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小鼠急性八角枫中毒的病理学观察



全 文 :法 医 学 杂 志 2009 年 10 月 第 25 卷 第 5 期
作者简介:张长银(1953—),男,安徽青阳人。 主检法医师,主
要从事有毒植物中毒的毒理病理学研究。 Tel:13905668505。
通信作者:朱建华,男。 副教授,硕士生导师。 E-mail:zhu9jian-
hua@sina.com。
八角枫(Alangium Chinense)为八角枫科八角枫
属植物,别名白龙须、五角枫、八角金盘、白金条等。主
要分布于华东、中南及四川、贵州等地。其须根、粗根、
细根及枝叶中均含有 Dl-毒藜碱(Dl-anabasine)[1],是
肌肉松弛作用的活性成分,以须根含量最多。另外,尚
含有水杨苷、树脂及强心苷。 具有祛风除湿、舒经活
络、散瘀止痛功用,主治风湿痹痛、四肢麻木、瘫痪、跌
打损伤等。 本药具有良好的药用价值[2],但亦有毒,尤
以须根毒性更大, 常因服用过量或未炮制品而致中
毒。法医实践中已有八角枫中毒致死案例报道[3]。本实
验采用八角枫须根水煎剂对小鼠行急性染毒实验,观
察中毒后主要组织器官的病理变化,为八角枫中毒的
防治及法医学鉴定提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验用药
本实验八角枫采集自安徽省南陵县丫山山区。八
角枫原植物品种鉴定由安徽中医药高等专科学校刘
晓龙高级讲师完成。 八角枫浓缩液的制备:将八角枫
须根阴干切碎,加蒸馏水浸泡 30min后煎煮 2 h,过滤
原液,再加蒸馏水煎煮 1 h 过滤原液,合并两次过滤
原液浓缩至每克相当于 1 g原药的浓缩液。 装瓶内置
冰箱保存。
1.1.2 实验动物
健康昆明种小鼠,雌雄各半,体质量(19±2) g,由
江苏省南京市江宁区青龙山动物繁殖场提供。
小鼠急性八角枫中毒的病理学观察
张长银 1,张礼俊 2,胡永良 3,夏显东 3,卢林明 4,闫宜锋 3,徐 祥 3,柯 玮 3,朱建华 3
(1. 池州秋诚司法鉴定所,安徽 池州 247000; 2. 旌德县公安局,安徽 旌德 242600; 3. 皖南医学院 医学
三系,安徽 芜湖 241002; 4.皖南医学院 病理教研室,安徽 芜湖 241002)
摘 要: 目的 观察急性八角枫中毒小鼠器官组织病理学变化并探讨其中毒机制。 方法 应用八角枫须
根水煎液对小鼠灌胃急性染毒,提取组织器官经 HE染色后进行病理学观察。 结果 实验组主要病理改变
为肺泡腔出血、肺间质出血,肝窦扩张、淤血,肝细胞水肿,蛛网膜下腔出血,其他器官呈淤血、出血性改
变。 结论 八角枫毒性作用的主要靶器官或靶组织为肺、肝和血管平滑肌;毒性作用与剂量具有相关性。
关键词: 法医病理学;中毒;八角枫;小鼠
中图分类号: DF795.1 文献标志码: A doi: 10.3969/j.issn.1004-5619.2009.05.003
文章编号: 1004-5619(2009)05-0329-03
The Pathological Observation of Acute Intoxication by Alangium Chinese in Mice
ZHANG Chang-yin1, ZHANG Li-jun2, HU Yong-liang3, XIA Xian-dong3, LU Lin-ming4, YAN Yi-feng3,
XU Xiang3, KE Wei3, ZHU Jian-hua3
(1. Chizhou Qiucheng Forensic Judical Appraisal Institute, Chizhou 247000, China; 2. Jingde Public Secu-
rity Bureau, Jingde 242600, China; 3. The Third Medical Department, Wannan Medical College, Wuhu 241001,
China; 4. Department of Pathology, Wannan Medical College, Wuhu 241001, China)
Abstract: Objective To investigate the pathological change of mice organ intoxicated by Alangium Chinese
and its poisoning mechanism. Methods Mice were intoxicated by gavage with extract of Alangium Chinese.
Then the histopathologic examination was made for evaluating the pathological changes in the organs of
the poisoned mice by HE staining. Results The main pathological changes included alveolar hemorrhage,
pulmonary interstitial hemorrhage, sinus hepaticus expansion and congestion, hepatocyte edema, subarach-
noid hemorrhage, congestion and hemorrhage of other organs. Conclusion The main target organs or tissue
of Alangium Chinese are the lungs, liver and vascular smooth muscle. There is correlation between the
toxic effect and the dosage.
key words: forensic pathology; poisoning; Alangium Chinense; mice
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Journal of Forensic Medicine, October 2009, Vol.25, No.5
1.2 方法
1.2.1 动物分组与染毒急性中毒实验
选取健康小鼠 40只(雌雄各半)经适应性饲养 2d
后,随机分为 3 个实验组和 1 个对照组,每组 10 只。
文献报道急性中毒实验小鼠腹腔注射八角枫须根
煎剂的 LD50为 9.98 g/kg[4]。本实验参照此 LD50值,将
3 个实验组分别予以 1.0、2.0 和 3.0 倍 LD50剂量的八
角枫须根水煎浓缩液进行灌胃染毒的急性中毒实验。
对照组按 1.0 LD50剂量组相同量的生理盐水灌胃。 实
验组在灌胃前禁食 12 h,急性染毒一次。 实验组及对
照组正常喂养, 实验中死亡小鼠及时解剖取脑、 心、
肝、肺、肾等器官固定。 存活小鼠观察 14 d 后全部采
用颈椎脱位法处死,解剖,取同上器官固定。
1.2.2 病理切片的制作
取上述固定后器官常规切片、HE染色、光镜观察。
2 结 果
2.1 一般观察
1.0 LD50 组小鼠灌服八角枫须根水煎液灌胃后
40 min,其中 1 只出现呼吸加快继则减慢、抽搐、四肢
瘫软、死亡,其余小鼠未见明显异常;2.0 LD50组小鼠
灌胃后 0.5 h内, 其中 4 只小鼠出现呼吸先加快后减
弱、抽搐、四肢瘫软、死亡,其余小鼠未见明显异常;
3.0 LD50组小鼠灌胃后 0.5 h 内,其中 9 只小鼠出现呼
吸先加快后减弱、抽搐、四肢瘫软、死亡,另 1 只小鼠
未见明显异常。 对照组小鼠灌胃后均无明显异常。 各
组死亡率比较,灌胃剂量越大,死亡率越高(表 1)。
各组未死亡小鼠观察 14 d,对照组小鼠能正常进
食、进水,体重增加;而实验组进食有所下降,体重增
长慢。
表 1 染毒小鼠与对照组死亡率的比较
组别 灌胃剂量/(g·kg-1) 死亡数/例 死亡率/%
2.0 LD50 20 4 40
3.0 LD50 30 9 90
1.0 LD50 10 1 10
对照 10 0 0
2.2 组织学观察
2.2.1 急性中毒死亡小鼠组织病理学改变
脑:1.0 LD50组和 2.0 LD50组 蛛网膜下腔小灶漏
出性出血,神经元无明显变化(图 1)。 3.0 LD50组 蛛
网膜下腔出血,神经元未见明显改变,脑组织血管扩
张充血(图 2)。
肺:1.0 LD50组 肺间质血管淤血, 局灶性肺泡
内出血。 2.0 LD50组 肺泡壁毛细血管扩张充血,大
片灶状肺泡腔内出血(图 3)。 3.0 LD50组 肺间质血
管扩张充血,肺泡壁毛细血管弥漫性扩张充血,部分
肺泡腔内可见粉红色水肿液,局灶性肺泡腔内充满红
细胞,支气管壁未见明显异常,管腔内有红细胞充填
(图 4)。
肝:1.0 LD50组 肝小叶中央区肝细胞明显水肿。
2.0 LD50组 肝细胞弥漫性水样变,气球样变,以小叶
中央明显;中央静脉扩张、淤血,汇管区淤血(图 5)。
3.0 LD50组 肝间质血管扩张充血,肝窦扩张,淤血;
肝细胞严重水肿,气球样变,以小叶中央明显;中央静
脉及汇管区血管扩张,淤血(图 6)。
心肌:1.0 LD50组 心肌间质略疏松,灶性心肌细
胞水肿。 2.0 LD50组 心肌间质略疏松,散在性心肌细
胞轻度水肿,横纹尚清晰(图 7)。 3.0 LD50组 心肌间
质略疏松,血管无明显扩张充血,心肌细胞未见明显
改变(图 8)。
1 2 3 4
图 1 2.0 LD50组,脑蛛网膜下腔出血,神经元无明显变化 HE×400; 图 2 3.0 LD50组,脑组织血管扩张充血,神经
元无明显变化 HE×400; 图 3 2.0 LD50组,肺泡壁毛细血管充血,肺泡腔内出血 HE×400; 图 4 3.0 LD50组,肺泡壁毛
细血管充血,肺泡腔内出血,支气管腔内少量出血 HE×400
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法 医 学 杂 志 2009 年 10 月 第 25 卷 第 5 期
图 5 2.0 LD50组,肝细胞水肿,以小叶中央区明显,中央静脉扩张淤血 HE×100; 图 6 3.0 LD50组,肝细胞水肿,
气球样变,中央静脉扩张淤血 HE×400; 图 7 2.0 LD50组,心肌细胞轻度水肿 HE×400; 图 8 3.0 LD50组,心肌细胞未
见明显病理改变,心肌间质略疏松 HE×400
2.2.2 急性中毒未死亡小鼠及对照组小鼠组织病理学改变
脑、肺、肝、心等器官均未见明显异常病理改变。
3 讨 论
目前国内外对八角枫的研究,主要为成分分析和
药理作用的探讨。 相关研究显示:八角枫须根含毒藜
碱量较多,毒性较大。 毒藜碱既是八角枫的主要活性
成分,又是其主要毒性成分。 兔、大鼠、鸡等动物实验
及临床观察表明,毒藜碱肌肉松弛作用的类型属双相
型[5]。 毒藜碱可抑制电刺激引起的兔胫神经-胫前肌
传导和膈神经-膈肌传导, 而对电流直接刺激肌肉引
起的收缩无抑制作用,说明其作用点在于阻断神经肌
肉接点的传导,对肌肉本身无直接作用。 毒藜碱的呼
吸抑制与呼吸肌麻痹和其中枢抑制作用有关;毒藜碱
对神经节亦有阻断作用[6]。
本实验 2.0 和 3.0 LD50组在采用八角枫须根水煎
液给小鼠灌胃 0.5 h 内, 出现呼吸先加快后减弱、抽
搐、四肢瘫软等中毒症状。死亡快,表明其急性中毒死
亡原因与呼吸肌麻痹和呼吸中枢抑制作用有关。
本实验观察到:各急性中毒实验组小鼠肝细胞呈
水样变性,病变部位以肝小叶中央为重,且伴有汇管区
淤血、静脉扩张;肺间质血管扩张、淤血,肺泡腔内出
血。 实验组其他组织器官中均见血管扩张,余未见明
显异常。 上述结果显示中毒致死小鼠明显病变的器官
组织为肝、肺和血管,可作为八角枫中毒毒作用的靶器
官、靶组织。肺、心肌等器官和组织 2.0LD50组组织病理
学改变较 3.0LD50组显著,这可能与 3.0LD50组剂量大,
动物中毒死亡快,病理改变尚来不及完全发生有关。
研究报道八角枫总碱可引起离体兔肠肌节律性
收缩增强,其收缩作用随剂量增加而增加,但大剂量时
则使肠管松弛 [7],表明八角枫须根大剂量亦可引起平
滑肌松弛。本实验应用中毒剂量染毒后观察发现多器
官血管明显扩张,尤其未见明显损伤的器官血管扩张
也较明显,这可能由血管平滑肌松弛引起。因此,认为
血管平滑肌亦可作为八角枫中毒作用的靶组织。据报
道,八角枫总碱 1.9 mg/kg,家兔静脉注射连续 15 d,可
见肝轻度脂肪变性,轻度炎症或坏死[8],此亦为本实验
将肝作为八角枫须根毒作用的靶器官提供依据。作者
认为肺、肝及器官血管扩张等病理变化可为八角枫中
毒的法医学鉴定提供参考依据。
本实验结果表明八角枫毒作用与剂量呈正相
关, 提示临床使用八角枫治疗慢性风湿性关节炎等
疾病时一定要严格控制剂量,以防中毒。
参考文献:
[1] Takada K, Swedberg MD, Goldberg SR, et al. Dis-
criminative stimulus effects of intravenous l -nicotine
and nicotine analogs or metabolites in squirrel monkeys[J].
Psychopharmacology(Berl),1989,99(2):208-212.
[2] 郭晓庄. 有毒中草药大辞典[M].天津:天津科技翻译出
版公司,1992:12.
[3] 张昌华,王登文,许小明,等. 八角枫中毒死亡 1 例[J].法
医学杂志,2008,24(2):155-156.
[4] 南京中医药大学. 中药大辞典[M].第 2 版.上海:上海科
学技术出版社,2006:32.
[5] 薛开先. 蟾力苏、新斯的明对抗八角枫碱引起的呼吸麻
痹的实验研究[J].药学学报,1979,14(12):738-741.
[6] 浙江医科大学. 八角枫碱肌肉松弛作用的研究[J].新医
药学杂志,1974,(10):45-48.
[7] 王本祥. 现代中药药理学[M].天津:天津科学技术出版
社,1997:492.
[8] 浙江医科大学. 肌肉松弛剂八角枫的药理研究与临床
观察[J].中华医学杂志,1972,(1):44-49.
(收稿日期:2009-07-21)
(本文编辑:张建华)
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