全 文 ：第22卷　第 5期 江 西 科 学 Vol.22　No.5
2004年 12月 JIANGXI　SCIENCE Dec ,2004
文章编号:1001_3679(2004)05_0379_03
收稿日期:2004-04-05;修订日期:2004-05-19
作者简介:应华忠(1968-),男 , 硕士 , 浙江中医学院实验动物中心助理研究员 , 1992 年毕业于浙江农业大学 ,
2002年毕业于浙江中医学院获硕士学位。
翠云草平喘作用的实验研究
应华忠 ,王德军 ,徐孝平 ,姚振生
(浙江中医学院 ,浙江 杭州　310053)
摘要:目的:观察翠云草水提物和醇提物的平喘作用。方法:以组胺和乙酰胆碱引起正常豚鼠支气管收缩和
以卵白蛋白诱发的致敏豚鼠支气管收缩。结果:翠云草水提物可显著延长药物引喘和卵白蛋白气雾吸入引喘
所致豚鼠抽搐的潜伏期(P<0.01)。结论:翠云草水提物具有平喘作用。
关键词:翠云草;哮喘;组胺;乙酰胆碱;卵白蛋白
中图分类号:R974+.2　　　　　文献标识码:A
Experimental Study on the Antiasthmatic Effects of Selaginella Uncinata
YING Hua_zhong ,WANG De_jun ,XU Xiao_ping ,YAO Zhen_sheng
(Zhejiang College of Traditional Chinese Medicine , Hangzhou Zhejiang 310053 PRC)
Abstract:Objective:To observe antiasthmatic effects of the alcoholic extract and the aqueous extract of
Selaginella uncinata.Methods:cousing the contraction of bronchial smooth muscles by histamine and
acetylcholme in the normal guinea pigs and the contraction of bronchial smooth muscles after inlalatioin of
ovalbumin in the sensitized guinea pigs , the treated by Selaginalla uncinat extracts.Results:the alco-
holic extract of Selaginella uncinata can obviously prolong the galvanic incubation period caused by drugs
and ovalbumin.Conclution:the alcoholic extract of Selaginella uncinata has antiasthmatic activity .
Key words:Selaginella uncinata , Asthma , Histamine , Acetylcholine , Ovalbumin
　　翠云草 Selaginella uncinata(Desv.)spring 又名
蓝地柏 、绿绒草 ,原产我国中部 、南部及西南部各
省区 。喜湿润和半阴环境 ,常生长在林下阴湿岩
石上 ,山坡或溪谷丛林中 ,怕强烈日光直射。为伏
地蔓生草本 ,叶密生 ,有蓝绿色荧光 ,十分秀丽。
翠云草为卷柏科的植物 ,性味微苦 、寒 ,功能清热
利湿 ,解毒 ,消瘀 ,止血[ 1] 。《湖南药物志》记载其
有“化痰止咳”的功效。本实验所用原植物于 2001
年采自浙江西天目山 ,并经浙江中医学院熊耀康
教授鉴定。通过平喘实验 ,初步探讨翠云草不同
提取物在哮喘治疗中的作用及开发应用前景。
1　实验材料
1.1　药品及试剂
翠云草用 100 ℃水提取 2次 ,每次 1 h ,合
并 ,浓缩得水提物 ,实验时分别配成含生药浓度
为0.75 、1.5 、3.0 g/ml;翠云草用体积分数 φ=
95%的乙醇于 60 ℃回流提取 3 次 ,每次 1 h ,合
并 ,回收乙醇得醇提物 ,实验时分别配成含生药
浓度为 0.75 、1.5 、3.0 g/ml;卵白蛋白为 Sigma公
DOI :10.13990/j.issn1001-3679.2004.05.017
司产品;地塞米松;磷酸组氨为上海丽珠东风生
物技术有限公司出品 ,批号 9904060;乙酰胆碱为
上海试剂三厂产品 ,批号 991223;氨茶碱由浙江
省中医院提供 ,临用之前用生理盐水配成所需要
的浓度。
1.2　实验仪器
电子天平 ,超声雾化器 ,秒表 ,手术器械等 。
1.3　实验动物
豚鼠 180±20 g左右 ,雌雄各半 ,由浙江中医
学院实验动物中心提供 ,动物质量合格证:医动
字第 220010004号 。
2　实验方法及结果
2.1　对组胺 、乙酰胆碱致正常豚鼠的影响
取豚鼠 ,依次放在密闭的 4 L 钟罩内 ,待安
静后 ,启动超声雾化器 ,喷入φ=2%氯化乙酰胆
碱和φ=0.1%磷酸组胺等容积混合液的雾气 ,15
s后停止喷雾 ,观察 6 min 内豚鼠出现喘息性呼
吸困难和抽搐跌倒的潜伏时间 ,潜伏时间大于
150 s者落选 ,挑选合格的豚鼠 50只 ,雌雄各半 ,
随机分组 ,每组 10只 ,分别为空白对照组 、翠云
草低 、中 、高剂量组 、阳性对照组[ 2] 。各组同体积
给翠云草水提物(0.2 mL/10 g 体重),灌胃给药 ,
连续 7 d。末次给药 45 min后 ,按预选时的同样
条件分别测定动物的潜伏期 ,观察翠云草水提物
不同剂量的平喘作用 。数据采用 SPSS10.0统计
学处理软件处理 ,其结果分别见表 1和表 2。
表 1　翠云草水提物对豚鼠引喘潜伏期的影响( x ±SD)
组　别 动物数/只
剂量
/ g.kg-1
潜伏期
给药前/ s 给药后/ s
空白组 10 — 44.9±8.8 44.1± 9.6
翠云草低剂量 10 15 45.1±7.9 46.2± 8.7
翠云草中剂量 10 30 46.5±7.3 57.0±14.3＊
翠云草高剂量 10 60 44.6±8.7 72.8±15.1＊＊
氨茶碱 10 3×10-2 44.9±9.2 86.6±17.7＊＊
注:与空白组比较＊P<0.05　　＊＊P <0.01
表 2　翠云草醇提物对豚鼠引喘潜伏期的影响( x ±SD)
组　别 动物数/只
剂量
/ g.kg-1
潜伏期
给药前/ s 给药后/ s
空白组 10 — 39.4± 8.9 39.8±10.1
翠云草低剂量 10 15 39.5± 9.3 41.2± 9.8
翠云草中剂量 10 30 41.5±10.4 44.4±10.7
翠云草高剂量 10 60 39.3±11.4 45.9± 8.4
氨茶碱 10 3×10-2 39.4±9.4 86.0±15.0＊＊
注:与空白组比较＊P<0.05　　＊＊P<0.01
　　从表 1和表 2可知:给药前 ,各组豚鼠的引
喘潜伏期无显著性差异 。给药后 ,翠云草95%的
醇提物对氯化乙酰胆碱和磷酸组胺混合液诱发
的豚鼠哮喘未发现有明显的预防作用;而水提物
3个剂量均显示了明显的平喘作用 ,能缓解组胺与
乙酰胆碱所引起的喘息反应 ,延长引喘潜伏期。
2.2　对致敏豚鼠哮喘的影响[ 3]
2.2.1　分组　取豚鼠 60只 ,随机分为 6组 ,分
别为模型组 ,正常组 ,翠云草低 、中 、高剂量组 ,阳
性对照组 ,每组 10只。
2.2.2　致敏豚鼠　卵白蛋白溶于 φ=10%氢氧
化铝凝胶中 ,配成φ=0.2%卵白蛋白凝胶溶液 。
每只豚鼠两后足掌 、腹股沟 、腰 、背 、颈 、腋窝共10
点 ,每点 0.05 mL ,皮下注射 ,同时腹腔注射 0.5
mL ,共 1.0 mL;正常组仅用φ=10%氢氧化铝凝
胶 1.0 mL ,注射容积和方法同上。
2.2.3　给药剂量及方式　于致敏第 9 d 起开始
灌胃给药 ,各组同体积给翠云草水提物(0.2 mL/
10 g体重),灌胃给药 , 1/d ,连续 10 d。
2.2.4　抗原攻击　致敏第 18 d ,给药后 l h将致
敏豚鼠置于 4 L玻璃钟罩内 ,用超声雾化器气雾
吸入φ=1.5%卵白蛋白 ,30 min观察各组豚鼠的
引喘潜伏期。数据采用 SPSS10.0统计学处理软
件处理 ,结果见表 3。翠云草醇提物的平喘实验
方法同水提物 ,结果见表 4。
表 3　翠云草水提物对致敏豚鼠引喘
潜伏期的影响( x ±SD)
组　别 动物数/只
剂量
/g.kg -1 潜伏期/ s
正常组 10 — 270.0±6.7
翠云草低剂量 10 15 40.4±11.1
翠云草中剂量 10 30 56.0±14.1＊＊
翠云草高剂量 10 60 79.9±14.4＊＊
模型组 10 — 38.0±8.2
地塞米松 10 5×10-3 89.5±11.2＊＊
注:与模型组比较＊P<0.05　　＊＊P<0.01
表 4　翠云草醇提物对致敏豚鼠
引喘潜伏期的影响( x ±SD)
组　别 动物数/只
剂量
/g.kg -1 潜伏期/ s
正常组 10 — 297.0±9.5
翠云草低剂量 10 15 38.84±6.8
翠云草中剂量 10 30 41.5±7.9
翠云草高剂量 10 60 44.6±8.9
模型组 10 — 33.8±6.8
地塞米松 10 5×10-3 87.9±14.6＊
注:与模型组比较＊P<0.05　　＊＊P<0.01
·380· 江 西 科 学　　　　　　　　　　　　2004年第 22卷
　　从表 3和表 4可知 ,翠云草水提物高剂量和
翠云草醇提物高剂量均能使抗原攻击后引起的
哮喘豚鼠症状好转 ,延缓哮喘发作时间和减轻发
作程度 ,发挥预防和治疗哮喘病的功效。但醇提
物的作用不及水提物 。
3　讨论
本实验分别对翠云草的水提物 、醇提物进行
了平喘实验。结果显示 ,翠云草的水提物具有一
定的平喘效果 ,可延长引喘潜伏期 ,表明有预防
组胺 、乙酰胆碱引起的豚鼠药物性哮喘作用 。还
能使抗原攻击后引起的哮喘豚鼠症状好转 ,延缓
哮喘发作时间和减轻发作程度 ,发挥预防和治疗
哮喘病的功效 。而醇提物的预防作用不及水提
物。
近几年的研究认为 ,哮喘是一种由嗜酸性粒
细胞 、肥大细胞及T 淋巴细胞等多种炎性细胞参
与的气道慢性炎症 ,它导致气道上皮损伤 ,微血
管渗透及气道神经功能紊乱 ,诱发和加重气道高
反应性[ 4] ,组胺是参与气道变应性炎症的重要炎
性介质。由此说明 ,翠云草的平喘作用可能是通
过抑制过敏介质的释放来发挥其平喘作用的 。
翠云草的水提物具平喘作用 ,这说明其有效成分
主要集中在极性大的部分 。至于有效成分究竟
是哪些物质 ,有待今后进一步研究 。
参考文献:
[ 1] 　江苏新医学院.中药大辞典[ M] .上海:上海科学技
术出版社 , 1985.2583.
[ 2] 　徐叔云 ,卞如濂 , 陈　修 ,等.药理实验方法学(第二
版)[ M] .北京:人民卫生出版社 , 1990.713-726.
[ 3] 　林晓霞 ,谢强敏 , 沈文会 , 等.虫草菌粉对致敏豚鼠
肺功能和大鼠气道炎症反应的影响[ J] .中国中药
杂志 , 2001 , 26(9):622-625.
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lergy Clin Immunol , 2000 , 105(2 Pt 2):514-517.
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·381·第 5期　　　 　　　　　　应华忠等:翠云草平喘作用的实验研究