全 文 :[收稿日期] 2010-05-11
[通讯作者] * 孟祥丽,硕士,主要从事中药有效成分分离和中
药 新 药 临 床 研 究,Tel:13945328091,E-mail:
zhaomeng111@ sohu. com
不同采收期、不同药用部位对长柱金丝桃中总黄酮含量的影响
赵玉佳1,孟祥丽2* ,丁禄荣2,王加良2
(1. 牡丹江医学院,黑龙江 牡丹江 157011;2. 牡丹江医学院红旗医院,黑龙江 牡丹江 157011)
[摘要] 目的:考察长柱金丝桃药用部位、采收期对总黄酮含量的影响。方法:采用比色法测定长柱金丝桃不同采收期、
不同部位的总黄酮含量。结果:长柱金丝桃带花的地上部分在花盛期采收总黄酮含量较高。结论:通过研究,得到一种适用于
长柱金丝桃药材的采收方法,对其开发具有指导意义。
[关键词] 长柱金丝桃;药用部位;采收季节;总黄酮
[中图分类号] R284. 1 [文献标识码] B [文章编号] 1005-9903(2010)10-0076-02
长柱金丝桃又名黄海棠、红旱莲、湖南连翘,为
藤黄科金丝桃属植物 Hypericum ascyron L.。长柱金
丝桃味苦,性寒。功效为平肝,凉血,止血,败毒,消
肿,泻火解毒。民间用于止血、治黄疸、肝炎、支气
管炎及疮疖肿毒等症[1]。已从长柱金丝桃中分离出
槲皮素(quercetin)、异槲皮苷(isoquercitrin)、芦丁
(rutin )、山 柰 酚 (kaempferol )及 金 丝 桃 苷
(hyperin)[2]等成分。黄酮类化合物有平喘、止咳、
祛痰、镇痛、镇静、抗菌消炎、利尿、降压、抗过敏作
用[3-4],近年来的研究又认为该类化合物亦具有抗抑
郁、抗肿瘤及抗爱滋病的作用[5]。本文采用比色法
比较了长柱金丝桃不同采收期、不同部位的总黄酮
含量,为合理开发利用提供了实验依据。
1 材料
1. 1 药材 长柱金丝桃采于佳木斯市猴石山。经
佳木斯大学药学院生药学教研室刘娟教授鉴定为藤
黄科植物长柱金丝桃 H. ascyron L. 的干燥全草,标
本存于佳木斯大学药学院药用植物及生药学标本陈
列室。
1. 2 仪器 FA2004 电子分析天平(上海恒平科学
仪器有限公司),KQ5200 超声波清洗器(昆山市超
声仪器有限公司),RE-52AA 旋转蒸发器(上海亚荣
生化仪器厂),分光光度计(日本岛津 UV-2401)。
1. 3 试剂 所用试剂均为分析纯。芦丁对照品(中
国药品生物制品检定所,批号 0076-9705)。
2 方法
将不同时期、不同地点的长柱金丝桃茎、叶、花
或果实、地上部分及乌腺金丝桃地上全草分别粉成
粗粉。采用比色法测定总黄酮的含量。
2. 1 标准曲线的绘制 精密称取在 120 ℃干燥至
恒重的芦丁 0. 023 4 g,95%乙醇溶解,小心移至 100
mL 量瓶,定容,摇匀,精密吸取该溶液(浓度 0. 234
mg·mL - 1)1. 0,2. 0,3. 0,4. 0,5. 0,6. 0 mL,分别至
25 mL 量瓶,先加 5% NaNO2 溶液 1. 0 mL,摇匀,放
置 6 min,再加 10% Al(NO3)3 溶液 1. 0 mL,摇匀再
放置 6 min,加 10% 的 NaOH 溶液 10. 0 mL,95% 乙
醇稀释至刻度,摇匀。以空白溶液为参比,在波长
504 nm 处测定吸收度,求得回归方程为 Y = 6. 0 ×
10 - 3 + 1. 18 × 10 - 2 X,r = 0. 999 7。结果表明在 0 ~
56. 16 mg·L - 1芦丁浓度与吸收度呈良好的线性关
系。
2. 2 稳定性试验 精密吸取芦丁 95% 乙醇溶液
(质量浓度 0. 234 g·L - 1)2 mL,按标准曲线项下操
作,加入显色剂后,每隔 10 min 测定其吸收度,试验
表明比色液在 1 h 内稳定,RSD 0. 19%。
2. 3 精密度试验 精密吸取芦丁 95% 乙醇溶液
(质量浓度 0. 234 g·L - 1)2 mL,按标准曲线项下操
作,加入显色剂后,连续测定 5 次,RSD 0. 627%,表
明精密度良好。
2. 4 供试品溶液制备 准确称量 1 g 样品粗粉(每
样称 3 份),石油醚冷浸过夜,索式提取器提取至无
色,药渣阴干后,95% 乙醇 50 mL 超声提取 3 次,每
次 20 min,合并滤液移至 250 mL 量瓶,定容,摇匀。
2. 5 重复性实验 分别精密称取同批样品 6 份,分
别制成供试品溶液,从中吸取适量(使 A 值在 0. 2 ~
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第 16 卷第 10 期
2010 年 8 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 16,No. 10
Aug.,2010
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2010.10.027
0. 8 之间)溶液至 25 mL 容量瓶,按标准曲线项下操
作显色后,于波长 504 nm 处测定吸收度,并按回归
方程计算含量。结果 RSD 为 2. 03%,重复性良好,
表 1。
2. 6 回收率试验 精密称取长柱金丝桃样品(猴石
山产,果期)约 1 g 共 5 份,分别向其中加入芦丁对
照品 10 mg,按样品测定方法进行提取、测定,按回归
方程计算芦丁含量,平均回收率为 98. 66%,RSD 为
1. 07%(n = 5)。
表 1 长柱金丝桃中芦丁回收率试验
No. 加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回收
率 /%
RSD /%
1 9. 99 9. 96 99. 70
2 10. 01 9. 88 98. 70
3 10. 00 9. 76 97. 60 98. 66 1. 07
4 9. 98 9. 73 97. 49
5 10. 03 9. 99 99. 60
2. 7 样品测定 取不同采收期、不同药材部位样
表 2 长柱金丝桃不同采收期、不同部位总黄酮含量(珋x ± s ) %
部位 采收期 总黄酮
茎 幼苗 1. 90 ± 0. 03
花盛 2. 24 ± 0. 05
果期 1. 99 ± 0. 06
果熟 1. 92 ± 0. 10
叶 幼苗 3. 29 ± 0. 19
花盛 2. 08 ± 0. 10
果期 2. 03 ± 0. 05
果熟 1. 30 ± 0. 03
花、果实 花盛 5. 55 ± 0. 36
果期 3. 88 ± 0. 12
果熟 3. 69 ± 0. 05
地上全草 幼苗 2. 87 ± 0. 08
花盛 5. 07 ± 0. 07
果期 3. 65 ± 0. 08
果熟 3. 25 ± 0. 03
品,分别制备成供试品溶液,依法测定并计算含量,
见表 1。长柱金丝桃中总黄酮在花盛期含量最高;
以花中总黄酮含量最高,茎中含量最少,见表 2。
3 结论与讨论
对不同采收期、不同药用部位长柱金丝桃总黄
酮的测定得知,总黄酮在花盛期含量最高,在幼苗期
含量最低;在花中含量最高,茎中含量最低。因此,
长柱金丝桃最好在花盛期(7 月末 8 月中旬)采收;
虽然花中总黄酮含量最高,考虑到药材中花的数量
少,且地上全草总黄酮含量仅次于花中。所以,认为
采收部位为地上全草。
金丝桃属植物具有复杂多样的化学成分,国内
外对其化学成分及药理方面的研究很多。其中研究
最多的是苯并二蒽酮化合物 (naphthodian2thr ones)
包 括 金 丝 桃 素 (hyperein )、 伪 金 丝 桃 素
(pseudohypericin)和黄酮类。长柱金丝桃富含多种
黄酮类成分,因此,本文以总黄酮为指标,比较了不
同入药用部位、不同采收期对活性成分的影响,为进
一步规范长柱金丝桃药材药用部位采收期和采收方
法提供科学依据,对其开发具有指导意义。
[参考文献]
[1] 江苏新医学院 . 中药大辞典 [M]. 上册 . 上海:上海科
学技术出版社,1997:101.
[2] 王兆全 .红旱莲有效成分的研究[J]. 药学学报,1980,
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[5] 林启寿 . 中草药成分化学[M]. 北京:科学出版社,
1977:206.
[责任编辑 顾雪竹]
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中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 16,No. 10
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