全 文 ：高效液相色谱法测定复方荔枝草颗粒剂
中桃叶珊瑚苷的含量
裴云萍 ,方 芸 ,吴正红
(南京大学医学院附属鼓楼医院临床药理室 ,南京 210008)
　　[ 摘要] 　目的:建立测定复方荔枝草颗粒剂中桃叶珊瑚苷含量的高效液相色谱法。方法:色谱柱为 KF-C18柱
(250mm×4.6mm , 10μm), 流动相为甲醇-水-磷酸(30∶969.5∶0.5);柱温为 35℃;检测波长为 203nm;流速为1.0
m L·min -1 。结果:线性范围 0.05 ～ 0.80μg , 平均回收率为 84.46%, RSD为 1.37%(n=9)。结论:本法简便 、灵敏 、
重现性好 ,可作为该制剂的质量控制标准。
[ 关键词] 　桃叶珊瑚苷;复方荔枝草颗粒剂;高效液相色谱
[ 中图分类号] R284.1　　[ 文献标识码] B　　[ 文章编号] 1003-3734(2002)09-0709-02
HPLC determination of aucubin in compound Salvia plebeia granules
PEI Yun-ping , FANG Yun ,WU Zheng-hong
(Clinical Pharmacological Department , The Drum Tower Hospi tal , Nanj ing 210008 , China)
[ Abstract] 　Objective:To establish a HPLC method fo r the determination of aucubin in com-
pound Salvia plebeia g ranules.Methods:Aucubin w as determined on KF-C18 colum(250mm ×4.6
mm ,10μm)w ith mobile phase of methanol-water-phosphoric acid(30∶969.5∶0.5)and the tempera-
ture at 35℃.The detect ive w aveleng th w as 203nm and the f low rate w as 1.0mL·min-1.Results:The
linear range of aucubin w as 0.05 ～ 0.80μg , the mean average recovery w as 84.46%w ith the RSD of
1.37%(n =9).Conclusion:The method is simple , sensit ive and highly reproducible and may be used
for quality cont rol of the granules.
[ Key words] 　aucubin;compound Salv ia plebeia g ranules;HPLC
　　复方荔枝草颗粒剂是由车前草 、荔枝草 、六月
雪 、紫花地丁等中药制成的纯中药制剂 ,具有清热解
毒 、利尿通淋之功效[ 1] 。车前草为方中一味主药 ,
近代研究认为车前草利尿的有效成分为桃叶珊瑚苷
(aucubin)[ 2] 。本实验采用高效液相色谱法(HPLC)
测定复方荔枝草颗粒剂中桃叶珊瑚苷的含量 ,方法
准确 ,灵敏度高 。
1　仪器与试药
LC-10A高效液相色谱仪(日本岛津);SPD-
10A紫外检测器;C-R7A数据处理机;USA7512进
样器(定量管 20μL);UV-2201型紫外分光光度计
(日本岛津);AG204电子分析天平(上海梅特勒-托
利多公司);pH 计(上海分析仪器厂);超声波振荡器
(无锡超声电子设备厂)。桃叶珊瑚苷标准品(含量
98%以上 ,日本和光纯药工业株式会社提供);复方
荔枝草颗粒剂(本院制剂室自制);甲醇为分析纯。
2　实验方法与结果
2.1　色谱条件 　色谱柱为 KF-C18柱(4.6mm ×
250mm ,10μm);流动相为甲醇-水-磷酸(30∶969.5∶
0.5);柱温 35℃;流速 1.0mL·min-1;纸速 2mm·
min
-1 ,检测波长为 203nm 。
在此条件下 ,桃叶珊瑚苷对照品溶液 、复方荔枝
草颗粒剂提取液及不含车前草的样品阴性对照液的
HPLC图见图 1。
图 1　复方荔枝草颗粒剂 HPLC色谱图
A 桃叶珊瑚苷对照品;B 复方荔枝草颗粒剂提取液;
C 不含车前草的样品阴性对照液
a:桃叶珊瑚苷(t R=20.5min)
—709—
　Chinese Jou rnal of New Drugs 2002 , Vol.11 No.9 中国新药杂志 2002年第 11卷第 9期　
2.2　溶液的制备
2.2.1　桃叶珊瑚苷对照品溶液　精密称取桃叶珊
瑚苷对照品约 8mg 置 10mL 量瓶中 ,加入适量甲醇
溶解后再稀释至刻度 ,摇匀 ,即得桃叶珊瑚苷标准液
(0.8mg·mL-1)。
2.2.2　复方荔枝草颗粒剂提取液　精密称取复方
荔枝草颗粒剂细粉约 5g ,置于磨口锥形瓶中 ,精密
加入甲醇 20mL。称重 ,置超声振荡器中超声 1.5h
后 , 再称重 ,补加甲醇至原重 ,过滤 ,弃去初滤液 ,收
集续滤液 。
2.2.3　样品阴性对照液　按复方荔枝草颗粒剂的
处方配比 ,取除车前草外的其他 3味草药共 50g ,加
水煎煮 2次 ,每次 2h ,合并煎液 ,滤过 ,滤液浓缩至
相对密度为 1.01的浸膏 ,放冷后加乙醇使含醇量达
60%,搅拌 ,静置 48h ,取上清液回收乙醇 ,浓缩至相
对密度为 1.08的清膏。取清膏适量(约相当于复方
荔枝草颗粒剂 5g),置于磨口锥形瓶中 ,精密加入甲
醇20mL 。称重 ,置超声振荡器中超声 1.5h 后 ,再
称重 ,补甲醇至原重 ,过滤 ,弃去初滤液 ,收集续滤
液。
2.3　标准曲线的制备　精密吸取桃叶珊瑚苷对照
品溶液 1.0mL 置于 10mL 量瓶中 ,用流动相稀释至
刻度 ,摇匀 ,精密吸取 5mL 置于 10mL 量瓶中 ,用流
动相稀释至刻度 ,摇匀 ,依次重复操作 ,配制浓度分
别为 40.00 ,20.00 ,10.00 ,5.00 ,2.50μg·mL-1的标
准溶液 ,精密量取 20μL 进样 ,按上述条件测定 ,结
果在 2.50 ～ 40.00μg·mL-1浓度范围内 ,色谱峰面
积(Y)和桃叶珊瑚苷浓度(X)之间呈线性关系。其
回归方程为:Y =7924.19X -548.90 , r=0.9999。
2.4　回收率试验　在 3份已知桃叶珊瑚苷含量的
复方荔枝草颗粒剂提取液中加入适量的桃叶珊瑚苷
标准品 ,制成 3种不同浓度的检测液 ,按样品测定项
下操作 ,每一浓度重复 3次 , 计算桃叶珊瑚苷含量
和回收率 ,结果见表 1 。
表 1　回收率试验结果　　　　n=3
加入量 μg 实测量 μg 回收率 % RSD %
5.2091 4.4250 84.95 1.73
9.3996 8.0897 86.06 2.04
17.7805 15.2414 85.72 1.83
2.5　精密度试验　以高 、中 、低 3种不同浓度的桃
叶珊瑚苷标准品溶液 ,按标准曲线测定项下操作 ,考
察 1d和 1周的日间变异性 ,结果见表 2 。
表 2　精密度试验结果　　　　n=5
浓度
μg·mL-1
日内
测得值
μg·mL-1
RSD
%
日间
测得值
μg·mL-1
RSD
%
2.50 2.5013 1.68 2.5505 1.89
10.0 9.9190 0.86 9.8407 1.04
40.0 39.5734 0.44 39.3439 1.15
2.6　重现性考察　精密称取复方荔枝草颗粒剂细
粉约 5g ,按样品测定项下操作 ,制取供试液 5份 ,进
样测定 ,计算复方荔枝草颗粒剂中桃叶珊瑚苷含量 ,
结果为 102.05μg·g-1 , RSD为 2.08%。
2.7　样品测定　精密量取复方荔枝草颗粒剂提取
液 1.0mL 置于 10mL 量瓶中 ,用流动相稀释至刻
度 ,摇匀 ,进样分析 。按外标法以峰面积计算桃叶珊
瑚苷含量 ,结果 3批样品含量分别为 100.1 , 101.3
和 105.8μg ·g-1 , RSD 分别为 3.30%, 1.24%和
3.20%。
3　讨论
以甲醇为溶剂 ,分别进行回流法 、索氏提取法和
超声法提取 ,三者提取效果相似 ,但以超声法提取操
作最为简便 。测定提取后的母液中桃叶珊瑚苷的含
量 ,发现含量很低 ,可以忽略不计 ,故可认定该法提
取较为完全 。
桃叶珊瑚苷为环烯醚萜苷类化合物 , 在紫外可
见区扫描 ,只有 203nm 处有一吸收峰 ,由于其靠近
紫外区 ,干扰较大 ,基线稳定时间较长 。
由于样品成分复杂 ,色谱峰多 ,含量测定不适合
选用内标法 。
[ 作者简介] 　裴云萍(1963-),女 ,主管药师。主要从事药物
分析、临床血药浓度检测工作。联系电话:(025)3304616-
66669。
[ 参 考 文 献 ]
[ 1] 　国家药典委员会.中华人民共和国药典[ S] .2000年版一部.北
京:化学工业出版社 , 2000.51.
[ 2] 　郭月秋 ,沙明 ,曹爱民 ,等.高效液相色谱法测定车前中桃叶珊
瑚苷的含量[ J] .中国中药杂志 , 1991 , 16(12)∶743-745.
(收稿日期:2002-03-17　修回日期:2002-05-13)
　　《药学实践杂志》由第二军医大学药学院主办。为大 16 开本 , 64 页 , 双月刊 , 每期定价 6.00 元 , 全年 36.00 元 , 邮发代号
4-664 , 请及时向当地邮局订阅;漏订读者可直接向《药学实践杂志》编辑部补订。地址:上海市国和路 325 号 ,邮编:200433。
电话:(021)25070358 , E-mail:practice-j@yahoo.com.cn , yxsj@chinajournal.net.cn。
—710—
　Chinese Journal of New Drugs 2002 , Vol.11 No.9 中国新药杂志 2002年第 11卷第 9期