全 文 ：凤丫蕨化学成分研究
陈佳佳 1 ,刘守金 1 ,高　原2 ,方成武 1
(1.安徽中医学院药学院 ,安徽省现代中药重点实验室 , 安徽 合肥　230031;2.云南西力生物技术有限公司, 云南昆明　650204)
摘要:目的　研究凤丫蕨 Coniogrammejaponica的化学成分。方法　采用色谱法进行分离 ,根据理化性质和波谱数据鉴定化合
物的结构。结果　分离得到 14个化合物 ,分别鉴定为 onitisin(1)、1, 3-双棕榈酸甘油酯(2)、 5α, 8α-过氧麦角甾-6, 22E-二烯-3β-
醇(3)、β-谷甾醇棕榈酸酯(4)、棕榈酸(5)、硬脂酸(6)、豆甾-4-烯-3β, 6β-二醇(7)、芹菜素(8)、β-谷甾醇(9)、β-胡萝卜苷(10)、
葡萄糖(11)、9S, 12S, 13S-trihydroxy-10-octadecenoicacid(12)、胡萝卜苷棕榈酸酯(13)、 4-oxododecanedioicacid(14)。 结论　化
合物 1 ～ 3、5 ～ 8和 11 ～ 14均是首次从凤丫蕨中得到。
关键词:凤丫蕨;化学成分;光谱分析
Chemicalconstituentsofconiogrammejaponica
CHENJia-jia1 , LIUShou-jin1 , GAOYuan2 , FANGCheng-wu1
(1.AnhuiKeyLaboratoryofModernizedChineseMateriaMedica, SchoolofPharmaceuticalSciences, AnhuiCollegeofTraditional
ChineseMedicine, Hefei, Anhui　230031, China;2.BioBioPhaCo., Ltd., Kunming, Yunnan　650204, China)
Abstract:Aim　TostudythechemicalconstituentsofConiogrammejaponica.Methods　TheRhizomeofC.japonicawereextracted
withethanolandthechemicalconstituentswereseparatedbychromatographytechnique, andtheirstructuresweredeterminedbyspectral
analysis.Results　Fourteencompoundswereisolatedandidentifiedasonitisin(1), glycerol1, 3-dipalmitate(2), 5α, 8α-peroxy-ergos-
ta-6, 22E-diene-3β-ol(3), β-sitosterolpalmitate(4), palmiticacid(5), stearicacid(6), stigmast-4-ene-3β, 6β-diol(7), apigenin(8), β-
sitosterol(9), β-daucosterol(10), glucose(11), 9S, 12S, 13S-trihydroxy-10-octadecenoicacid(12), daucosterolpalmitate(13)、 4-oxodo-
decanedioicacid(14).Conclusion　Compounds1to3, 5to8and11to14wereisolatedfromConiogrammejaponicaforthefirsttime.
Keywords:Coniogrammejaponica(Thunb.)Diels;chemicalconstituents;spectroscopicanalysis
　　凤丫蕨 Coniogrammejaponica(Thunb.)Diels为裸子蕨科
Hemionitidaceae凤丫蕨属 ConiogrammeFée植物 ,主要分布长
江以南和华东地区 , 其根茎及全草具有舒筋活络 , 祛寒除湿等
功效 [ 1] , 民间主要用于治疗跌打损伤 , 风湿痹证 , 寒湿内蕴等
症。 Marakami(1976, 1980年)等报道从凤丫蕨中得到蕨素 D、
表蕨素 L、蕨素 X[ 2, 3] , β-谷甾醇棕榈酸酯 、β-谷甾醇 、β-胡萝卜
苷 、环鸦片甾烯醇 [ 4];1982年 Hatanaka等从普通凤丫蕨(C.
intermedia)中得到了 E-2(S)-amino-3-methyl-3-pentenoicacid[ 5] ,
除此之外 , 该属其他植物的化学成分未见研究报道。本文对
凤丫蕨根茎进行系统化学成分研究 ,从中分离得到 14个化合
物 , 分别为 onitisin(1)、1, 3-双棕榈酸甘油酯(2)、5α, 8α-过氧
麦角甾-6, 22E-二烯-3β-醇(3)、β-谷甾醇棕榈酸酯(4)、棕榈酸
(5)、硬脂酸(6)、豆甾-4-烯-3β, 6β-二醇(7)、芹菜素(8)、β-谷
甾醇(9)、β-胡萝卜苷(10)、葡萄糖(11)、 9S, 12S, 13S-trihy-
droxy-10-octadecenoicacid(12)、胡萝卜苷棕榈酸酯(13)、4-ox-
ododecanedioicacid(14)。除 β-谷甾醇棕榈酸酯 、β-谷甾醇 、β-
胡萝卜苷外 , 其余均为首次从凤丫蕨中分离得到。
1　仪器与材料
1.1　试验仪器　BruckerAV-400 MHz和 BruckerDRX-500
MHz核磁共振光谱仪;Finnigan-MAT90型质谱仪测定;Agi-
lent1200型高效液相色谱仪(ZorbaxSB-C18 column, 5 μm, 4.6
mm× 150mm);XRC-1型显微熔点仪(四川大学科仪厂), 温
度未校正;旋转蒸发仪 (郑州长城科工贸有限公司);
通讯作者:刘守金 ,男 ,教授 ,硕士生导师 , 研究方向:中药资源与化学
成分研究 , E-mail:shjinliu@sina.com
电热恒温水浴锅(上海医疗器械五厂);SHB-Ⅲ循环式多用真
空泵(郑州长城科贸有限公司);ZF-2型三用紫外仪(上海安
亭电子仪器厂)。
1.2　试剂材料　拌样用硅胶(100 ～ 200目), 柱色谱用硅胶
(200 ～ 300目), 薄层硅胶 GF254板(50 mm ×100 mm)(青岛
海洋化工厂),凝胶为 SephadexLH-20(瑞典进口分装),试剂
均为分析纯。
凤丫蕨的根茎于 2008年 8月采自安徽舒城县万佛山自
然保护区 ,原植物由安徽中医学院中药教研室刘守金教授鉴
定为裸子蕨科植物凤丫蕨 Coniogrammejaponica(Thunb.)
Diel。
2　提取与分离
　　取干燥的凤丫蕨根及根茎 16 kg, 先用 95%乙醇浸泡过
夜 , 加热回流提取 3次 ,第 1次 3h,第 2次 2 h, 第 3次 2 h;再
用 50%乙醇浸泡过夜 ,加热回流提取 2次 , 第 1次 2h,第 2次
2h,过滤 ,合并滤液 , 减压回收溶剂 ,得到浸膏 2 kg, 加等量水
使之成混悬液 , 依次用石油醚 、乙酸乙酯萃取 , 分别回收溶剂
后得石油醚部分 130 g、乙酸乙酯部分 70g及不溶物 150 g。
　　经反复硅胶柱色谱 、SephadexLH-20柱色谱分离和重结
晶法纯化 , 从石油醚部分得到化合物 1, 3-双棕榈酸甘油酯
(2)、5α, 8α-过氧麦角甾-6, 22E-二烯-3β-醇(3)、β-谷甾醇棕榈
酸酯(4)、棕榈酸(5)、硬脂酸(6)、豆甾-4-烯-3β, 6β-二醇(7)、
β-谷甾醇 (9)、 9S, 12S, 13S-trihydroxy-10-octadecenoicacid
(12);从乙酸乙酯部分得到化合物 onitisin(1)、芹菜素(8)、β-
胡萝卜苷(10)、胡萝卜苷棕榈酸酯(13)、 4-oxododecanedioic
acid(14);从不溶物部分得到化合物葡萄糖(11)。
·277·安 徽 医 药　AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal　2010 Mar;14(3)
3　结构鉴定
　　化合物 1:分子式 C15H20O4 , 黄色针晶(甲醇), mp178 ～
179℃, 有荧光;EI-MSm/z:264 [ M] +;1H-NMR(CD3OD, 500
MHz)δ(ppm):3.69(1H, d, J=10.5 Hz, H-10a), 3.57(2H, t, J
=8.0Hz, H-13), 3.46(1H, d, J=10.5 Hz, H-10a), 3.15(1H,
d, J=17.0 Hz, H-3a), 2.97(2H, t, J=8.0 Hz, H-12), 2.65
(1H, d, J=17.0 Hz, H-3b), 2.56(3H, s, H-14), 2.31(3H, s,
H-11), 1.09(3H, s, H-10b);13 C-NMR(CD
3
OD, 400 MHz)δ
(ppm):213.1(s, C-1), 151.4(s, C-5), 139.7(s, C-9), 137.5
(s, C-7), 133.2(s, C-6), 132.3(s, C-4), 129.8(s, C-8), 68.3
(t, C-10a), 61.8(t, C-13), 52.5(s, C-2), 34.6(t, C-3), 33.4
(t, C-12), 21.4(q, C-10b), 13.4(q, C-11), 13.0(q, C-14)。以
上数据与文献 [ 6]报道的 onitisin基本一致 , 所以鉴定化合物 1
为 onitisin。
　　化合物 2:分子式 C
35
H
68
O
5
, 白色粉末(氯仿), mp73 ～
74℃, 紫外 365 nm下有蓝色荧光;EI-MSm/z:569 [ M] +;1H-
NMR(CDCl3 , 500 MHz)δ(ppm):4.20 ～ 4.08(5H, m), 2.34
(2H×2, m, -CH
2
), 1.62(2H×2, m, -CH
2
), 1.25(m, -CH
2
-), 0.90(6H, t, J=6.0 Hz, -CH3)。通过与文献 [ 7]中单棕
榈酸甘油酯的波谱数据进行比较 ,鉴定化合物 2为 1, 3-双棕
榈酸甘油酯(glycerol1, 3-dipalmitate)。
　　化合物 3:分子式 C28H44O3 , 白色针晶(氯仿), mp176 ～
179℃, 无荧光 , 硫酸香草醛显蓝色斑点;EI-MSm/z:428
[ M] +, 410 [ M-18] +, 396 [ M-32] +;1H-NMR(CDCl3 , 500
MHz)δ(ppm):6.50, 6.24(各 1H, d, J=8.5 Hz, H-6, 7), 5.21
(1H, dd, J=15.0 Hz, 7.5 Hz, H-22), 5.13(1H, dd, J=15.0
Hz, 8.5 Hz, H-23), 3.97(1H, m, H-3), 0.99(3H, d, J=6.5
Hz, H-21), 0.80 ～ 0.91(15H, m, 5 ×CH3)。 以上数据和文
献 [ 8]报道的 5α, 8α-过氧麦角甾-6, 22E-二烯-3β-醇基本一致 ,
所以鉴定化合物 3为 5α, 8α-过氧麦角甾-6, 22E-二烯-3β-醇
(5α, 8α-peroxy-ergosta-6, 22E-diene-3β-ol)。
　　化合物 4:分子式 C45H80O2 ,白色片晶(乙酸乙酯), mp85
～ 87℃, 无荧光 , 硫酸香草醛显淡紫色;EI-MSm/z:653
[ M] +, 396 [ M-257] +;1H-NMR(CDCl
3
, 500 MHz)δ(ppm):
5.37(1H, d, J=4.3 Hz, H-6), 4.62(1H, m, H-3), 2.28(2H,
t, J=7.5 Hz, H-2′), 1.59(2H, m, H-3′), 1.25(m, -CH2 -),
1.02(3H, s, H-19), 0.92(3H, d, J=6.5 Hz, H-21), 0.81 ～
0.85(9H, m, 3 ×CH3), 0.67(3H, s, H-18)。 以上数据和文
献 [ 9]报道的 β-谷甾醇棕榈酸酯基本一致 , 所以鉴定化合物 4
为 β-谷甾醇棕榈酸酯(β-sitosterolpalmitate)。
　　化合物 5:分子式 C
16
H
32
O
2
, 白色粉末(氯仿), mp63 ～
64℃;EI-MSm/z:256 [ M] +, 227 [ M-29] +;1H-NMR(CDCl3 ,
500MHz)δ(ppm):2.35(2H, t, J=7.5 Hz, H-2), 1.63(2H, m,
H-3), 1.25(m, -CH2 -), 0.88(3H, t, J=6.7 Hz, -CH3)。
以上数据和文献 [ 10]报道的棕榈酸基本一致 , 所以鉴定化合物
5为棕榈酸(palmiticacid)。
　　化合物 6:分子式 C18H36O2 ,白色蜡状结晶(氯仿), mp70
～ 71℃;EI-MSm/z:284 [ M] +, 255 [ M-29] +;其熔点 、1H-
NMR、EI-MS与文献 [ 11]报道的一致。故鉴定化合物 6为确定
为硬脂酸(stearicacid)。
　　化合物 7:分子式 C29H50O2 , 白色针晶(甲醇), mp267 ～
270℃, 硫酸香草醛显橙黄色;EI-MSm/z:430 [ M] +, 412 [ M-
18] +;1H-NMR(pyridine-d5 , 500 MHz)δ(ppm):6.40(1H, d, J
=3.8 Hz, H-4), 6.15(1H, s, -OH), 6.01(1H, s, -OH),
4.57(2H, brs, H-3, 6), 1.54(3H, s, H-19), 0.99(3H, d, J=6.
2Hz, H-21), 0.88(3H, t, J=7.0 Hz, H-29), 0.86(3H, d, J=
6.2Hz, H-26), 0.84(3H, d, J=6.8 Hz, H- 27), 0.71(3H, s,
H-18);13C-NMR(pyridine-d5 , 400 MHz)δ(ppm):147.2(s, C-
5), 130.0(d, C-4), 73.8(d, C-6), 67.6(d, C-3), 56.5(d, C-
17), 56.4(d, C-14), 55.0(d, C-9), 46.1(d, C-24), 42.8(s, C-
13), 40.7(t, C-7), 40.2(t, C-12), 37.7(t, C-1), 37.4(s, C-
10), 36.5(d, C-20), 34.3(t, C-22), 31.0(d, C-8), 30.2(t, C-
2), 29.5(d, C-25), 28.6(t, C-16), 26.5(t, C-23), 24.6(t, C-
15), 23.4(t, C-28), 21.7(q, C-19), 21.4(t, C-11), 20.0(q, C-
26), 19.3(q, C-27), 19.0(q, C-21), 12.2(q, C-29), 12.2(q,
C-18)。通过与文献 [ 12]中豆甾-4-烯-3β, 6α-二醇的波谱数据
进行比较 , 鉴定化合物 7为豆甾-4-烯-3β, 6β-二醇(stigmast-4-
ene-3β, 6β-diol)。
　　化合物 8:分子式 C15H10O5 , 黄色粉末(甲醇), mp182 ～
185℃, 有荧光 , 硫酸香草醛显黄色;EI-MSm/z:270 [ M] +,
269 [ M-1] +, 242 [ M-28] +;1H-NMR(DMSO-d6 , 500 MHz)δ
(ppm):12.97(1H, s, 5 -OH), 10.46(2H, brs, 7, 4′-OH),
7.92(2H, d, J=8.4 Hz, H-2′, 6′), 6.92(2H, d, J=8.4 Hz, H-
3′, 5′), 6.79(1H, s, H-3), 6.48(1H, d, J=1.5 Hz, H-8), 6.19
(1H, d, J=1.5 Hz, H-6)。以上数据与文献 [ 13]报道的芹菜素
基本一致 , 所以鉴定化合物 8为芹菜素(apigenin)。
　　化合物 9:分子式 C29H50O,白色针状晶体(氯仿), mp138
～ 140℃, 点板对照 ,用不同的展开剂 Rf值均与 β-谷甾醇标准
品一致。故鉴定化合物 9为 β-谷甾醇(β-sitosterol)。
　　化合物 10:分子式 C
35
H
60
O
6
,白色粉末(甲醇), mp298 ～
300℃, 点板对照 ,用不同的展开剂 Rf值均与 β-胡萝卜苷标准
品一致。故鉴定化合物 10为 β-胡萝卜苷(β-daucosterol)。
　　化合物 11:分子式 C6H12O6 ,无色结晶(甲醇), mp146℃,
点板对照 , 用不同的展开剂 Rf值均与葡萄糖标准品一致。故
鉴定化合物 11为葡萄糖(glucose)。
　　化合物 12:分子式 C18H34O5 ,白色粉末(甲醇), mp103 ～
105℃, 硫酸香草醛显灰褐色;EI-MSm/z:330 [ M] +;1H-NMR
(CD3OD, 500 MHz)δ(ppm):5.72(1H, dd, J=15.5 Hz, 5.8
Hz, H-11), 5.66(1H, dd, J=15.5 Hz, 5.8 Hz, H-10), 4.05
(1H, q, J=6.0 Hz, H-9), 3.92(1H, t, J=5.0 Hz, H-12), 3.46
(1H, m, H-13), 2.25(2H, t, J=7.5 Hz, H-2), 0.90(3H, t, J=
5.2Hz, H-18)。以上数据与文献 [ 14]报道的 9S, 12S, 13S-trihy-
droxy-10-octadecenoicacid基本一致 , 所以鉴定化合物 12为
9S, 12S, 13S-trihydroxy-10-octadecenoicacid。
　　化合物 13:分子式 C51H90O7 ,白色粉末(氯仿), mp163 ～
165℃, 硫酸香草醛显紫红色;EI-MSm/z:815 [ M] +;1H-NMR
(CDCl3 , 500 MHz)δ(ppm):5.36(1H, m, H-6), 4.47(1H, dd, J
=11.0Hz, 5.0Hz, H-6′), 4.38(1H, d, J=9.5 Hz, H-1′), 4.26
(1H, dd, J=11.0 Hz, 2.0 Hz, H-6′), 3.37(1H, m, H-3), 2.35
(2H, t, J=9.0 Hz, H-2′′), 1.25(m, -CH2 -), 1.00(3H, s, H-
19), 0.92(3H, d, J=8.0 Hz, H-21), 0.80 ～ 0.89(12H, m, 4×
CH
3
), 0.67(3H, s, H-18)。以上数据与文献 [ 15]报道的胡萝卜
苷棕榈酸酯基本一致 , 所以鉴定化合物 13为胡萝卜苷棕榈酸
·278· 安 徽 医 药　AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal　2010 Mar;14(3)
气质联用分析铁筷子的挥发油成分
娄方明 ,李群芳 ,张倩茹 ,钱　静
(遵义医学院 , 贵州 遵义　563003)
摘要:目的　研究铁筷子挥发油的化学成分组成 , 为铁筷子的开发利用提供理论依据。方法　水蒸气蒸馏法提取挥发油 ,气相
色谱 -质谱联用技术(GC-MS)对挥发油成分进行分离鉴定 , 并采用面积归一化法确定各成分的相对百分含量。结果　共鉴定
出 30个成分 ,占挥发油总量的 94.24%, 其中相对含量较高的有桉树脑(33.67%)、龙脑(13.98%)、氧化石竹烯(10.15%)、莰
烯(9.83%)。结论　本法简便 、快速 、灵敏度高 ,分离度好 , 是分析铁筷子挥发油成分的有效手段。
关键词:铁筷子;挥发油;气相色谱 -质谱
AnalysisoftheesentialoilfromHeleborusthibetanusFranch.
withGC-MS
LOUFang-ming, LIQun-fang, ZHANGQian-ru, QIANJing
(ZunyiMedicalColege, Guizhou　563003, China)
Abstract:Aim　TostudythechemicalconstituentsofessentialoilfromHelleborusthibetanusFranch.Method　Theessentialoilwasex-
tractedwithwaterdistilationmethodandthenanalyzedwithGC-MS.Results　Thirtycompoundswereidentified, whichaccountedfor
94.24% ofvolatilefraction.Themainconstituentsoftheoilwereeucalyptol(33.67%), borneol(13.98%), caryophyle-neoxide
(10.15%), andcamphene(9.83%).Conclusion　Thismethodisconvenient, quickandaccurateforanalysingtheessentialoilfrom
HeleborusthibetanusFranch.
Keywords:HelleborusthibetanusFranch;essentialoil;GC-MS
　　铁筷子(HeleborusthibetanusFranch.)为毛茛科铁筷子属
多年生草本植物。铁筷子属植物约有 20余种 , 但我国只有
HeleborusthibetanusFranch.一种 ,主要分布在西部地区 ,是贵
州民间常用药材。铁筷子根茎为主要药用部位 , 称为 “铁筷
子”或 “黑毛七” ,具活血散瘀 、消肿止痛 、清热解毒之功效 , 民
间主要用于治疗膀胱炎 、尿道炎 、疮疖肿毒及跌打损伤等
症 [ 1] ,是苗药健胃散治疗小儿慢性胃炎的主要成分之一 [ 2] 。
铁筷子味辛 、苦 ,其挥发油是活血散瘀 、消肿止痛 、清热解毒的
功效成分 , 但对其挥发油的组成研究还未见报道。 本工作对
贵州产铁筷子的挥发油成分进行了 GC-MS分离和鉴定 ,为更
酯(daucosterolpalmitate)。
　　化合物 14:分子式 C12H20O5 ,白色粉末(甲醇), mp106 ～
107℃, 硫酸香草醛显灰褐色;EI-MSm/z:244 [ M] +;1H-NMR
(CD3OD, 500 MHz)δ(ppm):2.71(2H, t, J=8.0Hz, H-3),
2.48 ～ 2.53(4H, m, H-2, 5), 2.27(2H, t, J=9.2 Hz, H-11),
1.54 ～ 1.58(4H, m, H-6, 10), 1.32(6H, m, H-7, 8, 9)。以上数
据与文献 [ 16]报道的 4-oxododecanedioicacid基本一致 , 所以鉴
定化合物 14为 4-oxododecanedioicacid。
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(收稿日期:2009-10-12)
·279·安 徽 医 药　AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal　2010 Mar;14(3)