全 文 ：[ 17 1Bs a ti
e a nt to S
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z h e n g W H
,
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.
T h e ig n k即 b i l o b a e x t ra e t
( E Gb 76 1 ) p ro t e e t s a n d re s e u e s h ip p oc a m p al e e l l s a g a i n s t n i t ir e
o x id e 一 i n d u e e d t o x i e i t y : i n v o lv e m e n t Of i t s fl a v o n o id e o n s t i t u e n t s
a n d p ro t e i n k in as e C [ J J
.
J N
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e m , 2 (X洲) , 7 4 ( 6 ) : 2 2 6 8
.
〔28 ] D e F e u d i s VF , D ir e u K . G in k驴 bi l ob a e x tacr t ( E G b 7 6 1 ) a n d
e N s fu n e t i o ns : b as i e stu di
e s an d e l i n i e al aP v li e at ion s [ J 3
.
C u r
D ru g T a r g e t s
,
20( 刃 , l ( l ) : 2 5 .
[一9〕 o ke n BS , S t o rz bac h D M , Ka y e JA . hT e e if e ac y of ig n k即 b i lo ba
o n e铭n i t i v e fu n e t i o n i n A l z h e i m e r d i s e as e [ J 〕. A二 h N e u o l .
19 9 8
,
55 ( 11 )
: 14 09
.
[ 2 0 1
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e Jo u rn a l o f Ph a r n la e e u t i e al P r ac t ie e V o l
.
20 2X() 2 N
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.
6
S t o l l S
,
Se h e u e r K
,
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, et a l
.
G i n k即 bi lo b a e x tar c t
( EG价 6 1 ) sn d e p e n d e n t l y i m p or v e s e h a n罗 5 i n p龄 , i v e 〔 J 〕·
hP amr
a e o p s y e h iat 叮 , 19 96 , 29 ( 4 ) : 14
.
B o n i e l T
,
D a n n o n
,
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o f h e br al m e d i e in e s i n th e p s y
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e h i a tir e p ar e t i e e 〔J ] . H二fu 曲 , 2X() l , 14 0 ( 8 ) : 7 80 .
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. 灿t e e it v e e fe e r o f g i n at o n o n art l i v e r
m i e or e icr u alt i
o n d i s tu ht a cn e of ll o w i嗯 l i v e r x e n o t ar n s Pl a n t at i o n
[ J〕. Z ho n gh u a Y i X u e Z a Z h i , 2 (刃 0 , 8 0 ( 9 ) : 7 0 6 .
收稿日期 : 20 2 一 08 一 15
2l
遍地金提取物对大鼠脑纹状体突触体 〔’ H 〕 一 多巴胺重摄取抑制试验
何洪静` , 高 玮` , 李全红 , , 赵见宝 2 l( . 成都军区昆明总医院 , 昆明 65 0 犯 ; 2 . 大理医学院 98 级实习晶赵
生
摘要 目的 : 评价遍地金提取物对大鼠脑纹状体 突触体 〔’ H ] 一 多巴胺重摄取的抑制作用 。 方法 : 通过 大鼠
脑纹状体突触体「’ H ] 一 多巴胺重摄取抑制实验 , 刚定其重摄取量 c m p 及抑制百分率 , 以评价待试物对 多巴
胺重摄取的抑制活性 。 结果 :遍地金组平均抑制百 分率为 65 % , IC S。 二 1 13 . 25 m g’ ml 一 ’ ; tS . Jho n ’ 5 Wort 组平
均抑制百 分率为 61 % , IC S。 二 28 . 29 m g’ m 1一 ` 。 结论 :遍地金提取物与在欧美上市的药物 tS . Jho n ’ 5 WOrt 均抑
制大鼠脑纹状体突触体「3 H〕 一 多巴胺重摄取 ,二者差异无统计学意义 。
关键词 遍地金 ;多巴胺 ;重摄取 ;抑制百分率
中图分类号 : B2 86 文献标识码 : A 文章编号 : 1006 一 0 1 1 1 ( 20 2 )06 一 0 3 3 8 一 03
E fe
e t o f 双理 e icr u m w烤h血n u m e x t r a c t s o n s y an P s e r e u P t a k e o f d o P a m i n e i n t h e
s t r i a t u m o f r a t b ar i n
z H A o J i
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H E H o n g 一 J i n g ,
,
G A o w e i
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u a n 一 H o n g , , z H A o J ia n 一 B a o , ( 1
.
K u n m i n g M i l i t脚 G e n e alr H o s -
p i t a l
,
K u n m i n g 6 5 0 0 3 2
,
C h i n a ; 2
.
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e Ph a mr
a e e u t i e a l D e p art m
e n t o f D a l i M e d i e a l U n i v e sr i ty )
A B S T R A C T O B J E C T TVE
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ti a n u m e x tar e t s o n s y n a p s e er u p ta k e o f d o p a m in e i n
ar t b ar i n s t五a t u m . M E T HO n s : hT e in h ib i t i o n e x p e五m e n t of er u p ta k i n g 〔’ H 」一 d o p a m i n e o n b ar i n s t r i at u m s y n -
a p s e o f ar t h a s b e e n a d o p t e d
.
Th e a e t i v i t y w a s e v a l u a t e d b y a s s a y i n g q u a n t i ty o f er u p t a k i n g (
e m p )
a n d t h e i n h ib it i o n
Pe or e n t a罗 . R E S U L T S : hT e a v e agr e i n h ib i t io n p e cr e n t a g e a n d IC * of 双净 e ir e u m 矶 g h t ia n u m e x tacr t g or u p , a er er -
s p e e t iv e l y 6 5% a n d 1 13
.
2 5 m岁 m l a n d fo r s t . Jo h n 急 6 1% a n d 2 8 . 2 9 m g · m l 一 ’ a n d fo r Wo rt g or u p aer . e o N e切·
S IO N进净e ir e u m Wig h t ia n u m e x t ar e t gor u p a n d a n t id e p er s s a n t p er part i o n S t
.
J o h n 宕 Wo rt 盯ou P b o t h s h ow e d i n h i -
b i ti o n a e t iv i ty o n b ar i n s tir a t u m s y n a p s e er u Pt a k i n g d o p a m i n e a n d h a v e n o s t at i s t i e s s igl iif e an e e b e t w e e n th e t w o
g r o u P s
·
K E Y W O R D S 场刀e icr u m Wig h t ia n u m ; d o p a m i n e ; er u p t a k e ; i n h ib i t i o n p e cr e n t a ge
抑制多巴胺重摄取为抗抑郁药的作用机制之
一 。 合成的抗抑郁药具有不同程度的胆碱能神经和
心血管系统副作用 , 抑郁症患者在使用抗抑郁药维
持治疗时 ,症状复发率为 9 % 一 57 % 。 合成的抗抑
郁药治疗一段时间后 , 由于直接或间接的抗多巴胺
能作用 ,多巴胺功能下降 ,可导致抑郁症状反复 。 金
丝桃植物提取物 st . Jho n ,s W o ir 为在欧洲和美国广
泛应用的天然抗抑郁药物 , 分布于云南地区的同属
植物遍地金含有与其相同的化学成分金丝桃素 ,本
实验通过测定遍地金提取物对大鼠脑纹状体突触体
药学实践杂志 20 2年第 20卷第 6期
[
’ H]
一 多巴胺重摄取的抑制作用 , 作为评价其抗抑
郁药用价值的研究之一 。
1 实验材料
1
.
1 药物及试剂
S t
.
J o h n
’ 5 W o rt (含 0 . 15% Hy p e r i e i n ) , 由美国
G o o d
’
N a t u ar l M a n u af e tu r i n g C o印 . ( U A S ) 生产 , 批
号 : 0 3 4 6 2 1 80 1 :遍地金提取物 (含 0 . 0 2 7% Hy p e ir -
ic n)
, 由本实验室制备 ; 克 一 享氏碳酸氢盐缓冲液
(每 l o m l 中含 : N a C 10 . 6 9 2 9 ; K C10 . 0 3 5 9 e a e l o .
0 2 8 9 K H Z P O
4
0
.
0 16 9 : G l u e o s e 0
.
2 9 ; M g S O
4
·
7 H
2
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.
0 2 9 9 N a H c o
3
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.
2 19 ) ; [
’ H )
一 D o p a m i n e (
’ H 一 D A )
购 自英国 Am e r s h a m p h a mr a e i a B i o te e h 公司 [ A n a -
ly s e d 18
眨h D e e e m h e r 2 0 0 1」; T ir t o n X 一 10 0 ;闪烁液等 。
1
.
2 仪器
D Y 8 9 一 1 型电动玻璃匀浆器 (宁波新芝科器研
究 所 生 产 ) ; B E C K M AN A L LE G R A 6 4 R G E NT R I -
F AG E 高速冷冻离心机 : N A PC O M O D E L 54 3 0 细胞
培养箱 ; B E CK MA N L S6 5 0 0 液体闪烁计数器 。
1
.
3 动物
iw ast
: 大鼠 ,雄性 , 150 一 20 0 9 。 动物合格证号 :
97 14
, 由中科院昆明动物研究所提供 。
2 实验方法
2
.
1 组织悬液制备
选体重 15 0 一 2 0 0 9 雄性健康 W i s ta r 大鼠 6 0 只 ,
断头后 ,迅速取出脑组织 , 于预先冰冻的生理盐水冰
面上去除脑膜和血管 ,分离纹状体 ,加人 9 倍体积的
冰冷的 0 . 32 m d · L 一 ’ 蔗糖溶液 , 在匀浆器 中匀浆 l -
Zm i n 后 ,将匀浆液在 0 一 4℃ , 1 00() g 离心 I Om i n , 取
出上清液用于重摄取试验 。
2
.
2 药液配制
S t
.
J
o h n
’ 5 W o rt 分 别 为 1 1 . 4 4 m g · m l 一 ’ ,
5
.
7 2 m g
·
m一 ’ , 2 . 8 6 m g · m一 ’ , 1 . 4 3m g · m l 一 l ,
0
.
72 m g
·
m l
一 ’
5 个剂量组 。 以上样品均用 二 甲亚矾
溶 解 配制 。 遍 地金 提取物 5 个剂 量组 分别 为
4 8
.
6 6 m g
·
m一 l , 2 4 . 3 3m g · m l 一 l , r 2 . 16 m g · m z 一 l ,
6
·
o s m g
·
m l
一 l ,
3
.
04 m g
·
m l
一 l 。
2
.
3 测定步骤
2
.
3
.
1 各试管加入
组织悬液 10 0闪
5 5
.
s n m o l
·
L
一 ’ 厂’ H」一 DA
(克亨氏缓冲液配制 ) 9 0 0闪
A 管 : 不同浓度药液 20 闪
B 管 :溶剂 2 0闪
C 管 :溶剂 2 0闪
表 1 遍地金提取物 cP m 测定值及抑制百分率
药物浓度
( n 、g
·
m l
一 ’ )
平均重摄取量
月屯J,J丹、421勺一765344 8
.
6 6
2 4
.
3 3
12
.
16
6
.
0 8
3
.
04
cP m 测定均值
4 0 9
.
5 土 0
.
7
4 2 3 士 12
.
7
4 5 3
.
5 士 3 0
.
4
5 70
.
5 土 19
.
1
9 5 2 土 4
.
2
14 15
.
5 士 4 7
.
4
1《减) 土 2 . 2
(
〔 P m )
30 9
.
5
抑制百分率 (P % )
32 3
35 3
.
5
溶剂 B 管
C 管
4 7 0
.
5
8 5 2
13 15
.
5 IC
5o 9 5% 可信限 1 13 . 2 5
士 4 7
,
6 9 m g
,
m l
一 l
注 : 0 ℃时的溶剂对照管即 C 管的重摄取值 cP m 为设定值 。
表 2 tS . Jho n ’ s w ort 叩m 测定值及抑制百 分率
药物浓度
(
n ,g
·
m l
一 ’ )
平均重摄取量 抑制百分率 (P % )
1 1
·
4 4
5
.
7 2
2
.
8 6
1
.
4 3
0
.
7 1
8 4
.
2 3
7 6
.
66
6 3
.
0 2
溶剂 B 管
( e P m )
2 0 7
.
5
3 0 7
4 8 6
.
5
5 9 3
.
5
9 7 5
.
5
13 15
.
5
C 管
c p m 测定均值
3 0 7
.
5 士 4
.
9
40 7 士 3 1
.
1
5 8 6
.
5 士 2
.
1
6 9 3
.
5 士 2 4
.
7
10 7 5
.
5 士 6 5
.
8
14 15
.
5 土 4 7
.
4
10 0 土 2
.
2
5 4
.
8 8
2 5
.
8 5
IC S` , 9 5 % 可信限 2 8 . 2 9
士 12
.
2 8 m g
·
m l
一 l
2
.
3
.
2 孵育 将各试管中液体混匀后 , 于 95 % 0 2
+ 5% C O
Z 环境下 , A 、 B 管于 3 7℃ 孵育 s m in , C 管于
0℃ 孵育 s m i n 。
2
.
3
.
3 测定 孵育后 ,所有试管在 4 0 0 0 9 下迅速
离心 or m in 。 吸出上清液 ,沉淀用 l ml irT t on X 一 10
+ 50 % 乙醇液 ( 1 : 4) 溶解 , 剧烈震荡后倾入闪烁杯
中 ,加人闪烁液 4 ml 进行计数 ,记录 叩 m 值 。
3 实验结果
以 37℃或。℃孵育的样品平均 叩 m值之差代表
平均重摄取量 ( U) T。
抑制百分率 P二 仁 (正常平均重摄取量 一加药物
后平均重摄取量 ) *正常平均重摄取量」 x 1 0%
I c
s。用概率单位法计算 。
4讨论
在美国草药年销售接近 4 0亿美元 ,增长最快的
是用于治疗抑郁症 的金丝桃提取物 tS Jho n 乞 w o rt ,
年增长 2 80 % 。 在欧洲 tS oJ hn 乞 wo rt 治疗抑郁症
的 日花费相当于三环类药物 ,但副作用仅为其一半 。
以其中所含 h yep icr in 为标准计算 ,抑制多巴胺 一 p
一 经化酶 Ie , 。为 0 . x m协m o l · L川 。 遍地金提取物与
国外用于抑郁症治疗的 tS . Jho n ,s W ort 提取物具有
相近的抑制大鼠脑纹状体突触体 〔’ H ] 一 多巴胺重
摄取作用 ,在本实验中两者平均抑制率均为 60 % 左
右 ,且无显著性差异 (尸 > 0 . 1 ) 。 二者对大鼠脑纹状
体突触体〔’ H〕一 多巴胺重摄取的抑制率基本与药
物浓度为线型关系 , 呈浓度梯度变化 。 遍地金提取
物 Ie s。 = 1 13 . 2 5 土 4 7 . 6 9 m g · m l 一 ` , S t . Jo h n ` Wo rt IC S。
二 2 5
.
2 9 土 12
.
Zs m g
·
m l
一 l 。
文献报道仁’ 〕 ,贯叶金丝桃 80 % 的甲醇提取物体
外具有 强 大的 多 巴胺 ( DA ) 抑制作用 , 其 IC S。 二
Th e J
o u rn a l of P h a mr
a e e u t i e a l rP
a e t i e e V
o
l
.
20 2 002 N
o
.
6
0
.
9此 · m l 一 ’ 。 多巴胺 、 5 一 轻色胺 、 去甲肾上腺素 、 肾
上腺素均为单胺类神经递质系统 , 多巴胺从 D I 到
D 5 5 个亚型具有许多生理功能 , 如 :调整锥体外系运
动功能 、 调控精神活动 、 调节脑垂体激素的分泌等
等 , 调控精神活动重要表现为参与认识功能 ,对事物
的识别能力 ,包括思维 、感觉 、理解 、 判断等 。 多巴胺
对情感障碍的病理生理起着重要 的作用 , 多巴胺传
递减少 ,可致动机减少 、 快感缺乏 。 M c rG at h 认为服
用 S S IR s ( 5 一 经色胺回收抑制剂 , 如氟西 汀 、 舍曲
林 、帕罗西汀等 ) 的抑郁症患者会 消耗多 巴胺储备
导致抑郁症状反复 ,故可通过多巴胺能拮抗剂刺激
突触后多巴胺受体 , 从而减少多巴胺的消耗 。 这种
理论在临床实践中得到 了验证 〔’ 〕 。 这就为我们使
用多巴胺重摄取抑制剂提供依据 , 金丝桃植物的多
巴胺重摄取抑制作用有利于其抗抑郁活性 。
参考文献 :
[ l〕 K l e b e r E , Ob叮 T , H ip p e l i 5 . B i o e he m i e a l a e t i v i t i e s o f e x t r a e t s ofr m
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志 , 2X() 2 , 12 ( 2 ) : 1 18 . 收稿 日期 : 2 00 2 一 0 8 一 27
更正说明 :
原载本刊 2002 年第三期 18 页的 “ IP A ” 光盘数据库的功能与应用一文 ,其中表 2 “ IP A
应更正为 “ IP A 的药理学 /治疗学分类表 ” ,其结构如下 :
0 4
.
0() A
n it h i s at m in e S
0 8
.
0 0 A n it P or t o z o a l s
0 8
.
0 0 A n Ule P or it e a g e此
0 8
.
0 0 A n “ 一 in 介e Uv e a g e n st
0 8
.
04 A m
e b i e i d e s
0 8
.
0 8 An t h e lm i n t i e s
0 8
.
12 A n t ib a e t e ir a l a ge n t s
0 8
.
12 A n t ib i o t i e s
0 8
.
12
.
0 2 A zn i n ogl y
e o s id ,
0 8
.
12
.
0 4 A n t i fu n g a l s
0 8
.
12
.
04 F
u n g i e i de s
0 8 12
.
0 6 C e Ph a l
o s p o ir n s
0 8
.
12
.
0 8 Ch l o ar m ph e n i e o ls
0 8
.
12
.
12 M a e r o lid e s
0 8
.
12
.
12 E叮 th or m y e i n s
0 8
.
12
.
16 P e n i e i l l i n s
0 8
.
12
.
2 4 eT
tar e y e l i n e s
0 8
.
16 A n t i t u b e cr u l a r s
的主题类 目表 ”
(以下略 ) 而原表 2 “ IPA 的主题类目表 ” 应为 “ 表 3 ” ,置 1 89 页左侧倒数第 6 行之上 ,特此说明 ·
《药学实践杂志》编辑部