全 文 :第27卷第2期
2013年4月
水土保持学报
Journal of Soil and Water Conservation
Vol.27No.2
Apr.,2013
收稿日期:2012-12-29
基金项目:广东省科技计划项目(2010B031800011);广东省自然科学基金项目(815140150100003)
作者简介:刘德良(1964-),男,湖南邵东人,博士,教授,主要从事生态修复等研究。E-mail:ldl@jyu.edu.cn
煤矿区先锋植物猪屎豆接种丛枝菌根的效应研究
刘德良1,王开峰2,杨期和1
(1.嘉应学院生命科学学院,广东 梅州514015;2.嘉应学院化学与环境学院,广东 梅州514015)
摘要:以煤矿尾矿区土著先锋植物猪屎豆(Crotalaria pallida Ait.)为研究对象,开展了3种基质配比、4
种丛枝菌根接种后的效应研究。结果表明:(1)从宿主生物量、菌根侵染率及侵染强度、50g干土中的孢子
数、根系活力看,A4菌根是最适合梅州明山矿区先锋植物猪屎豆的优势菌种,菌剂与基质优势组合是
A4B1;(2)不同菌种、植株及地上部/地下部对镉、锌、铜、镍、锰5种重金属元素的吸收-排斥效应是不同
的。从镉元素看,与对照A5相比,A1、A3、A4菌根促进或抑制对镉吸收-排斥效应均达极显著差异水平,
这3种菌根结合猪屎豆可作为明山废矿区镉污染丛枝菌根-植物联合修复的优势菌种;4种菌根对促进或
阻止铜、锰吸收-排斥效应均不显著;(3)覆土少的(覆2cm厚黄土于9cm厚煤矸石上)相应高于不接种且
覆土厚(覆7cm厚黄土于4cm厚煤矸石上)的,说明接种菌根具有抵消由于覆土少而导致的植株生物量
降低的潜力,极大地节约了复垦费用,综合经济效益十分可观。
关键词:猪屎豆;丛枝菌根;煤矿;效应
中图分类号:S154.3 文献标识码:A 文章编号:1009-2242(2013)02-0282-06
Study on Effects of CrotalariapallidaInoculated with
Arbuscular Mycorrhizal Fungi in Coal Mining Area
LIU De-liang1,WANG Kai-feng2,YANG Qi-he1
(1.School of Life Sciences,Jiaying University,Meizhou,Guangdong514015;
2.School of Chemistry and Environment Sciences,Jiaying University,Meizhou,Guangdong514015)
Abstract:In order to better expand land reclamation and ecological reconstruction of wastland of coalmine
tailing in Mingshan,effects of Crotalaria pallida(a kind of indigenous pioneer plant)was studied by
contrast of three different mediums and respectively inoculation of four arbuscular mycorrhizal fungi,The
chief results were as folows:(1)Seen from biomass of host,mycorrhizal infection rate and intensity,spores
of 50g dry soil,and root activity of four indicators,A4(Glomus versiforme)was a kind of dominant species
for the best suitable Crotalaria pallidain coalmine tailing of Mingshan,and A4B1was superior combination
of mediums and arbuscular mycorrhizal fungi.(2)Effects of the absorption-repulsion of five heavy metals
(Cd,Zn,Cu,Ni and Mn),different mycorrhizal fungus as wel as roots and shoots of plant,were different,
of which Cd effect of the A1,A3and A4that caused absorption or repulsion was very marked difference,and
the three kinds of arbuscular mycorrhizal fungi combination Crotalaria pallidain the united repairs of AMF-
plant were used as superior fungi of Cd contamination of coalmine tailing in Mingshan;of which Cu and Mn
effect of the absorption-repulsion of 4kinds of arbuscular mycorrhizal fungi that causesd absorption or
repulsion was not marked.(3)Because the reclaimed soil with a little soil(loess thickness of 2cm and gangue
thickness of 9cm)were higher than those for non-mycorrhizal plants in reclaimed soil with a great soil(loess
thickness of 7cm and gangue thickness of 4cm),arbuscular mycorrhizae had a potential to counteract the
effect induced by a smal thickness of covered soil,reclamation fee could be very reduced,and comprehensive
economic benefits were great generous.
Key words:Crotalaria pallida Ait.;arbuscular mycorrhiza(AM);coal mining;effect
矿业废弃地是为采矿活动所破坏和占用,非经治理而无法使用的土地,主要包括排土场、尾矿、废石堆、采
空区和塌陷区等。采矿活动及其废弃物的排放不仅破坏和占用大量土地,日益加剧人多地少的矛盾,而且矿山
DOI:10.13870/j.cnki.stbcxb.2013.02.045
废弃物的排放和堆存也带来一系列影响深远的环境问题,如区域性重金属污染、土地退化、生物多样性丧失、农
作物减产和品质下降、生态系统和景观受到破坏并危及人体健康[1-2]。为消除矿区的环境负面效应,缓解人地
矛盾,过去10~20年里,我国矿山的土地复垦和生态重建取得了一些阶段性的理论和应用研究成果[3-4],但研
究重点大多放在以富集植物筛选为基础的植被重建及工程技术上,对于包括菌根在内的土壤微生物在矿区土
壤复垦与生态重建中的作用、机理及其效应等报道尚少[5],正因如此,受矿区固体废弃地土壤极端贫瘠、重金属
污染严重及含量高、生态环境脆弱等特殊地下环境的制约,植被重建的生态效应并不明显,甚至出现生态治理
的短期行为,没有真正发挥生态系统的稳定性和可持续性作用。因此,进入21世纪,一种取各项修复技术之
长,致力于矿区整体(地上和地下)生态系统健康的综合治理、协同修复技术体系正日益为人们所关注,其中包
括矿区菌根在内的土壤微生物及其地下生态系统的健康与修复是矿区土地复垦与生态重建的关键和基础[6-7],
为此,毕银丽[5]认为菌根微生物技术可能成为未来矿区土地垦复和生态重建的新突破口。
选择广东梅州明山煤矿区特有的固体废弃物与黄土覆盖为培养基质,以猪屎豆(Crotalaria pallida Ait.)
为宿主,接种4种不同菌根丛枝真菌(arbuscular mycorrhiza fungi,AMF),探讨适宜于该煤矿区特殊立地条件
的AMF与猪屎豆的最佳优势组合、生态适应性以及丛枝菌根-植物联合修复的生态效应,旨在为AMF应用
于煤矿废弃地的土地复垦与植被恢复提供理论依据。
表1 梅州明山煤矿废弃地土壤的重金属含量
样点 pH
重金属含量/(mg·kg-1)
镍(Ni) 镉(Cd) 铜(Cu) 锌(Zn) 锰(Mn)
样点1 2.87 35.097 2.541 62.109 77.704 409.056
样点2 5.02 46.065 0.759 270.308 92.501 387.057
样点3 3.76 34.351 0.823 44.536 80.249 488.660
样点4 6.16 34.397 3.028 39.522 89.199 441.963
样点5 5.46 45.0488 3.109 39.931 104.502 409.338
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 培养基质 试验用培养基质取自广东梅
州明山煤矿尾废矿区特有的固体废弃物煤矸石
及周边的黄红壤为混合基质。黄土及煤矸石在
装盆前用2cm孔径的泥土筛过筛,并经高温高
压蒸汽灭菌(121℃,2h),风干备用。经研究梅
州明山废矿区煤矸石pH较低(pH为2.87~6.16),且土壤重金属污染属于镉-铜-锰复合型污染(土壤镉超
标严重;存在一定程度的铜污染,但污染不严重;锰污染严重),相关性状见表1[8]。
1.1.2 供试菌种 试验用丛枝菌根分别为根内球囊霉(Glomus intraradices),中国丛枝菌根种质资源库编号
为BGC BJ09];摩西球囊霉(Glomus mosseae),中国丛枝菌根种质资源库编号为BGC NM01A;摩西球囊霉
(Glomus mosseae),中国丛枝菌根种质资源库编号为BGC HEB07B;地表球囊霉(Glomus versiforme),中国丛
枝菌根种质资源库编号为BGC GD01C。丛枝菌根均来自北京农林科学院植物营养与资源研究所国家基金资
助“中国丛枝菌根真菌种质资源库(BGC)”。
1.1.3 试验用盆和供试作物 试验用盆为规格20cm×20cm×15cm(高×盆口直径×盆底直径)的棕色塑
料盆,用自来水清洗,75%的酒精消毒;试验培养基质为黄土在上、煤矸石在下,按比例分3个层次装盆(模拟室
外自然生境中的不同厚度覆土处理及覆土的经济效益;为模拟猪屎豆在自然状况下生长,不施底肥)。为方便
统计分析,拟采用相关编码识别样本,见表2。
表2 试验材料及编号
编号 菌种及基质 编号 菌种及基质
A1 根内球囊霉(Glomus intraradices,BGC BJ09) A5 CK样
A2 摩西球囊霉(Glomus mosseae,BGC NM01A) B1 0.4kg黄土(约2cm厚盆土)/1.8kg煤矸石(约9cm厚)
A3 摩西球囊霉(Glomus mosseae,BGC HEB07B) B2 0.9kg黄土(约4cm厚盆土)/1.2kg煤矸石(约7cm厚)
A4 地表球囊霉(Glomus versiforme,BGC GD01C) B3 1.4kg黄土(约7cm厚盆土)/0.6kg煤矸石(约4cm厚)
1.2 试验设计与管理
试验在嘉应学院日光温室中进行,采用4种菌剂与对照(CK)共5个处理、3种不同覆土方式的基质,3次
重复,共45盆。2011年3月1日,取籽粒饱满的猪屎豆种子,在10%的双氧水中表面消毒20min,无菌水冲洗
5次后播种于无菌土中,待幼苗长出3对真叶后选取生长整齐、高矮一致的实生苗进行移栽,每盆移植无菌播
种苗3~4株,并最后定苗为每盆2株。日常管理主要是根据盆中土壤缺水情况,不定期浇水,使土壤含水量经
常保持在田间持水量的60%左右。为防止污染物淋溶渗漏损失,在盆下放置塑料托盘并将渗漏液倒回盆中。
1.3 试验方法
1.3.1 接种方法 AM真菌接种以穴播方法进行,接种处理的植株按照10g菌土/盆的剂量进行,菌土在移
382第2期 刘德良等:煤矿区先锋植物猪屎豆接种丛枝菌根的效应研究
栽时均匀撒在实生苗根系周围,对照分别加入相应的10g灭菌菌剂和10ml菌剂过滤液(浇等量菌种过滤
液),以保持基质中除丛枝菌根外其他微生物区系一致。
1.3.2 样品分析及测定方法 2011年11月21日收苗,植物分地上部、地下部,用自来水清洗植物,再用去离
子水淋洗3遍,稍干后分地上部、地下部分别称其鲜重,其中一部分用于重金属含量测定;另一部分置于烘箱
80℃烘48h,95℃烘24h后称量得植物干重、480℃灰化4h,待用。
采用 HCl-HNO3-HF-HClO4 混酸消解法,每个样品3次重复;植物重金属镍、镉、铜、锌、锰测定参照
王喜全[9-10]等的方法:采用灰化法处理样品植物;植物样品消化液中Ni、Cd、Cu、Zn、Mn 5种重金属浓度采用原
子吸收分光光度计测定(日本岛津,AA-6300)。
菌根侵染率测定参照文献[11];基质风干后用湿筛倾注法测定AM真菌孢子数[12];根系活力用TTC法测定。
2 结果与分析
2.1 植株生物量分析
由表3可知,接种AMF后,与对照(A5)相比,不同种类丛枝菌根及其基质组合对生物量(地上部/地下部)
的影响不同。总体上看,A4有比较明显的促进生物量增大(总生物量,地上部/地下部生物量)的作用,A1、
A2、A3促进植物生长的作用/效益不明显,甚至出现比对照不接种样本还低的现象;不同配比的煤矸石、黄土
基质中,对照(A5)以B3生物量最大,但无论地上部、地下部还是总生物量,差异均不大;相同菌剂不同配比的
基质间,大体上呈现以B2和B1为好,B3为差的趋势。分析接种后植株生物量比对照样本生物量还低的原因,
可能是由于菌根真菌在较差基质(本试验模拟室外覆土处理,不施底肥)中生长时,消耗了比植物正常情况下所
能提供的更多碳水化合物[5]。因为在菌根形成初期,菌根真菌和宿主根系都要争夺有限的碳源营养,其生长发
育均会受到碳源供应不足而暂时受到抑制的影响。但随着真菌和宿主继续生长,菌根真菌完成初始侵染并进
入发挥有益作用阶段,菌根提高了宿主根系吸收矿质元素的能力。接种到煤矿区废弃物后,丛枝菌根真菌可能
有一个逐渐适应、驯化过程。
从地下部看,差异达显著水平的菌剂与基质的优势组合有 A4B3(9.52g/盆)、A3B3(7.97g/盆)、A4B2
(7.69g/盆),但地上部与总生物量间,各处理样本差异均不显著。总之,综合菌剂与基质间各方面的表现以
A4B1组合的总生物量最大(37.04g/盆),大体可以认定菌剂与基质优势组合是A4B1。
表3 接种菌根的生态适应性
编号
每盆生物量/g
地上部 地下部 总和
根系活力/
(μg·g
-1·h-1)
每50g干土孢
子数(个)
菌根侵染
侵染率/% 侵染等级
A1B1 24.73±5.56 3.98±0.61 28.71±4.92 17.64±2.18* 20±8.37* 54.45±18.25 4
A1B2 29.41±1.97 6.64±2.38 36.05±6.78 42.71±10.53** 18±3.65* 49.32±7.46 3
A1B3 21.28±4.23 6.30±1.75 27.58±5.51 21.71±6.64** 9±2.33 40.36±10.18 3
A2B1 29.03±1.15 5.45±3.24 34.48±6.36 28.80±7.25** 14±1.89 57.24±5.72 4
A2B2 24.85±3.78 4.54±2.67 28.39±2.44 15.78±4.40* 16±3.28 45.87±13.30 3
A2B3 24.61±0.94 6.60±1.88 31.21±5.23 27.65±3.38** 15±0.94 39.50±16.56 3
A3B1 26.26±7.37 6.75±3.49 33.01±3.68 20.58±9.41** 21±6.46* 54.61±9.75 4
A3B2 21.73±5.18 4.73±0.92 26.46±7.26 22.71±2.75** 12±3.59 50.82±20.44 4
A3B3 21.05±2.46 7.97±2.18* 29.02±4.39 14.91±3.44* 10±2.25 42.71±5.85 3
A4B1 30.18±10.15 6.86±3.87 37.04±4.75 23.53±7.26** 23±6.43** 67.23±14.10* 4
A4B2 25.09±6.34 7.69±1.65* 32.78±5.53 17.54±1.15* 20±10.71* 60.34±13.87 4
A4B3 24.13±2.91 9.52±3.74* 33.65±8.64 16.98±5.27* 18±5.34* 56.18±7.66 4
A5B1 21.98±6.53 6.12±2.29 28.10±1.15 13.63±2.63* - - -
A5B2 23.44±1.49 6.38±1.53 29.82±3.97 7.22±1.98 - - -
A5B3 23.58±4.34 7.02±3.42 30.60±2.38 7.78±1.24 - - -
注:同列间*表示差异显著(P<0.05);同列间**表示差异极显著(P<0.01)。
2.2 菌根的生态适应性分析
2.2.1 不同处理对菌根侵染率的影响 菌根侵染率在一定程度上反映了菌根真菌与宿主植物的亲合程度。
侵染等级划分标准:菌根侵染率0~5%为1级;6%~25%为2级;26%~50%为3级;51%~75%为4级;76%
~100%为5级[13]。相关研究表明,菌根侵染植物后,可以明显提高宿主植物的抗旱性、病虫害和重金属毒害
及抗酸性和抗极端温度、湿度等能力[5]。由表3可知,在对照处理中,没有发现菌根的侵染,而接种处理后菌根
侵染率为67.23%~39.50%,侵染强度均达到3~4级,表明寄主根与菌根真菌之间的亲合性均较好,但差异
482 水土保持学报 第27卷
达显著水平的只有A4B1(侵染率为67.23%);4种AMF比较,A4菌根在3种基质层级中的侵染率均较高,达
到4级侵染强度,而A1、A2、A3的侵染强度多为3级;不同配比的煤矸石、黄土基质中,随着基质B1、B2、B3中
黄土的增多、煤矸石的减少,各菌种的菌根侵染率依次递减。
有关研究[5,14]表明,菌根侵染率与土壤的有机质含量和基质pH等有关,由于梅州明山废矿区煤矸石pH
较低(pH为2.87~6.16),导致在土壤样本中,煤矸石含量越大,菌根侵染率越低。在利用丛枝菌根复垦矿区
的过程中,可通过在煤矸石表面覆盖土壤的方式,为菌根提供一个保持水分、养分较强的环境同时,可调节煤矸
石的pH值,为菌根的侵染创造良好的条件,同时表面覆盖黄土能够维持较高的土壤最低温度,减少土壤温度
的日较差,有利于根系的生长发育,促进植物的根系活力,提高菌根侵染率。
2.2.2 不同处理对AM真菌孢子密度的影响 由表3可看出,接种丛枝菌根真菌后,50g干土中的孢子数为
9~23个。其中,差异达极显著水平的有 A4B1(23个),差异达显著水平的有 A1B1(20个)、A1B2(18个)、
A3B1(21个)、A4B2(20个)、A4B3(18个)。此外,相同菌剂不同处理间的孢子密度均随着B1、B2、B3而递减,
这可能是由于随着基质B1、B2、B3中pH逐渐降低,影响了孢子的生活环境。因为明山煤矿矸石废弃地pH
2.87~6.16,呈(强)酸性,而菌根真菌孢子一般最适合生长于中性环境;同时,孢子的萌发也受培养基质中pH
的影响。有关研究表明:碱性(pH 7.5~8.0)条件下孢子的发芽率比中性和酸性条件稍高[15],所以在此酸性环
境下,孢子量不多,同时也抑制了菌根对根系的侵染。
2.2.3 不同处理的根系活力 根系是植物吸收水分和营养物质的重要器官,根系的吸收与合成能力直接影响
植物地上部的生长发育。由表3可知,根系活力范围为7.22~42.71μg/(g·h),与对照(A5)相比,4种菌根
真菌均对明山先锋植物猪屎豆根系活力有明显的提升效应(差异均达到显著或极显著水平)。Barea[16]证实丛
枝菌根与豆科植物根瘤菌之间有互利作用,可以促进豆科植物结瘤和固氮,增加豆科植物根瘤的数目,提高固
氮的能力,与本次试验结果相符。
2.3 植株的重金属含量及其带走量分析
2.3.1 地上部重金属含量及其带走量 由表4可知,接种AM真菌后,植株地上部对5种重金属元素镉、锌、
铜、镍、锰的吸收-排斥效应是不同的。与对照(A5)相比,其中,A3、A4菌根具有抑制地上部对重金属镉吸收
的作用(排斥效应达差异显著水平),但从重金属镉的带走量看,4种菌根对重金属镉的吸收-排斥效应均不显
著;A1、A2、A3、A4菌根对锌的排斥效应达差异显著水平,但从重金属锌的带走量看,只有A3达差异显著水
平;A4对铜的排斥效应达差异极显著水平;A3、A4对镍的促进吸收效应达差异显著水平;4菌根对锰的吸收
-排斥效应均不显著。
表4 地上部重金属含量(mg/kg)及其每盆带走量(mg)
编号
镉
含量 带走量
锌
含量 带走量
铜
含量 带走量
镍
含量 带走量
锰
含量 带走量
A1 20.57±8.37 0.52±0.25 1132.30±62.18* 28.84±15.33 135.01±19.27 3.44±1.98 354.40±73.54 9.03±4.32 959.79±44.16 24.45±8.27
A2 11.16±2.45 0.29±0.43 1412.03±11.57 36.94±6.28 103.85±8.14 2.72±1.43 510.92±24.82 13.37±3.19 1520.43±32.53 34.99±17.33
A3 0.64±1.18** 0.00±0.58 1073.68±45.30* 24.71±9.16* 100.57±13.30 2.31±0.91 772.54±18.26* 17.78±6.47**1520.43±25.82 25.03±10.07
A4 0.79±0.92** 0.00±0.36 1153.97±9.68* 30.55±12.42 24.67±8.15** 0.65±1.05**769.09±6.67* 20.36±4.45** 848.90±17.44 22.47±3.58
A5 16.31±5.36 0.38±0.21 2025.96±20.84 46.60±18.81 110.36±15.28 2.54±0.76 409.59±15.50 9.42±1.78 1266.28±15.37 29.12±16.45
注:同列间*表示与对照(A5)相比,差异显著(P<0.05);同列间**表示与对照(A5)相比,差异极显著(P<0.01)。下同。
2.3.2 地下部重金属含量及其带走量 由表5可知,植株地下部对5种重金属元素镉、锌、铜、镍、锰的吸收-
排斥效应是不同的。与对照(A5)相比,A1、A2菌根可促进对重金属镉的吸收(呈极显著差异),但重金属镉的
带走量均不显著;A1、A2、A3、A4菌根促进或抑制对锌、铜元素的吸收-排斥效应均不显著;4种菌根对促进
镍的吸收均达显著或极显著差异水平,但从重金属镍的带走量看,A1差异不显著;A1、A2菌根对锰的排斥效
应达差异显著水平。
表5 地下部重金属含量(mg/kg)及其每盆带走量(mg)
编号
镉
含量 带走量
锌
含量 带走量
铜
含量 带走量
镍
含量 带走量
锰
含量 带走量
A1 20.72±4.16** 0.12±0.09 901.65±107.48 5.09±2.23 124.59±26.15 0.70±0.26 384.72±47.03* 2.17±1.46 572.90±18.67* 3.23±0.55*
A2 18.24±2.25** 0.10±0.10 1006.85±34.27 5.57±3.54 151.73±8.72 0.84±0.41 532.60±19.65** 2.95±0.83* 576.54±45.29* 3.19±1.74*
A3 0.57±0.94 0.00±0.00 699.39±18.45 4.53±1.88 154.35±14.36 1.00±0.77 632.93±25.24** 4.10±2.61** 748.98±80.41 4.85±2.13
A4 0.57±1.06 0.00±0.00 871.65±22.36 7.01±1.17 140.95±11.50 1.13±0.94 1082.74±121.70**8.68±4.28** 992.52±8.95 7.96±3.06
A5 0.37±0.42 0.00±0.00 1096.19±71.53 7.14±2.45 100.08±9.24 0.65±0.13 182.15±22.48 1.19±1.07 1111.30±26.52 7.23±1.78
582第2期 刘德良等:煤矿区先锋植物猪屎豆接种丛枝菌根的效应研究
2.3.3 全株的重金属含量及其带走量 由表6可知,与对照(A5)相比,A1、A3、A4菌根促进或抑制对镉吸收
-排斥效应均达极显著差异水平;4种菌根对重金属锌均有排斥作用(含量和重金属带走量的差异均达极显著
或显著水平);4种菌根对促进或阻止铜、锰吸收-排斥效应均不显著;A2、A3、A4菌根对重金属镍有促进吸收
的效应(含量和重金属带走量的差异均达极显著或显著水平)。
表6 全株重金属含量(mg/kg)及其每盆带走量(mg)
编号
镉
含量 带走量
锌
含量 带走量
铜
含量 带走量
镍
含量 带走量
锰
含量 带走量
A1 20.64±3.45** 0.64±0.92 1016.98±123.17* 31.64±7.05**129.80±18.53 4.04±2.38 369.5±104.16 11.50±4.42 766.34±52.56 23.84±6.70
A2 14.70±5.38 0.46±1.15 1209.44±77.36* 37.93±12.84* 127.79±34.62 4.00±0.95 521.76±23.51* 16.36±2.18* 1048.48±125.05 32.88±19.97
A3 0.12±0.60** 0.00±0.23 886.54±19.48** 26.15±11.00**127.46±24.15 3.76±1.17 702.74±58.60** 20.73±10.84** 900.62±88.72 26.57±13.43
A4 0.28±0.42** 0.00±0.17 1012.81±36.60* 34.93±5.46* 82.81±9.37 2.86±0.88 925.91±29.52** 31.93±9.26** 920.71±24.87 31.76±7.54
A5 8.34±1.97 0.25±0.30 2472.44±79.51 72.96±27.16 105.22±13.64 3.11±1.54 295.87±16.87 8.73±2.39 1188.79±67.84 35.08±22.15
2.4 接种AMF后的经济效益估算
表3表明,不同基质的配比中,对照(A5)以基质B3为好,其他菌剂间大体呈现基质B2与B1为好,B3为
差的趋势,表明接种菌根真菌后,无论是植株的地上部、地下部,还是全株,接种的菌根真菌具有抵消由于覆土
少而导致的生物量减少的作用。在本试验条件下,每盆接种A4(表现好的菌种)菌剂10g左右,约10元菌剂
成本费,从生物量看,覆土少的(B1,覆2cm厚黄土于9cm厚煤矸石上)相应高于不接种且覆土厚(B3,覆7cm
厚黄土于4cm厚煤矸石上)的,说明接种菌根具有抵消由于覆土少而导致的植株生物量降低的潜力,若按复垦
1hm2 土地计算,将减少土方500m3 左右。按《广东省园林工程综合定额(2006)》搬运覆土50~100元/m3 计
算,则复垦1hm2 土地将节约25 000~50 000元,而该菌根菌剂的成本相当低,从而可极大地节约复垦费用。
3 小结与讨论
随着菌根微生物技术的发展,利用 AM 强化矿区重金属污染土壤的植物修复日益成为国内外研究的热
点。通常认为,菌根侵染率、孢子密度等是研究菌根特性、评价菌根生态适应性最重要的2个指标,而生物量及
根系活力是表明寄主植物生长情况的重要特征。Abbott等[17]认为高效AM 真菌的筛选依据以下指标:接种
后的侵染状况;真菌对宿主植物磷的贡献;宿主植物的生长效应;真菌繁殖体的数量和在土壤中的存活、重建能
力等。van der Heijden等[18]发现,不同丛枝真菌促进植物生长的能力不同,其生长效应依赖于植物与真菌的
特定配合,作为抗性植物或超量累积植物,虽然其本身具有富集重金属的能力,但接种AMF后,有可能使这种
富集能力得到强化,因此,在煤矿区废弃物生态恢复中,为更好地发挥菌根的作用,应针对不同适生植被接种不
同的AMF。本试验研究中,明山煤矿区的先锋植物猪屎豆接种4种AMF后,无论从生物量、菌根侵染及其强
度、50g干土中的孢子数,还是根系活力看,A4均表现为好,为此,本试验初步认定,A4菌根(地表球囊霉,
Glomus versiforme,BGC GD01C)是最适合梅州明山矿区先锋植物猪屎豆的优势菌种;综合菌剂与基质间各
方面的表现,初步认定菌剂与基质优势组合是A4B1。
研究[5,14,19]表明,当矿区土壤中重金属含量达到毒害水平时,AM真菌侵染宿主植物表现出不同的菌根效
应,取决于金属元素的种类和土壤重金属浓度、土壤理化性质以及宿主植物和菌根真菌的种类、生物学性质。
作为抗性植物或超量累积植物,虽然其本身具有富积重金属的能力,接种丛枝菌根真菌后,有可能使这种富积
能力得到强化,但由于土壤性质、重金属有效性等环境条件的影响,菌根效应有着不同的表现。Repetto等[20]
通过二维凝胶电泳———液相色谱技术证实丛枝菌根调节合成了镉诱导蛋白,认为这是菌根共生体对镉的解毒
机制之一;还有学者[15,21]认为,菌根增强寄主植物对过量重金属抗性的可能性机理是菌丝积累了过量重金属;
有学者[22-23]认为是菌根菌丝通过物理或化学作用阻碍了重金属进入植物体。在梅州明山煤矿区废弃物及其先
锋植物猪屎豆接种AM 菌剂后,不同菌剂、植株及地上部与地下部对镉、锌、铜、镍、锰5种重金属元素的吸收
-排斥效应是不同的。从镉元素看,与对照(A5)相比,A1、A3、A4菌根促进或抑制对镉吸收-排斥效应均达
极显著差异水平,无论是何种机理,试验表明,这3种菌根结合猪屎豆可作为明山废矿区镉污染丛枝菌根-植
物联合修复的优势菌种;4种菌根对促进或阻止铜、锰吸收-排斥效应均不显著。
矿区土地复垦与生态重建的最大挑战是如何克服矿区固体废弃地极端贫瘠、重金属含量高、生态环境脆弱
等特殊地下环境条件的制约。为加快矿区生态恢复步伐,国内外早在1994年就有人在矿山固体废弃物中引入
(菌根)微生物,促进植物根瘤菌和菌根的生成,从而促进植物迅速生长、固定废弃物和加速废弃物风化成土。
682 水土保持学报 第27卷
Noyd等[24]把根内球囊霉(Glmous intraradices)和近明球囊霉(Glmous claroideum)接种到牧草上,成功地恢
复了矿渣地的植被,达到了修复和复垦的目的;张文敏等[25]在矿山复垦试验中发现,当大量丛枝菌根形成以
后,可以大幅度加速培肥土壤,有效改良复垦土壤基质;毕银丽等[5]在宁夏大武口煤矸石山的复垦中应用丛枝
菌根技术也取得了较好的生态效应。本试验中,选择明山煤矿先锋植物猪屎豆,结合黄土覆盖、菌根接种,模拟
自然生境的综合治理,由于接种菌根具有减少覆土厚度的潜力,经测算,每复垦1hm2 土地将节约25 000~
50 000元的搬运覆土费,且接种菌根的成本也很低,从而可以极大地节约复垦费用。
参考文献:
[1] Liu Y G,Zhang H Z,Zeng G M,et al.Heavy metal accumulation in plants on Mn mine tailings[J].Pedosphere,2006,16(1):
131-136.
[2] Rascio N,Navari-Izzo F.Heavy metal hyperaccumulating plants:How and why do they do it?And what makes them so
interesting?[J].Plant Science,2011,180(2):169-181.
[3] 胡振琪.中国土地复垦与生态重建20年:回顾与展望[J].科技导报,2009,27(17):25-29.
[4] 王海春.矿区土地复垦的理论及实践研究综述[J].经济论坛,2009(13):40-42.
[5] 毕银丽.丛枝菌根培养新技术及其对土地复垦生态效应[M].北京:地质出版社,2007.
[6] 刘德良,廖富林,黄思梅,等.菌根生物技术及其在矿区土地复垦与生态重建中的应用研究[J].嘉应学院学报,2011,29(2):
58-65.
[7] 周庆,欧晓昆,张志明.地下生态系统对生态恢复的影响[J].生态学杂志,2007,26(9):1445-1453.
[8] 沈洽金,刘德良,郭宇翔,等.煤矿废弃地重金属含量及3种土著先锋植物吸收特征[J].广东农业科学,2011,38(20):134-
138.
[9] 王喜全.原子吸收光谱法测定植物叶中微量重金属[J].理化检验(化学分册),2007,23(5):360-361.
[10] 隋方功,李俊良.土壤农化分析实验[M].青岛:莱阳农学院农学系,2004:37-43.
[11] Philips J M,Hayman D S.Improved procedures for clearing and staining parasitic and vesicular-arbuscular mycorrhizal
fungi for rapid assessment of infection[J].Transactions of the British Mycological Society,1970,55:158-161.
[12] Gerdemann J W,Nicolson T H.Spores of mycorrhizal endogone species extracted from soil by wet sieving and decanting
[J].Transactions of the British Mycological Society,1963,46:235-244.
[13] 弓明钦,陈应龙,仲崇禄.菌根研究及应用[M].北京:中国林业出版社,1997:34-42.
[14] 刘润进,李晓林.丛枝菌根及其应用[M].北京:科学出版社,2000.
[15] Bradley R,Burt A J,Read D J.The biology of mycorrhizal in the Ricacacea:Ⅷ.The role of mycorrhizal infection in heavy
metal resistance[J].New Phytologist,1982,91:197-209.
[16] Barea J M.Interactions between mycorrhizal fungi and rhizosphere micro-organisms within the context of sustainable soil-
plant systems[M]//Brown G.Multitrophic interactions in terrestrial systems.Oxford:Blackwel Science Ltd.,1997:196-
198.
[17] Abbott L K,Robson A D,Gazey C D.Seclection of inoculant vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi[J].Methods in the
Microbiology,1992,24:1-21.
[18] van der Heijden M G A,Klironomos J N,Ursic M,et al.Mycorrhizal fungal diversity determines plant biodiversity,
ecosystem variability and productivity[J].Nature,1998,396:69-72.
[19] 申鸿.丛枝菌根(AM)对重金属污染耐受性机理研究[D].重庆:西南农业大学,2004.
[20] Repetto O,Bestel-Corre G,Dumas-Gaudot E,et al.Targeted proteomics to identify cadmium-induced protein modifications
in Glomus mosseae-inoculated pea roots[J].New Phytologist,2003,157:555-567.
[21] Denny H J,Wilkins D A.Zinc tolerance in Betulaspp.[J].New Phytologist,1987,106:517-553.
[22] Colpaert J V,van Assche J A.Zinc toxicity in ectomycorrhizal Pinus sylvestris[J].Plant and Soil,1992,143(2):201-211.
[23] Janouskova M,Pavlíkova D,Macek T,et al.Arbuscular mycorrhiza decreases cadmium phytoextraction by transgenic
tobacco with inserted metalothionein[J].Plant and Soil,2005,272:29-40.
[24] Noyd R K,Pfleger F L,Norland M R.Field responses added organic matter,arbuscular mycorrhizal fungi,and fertilizer in
reclamation of taconite iron ore tailing[J].Plant and Soil,1996,179:89-97.
[25] 张文敏,张美庆,孟娜,等.VA菌根用于矿山复垦的基础研究[J].矿冶,1996,5(3):17-21.
782第2期 刘德良等:煤矿区先锋植物猪屎豆接种丛枝菌根的效应研究