全 文 ：第 27卷　第 2期 　　　　　　　　　　　　　　西　南　林　学　院　学　报　　　　　　　 Vo.l 27　No. 2
　 2007年 4月 　　　　　　　　　　 JOURNAL OF SOUTHWEST FORESTRY COLLEGE　　　　　 Apr. 2007　
*　收稿日期:2006 - 10 - 16　　**为通讯作者
基金项目:福建省林业厅科技推广项目 [ 1998 ～ 2002年第一期林木种苗工程重点项目 3(4)]资助.
作者简介:宋建英(1954 -)女 ,福建莆田人 ,副教授 ,博士生 ,主要从事植物生物技术研究.
鄂报春的组培技术研究*
宋建英1, 2 ,叶建仁 1** ,陈剑勇 2
(1.南京林业大学 森林资源与环境学院 ,江苏 南京 210037;2.福建林业职业技术学院 资源环境系 ,福建 南平 353000)
摘要:采用鄂报春的嫩叶片进行诱导试验 ,结果表明:被诱导的鄂报春叶片先形成愈伤组织再
形成芽;诱导叶片分化的较理想培养基是:MS+6 -BA 2. 0mg /L +NAA 1. 0mg /L,其诱导分化
率可达 42. 11%;较理想的继代增殖培养基是:MS+6 -BA 1. 0mg /L+NAA0. 05mg /L,其有效
芽分化系数为 4. 27,平均苗高为 1. 5 cm;较理想的生根培养基为 MS基本培养基 ,平均根条数
为 8. 6条 ,平均根长为 3. 5 cm ,平均苗高为 5. 0 cm ,根粗壮 ,有利于移栽;采用培养料体积比为
7∶3混合的新鲜河泥和珍珠岩移栽鄂报春 ,成活率可达 98. 1%.
关键词:鄂报春;培养基;继代繁殖;生根
中图分类号:S723. 132　 　文献标识码:A　　　文章编号:1003 -7179(2007)02 - 0053 - 04
　　鄂报春 (P rimu la obconica Hance)为报春花科
报春花属植物 ,原产湖北宜昌 、湖南 、江西 、广西 、
广东 、贵州 、云南及西藏山南等地. 叶椭圆至长圆
形 ,叶缘有浅波状裂或缺刻 ,叶面光滑 ,叶背密生
白色柔腺毛. 伞形花序常着花 1轮 ,具花 10 ～ 15
朵 ,花葶高达 30 cm ;原种花小 ,淡紫至玫瑰紫色 ,
喉部黄色;花径约 2. 5 cm ,花冠漏斗型 ,于 1880年
在宜昌发现引入西欧 ,现代品种花型变大 [ 1 -3] . 本
试验所用品种为紫色花 ,花径约 5 cm ,为冷室冬季
早春盆花 ,在福建花期为 1 ～ 6月. 由于该品种花
期长 ,叶型美丽 ,深受人们喜爱 ,但由于自然界中 ,
该花所结种子粒小而瘪 ,无法进行正常的播种育
苗.目前 ,各地均采用分株方法进行报春花的栽
培.这种方法限制了该花的大面积种植. 而采用组
培的方法是使其快速繁殖 、实现工厂化生产的最
佳路线.
1　材料与方法
1. 1　材料来源
试验所用鄂报春种源来自厦门万石植物园.
先把引种的鄂报春小苗种在花盆中 ,让其生长 90
天左右 ,再取其嫩心叶作为外植体材料.
1. 2　材料处理与培养基准备
1. 2. 1　外植体的处理　取报春花的嫩心叶作以
下处理:(1)将嫩叶的叶柄去除;(2)将叶片放入
洗衣粉溶液中浸泡 3 m in,再用流水冲洗 6 m in;
(3)在超净工作台上将叶片用 70%酒精浸泡 30 s,
捞出用无菌水冲洗 1遍 ,再放入 0. 1%升汞水中浸
泡 15m in,捞出用无菌水冲洗 5遍;(4)将嫩叶用
无菌滤纸吸干 ,切成 0. 5 cm ×0. 5 cm的小片备用.
1. 2. 2　培养基的准备　根据不同要求制备下列
不同培养基:(1)诱导培养基:以 MS为基本培养
基[ 4 -8] , 6 - BA取 0. 5, 1. 0, 2. 0, 4. 0mg /L 4种浓
度水平 , NAA取 0. 01, 0. 10, 0. 50 , 1. 00等 4种浓
度水平 ,以正交试验法组成 16种配方. 以不添加
任何激素的 MS培养基为对照;(2)继代培养基:
以 MS为基本培养基 , 外加 6 - BA浓度为 0.1,
0.5, 1. 0mg /L及 NAA浓度为 0, 0. 01, 0. 05mg /L,
以正交试验组成 9种培养基配方.以不加任何激素
的 MS培养基作为对照;(3)生根培养基:以 1 /2M S
和 MS作为基本培养基 ,外加浓度为 0. 01, 0. 05,
0.10mg /L的 NAA溶液 ,组成 6种培养基配方 ,并以
不加任何激素的 1 /2M S和 MS基本培养基作为对
照.以上 8种培养基中均加入 0. 5%的活性炭.
上述各配方的培养基中 , 卡拉胶含量为
7 g /L,蔗糖为 30 g /L.
1. 3　培养方法
将处理好的外植体接种在上述不同培养基
上 ,置于 25℃恒温 、光照 2 000 lx、12 h /d条件下进
行培养.
2　结果分析
2. 1　不同激素浓度对鄂报春叶片诱导分化的影响
鄂报春的叶片接种到以正交试验法组成的 16
种配方的诱导培养基上培养.接种 6天后 ,在部分
不同配方的培养基上 ,鄂报春的嫩叶切片边缘产
生膨大 、卷曲状的愈伤组织 ,叶色转浓绿色. 接种
15天后 ,在愈伤组织上出现颗粒状的突起 ,即鄂报
春的芽点. 接种 45天后 ,这些芽点分化成芽. 鄂报
春嫩叶切片在不同培养基上诱导分化的情况 (见
表 1).
表 1　在不同培养基上鄂报春叶片诱导情况
序号 6 -BA
/(mg L - 1)
NAA
/(mg L -1)
接种数量
/瓶
无污染 、无
干枯数量 /瓶
诱导分化
数量 /瓶
诱导分
化率 /%
1 0. 50 0. 01 50 20 0 0. 00
2 0. 50 0. 10 50 16 0 0. 00
3 0. 50 0. 50 50 14 1 7. 14
4 0. 50 1. 00 50 25 1 4. 00
5 1. 00 0. 01 50 22 3 13. 63
6 1. 00 0. 10 50 12 1 8. 33
7 1. 00 0. 50 50 28 3 10. 71
8 1. 00 1. 00 50 21 5 23. 81
9 2. 00 0. 01 50 16 4 25. 00
10 2. 00 0. 10 50 23 6 26. 09
11 2. 00 0. 50 50 26 8 30. 77
12 2. 00 1. 00 50 19 8 42. 11
13 4. 00 0. 01 50 15 4 26. 67
14 4. 00 0. 10 50 24 6 25. 00
15 4. 00 0. 50 50 18 3 16. 67
16 4. 00 1. 00 50 11 2 18. 18
从表 1可见:随 6 -BA浓度的增高 ,鄂报春叶
片诱导率有明显增加的趋势 ,当 6 - BA浓度达到
2. 00mg /L时 , NAA浓度为 1. 00mg /L时 ,诱导率
达到最高 ,为 42. 11%. 因此 ,从选用的 16种鄂报
春叶片诱导培养基配方诱导结果来分析 ,鄂报春
叶片的最佳诱导培养基配方为 MS +6 - BA 2. 0
mg /L+NAA 1. 0mg /L.
2. 2　不同浓度激素对鄂报春继代增殖培养的影响
将诱导 45天的外植体在超净工作台上取出 ,
切下诱导出的芽 ,接种到以正交试验组成的 9种
配方继代培养基上 ,原嫩叶切片如无诱导出芽的
部分即切除弃去. 每种配方的培养基接种 50瓶 ,
每瓶接 5小丛芽. 培养 20天后观察统计其继代生
长情况 ,结果见表 2.
从表 2可见:在作为对照的 MS基本培养基
上 ,鄂报春不但可以继代增殖 ,而且芽可以形成大
量的根 ,平均苗高达到 3. 5 cm.如果组织培养的目
的只是进行试验或只要提供少量的苗 ,采用 MS基
本培养基 ,即可一次性培养出根芽齐全的鄂报春
苗.但如果是要实现工厂化生产 ,则应在快速繁殖
基础上 ,使鄂报春增殖到一定的数量 ,再让其生
根.从表 2还可看出:在 6 - BA浓度为 0. 1mg /L、
添加或不添加 NAA的 MS培养基上 ,部分鄂报春
的芽均能形成根芽齐全的苗. 而随 6 - BA浓度增
高到 0. 5mg /L及以上时 ,鄂报春的平均有效芽分
化系数逐渐增高 ,但限制了根的生长.在 6 -BA浓
度达到 1. 0mg /L的 MS培养基上 ,平均有效芽分
化系数达到 5. 45,为最高 , 但平均苗高仅为 1. 0
cm ,这种高度的苗用来生根 ,不利于移栽. 而在 MS
+6 -BA 1. 0mg /L +NAA 0. 05mg /L上诱导 ,在细
胞分裂素和生长素的共同作用下 ,虽然鄂报春的
平均有效芽分化系数为 4. 27,比 MS +6 - BA 1. 0
mg /L培养基上培养的鄂报春平均有效芽分化系
数(5. 45)低了 1. 18,但苗却长高了 0. 5 cm ,为 1. 5
cm ,且芽的长势正常 ,有利于生根和移栽. 因此 ,本
实验室采用 MS + 6 - BA 1. 0 mg /L +NAA 0. 05
mg /L来继代增殖鄂报春 ,效果良好.
表 2　不同浓度激素对鄂报春继代增殖的影响
序号 6 -BA
/(mg L - 1)
NAA
/(mg L - 1)
平均有效芽
分化系数
平均苗高
/cm
生长状况
0 0. 0 0. 00 1. 65 3. 5 形成大量根 , 叶
墨绿 ,大 ,苗健壮
1 0. 1 0. 00 3. 13 2. 5 部分芽形成根 ,
叶墨绿 ,苗健壮
2 0. 1 0. 01 3. 13 2. 0 部分芽形成根 ,
苗健壮 ,叶绿色
3 0. 1 0. 05 2. 71 2. 5 部分芽形成根 ,
苗健壮 ,叶绿色
4 0. 5 0. 00 3. 26 1. 5 无根的形成 , 叶
绿色
5 0. 5 0. 01 2. 82 1. 5 无根的形成 , 叶
绿色
6 0. 5 0. 05 4. 09 1. 5 无根的形成 , 叶
绿色 ,长势一般
7 1. 0 0. 00 5. 45 1. 0 无根的形成 , 叶
绿色 ,长势正常
8 1. 0 0. 01 3. 45 1. 5 无根的形成 , 叶
绿色 ,长势正常
9 1. 0 0. 05 4. 27 1. 5 无根的形成 , 叶
绿色 ,长势正常
2. 3　鄂报春生根试验
将继代增殖 20天 、苗高为 1. 5 cm的鄂报春小
芽接种在 1. 2. 2所述的 (3)各种培养基中 , 20天
后统计鄂报春小苗生根情况 ,见表 3.
从表 3可见:无论在上述的何种培养基上 ,鄂
报春的芽都可生根. 在 MS基本培养基上 ,鄂报春
长出的根条数比在添加不同浓度 NAA的培养基
54 西　南　林　学　院　学　报　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　第 27卷
上长出的根条数量相对较少 ,但根相对较粗 ,有利
于移栽. 在 1 /2M S和 MS基本培养基上培养的结
果显示:(1)在 MS基本培养基上 , 鄂报春的平均
根条数为 8. 6条 ,比在 1 /2M S基本培养基上的 6. 5
条多了 2. 1条;(2)在 MS基本培养基上 ,鄂报春
的平均根长为 3. 5 cm ,比在 1 /2MS基本培养基上
的 2. 5 cm长了 1. 0 cm;(3)在 MS基本培养基上 ,
鄂报春的苗高为 5. 0 cm ,比在 1 /2M S基本培养基
上的 3. 2 cm高了 1. 8 cm;(4)在 MS和 1 /2M S两
种基本培养基上 ,鄂报春所长的根均较粗壮 ,叶色
浓绿 ,有利于移栽. 而在添加了 NAA的培养基上 ,
随其浓度增高 ,平均根条数增加显著 ,且其根系明
显增长 ,但苗高不如在 MS基本培养基上生长的.
这种根细长且多 、叶色淡绿的小苗不利于下地种
植 ,如在下地前将其根系剪短后再种植 ,不仅增加
用工量 ,还会影响移栽成活率. 因此 ,从节约成本 ,
提高经济效益的角度出发 ,选择在 MS基本培养基
上培养的鄂报春生根苗 (见图 1 A)进行移栽是较
为理想的.
表 3　鄂报春在不同培养基上生根情况
序号 基本培养基
NAA
/(mg L -1)
平均根
条数 /条
平均
根长 /cm
苗高
/cm
生长情况
1 1 /2M S 0. 00 6. 5 2. 5 3. 2 根粗壮 ,叶色浓绿
2 1 /2M S 0. 01 7. 8 3. 3 2. 8 细根多 ,叶色淡绿
3 1 /2M S 0. 05 10. 2 4. 2 3. 1 根细长 ,叶色淡绿
4 1 /2M S 0. 10 15. 6 5. 1 3. 0 根细长 ,叶色淡绿
5 M S 0. 00 8. 6 3. 5 5. 0 根粗壮 ,叶色浓绿
6 M S 0. 01 9. 9 5. 3 4. 3 根细长 ,叶色淡绿
7 M S 0. 05 14. 7 6. 1 3. 5 根细长 ,叶色淡绿
8 M S 0. 10 16. 4 7. 9 3. 0 根细长 ,叶色淡绿
2. 4　鄂报春的移栽
2. 4. 1　移栽培养料的准备　将新鲜的河泥与珍
珠岩以体积比为 7∶3的比例混合 ,装在 5×10孔
的塑料穴盘内备用.
2. 4. 2　鄂报春的移栽种植　将生根培养 25天的
鄂报春组培瓶苗置于自然条件下 2 ～ 3 d,再打开
瓶盖炼苗 3 ～ 4 d. 取出瓶苗 ,洗净培养基 ,用稀释
800倍的多菌灵浸泡 20m in,将试管苗种植在上述
培养料的穴盘中.种完后 ,将多余的多菌灵浸泡液
用喷壶喷在鄂报春的叶面及土壤根部 ,一次性喷
水灌透 ,再用塑料薄膜将穴盘蒙上 (穴盘上方用竹
片作为支架 ). 每天早晚掀开薄膜透气 3 ～ 5 m in,
再盖上. 7天后 ,就可将薄膜全部拆开 ,按观赏植物
正常水肥进行管理. 采用这种移栽方式可使鄂报
春的移栽成活率达到 98. 1%.
2. 4. 3　鄂报春的上盆种植管理　鄂报春是一种
典型的暖温带植物 ,喜气候温凉 、湿润的环境和排
水良好 、富含腐殖质的中性土壤 ,不耐高温和强烈
的直射阳光 ,亦不耐严寒 ,不耐霜冻 ,花期早.
一般组培苗控制在 8月底至 9月初出瓶 ,移
植于穴盘 30天后 ,即可装入 12 ～ 16 cm的盆. 2年
生老株 ,盆可适当放大. 入盆约 120天后 ,即可在
来年 1 ～ 2月开花上市. 盆土且不可带酸性 ,栽植
深度要适中 ,太深易烂根 ,太浅易倒伏. 须经常施
肥.叶片失绿的原因除盆土酸性外 ,可能因太湿或
排水不良. 由于鄂报春在年初开花 ,时值气温较
低 ,若长期将其置于室内 ,其花色不浓艳 ,应将其
于 100天后置于阳光下照射 ,可保证花色鲜艳 (见
图 1 B).但越夏时应注意通风 ,给予半荫并防止阵
雨袭击 , 采用喷雾 、棚架及地面洒水等措施以
降温.
3　结　论
(1)诱导鄂报春嫩叶分化较理想的培养基配
方是:MS+6 -BA 2. 0mg /L +NAA 1. 0mg /L.在此
培养基上 ,鄂报春芽的分化率可达 42. 11%.
55第 2期　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　宋建英等:鄂报春的组培技术研究
(2)鄂报春较理想的继代增殖培养基配方
是:MS+6 - BA 1. 0mg /L+NAA 0. 05mg /L. 其有
效芽分化系数为 4. 27,平均苗高为 1. 5 cm ,苗的长
势正常 ,有利于生根培养.
(3)鄂报春较理想的生根培养基为添加
0.5%活性炭的 MS基本培养基 ,在此培养基上 ,鄂
报春平均根条数为 8. 6条 ,平均根长为 3. 5 cm ,平
均苗高为 5. 0 cm ,且根长势粗壮 ,叶色浓绿 ,有利
于移栽.
(4)移栽鄂报春较理想的培养料体积比为
7∶3混合的新鲜河泥和珍珠岩. 在此培养料上移栽
培养 ,成活率可达 98. 1%.
综合上述影响鄂报春增殖和生根培养的各项
因素 ,本着既要提高鄂报春的增殖率 ,又要降低生
产成本的基本原则 ,建议在鄂报春增殖快繁中采
取如下综合处理措施:(1)用普通白糖代替蔗糖 、
用卡拉胶代替琼脂条或代替琼脂粉 (其中 ,普通白
糖的价格为 5. 0元 /kg,而蔗糖价格为 30元 /kg;卡
拉胶价格为 70元 /kg,而琼脂条价格为 140元 /kg,
琼脂粉的价格为 300元 /kg);(2)采用嫩叶诱导分
化出鄂报春的愈伤组织及再分化成芽后 ,可对芽
进行继代快速繁殖 ,待芽增殖培养到一定基数时 ,
再让其进入生根培养 ,以满足工厂化生产的需要.
采取上述措施 ,既可保证鄂报春最佳的快繁
增殖率 ,又可降低生产成本 ,有利于提高工厂化生
产的经济效益.
[参　考　文　献 ]
[ 1] 　陈俊愉 ,程绪珂. 中国花经 [M ] .上海:上海文化出版
社 , 1990:204 - 207.
[ 2] 　何国生 ,胡启明.鄂报春(Primu la obconica H ance)一
新亚种 [ J] .植物分类学报 , 2002, 40(6):551 - 552.
[ 3] 　颜海飞 ,王小兰 , 胡启明 , 等. 鄂报春 (Primu la obconi-
ca H ance)亲缘地理学的初步研究 [ J] . 热带亚热带
植物学报 , 2005, 13(6):526 -532.
[ 4] 　李浚明.植物组织培养教程(第 2版)[M ] . 北京:中
国农业大学出版社 , 2002:280.
[ 5] 　崔德才 ,徐培文.植物组织培养与工厂化育苗 [ M ] .
北京:化学工业出版社 , 2003:33 - 34.
[ 6] 　梅家训 ,丁习武. 组培快繁技术及其应用 [M ] .北京:
中国农业出版社 , 2003.
[ 7] 　宋建英.西洋百合 “卢浮宫”的组培技术研究 [ J] . 林
业科学研究 , 2004, 17(3):346 -351.
[ 8] 　谭文澄 ,戴策刚. 观赏植物组织培养技术 [M ] .北京:
中国林业出版社 , 1991:290 - 297.
A Study on Tissue Culture ofPrimula obconica
SONG Jian - y ing
1, 2 , YE Jian - ren1 , CHEN Jian - yong2
(1. C ollege ofForest Resou rces and Environm en t, Nan jing Forestry Un iversity, Nan jing Jiangsu 210037, Ch in a;
2. Departm en t of Resou rces and Environm en t, Forestry Vocational Ins titu te of Fu jian Province, N anp ing Fu jian 353000, Ch ina)
Abstract:A tissue culture expe rimentw ithPrimula obcon ica was carried ou t and tender leavesw ere used as
the initial explant to induce d ifferen tiation. The resu lt revea led that the induced tende r leaves o f P rimu la
obcon ica would form ca llus first and then differen tiate into buds. The comparative ly suitab le medium fo r young
lea f induction w asM S +6 - BA 2. 0 mg /L +NAA 1. 0 mg /L, on which the average inducing rate reached
42. 11%. The be tte rmedium for successive cu lture w asM S+6 -BA 1. 0mg /L +NAA 0. 05 mg /L, on wh ich
the ave rage diffe rentiation coe fficient for effective buds reached 4. 27, and themean height o f young shootsw as
1.5cm. O rdinaryMS medium was the best for roo ting, on which the ave rage numbe r o f roo ts occu rred w as 8. 6,
w ith the average root leng th as 3. 5 cm , and the average shoot he ight as 5. 0 cm. The roo ts induced by the
ordinary medium were strong enough for transp lanting. The mate ria l forPrimula obcon ica transplan ting was the
combination o f river mud and pe rlite (proportion 7∶3), the ave rage survival rate could reach 98.1% in
the expe riments.
Key words:P rimula obcon ica;medium;successive propagation;roo ting
56 西　南　林　学　院　学　报　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　第 27卷