全 文 : ○中药研究○
扁担杆化学成分体外抑菌活性研究*
★ 刘建群** 吴继梅 张锐 (江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室 南昌 330004)
摘要:目的:寻找药用植物扁担杆的抗菌活性成分。方法:将从扁担杆中分得的 6个化合物:木栓酮(1)、表木栓醇(2)、二十一
酸(3)、β -谷甾醇(4)、棕榈酸丙酯(5)、儿茶素(6), 采用液体两倍稀释法对金黄色葡萄球菌 、大肠杆菌 、绿脓杆菌 、β-溶血性链
球菌 、表皮葡萄球菌 、柠檬色葡萄球菌进行体外抑菌实验。结果:与阳性对照药盐酸小檗碱比较 , 上述 6个化合物对除金黄色
葡萄球菌以外的 5种细菌生长均有明显的抑制作用 , 特别是儿茶素对绿脓杆菌 、β-溶血性链球菌和表皮葡萄球菌均有较强的
抑制作用 ,最低抑菌浓度分别为 0.004、0.002、0.004mg/ml, 抑菌效果优于盐酸小檗碱。结论:扁担杆中含有多种抗菌活性成
分 ,其中儿茶素为抑菌活性较强的成分之一。
关键词:扁担杆;抗菌;儿茶素;液体两倍稀释法
中图分类号:R285.5 文献标识码:A
StudyontheinvitroantibacterialactivitiesofcompoundsisolatedfromGrewiabiloba
LIUJian-qun, WUJi-hai, ZHANGRui
KeylaboratoryofModernPreparation, JiangxiUniversityofTraditionalChineseMedicineNanchang330004
Abstract:ObjectiveToscreentheantibacterialconstituentsfromGrewiabiloba.MethodsDoubledilutionmethodwasusedtodetermine
theminimuminhibitoryconcentration(MIC)ofsixcompounds, friedelin(1), epi-friedelan-3-ol(2), heneicosanoicacid(3), β-sitos-
terol(4), Propylpalmitate(5), catechin(6), isolatedfromGrewiabilobaagainstStaphylococcusaureus, Escherichiacoli, Pseudo-
monasaeruginosa, β -Hemolyticstreptococcus, StaphylococcusepidermidisandStaphylococcuscitreus.ResultsCompounds1-6canobvi-
ouslyinhibitthegrowthoftheabovefivebacteriaexceptforStaphylococcusaureus.Furthermorecatechin(6)showedstrongerantibac-
terialactivitiesthanberberinehydrochlorideagainstPseudomonasaeruginosa, β -HemolyticstreptococcusandStaphylococcusepidermi-
diswithMIC0.004、0.002、0.004 mg/ml, respectively.ConclusionCompounds1-6 isolatedfromGrewiabilobahaveobviousantibacte-
rialactivitiesandcatechin(6)showedstrongantibacterialactivities.
Keywords:Grewiabiloba;Antibacterialactivity;catechin;Doubledilutionmethod
扁担杆(GrewiabilobaG.Don)为椴树科扁担杆
属植物 ,全世界约有 150种 ,据 《中国植物志 》记载
我国有 27种和 1存疑种 ,主要分布于云南 、广西和
江西等省 。在非洲和亚洲一些国家地区 ,部分扁担
杆属植物被作为民间草药使用 ,多具有抗菌消炎作
用。如南非的 Grewiaoccidentalis和巴基斯坦的
Grewiaerythraea在民间作为传统草药治疗伤口细菌
感染 [ 1, 2] ;Grewiabicolor在苏丹作为传统草药治疗皮
肤脓疱疮 ,还有镇静作用[ 3] ;《新修本草》记载小花
扁担杆枝叶煮汁可治小儿蛔虫病 [ 4] ;扁担杆的根皮
在江西部分地区民间用来治疗皮肤脓胞疮。我们研
究发现扁担杆根皮提取物对 β -溶血性链球菌等菌
有较强的抑制作用 [ 5] ,为了阐明其抗菌物质基础 ,
我们首次研究了扁担杆的化学成分[ 6] ,分得 6个化
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江西 中医学院 学报 2 0 0 9年 4月 第 2 1卷第 2期
JOURNALOFJIANGXIUNIVERSITYOFTCM 2009 Vol.21No.2
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基金项目:江西省卫生厅中医药科研基金项目(2007A094)
通讯作者:刘建群 ,副教授 ,博士 ,主要从事中药活性成分研究 , Tel:07917118657, Email:liu5308@sina.com.
○中药研究○
合物 。本文采用液体两倍稀释法对这 6个化合物进
行了体外抑菌活性研究 。
1 材料与试药
1.1 菌种 金黄色葡萄球菌 (Staphylococcusau-
reaus, ATCC259223)、大肠杆菌 (Escherichiacoli,
ATCC25922)、绿脓杆菌 (Pseudomonasaeruginosa,
ATCC27853)和 β -溶血性链球菌(β-Hemolyticstrepto-
coccus, ATCC0604)、表皮葡萄球菌 (Staphylococcus
epidermidis)和柠檬色葡萄球菌 (Staphylococcuscit-
reus),江西省临床疾病检验中心提供 。
1.2 药物 木栓酮(1)、表木栓醇(2)、二十一酸
(3)、β-谷甾醇(4)、棕榈酸丙酯(5)、儿茶素(6),从
扁担杆中分得 。盐酸小檗碱(中国药品生物制品检
定所)。
1.3 培养基 营养肉汤(杭州微生物试剂有限公
司)、琼脂粉(成都科龙化工试剂厂)、苯酚红(天津
市大茂化学试剂厂)、无菌脱纤维绵羊血(江西省临
床疾病检验中心)。
2 方法与结果
2.1 普通培养基的制备 用蒸馏水将营养肉汤和
琼脂粉溶解后 ,高压灭菌。趁热将培养基倾倒入培
养皿中 ,冷却备用 。
2.2 血平板培养基的制备 在普通营养琼脂培养
基础上高压消毒后 ,冷却至 56℃时加上 5% ~ 10%
无菌脱纤维绵羊血混匀 ,倒入培养皿中备用 。
2.3 菌液的制备 将在低温保存的菌种活化 2 ~ 3
次 ,然后于肉汤蛋白胨琼脂培养基斜面 37 ℃培养
24 h。再从斜面培养基上沾取一铂金耳菌苔 ,接种
到灭菌的葡萄糖酚红肉汤培养基中 ,于 37 ℃培养
24 h,取出作为原菌液 。再用无菌生理盐水稀释至
浓度为 1∶1000做实验菌液。
2.4 实验药液的制备 将分得的化合物 1 ~ 6用
DMSO溶解配成 4 mg/ml水溶液 ,并以盐酸小檗碱
(4 mg/ml)作为阳性对照药。
2.5 最低抑菌浓度(MIC)的测定 取 16支灭菌过
带有棉塞的试管 ,每管均加入 1ml灭菌的葡萄糖酚
红肉汤培养基 。取上述 5种供试液各 1 ml,加入各
自的第 1管中 ,混匀 ,吸出 1 ml加至第二管中……
如此稀释至第 14管 ,取出 1 ml弃去。第 15管不加
药物(作阳性对照),第 16管不加药物也不加菌液
(作阴性对照)。随后第 1 ~ 15管中分别用移液枪 ,
按无菌操作加入稀释好的实验菌液各 0.1 ml,混合
均匀。以上各实验用具及各种培养基均按要求事先
灭菌 ,各步骤均按无菌操作进行实验。于 37 ℃恒温
箱中培养 24 h。观察结果 ,以完全没有菌生长的最
低药物浓度作为该药物对实验菌的最低抑菌浓度
(MIC),结果见表 1。
表 1 化合物 1 ~ 6对六种菌株的最低抑菌浓度(mg/ml)
菌株 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 绿脓杆菌 β -溶血性链球菌 表皮葡萄球菌 柠檬色葡萄球菌
化合物 1 2.00 0.03 0.03 0.004 0.12 0.25
化合物 2 2.00 0.03 0.12 0.004 0.01 0.03
化合物 3 4.00 1.00 0.12 0.06 0.25 0.50
化合物 4 2.00 0.06 0.03 0.03 0.50 0.12
化合物 5 4.00 0.06 0.50 0.50 1.00 2.00
化合物 6 2.00 0.25 0.004 0.002 0.004 0.03
盐酸小檗碱 0.25 2.00 2.00 0.004 0.12 0.01
3 讨论
上述 6个化合物对除金黄色葡萄球菌以外的 5
种细菌生长均有明显的抑制作用 ,特别是儿茶素对
绿脓杆菌 、β-溶血性链球菌和表皮葡萄球菌均有较
强的抑制作用 ,抑菌效果优于阳性药盐酸小檗碱 。
结果表明扁担杆中含有多种抗菌活性成分 ,其中儿
茶素为抑菌活性较强的成分之一 ,扁担杆的抗菌作
用可能为多种抗菌成分作用的综合 。
致谢:感谢江西中医学院微生物教研室朱金华
老师对本文抗菌实验的指导帮助。
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[ 5] 刘建群 , 吴继梅 , 何志恒 ,等.扁担杆提取物体外抑菌活性研究
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材 , 2008, 31(10):5 051-7 051.
(收稿日期:2009-02-27)
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江西中医学院学报 2009年第 21卷第 2期