全 文 ：猪屎豆不同部位黄酮含量的测定及比较
郭艳峰，黄 钰，刘 妍，黄 冬* (中山火炬职业技术学院生物医药系 ，广东中山 528436)
摘要 ［目的］研究猪屎豆不同部位不同提取相的黄酮含量。［方法］采用乙醇回流提取作为猪屎豆黄酮的制备方法;以芦丁为对照品，
采用紫外 －可见分光光度法作为黄酮的测定方法。［结果］叶片石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相和水相的黄酮含量分别为 14． 63、92． 67、
8． 29、98． 80 mg /g，果实各萃取相黄酮含量分别为3． 24、30． 54、52． 15、59． 72 mg /g;猪屎豆叶片石油醚相、氯仿相和水相的黄酮含量显著高
于果实相应的黄酮含量，果实乙酸乙酯相的黄酮含量显著高于叶片乙酸乙酯相的黄酮含量。［结论］猪屎豆叶片和果实可作为黄酮开发
利用的重要来源之一。
关键词 猪屎豆;黄酮;不同部位;乙醇回流提取;紫外分光光度法
中图分类号 S567． 23 + 9 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2016)07 －145 －02
Comparison and Determination of Total Flavonoids in Different Parts of Crotalaria pallida
GUO Yan-feng，HUANG Yu，LIU Yan，HUANG Dong* (Department of Biomedicine，Zhongshan Torch Polytechnic，Zhongshan，Guang-
dong 528436)
Abstract ［Objective］To research the flavonoids content in different parts of Crotalaria pallida at different extraction phases．［Method］Fla-
vonoids were prepared from C． pallida by ethanol reflux extraction． With rutin as the reference substances，UV-VIS spectrophotometry was used as
the detection method of flavonoids．［Conclusion］Flavonoids contents in C． pallida leaves in petroleum ether phase，chloroform phase，ethyl acetate
phase and water phase were 14． 63，92． 67，8． 29 and 98． 80 mg /g，respectively． Flavonoids contents in C． pallida fruits were 3． 24，30． 54，52． 15
and 59． 72 mg /g，respectively． Flavonoids contents in C． pallida leaves in petroleum ether phase，chloroform phase and water phase were signifi-
cantly higher than those in C． pallida fruits． Flavonoids content in C． pallida fruits in ethyl acetate phase was significantly higher than that in C．
pallida leaves．［Conclusion］C． pallida leaves and fruits were important sources for the development and utilization of flavonoids．
Key words Crotalaria pallida;Flavonoids;Different parts;Ethanol reflux extraction;Ultraviolet spectrophotometry
基金项目 中山市公益研究项目(2015B2355)。
作者简介 郭艳峰(1984 －) ，女，山西汾西人，博士，从事植物功能产品
开发研究。* 通讯作者，教授，从事天然产物开发研究。
收稿日期 2016-02-19
黄酮类化合物的基本结构构成为 C-G-C 方式，属于植物
次级代谢产物。黄酮类化合物具有来源广、生物活性多、毒
副作用小等特点，目前广泛应用于临床，可影响心血管系统、
抗炎调节免疫、抗肿瘤、抗菌抗病毒、免疫系统调节、神经系
统、生殖系统、消化系统等［1］。近年来，植物源药剂以其天然
低毒的特点倍受青睐，而黄酮类化合物更是以其光谱的药理
作用引人瞩目，是当前药品、功能食品和保健品开发的重点
活性物质［2］。
黄酮类化合物广泛存在于豆科植物中，但在猪屎豆属植
物中仅有少量分布，主要分布在该属马都拉猪屎豆(C． Ma-
durensis)中［3］。猪屎豆(Crotalaria pallida Aiton)是豆科(Le-
guminosae)猪屎豆属(Crotalaria)多年生草本，是世界广布
种，原产于热带美洲，分布于大西洋海岸线、巴西、美洲、非洲
及中国大部分地区，常见于路边、河边、沙地还有贫瘠的山
坡［4 －5］。猪屎豆具有较好的生物活性，全草有散结、清湿热
等作用，近年来试用于抗肿瘤效果较好，主要对鳞状上皮癌、
基底细胞癌有疗效［5］。猪屎豆生长茂密、生长速度快、花期
长、结实率高［4］，每年都能采集到大量的猪屎豆叶和荚果。
已有研究显示，猪屎豆叶片提取物总黄酮具有良好的抑菌活
性［2］，能广泛用于杀菌剂、保鲜剂等产品的开发，但至今对果
实的研究及开发利用还很缺乏，造成了极大的资源浪费。该
研究对猪屎豆不同部位不同提取相的黄酮进行了含量的测
定，明确果实总黄酮含量的情况，以期为果实在黄酮类功能产
品方面的开发以及猪屎豆植物的进一步开发利用提供依据。
1 材料与方法
1． 1 试验材料 猪屎豆(Crotalaria pallida Ait．)叶片和果实
分别于 2015年 12月 21日采自广东省中山市陵岗村，经中山
市森林资源中心蒋谦才高级工程师鉴定为豆科(Legumino-
sae)猪屎豆属(Crotalaria)猪屎豆的叶片和果实。采集后的
叶片和果实经 80 ℃干燥后粉粹备用。
1． 2 仪器和试剂 旋转蒸发仪(RE-30L)，紫外可见分光光
度仪(北京谱析 TU-1901)，粉碎机(LD-800，粉粹细度 30 ～
200目)。芦丁(上海江莱生物科技有限公司，优级纯，规格
100 mg)，乙醇、石油醚(60 ～ 90 ℃)、乙酸乙酯、氯仿试剂、氢
氧化钠、硝酸铝均为分析纯。
1． 3 试验方法
1． 3． 1 猪屎豆叶片提取物的制备。分别精密称取猪屎豆叶
片和果实粉末 200 g，分别置于 1 000 mL的圆底烧瓶中，加石
油醚 300 mL，回流提取 2 h，直至溶剂无色，挥发完样品中的
石油醚，加 80%乙醇 300 mL进行回流提取 2 h，过滤后滤渣
继续用 80%的乙醇回流提取 1 h，合并滤液，将乙醇旋转蒸发
完，得浸膏。
1． 3． 2 标准曲线的制作。参考王芳等［2］、余文新等［6］方法
配置芦丁标准溶液，选择合适的测定波长(500 nm)进行吸光
度测定，每浓度标准溶液连续测 3 次。绘制芦丁的标准曲
线，求出吸光度 A 与芦丁的标准溶液浓度之间的线性回归
方程。
2 结果与方法
2． 1 猪屎豆样品不同提取部位的浸膏得率 取干燥的猪屎
豆叶片样品 200 g，分别利用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和水提
取，石油醚萃取叶片得浸膏 11 g，得率为 2． 75%;氯仿萃取叶
片得浸膏 13 g，得率为 3． 25%;乙酸乙酯萃取叶片得浸膏 12
安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2016，44(7):145 － 146 责任编辑 黄小燕 责任校对 况玲玲
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2016.07.048
g，得率为 3． 00%;水相萃取叶片得浸膏 13 g，得率为 3． 25%。
取干燥的猪屎豆果实样品 200 g，分别利用石油醚、氯
仿、乙酸乙酯和水提取，石油醚萃取果实得浸膏 17 g，得率为
4． 25%;氯仿萃取果实得浸膏 18 g，得率为 4． 50%;乙酸乙酯
萃取果实得浸膏 15 g，得率为 3． 75%;水相萃取果实得浸膏
11 g，得率为 2． 75%。
2． 2 标准溶液浓度与吸光度值的回归方程 由图 1 可见，
芦丁标准溶液浓度与吸光度之间的线性回归方程为 A =
4． 685 7x －0． 010 5(R2 = 0． 992 0)，表明芦丁的质量浓度在
0. 01 ～0． 05 mg /mL与吸光度有良好的线性关系。
图 1 芦丁标准曲线
Fig． 1 Standard curve of rutin
2． 3 各萃取相黄酮含量 按照标准曲线及其换算关系，计
算猪屎豆叶片及果实提取物各部分黄酮含量，结果表明(表
1)，石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相和水相叶片的黄酮含量分
别为 14． 63、92． 67、8． 29、98． 80 mg /g，各萃取相果实黄酮含量
分别为 3． 24、30． 54、52． 15、59． 72 mg /g;石油醚相、氯仿相和
水相叶片的黄酮含量显著高于果实的黄酮含量(P ＜ 0． 05)，
乙酸乙酯相果实黄酮含量显著高于叶片黄酮含量(P ＜
0． 05)。
表 1 猪屎豆不同部位的黄酮含量
Table 1 Flavonoids contents in different parts of C． pallida
萃取相
Extraction
phase
黄酮含量 Flavonoids content∥mg /g
叶片
Leaves
果实
Fruit
T值
T value
P值
P value
石油醚
Petroleum ether
14． 63 ±1． 96 3． 24 ±0． 13 8． 179 0． 001
氯仿 Chloroform 92． 67 ±7． 06 30． 54 ±1． 81 12． 059 0． 000
乙酸乙酯
Ethyl acetate
8． 29 ±0． 42 52． 15 ±3． 35 25． 194 0． 000
水 Water 98． 80 ±6． 96 59． 72 ±4． 87 6． 507 0． 003
3 结论
该试验采用体积分数 80%的乙醇，70 ℃回流提取猪屎
豆叶片和果实中的有效成分，分别得到了石油醚相、氯仿相、
乙酸乙酯相和水相的黄酮含量。结果显示，叶片石油醚相黄
酮含量为 14． 63 mg /g，氯仿相黄酮含量为 92． 67 mg /g，乙酸
乙酯相黄酮含量为 8． 29 mg /g，水相黄酮含量为 98． 80 mg /g;
果实石油醚相黄酮含量为 3． 24 mg /g，氯仿相黄酮含量为
30． 54 mg /g，乙酸乙酯相黄酮含量为52． 15 mg /g，水相黄酮含
量为 59． 72 mg /g。比较而言，猪屎豆叶片石油醚相、氯仿相
和水相的黄酮含量显著高于果实相应的黄酮含量，果实乙酸
乙酯相的黄酮含量显著高于叶片乙酸乙酯相的黄酮含量。
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3 －4．
(上接第 141页)
代后，传入年限跨度大，传入途径复杂，多数物种分布在海拔
1 400 m以下;人们普遍对外来入侵生物的危害性认识不足，
防控意识淡薄，人为无意识导致外来入侵生物扩散现象突
出，农民掌握的防治方法少，防治效果不好;缺乏政府资金支
持，预警监测能力弱，协作、统防、信息共享不畅，防控工作
滞后。
3． 2 建议
3． 2． 1 开展早期预警监工作。外来入侵生物具有潜伏性、
突发性以及对气候、土壤、环境适应能力强等特点，种群生物
量与土壤肥力、土壤湿度、温度密切相关。如果入侵初期未
引起足够重视，一旦扩散蔓延，便很难消灭［1］，因此应开展早
期预警监测工作，做到早发现，早防治。
3． 2． 2 建立部门沟通交流机制，实现信息共享。外侵生物
分布区域广，防控工作涉及多个部门，应建立部门沟通交流
机制，实现信息共享;对农民加强防控知识和防治技术宣传
培训，形成“政府引导，部门协作;防除并举，点面结合;监测
时互防，灭除时联防”的防控机制。
3． 2． 3 加强防控机制的建立和防治队伍建设。外侵生物防
控应在保护农业安全、生态安全的战略高度，加强防控机制
的建立和防治队伍建设，建立政府资金投入保障制度，加强
对公众外侵生物防控知识宣传普及，提高农民的防除能力。
3． 2． 4 加强防治工作。外侵生物防治应结合实际，采取生
物防治、化学防治、物理防治方法［1］，在化学防治和物理防治
区域内，根据地块实施替代种植技术，宜农则农、宜果则果、
宜林则林，通过管理措施，控制外侵生物的再生。
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