全 文 ：中 国 药 科 大 学 学 报
J o u rn al o f Ch in aP h r a m ae e ut ic al Un ie vr i st y 19 9 3, 2 4 ( 3 ) : 2 3 5一 2 3 7 2 3 5
山苦茶的抗菌和抗病毒作用研究
林 海 麦光大 唐小山’ 徐生淦
(海南医学院 , 海口 5 7 0 005 ; ’ 医学科学院生物技术研究所 )
摘 要 山苦茶的水燕馏液成分对金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌等六种试验菌无杭菌作
用 。 但山苦茶的水提取液对大部分试验菌具有一定的抑菌效果 。 山苦茶干品的水提取液对金黄色葡
萄球菌的抑菌效果最好 , 1 , 1水提液抑菌环直径为 1 m m ,最小抑菌浓度 1 , 32 ;对福氏志贺氏菌
的效果次之 , 抑菌环直径为 1 . 5 m m ,最小抑菌浓度为 l : 8 ,对铜绿色假单胞菌的抑菌效果最差 . 纸
片法未见抑菌环 ,稀释法测得最小抑菌浓度为 l : 2 。 抗病毒作用研究用 c P E 法观察 ,对慢病毒 M ae -
id 病毒 1 0 1 株无作用 ,而观察到在 1 : 25 的浓度时 ,对 s Y N 羊二倍体细胞有细胞毒性作用 .
关桩词 山苦茶 ; 抗菌 ; 抗病毒
山苦茶 龙阮伍才哪 了脚以必。二 ( aB il) 系大戟科
野桐属海南岛特产植物 , 主要分布我 国海南
岛 、 中印半岛及苏门答腊岛 l3[ 。 海南人习惯用
它的叶子泡制饮料 , 故俗称为鹤鸽茶 。 由于它
的香味浓郁 , 有清热解毒 、 利胆消食的功效 ,
当地居民用作解油腻 、助消化的保健饮料 。经
广东省科学技术情报所国际联机检索 ,均未
见有实验性研究的报告 。 经我院大量的临床
试验及药理实验已经证明山苦茶是治疗胆囊
炎 、 胆结石 , 消炎止痛 、利胆的 良药2[] 。 为了确
定山苦茶真正的药理作用和 临床效果 , 1 9 91
年海南省科技厅将这一研究列入省自然科学
基金课题给予资助 。 本报告是这一研究的内
容之一 。
材料与方法
.1 1 山苦茶提取液的制备
1
.
1
.
1 山苦茶水蒸馏液的制备 称取一定
t 的山苦茶鲜品 , 置于蒸馏器内用水浸过面 ,
浸泡 Z h 后加热蒸馏 , 第一次收集两倍山苦
茶样品重 t 的燕馏液 。此蒸馏液重燕馏 ,收集
相当于样品重 t 的燕馏液 。 即是 1 : 1 山苦茶
燕招液 , 密封灭菌后供抗菌试验 。
1
.
1
.
2 山苦茶水提液 的制备 称取一定量
山苦茶干品或鲜品置于大烧杯中 , 加燕馏水
浸泡过 面 , 静置 Z h 后 加热至沸 , 文 火煮 15
m in 后纱布过滤得第一次水提液 , 再同样得
第二次水提取液 ,合并二次滤液 , 加热减压浓
缩至相当于 山苦茶样品原重量 ,得 1 : ! 水提
取液 , 密封灭菌后供抗菌试验 。
抗菌药敏试验液配制 将以上两种提取
液分别用纸片法以 1 : 1药液 1 m l 均匀浸湿
标准纸片 10 片 ,液体稀释液按倍比梯度 , 用
培养液稀释为 1/ 2 , 1 / 4 , 1/ 8 , 1 / 16 , 1 / 3 2 浓
度 ,供药敏实验 。
1
.
1
.
3 山 苦茶醉提取液的制备 供抗病毒
试验的山苦茶醉提取液 , 按山苦茶鲜叶冻干
品 1 0 0 5 加入 7 5%乙醉 5 0 0 m l , 浸泡过夜 , 回
流 4 h , 浓缩至无乙醉味 , 然后加蒸馏水 1 0
m l , 加 N a o H 调 PH 至 7 . 4 , 使其完全溶解于
水 , 并用 0 . 45 林m 的微孔滤膜过滤 ,得含山苦
茶 1 : 1 的药液 。 然后按 l 5/ , 1/ 25 , 1 / 1 2 5 及
1 / 6 2 5 的稀释浓度供抗病毒试验 。
1
.
1
.
4 试脸 菌株 、 病毒株及细胞株
试验菌株 金黄色葡萄球菌 (腼内沁粉
, 一 ) 、 白色葡萄球菌 (S月砚脚 ) 、大肠埃希
收摘日期 1.9冬 s0一 29 海南省自然科学羞金资助课厄
2 3 6 中 国 药 科 大 学 学 报 2 4卷
氏菌 (及痴甘盆汤自 碱 ) 、 铜绿色假单胞菌 (几剧 ~
面机闭口吕 口 , .勺 . 之朋 ) 、 伤寒沙门氏菌 (& 劝加舰以抽 年
声 ) 、 福氏志贺氏菌 ( j肠州如 扣场姗` )均由中国
药品生物制品检定所提供 。 病毒毒株为梅迪
病毒 ( M a de i v i r u s ) 1 0 1 1株 ,是一种冰岛羊里
发生的慢性传染病病毒 。 培养病毒的细胞株
为 s Y N 羊二倍体细胞 。 以上毒株及细胞株均
由冰岛、 冰岛大学病理研究所 TH oR M A R 教
授提供 。
1
.
2 实脸方法
抑菌药敏试验分纸片法和液体稀释法 ,
均参照 iK r by 一 E如 e r 法进行 s[, `〕。 纸片法测定
其对各种细菌的抑菌环大小 ,液体稀释法经
观察细菌生长萦殖情况求出抑菌的最小稀释
浓度 。
山苦茶的抗慢病毒— 梅迪病毒 (M a ed i
vi ur
s )的试验方法参考 F ar kn 所述的方法进
行 s[] 。 将 s Y N 细胞接种到细胞培养板上 , 培
养于 37 ℃ , 5% C 0 2 中 24 h . 待细胞长成单层
后 , 接种梅迪病毒 1 01 1 株 50 x cT ID 50 , 吸
附 Z h 后 ,加入不同稀释度的上述山苦茶提
取液 , 同时用抗病毒 药物益氮脱氧 胸昔
( A z T
, 美国 B u r r o u hg W e l l e o m e 公司产品 )作
抗病毒阳性对照 , 试验浓度为 10 , 2 , 0 . 4 ,
0
·
0 8 、 s / m l , 再在 3 7 ` C , 5% c o Z 培养箱中培
养 4 d ,然后按 C P E 法观察结果 。
2 结 果
三种山苦茶提取液的抑菌试验结果列于
表 l
T . b 1
.
T七e m in 加 al 加 h i加 t or y c o n c e。廿 a如 n 朋 d d 扭m e t e r of z o n e o f i n h i b i t i o n of t h r e e x t ar e st f r o . 1 叮 . 了. 侧晌. . ( M F )
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.
1 6
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从表 l 可以看出 , 山苦茶鲜品的抑菌效
果普遍 比干品高 . 而对金黄色荀萄球菌的抑
制作用最强 ,干品的抑菌环直径为 n . 0 m m ,
鲜品为 15 . 5 m m ,最小抑菌浓度均达到本试
验的最高稀释度 1 : 32 。 其次是对福氏志贺
氏菌的抑菌效果较好 , 干品的抑菌环直径为
n
.
5 m m
,鲜品为 13 . 0 ~ ;干品最小抑菌浓度 1 : 8 ,鲜品为 1 : 16 . 对其它细菌抑制作用
从强到弱排列为伤寒沙门氏菌 、 白色葡萄球
菌 、大肠埃希氏菌 。对铜绿色假单胞菌的抑制
作用最差 。
抗病毒作用的实验结果表 2 。 可以看出
对照药物 A z T 浓度在 2 阳 / un 以上时可以完
全抑制梅迪病毒产生细胞病变效应 ( CPE ) ,
在 0 . 08 阳 / iln 时还表现 出对 CP 有一定的作
用 。 而山苦茶则未见有抑制 CP E 的作用 , 在
浓度高出 1 / 2 5 时对 s Y N 羊二倍体细胞产生
细胞毒作用 。
T a b 2
.
T加 C P E 1. t r . u l st o f M F 叭 M , 创` v i r . a 10 11
M F C o n C
.
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参 专 文献
中国科学院华南植物研究所编 . 海南植抽 志 . 第二卷 ·
北京 : 科学出版社 , 19 6 5 : 1 5 6
华运群 . 山苦茶的利胆作用和 毒性 . 中目药理 学通报 ,
1 9 9 2 牟. ( 5 ) : 3 3 4
徐叔云等主编 . 药理 实脸才法 , 第二版 , 北京 : 人民卫生
出版社 , 19 9 1 : 13 4 0
张顺悟主编 . 临 未徽 生物 学 . 下册 , 大连出版社 , 19 9 0 :
6 4 8一 5 3
4期 林 海等 :山苦茶的抗菌和抗病毒作用研究 2 3 7
5 F rn ak K B
.
V i sn a vi r u sa san 二心 , m do e l f or h u m a n im -
m u n团 e f lC i e。叮 v i r山 an d in h ibi tj on by r l比 v i r i n , 曲留P h朗。
r o r m a t 。 a n d Z, , 3` 一 did
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S t u d y o f A n t i b a e t e r i a l a n d A n t i v i r u s o f M
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.
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w as n o e f f e e t o n s l o w v i r u s M a e d l v i r u s 1 0 1 1
.
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~
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.
K e y w o r ds M汕娜哪 户盯以俪公 , A n ti ab e et r ia , A n ti v i r u s
中药小叶莲及鬼日类生药学研究
尚明英 导师:徐国钧 徐瘩珊 李 萍
(生药学教研室 )
小叶莲药用果实 ,始载于《月王药诊 》 ,之后的许多戴医药文献中多有记载 ,鬼臼药用根茎及根 ,始载于 《神
农本草经 》 ,历代本草亦有记载 。 经本草考证表明 ,小叶莲的植物来源为小聚科植物桃儿七伍诫琳由城户帅 . 加`
( w al
.
) Y脚 ;鬼臼的植物来源应为小粟科八角莲属六角莲 (炳脚翔加 神如此 J ( Ha n二 )傲烈白网 或八角莲 伪阵姗朋 ~
翻州灿 (H an 忱 ) 对汉施仰 .
经药源调查 ,小叶莲来源单一 ,鬼臼类基像植物较多 ,对所采到的 150 余份植物标本进行分类鉴定 ,计有 3
科 5 属 13 种植物 ,发现八角莲属 1新种禽明八角莲 (场闷脚目 . 如脱. 万 . Y . 目口夕 e t G . J . 如 即 . 0 . ) 。
对小叶莲及 10 种鬼臼类生药和 2 种混用品进行性状 、显徽特征观察 . 在此墓础上 ,对 52 件商品进行鉴定 ,
兔臼类药材来源于小聚科桃儿七属 、 山荷叶属和八角莲月 9种植物 ,并有虎耳草科鬼灯集属 1种和秋海棠科秋
海案属 l 种与之混用 ,其主流商品为桃儿七的根茎及根 . 首次从小叶莲中分得 8 个化合物 ;从批鳞八角莲 (伪辉冷
.
月加价“ 咖 )中分得 9 个化合物 。
用 H月刀法侧定了小叶莲及鬼臼类生药中主要有效成分鬼臼毒素、 去载鬼臼毒素 、 去甲去氧鬼臼毒家的含
t
。 对兔臼毒素 、去暇鬼臼毒素、 小叶莲根提取物 、 桃儿七提取物及批鳞八角莲提取物进行了抗肝瘤 、 艾氏腹水
启及裸肝药理实脸 ,结果表明 :批麟八角莲提取物对肝瘤的抑制作用和保肝作用最强 ;鬼臼毒素对艾氏腹水庙
的神侧作用最强 。 以上研究结果为小叶莲及鬼臼类生药的品种鉴定 、 质t 评价及开发利用提供了科学依据 .
(全丈待发衣 )