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楮头红化学成分的分离与鉴定



全 文 :China Pharmacy 2012 Vol. 23 No. 7 中国药房 2012年第23卷第7期
楮头红 Sarcopyramis nepalensis Wall.,民间又称风柜斗
草,为野牡丹科肉穗草属植物,在我国主要分布于台湾、福建、
江西、云南和四川等地。该植物以全草入药,具有清热解毒、
凉血利水之效,是治疗急性肝炎、肺热咳嗽、风湿痹痛等疾病
的珍稀名贵中草药[1~4],在闽台地区民间应用极广。临床研究
表明,楮头红对急性肝炎(甲肝、乙肝急性期)疗效最佳,对慢
性肝炎及乙肝病毒携带者有效[4]。然而,目前对楮头红药理活
性及化学成分的研究还不是很全面,仅见其提取物抗氧化、抗
菌及保肝降酶活性的报道[5,6];从楮头红中分离鉴定了一些甾
醇、黄酮和酚酸类成分 [7~9]。本试验中,笔者采用硅胶、Seph-
adex LH-20和ODS等柱色谱方法从楮头红乙醇提取物的氯仿
和乙酸乙酯部位中分离得到了7个化合物,并采用波谱技术对
得到的化合物进行了结构鉴定。
1 仪器与试药
Avance-600 FT型核磁共振光谱(NMR)仪(瑞士Bruker公
司);HP 5973 型质谱(MS)仪(美国安捷伦科技有限公司);
RE-52A型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);各种柱色谱硅
胶(200~300目)、GF254薄层硅胶板(0.25 mm)均为青岛海洋化
工厂生产。
ODS(美国 GE 公司);Sephadex LH-20 凝胶(美国
Pharmacia公司);其他试剂均为分析纯。楮头红药材于 2010
年8月购自福建漳州市南靖县药材市场,经笔者鉴定为野牡丹
科肉穗草属植物楮头红S. nepalensis Wall.。
2 提取与分离
取干燥楮头红全草5 kg,粉碎后以8倍量60%乙醇冷浸提
取3次,每次提取1周,合并提取液减压浓缩,得浸膏860 g。取
浸膏 800 g,溶解于 5 L蒸馏水中,依次用等体积的石油醚、三
氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇分别萃取 3次,回收溶剂后得石油
醚部位 14 g、三氯甲烷部位 19 g、乙酸乙酯部位 76 g和正丁醇
部位183 g。
三氯甲烷部位经硅胶柱色谱、石油醚-丙酮梯度洗脱、薄层
色谱(TLC)指导合并相同馏分,再经丙酮重结晶、反复硅胶柱
色谱和Sephadex LH-20纯化,得到一白色针状结晶(化合物1)
和化合物2~4。
乙酸乙酯部位经硅胶柱色谱、氯仿-甲醇梯度洗脱、TLC指
导合并相同馏分,再经反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20以及
ODS等色谱手段进行分离,得到化合物4~7。
3 结构鉴定
化合物1:白色针状结晶(丙酮),与β-谷甾醇对照品在不同
溶剂展开系统下在同一薄层板上Rf值均一致,TLC板经硫酸
乙醇显色呈紫色斑点,故确定化合物 1为β-谷甾醇。张锦文
等[8,9]也曾从楮头红中分离得到了该化合物。
化合物2:白色粉末,难溶于石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮
和甲醇等有机溶剂,易溶于吡啶和氯仿甲醇混合溶剂,与胡萝
卜苷对照品在不同溶剂展开系统下在同一薄层板上Rf值均一
致,1H-NMR数据与文献[10]对照基本一致,故确定化合物2为胡
*副主任药师。研究方向:医院药学。E-mail:zyyx2006@126.
com
楮头红化学成分的分离与鉴定
伏 晓*,樊建领,巨秦豫(河南省中医院药剂科,郑州 450002)
中图分类号 R284.1;R927 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2012)07-0638-02
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2012.07.22
摘 要 目的:分离、鉴定楮头红乙醇提取物中的化学成分。方法:用60%乙醇浸泡提取楮头红,系统溶剂萃取楮头红乙醇提取
物,并用硅胶、Sephadex LH-20和ODS等柱色谱方法分离氯仿和乙酸乙酯部位,再根据化合物的理化性质、核磁共振光谱和电喷
雾质谱数据与相关文献对照鉴定其结构。结果:从楮头红乙醇提取物的氯仿和乙酸乙酯部位中分离得到7个化合物,分别为β-谷
甾醇(1)、胡萝卜苷(2)、山柰酚(3)、槲皮素(4)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(5)、芦丁(6)和山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(7),其中化合
物3~7为首次从该植物中分离得到。结论:本试验结果可为楮头红的进一步开发利用提供物质基础。
关键词 楮头红;化学成分;分离;结构鉴定
Isolation and Identification of Chemical Constituents from Sarcopyramis nepalensis
FU Xiao,FAN Jian-ling,Jü Qin-yu(Dept. of Pharmacy,Henan Hospital of Traditional Chinese Medicine,Zheng-
zhou 450002,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To isolate and identify chemical constituents from the ethanol extracts of Sarcopyramis nepalensis.
METHODS:S. nepalensis were extracted with 60% ethanol. The ethanol extracts were successively partitioned with systematic sol-
vent. The chloroform extract and ethyl acetate extract were separated by silica gel,Sephadex LH-20 and RP-ODS column. Their
chemical structures were identified by physicochemical properties,NMR and ESI-MS spectral analysis. RESULTS:Seven chemical
constituents were isolated and identified as β-Sitosterol(1),daucosterol(2),kaempferol(3),quercetin(4),quercetin-3-O-β-D-glu-
copyranoside(5),rutin(6)and kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside(7). Compounds 3~7 were isolated from the plant for the
first time. CONCLUSION:The results provide the scientific basis for further exploitation of S. nepalensis.
KEY WORDS Sarcopyramis nepalensis;Chemical constituents;Isolation;Structure identification
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中国药房 2012年第23卷第7期 China Pharmacy 2012 Vol. 23 No. 7
萝卜苷。
化合物 3:黄色粉末,盐酸-镁粉反应呈阳性,Molish反应
显阴性;紫外图谱在366和265 nm波长下均有最大吸收峰,提
示可能为黄酮苷元类化合物。ESI-MS m/z:285 [M-H]-;
1H-NMR(600 MHz,DMSO-d6) δ:8.03(2H,d,J=8.9 Hz,
H-2′,6′),6.92(2H,d,J=8.9 Hz,H-3′,5′),6.41(1H,d,J=1.8
Hz,H-8),6.17(1H,d,J=1.8 Hz,H-6),12.47(1H,brs,OH-5)。以
上1H-NMR数据与文献[11]对照一致,故确定化合物3为山柰酚。
化合物 4:黄色粉末,盐酸-镁粉反应呈阳性,Molish反应
显阴性;紫外图谱在370和255 nm波长下均有最大吸收峰,提
示可能为黄酮苷元类化合物。ESI-MS m/z:301 [M-H]-;
1H-NMR(600 MHz,DMSO-d6)δ:12.48(1H,brs,OH-5),7.68
(1H,d,J=2.0 Hz,H-2′),7.54(1H,dd,J=2.0,8.4 Hz,H-6′),
6.88(1H,d,J=8.4 Hz,H-5′),6.40(1H,d,J=1.8 Hz,H-8),
6.18(1H,d,J=1.8 Hz,H-6)。以上 1H-NMR数据与文献 [12]对
照一致,故确定化合物4为槲皮素。
化合物5:淡黄色粉末,盐酸-镁粉反应呈阳性,Molish反应
显阳性;紫外图谱在356和258 nm波长下均有最大吸收峰,提
示可能为黄酮苷类化合物。ESI-MS m/z:463 [M-H]-;1H-NMR
(600 MHz,DMSO-d6)δ:7.58(1H,dd,J=2.2,9.0 Hz,H-6′),
7.57(1H,d,J=2.2 Hz,H-2′),6.84(1H,d,J=9.0 Hz,H-5′),
6.40(1H,d,J=2.1 Hz,H-8),6.19(1H,d,J=2.1 Hz,H-6)。
以上 1H-NMR数据与化合物4类似。但化合物5在5.47(1H,d,
J=7.3 Hz,H-1″)处有一糖端基质子信号:3.08~3.58(6H,m,
glu上的H),说明化合物 5为化合物 4的糖苷。13C-NMR(600
MHz,DMSO-d6)δ:156.9(C-2),134.0(C-3),178.1(C-4),161.9
(C-5),99.4(C-6),164.7(C-7),94.1(C-8),156.9(C-9),104.7
(C-10),122.2(C-1′),115.9(C-2′),145.5(C-3′),148.9
(C-4′),116.8(C-5′),121.9(C-6′),101.6(C-1″),74.8(C-2″),
77.2(C-3″),70.6(C-4″),78.1(C-5″),61.7(C-6″)。以上波谱
数据与文献 [13]对照基本一致,故确定化合物 5 为槲皮
素-3-O-β-D-葡萄糖苷。
化合物6:淡黄色粉末,盐酸-镁粉反应呈阳性,Molish反
应显阳性;紫外图谱在356和258 nm波长下均有最大吸收峰,
提示可能为黄酮苷类化合物。ESI-MS m/z:609 [M-H]-;
1H-NMR(600 MHz,DMSO-d6,δ,ppm,J/Hz)δ:7.59(1H,dd,
J=2.2,9.0 Hz,H-6′),7.54(1H,d,J=2.2 Hz,H-2′),6.85
(1H,d,J=9.0 Hz,H-5′),6.40(1H,d,J=2.1 Hz,H-8),6.20
(1H,d,J=2.1 Hz,H-6),5.32(1H,d,J=7.2 Hz,glu-H-1″),
4.39(1H,d,J=1.6 Hz,rha-H-1″′),0.99(3H,d,J=6.2 Hz,
rha-CH3)。以上波谱数据与文献[14]对照基本一致,故确定化合
物6为芦丁。
化合物 7:淡黄色粉末,盐酸-镁粉反应呈阳性,Molish反
应显阳性;紫外图谱在346和265 nm波长下均有最大吸收峰,
提示可能为黄酮苷类化合物。ESI-MS m/z:447 [M-H]-;
1H-NMR(600 MHz,DMSO-d6,δ,ppm,J/Hz)δ:12.62(1H,s,
OH-5),10.88(1H,s,OH-7),8.04(2H,d,J=8.8 Hz,H-2′,
6′),6.89(2H,d,J=8.8 Hz,H-3′,5′),6.44(1H,d,J=1.6
Hz,H-8),6.21(1H,d,J=1.6 Hz,H-6)。以上 1H-NMR数据与
化合物 3 类似。但化合物 7 在 5.45(1H,d,J=7.6 Hz,
glu-H-1″)处有一糖端基质子信号,说明化合物7为化合物3的
糖苷。 13C-NMR(600 MHz,DMSO-d6)δ:156.5(C-2),133.9
(C-3),178.0(C-4),161.5(C-5),99.8(C-6),164.1(C-7),94.6
(C-8),156.9(C-9),104.9(C-10),121.1(C-1′),131.4(C-2′),
115.6(C-3′),160.6(C-4′),115.6(C-5′),131.4(C-6′),101.9
(C-1″),74.8(C-2″),77.0(C-3″),70.4(C-4″),78.0(C-5″),
61.3(C-6″)。以上波谱数据与文献[15]对照基本一致,故确定化
合物7为山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷。
4 讨论
综上,从楮头红乙醇提取物的氯仿和乙酸乙酯萃取部位
一共分离得到 7个化合物,采用波谱技术进行结构鉴定,分别
为β-谷甾醇(1)、胡萝卜苷(2)、山柰酚(3)、槲皮素(4)、槲皮
素-3-O-β-D-葡萄糖苷(5)、芦丁(6)和山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖
苷(7),其中化合物3~7为首次从该植物中分离得到。
楮头红中主要的活性物质为黄酮类化合物,黄酮是一类
具有广泛药理活性的多酚化合物,包括抗氧化、清除自由基、
抗肿瘤、抗菌、抗病毒和抗炎等。槲皮素及其糖苷衍生物是植
物界分布最广泛的黄酮类化合物,具有抗菌、抗炎、抗病毒等
药理作用[16]。槲皮素及其糖苷衍生物是否为楮头红发挥保肝
降酶活性的物质基础还需要进一步的研究。本试验结果可为
楮头红的进一步开发利用提供一定的物质基础。
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(收稿日期:2011-08-05 修回日期:2011-09-22)
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