全 文 ：收稿日期: 2004-11-23.
基金项目: 湖南省教育厅资助项目 .
作者简介: 付　明 ( 1966- ) ,女 ,湖北荆门人 ,高级讲师 ,主要从事药用植物的开发与利用研究 .
　文章编号: 1000-1190( 2005) 02-0245-04
灰白毛莓、苍耳的抑菌作用研究
付　明 , 刘胜贵 , 伍贤进
(怀化学院 生物工程系 , 湖南 怀化 418008)
摘　要: 采用二倍稀释法 ,以金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、普通变形杆菌、产气
肠杆菌、鸡沙门氏菌为供试菌种 ,对灰白毛莓、苍耳植株的不同器官和两者不同器官的配伍制剂的
抑菌作用进行了试验 .结果表明 ,灰白毛莓茎对 6种供试菌种均有抑制作用 ,抑菌范围最广 ;灰白
毛莓叶对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强 ;灰白毛莓根的抑菌范围最窄、抑菌作用最小 .苍耳茎叶
的抑菌范围最广 ,抑菌作用最强 ;苍耳子次之 ;苍耳根的抑菌范围最窄 ,抑菌作用最小 .苍耳根+ 灰
白毛莓茎叶、苍耳茎叶+ 灰白毛莓根提取液的配伍制剂对 6种供试菌种的 MBC≤ 0. 25 g /m L.
关键词: 灰白毛莓 ; 苍耳 ; 抑菌作用
中图分类号: Q946 文献标识码: A
　　灰白毛莓 ( Rubus tephrodes Hance) ,蔷薇科、
悬钩子属植物 ,俗称乌泡 .在我国的湖南、湖北、广
东、广西、安徽、福建、台湾、贵州等省均有分布 ,生
长在海拔 330～ 2 280 m的路旁、溪边、灌木丛中和
山间坡地等光线较强的地方 [1 ] .在湖南、湘西一带
的少数民族地区 ,常常取灰白毛莓的叶片捣碎后 ,
取汁服用治疗常见的痢疾 .
苍耳 (Xanthium sibiricum Patrin ) ,菊科苍耳
属 ,我国有 3种 1变种 ,广泛分布于东北、华北、华
东、华南、西北、西南各省区 ,生长于低山、路边、田
边、农舍附近 ,俗称常思菜、野棉花、野茄子等 .主要
化学成分是倍半萜内酯化合物 [ 2]、挥发油 [3 ]、水溶
性苷类 [4, 5 ]和其他成分 [6 ] .苍耳草 (茎叶 )苦、辛、微
寒 ,有毒 ,具有祛风湿、消肿痛、止痒解毒的作用 ,临
床上用来治疗慢性鼻炎、麻风病、伤寒、皮肤癌、功
能性子宫出血等 .苍耳子对金黄色葡萄球菌等多种
微生物有较强的抑制作用 ,具有消炎镇痛功效 ;提
高超氧化物歧化酶 ( SOD)的活性 ,增强机体对自由
基的清除能力 [7 ];能降低细胞内组胺的释放 ,从而
治疗过敏性疾病 [8 ] .苍耳根主要治疗疔疮、痈疽、痢
疾、丹毒等 [6 ] .在湖南、湖北一带 ,民间常常用苍耳
的根煎煮 ,取汁服用治疗常见的痢疾 .
灰白毛莓和苍耳是生命力较强的野生植物 ,对
苍耳的研究已经比较广泛和深入 [2～ 8 ] ,对灰白毛莓
的研究较少 .本文对这两种植株的抑菌作用进行试
验 ,比较它们的抑菌效果 ,为其开发利用提供实验
数据 .
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 实验仪器　立式压力蒸汽灭菌器 ( YXQ-
LS-50S1,上海博迅实业有限公司医疗设备厂 )、摇
床 ( ZHWY200B,上海智城分析仪器制造有限公
司 )、电热恒温培养箱 ( DHP-2000型 ,天津市华北
实验有限公司 )、水平层流净化工作台 (苏州洁净技
术研究所制造 )、电冰箱、培养皿、涂布棒等 .
1. 1. 2 生化试剂　蛋白胨 (生化试剂 ,上海东海制
药厂出品 )、酵母浸粉 (生化试剂 ,北京奥博星生物
技术责任有限公司 )、琼脂粉 (生化试剂 ,北京奥博
星生物技术责任有限公司 )、 NaCl(分析纯 ,成都市
金山化工试剂厂 )、 NaOH(分析纯 ,天津市化学试
剂批发部经销 ) .
1. 1. 3 供试菌种　大肠埃希氏菌 (Escherichia col i
CV CC249)、铜绿假单胞菌 ( Pseudomonas aerugi-
nosa )、普通变形杆菌 ( Proteus vulgaris CCTCC
AB91103)、金黄色葡萄球菌 ( Staphylococcus au-
reus CCTCC AB91053)、产气肠杆菌 ( Enterobacter
aerogenes )、鸡沙门氏菌 ( Salmonella gall inarum ) ,
均由怀化学院微生物学实验室提供 .
1. 1. 4 实验样品　实验所用植物样品于 2004年 6
第 39卷第 2期 华中师范大学学报 (自然科学版 ) Vol. 39 No. 2
2005年 6月 JOURNAL OF CEN TRAL CHIN A NO RM AL UN IV ERSITY ( Nat. Sci. ) Jun. 2005
月 (苍耳子于 10月份 )采自湖南省怀化市 .
1. 1. 5 培养基　 LB( Luria-Bertani )液体培养基:
蛋白胨 10 g, NaCl 5 g,酵母粉 5 g ,用 1 mo l /L
NaOH调 pH7. 0,重蒸馏水定容至 1 000 mL.
LB固体培养基: LB液体培养基中加 1. 6%的
琼脂粉 ,煮沸溶化后定容 .
1. 2 方法
1. 2. 1 中草药的煎制　将灰白毛莓的根、茎、叶和
苍耳的根、茎叶、苍耳子分别洗净切碎 ,于 60℃干
燥 16～ 18 h后 ,用蒸馏水煎煮 2次 ,每次 30 min.
合并滤液 ,于 8 000 r /min离心 15 min,取滤液浓
缩至含生药 1 g /mL.灭菌后放入冰箱中保存备用 .
1. 2. 2 菌液的制备　分别刮取 6种供试菌种的新
鲜营养琼脂斜面培养物适量 ,接种于 LB液体培养
基内于 37℃、 160 r /min下培养 16～ 18 h.然后用
生理盐水稀释至 1× 10- 4备用 .
1. 2. 3 抑菌实验　 在无菌条件下 ,将灭菌试管分
成 3大组 ,每组 36支 . 36支试管再分成 6小组 ,每
组 6支 .第 1支试管中加入 1 mL 2倍浓度的 LB
液体培养基 ,第 2～ 5支试管中各加入 1 mL LB液
体培养基 ,向第一支试管中加入 1 mL药液后按 2
倍稀释法 ,使各管药液浓度分别为 0. 5、 0. 25、
0. 125、 0. 062 5、 0. 031 25 g /mL,然后向各管中加
入 0. 1 m L的 10- 4菌液 ,第 6支试管中加 2 m L LB
液体培养基 ,不加药液作为对照 .将培养物置于
37℃培养 16～ 18 h.
从以上培养物中分别取 0. 1 mL涂布于固体
LB培养基平板上 ,于 37℃培养 16～ 18 h后观察 .
以上试验重复 3次 .
2 结果
2. 1 灰白毛莓各器官的抑菌作用
灰白毛莓茎对 6种供试菌种均有抑制作用 ,抑
菌范围最广 ;灰白毛莓根只对 4种供试菌种有抑制
作用 ,抑菌范围最窄 ;灰白毛莓叶对 5种菌种有抑
制作用 .灰白毛莓各器官对金黄色葡萄球菌的抑制
作用最强 .另外 , 灰白毛莓根对鸡沙门氏菌的抑制
作用是最强的 .
灰白毛莓叶对供试菌种的抑制作用见表 1.灰
白毛莓茎抑菌作用见表 2.灰白毛莓根抑菌作用见
表 3.
2. 2 苍耳各器官的抑菌作用
苍耳茎叶对除普通变形杆菌以外的 5种供试
菌种均有抑制作用 ,抑菌范围最广 ;苍耳子对金黄
色葡萄球菌和鸡沙门氏菌有抑制作用 ;苍耳根只对
铜绿假单胞菌有抑制作用 ,抑菌范围最窄 .苍耳茎
叶对铜绿假单胞菌的抑制作用最强 .
苍耳茎叶抑菌作用见表 4.苍耳根抑菌作用见
表 5.苍耳子抑菌作用见表 6.
表 1　灰白毛莓叶对供试菌种的抑制作用
菌　种 灰白毛莓叶的浓度 / ( g· mL
- 1)
0. 5 0. 25 0. 125 0. 062 5 0. 031 25
大肠埃希氏菌 —
铜绿假单胞菌 — —
普通变形杆菌 +
金黄色葡萄球菌 — — — — —
产气肠杆菌 — —
鸡沙门氏菌 — — + + +
　　注: “ - ”:无菌生长 ,“+ ”:少数几个菌落生长 ,“ ”:有一些菌
落生长 ,“ ”:菌落生长良好 .以下同 .
表 2　灰白毛莓茎对供试菌种的抑制作用
菌　 种 灰白毛莓茎的浓度 / ( g· mL
- 1)
0. 5 0. 25 0. 125 0. 062 5 0. 031 25
大肠埃希氏菌 —
铜绿假单胞菌 —
普通变形杆菌 —
金黄色葡萄球菌 — — —
产气肠杆菌 —
鸡沙门氏菌 —
表 3　灰白毛莓根对供试菌种的抑制作用
菌　 种 灰白毛莓根的浓度 / ( g· mL
- 1)
0. 5 0. 25 0. 125 0. 062 5 0. 031 25
大肠埃希氏菌
铜绿假单胞菌 — —
普通变形杆菌 —
金黄色葡萄球菌 — — — +
产气肠杆菌 +
鸡沙门氏菌 — — —
表 4　苍耳茎叶对供试菌种的抑制作用
菌　 种 苍耳茎叶的浓度 / ( g· mL
- 1)
0. 5 0. 25 0. 125 0. 062 5 0. 031 25
大肠埃希氏菌 — + +
铜绿假单胞菌 — — — — +
普通变形杆菌 +
金黄色葡萄球菌 — +
产气肠杆菌 — +
鸡沙门氏菌 — +
246
　
华中师范大学学报 (自然科学版 ) 第 39卷
表 5　苍耳根对供试菌种的抑制作用
菌　种 苍耳根的浓度 / ( g· mL
- 1 )
0. 5 0. 25 0. 125 0. 062 5 0. 031 25
大肠埃希氏菌 +
铜绿假单胞菌 — +
普通变形杆菌 + +
金黄色葡萄球菌 +
产气肠杆菌 + +
鸡沙门氏菌 +
表 6　苍耳子对供试菌种的抑制作用
菌　种 苍耳子的浓度 / ( g· mL
- 1 )
0. 5 0. 25 0. 125 0. 062 5 0. 031 25
大肠埃希氏菌
铜绿假单胞菌
普通变形杆菌
金黄色葡萄球菌 —
产气肠杆菌
鸡沙门氏菌 —
2. 3 灰白毛莓和苍耳的配伍制剂的抑菌作用
从总体上看 ,灰白毛莓和苍耳联合使用对 6种
供试菌种均有抑制作用 .而且对大肠埃希氏菌、普
通变形杆菌和产气肠杆菌的抑菌作用增强 ,比单独
使用灰白毛莓和苍耳的任何一种器官的最低杀菌
浓度 ( M BC)都要小 .
灰白毛莓茎叶+ 苍耳根的配伍制剂对 6种供
试菌种的 MBC均为 0. 25 g /mL(见表 7) .
灰白毛莓根+ 苍耳茎叶的配伍制剂对铜绿假
单胞菌的 MBC为 0. 125 g /mL,对其余 5种供试
菌种的 MBC均为 0. 25 g /mL(见表 8) .
表 7　灰白毛莓茎叶+ 苍耳根对供试菌种的抑制作用
菌　种 灰白毛莓茎叶+ 苍耳根的浓度 /( g· mL
- 1 )
0. 5 0. 25 0. 125 0. 062 5 0. 031 25
大肠埃希氏菌 — —
铜绿假单胞菌 — — +
普通变形杆菌 — —
金黄色葡萄球菌 — — +
产气肠杆菌 — —
鸡沙门氏菌 — —
3 小结与讨论
( 1)本次试验所用的抑菌物质是煎煮的中草
药制剂 ,颜色较深 ,若采用试管法会因为它的颜色
深而导致观察不准确 ; 若采用纸片法、打洞法等则
会因为中草药扩散慢、抑菌弱 , 也无法得到准确的
抑菌浓度 ; 本试验采用涂平板的方法 ,它具有显示
稳定的优点 , 比较适合测定中草药的抑菌浓度 ,
并且测得的结果为 MBC而非最低抑菌浓度
( M IC) .
表 8　灰白毛莓根+ 苍耳茎叶对供试菌种的抑制作用
菌　 种 灰白毛莓根+ 苍耳茎叶的浓度 / ( g· mL
- 1)
0. 5 0. 25 0. 125 0. 062 5 0. 031 25
大肠埃希氏菌 — —
铜绿假单胞菌 — — —
普通变形杆菌 — —
金黄色葡萄球菌 — — + + +
产气肠杆菌 — —
鸡沙门氏菌 — — +
( 2) 总体上来看 ,灰白毛莓的抑菌范围比苍耳
的抑菌范围广 .灰白毛莓全株对金黄色葡萄球菌、
鸡沙门氏菌的抑制作用较苍耳强 ,苍耳的茎叶对铜
绿假单胞菌的抑制作用较灰白毛莓强 ,灰白毛莓的
根和苍耳的根对大肠埃希氏菌、产气肠杆菌均无抑
制作用 .
( 3) 灰白毛莓茎、叶对金黄色葡萄球菌的抑制
作 用 最 强 , M BC 分 别 为 0. 125 g /mL、
0. 03 125 g /mL;灰白毛莓根对金黄色葡萄球菌、
鸡 沙 门 氏 菌 的 抑 制作 用 最 强 , M BC 均 为
0. 125 g /mL.
( 4)苍耳茎叶对铜绿假单胞菌的抑制作用最
强 ,其 MBC为 0. 062 5 g /mL;苍耳根只对铜绿假
单胞菌有抑制作用 ,其 MBC为 0. 5 g /mL;苍耳子
对金黄色葡萄球菌、鸡沙门氏菌的 MBC为
0. 5 g /mL.
( 5) 灰白毛莓和苍耳的配伍制剂有协同作用 .
对大肠埃希氏菌、普通变形杆菌和产气肠杆菌 ,二
者的不同器官交叉联合用药抑菌效果较好 .但对铜
绿假单胞菌 ,单独使用苍耳的茎叶抑菌效果好 ;对
金黄色葡萄球菌 ,单独使用灰白毛莓的根、茎、叶抑
菌效果均好 ;对鸡沙门氏菌 ,单独使用灰白毛莓的
根抑菌效果较好 .
( 6) 由于动物体内的免疫系统非常复杂 ,因此
一种药物在机体内的杀菌效果与体外试验有差异 ,
灰白毛莓在机体内的杀菌效果还有待进一步试验 .
( 7) 本次试验结果表明 ,灰白毛莓的抑菌范围
比苍耳的抑菌范围更广 ,灰白毛莓全株对金黄色葡
萄球菌、鸡沙门氏菌的抑制作用比苍耳更强 .另据
报道 ,蔷薇科悬钩子属是一类重要的小浆果果树资
247
　
第 2期 付　明等:灰白毛莓、苍耳的抑菌作用比较
源 ,国外早就培育出许多栽培品种 ,并已开始大面
积栽培 [9 ] .悬钩子具有药用功能 ,可治疗阳萎早泄、
遗精、肾虚尿频 ,有活血散瘀、止血、清热解毒、祛风
活血等功效 [10 ] .而灰白毛莓叶止血解毒 ,主治外伤
出血、痈疖疮疡 ;灰白毛莓根祛风除湿 ,活血调经 ,
主治风湿疼痛、慢性肝炎、月经不调、痢疾、跌打损
伤 ;灰白毛莓种子入药为强壮剂 [11 ] .灰白毛莓鲜果
中色素 (总花色苷 )含量在同属植物中最高 ,而且该
色素耐热性强 ,具有很好的开发应用前景 [12 ] .
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生植物资源 , 1997, 16( 4): 1～ 5.
Stuies on bacteriostastic comparison of Rubus tephrodes Hance
and Xanthium sibiricum Patrin
FU Ming , LIU Sheng-gui, WU Xian-jin
( Depar tment of Bioengineering , Huaihua Colleg e, Huaihua, Hunan 418008)
Abstract: The experiment makes Staphylococcus aureus , Escherichia col i , Pseudomonas
aeruginosa , Proteus vulgaris , Enterobacter aerogenes , Salmonella gall inarum as samples
and tests the bacteriostastic activ ity o f di fferent organs of Rubus tephrodes Hance、 Xan-
thium sibiricum Patrin and their org ans dif ferent compatibility of medicines by dilution
method. It testifies tha t R. tephrodes Hance stem could produce bacteriostasis all a-
gainst six samples, R. tephrodes Hance leaf could have a st rong ef fect on Staphylococ-
cus aureus. R. tephrodes Hance ro ot s antimicrobial spect rum and bacteriostasis is the
w eakest. X . sibiricum Patrin s stem and leaf could produce bacteriostasis widely and
st rong ly, i t s f rui t is the w eaker, but X . sibiricum Patrin s roo t i s weakest both in the
scope and effect. The compatibi li ty of both medicine s M BC is less than or equal to
0. 25 g /mL, w hich is picked up from X . sibiricum Patrin roo t , R. tephrodes Hance
stem and leaf and X . sibiricum Patrin stem and leaf, R. tephrodes Hance roo t.
Key words: Rubus tephrodes Hance; Xanthium sibiricum Patrin; bacteriostasis
248
　
华中师范大学学报 (自然科学版 ) 第 39卷