( HgCL2 )浸泡 10 min,能
达到很好的杀菌效果。
( 2)用诱导培养基 MS+ BA0. 5+ N AA0. 5 ,对黄
花补血草不定芽的分化效果最好 ,诱导率达
92. 9% 。
( 3)黄花补血草增殖培养时 ,用培养基 M S+
BA0. 2+ N AA0. 2既能达到高的增殖系数 ( 8. 7)又能
培养生长健壮的幼芽。
( 4)生根培养基采用 1 /2M S+ N AA0. 1生根率
较高 ,为 65. 3%。但不是很理想 ,提高生根率的培
养基配制技术有待进一步研究。
参 考 文 献:
[1 ] 中国科学院西北高原生物研究所编著 .青海植物志 [ M ].西
宁:青海人民出版社 , 1996.
[2 ] 刘青林 ,马玮 ,郑玉梅 ,等 .花卉组织培养 [M ].北京:中国农
业出版社 , 2003.
[3 ] 程广有 .名优花卉组织培养技术 [M ] .北京:科学技术文献
出版社 , 2003.
[4 ] 赵玉芬 ,刘满光 ,孟维英 ,等 .花烛的低成本快速繁殖技术研
究 [ J] .河北林业科技 , 2005, 139( 4): 73— 75.
[5 ] 程家胜 .植物组织培养与工厂化育苗技术 [ M ] .北京:金盾
出版社 , 2003.
·12· 陕 西 林 业 科 技