全 文 ：研究报告
Research Report
基于 16S rRNA测序研究蒙桑根际细菌多样性
杨金宏 孔卫青 *
安康学院陕西省蚕桑重点实验室,安康, 725000
*通讯作者, weiqing_kongwq@126.com
摘 要 根际细菌丰富多样，对植物的生长发育有重要影响。为更好的了解野生蒙桑和移植栽培蒙桑根际细
菌的多样性组成和差异，本研究提取了两样本的宏基因组 DNA，利用 Roche 454 GS FLX测序技术对样本菌
群的 16S rRNA基因的 V1~V3区域进行测序。测序结果表明：野生蒙桑根际细菌的主导类群为变形菌门
(31.62%)和酸酐菌门(19.8%)；栽培蒙桑的主导类群为厚壁菌门(89.07%)，两样本的沙浓指数分别为 5.8和 1.33。
栽培蒙桑样本 OTU498 的基因序列数占总样本的 78.9%，其最相近菌属为苏云金芽孢杆菌；野生蒙桑
OTU656、OTU556、OTU568和 OTU665占总样本的 8.17%，最相近菌属是丝状共生菌。进化分析发现两样本
菌群具有各自的特异性，大都来源于同一菌门的不同菌属，分别聚类。本研究表明移栽后蒙桑根际细菌的多
样性降低，主导类群也发生了变化，基于 16S rRNA测序可以揭示根际细菌的组成结构。
关键词 蒙桑, 根际细菌, 16S rRNA, 多样性
Rhizosphere Bacteria Diversity of Morus mongolica Revealed Based on 16S
rRNA Sequencing
Yang Jinhong Kong Weiqing *
The Key Sericultural Laboratory of Shaanxi Ankang University, Ankang, 725000
* Corresponding author, weiqing_kongwq@126.com
DOI: 10.13417/j.gab.034.002161
Abstract Plant rhizosphere is rich in variety of bacteria, which have an important influence on the growth and
development of plants. In order to better understand the diversity and difference of rhizosphere bacterias between
the wild and cultivated Morus mongolica, we extracted the metagenomic DNA and analyzed the rhizosphere
microflora of two samples using the Roche 454 sequencing technology. The rhizosphere bacteria were
characterized by amplifying the V1~V3 region of bacterial 16S rRNA gene. The results showed that the dominant
taxa in wild Morus mongolica Rhizosphere bacteria are Proteobacteria (31.62%) and Acidobacteria (19.8%), while
in the cultivated sample, the dominant taxa were Firmicutes (89.07%). The Shannon index were 5.8 and 1.33 in the
wild Morus mongolica rhizosphere bacteria and cultivated one. In cultivated Morus mongolica sample, 78.9% of the
total sequence belongs to OTU498, the closest genus of which is Bacillus thuringiensis. The four group of
OTU656, OTU556, OTU568 and OTU665 in wild Morus mongolica sample, which accounted for 8.17% of the
total sequence, is similar to the Methylobacterium sp. the rhizosphere bacterias of the two sample belong to the
same Phylum, but different genus. The results of this study demonstrated that the diversity of cultivated Morus
mongolica rhizosphere bacteria is lowered than that in the wild sample, and the dominant taxa changed in the
cultivated Morus mongolica rhizosphere bacteria, as well. The sequencing analysis based on the metagenomic DNA
and 16S rRNA gene can reveal the composition of rhizosphere bacteria.
Keywords Morus mongolica, Rhizosphere bacteria, 16S rRNA, Diversity
基金项目：本研究由陕西省青年科技新星项目(No.2013KJXX-96)和陕西省教育厅重点实验室科研计划项目(No.14JS003)共同
资助
基因组学与应用生物学，2015年，第 34卷，第 10期，第 2161-2168页
Genomics and Applied Biology, 2015, Vol.34, No.10, 2161-2168
基因组学与应用生物学
Genomics and Applied Biology
蒙桑(Morus mongolica)为桑科桑属植物，原产于
我国和朝鲜，抗旱、耐冷力强，材质坚硬，可用于器具
制造，叶能养蚕(楚渠和彭云武, 2012,陕西农业科学,
(3): 90, 100)。同时，作为与桑白皮来源桑树同属的植
物，蒙桑根皮中也含有黄酮类化合物、Diels-Alder型
加合物等具有利尿降压、镇咳抗炎等成分(康洁等,
2006;景莹等, 2010)。秦巴山区是长江上游地区一个
重要的生态屏障，蕴藏着十分丰富的林、草及土特产
品。本实验室于 2007年从秦岭引种蒙桑，栽植于实
验室野生桑种质资源基地。但可能与生态环境的改
变有关，最初移栽后发现其易得根部病害枯死。
土壤微生物丰富多样，是整个土壤生态系统的
重要组成部分，在植物的生长发育中发挥重要作用。
但目前大部分的土壤微生物难以在实验室条件下培
养(Amann et al., 1995)，限制了对其的研究和利用。随
着分子生物学和高通量测序技术的发展，基于 16S
rRNA序列研究环境微生物多样性的方法得到快速
发展，该方法避开了微生物的分离培养，根据 16S
rRNA序列预测微生物的群落结构和生态功能(刘玮
琦等, 2008; 杜爽等, 2013; Camanocha and Dewhirst,
2014;李璐等, 2015)，具有更加高效、准确和高信息量
的优势，极大地扩展了微生物资源的利用空间。细菌
是土壤微生物的主要类群，通过改善根际细菌环境
来促进植物生长，或从筛选根际具有良好促生和抗
菌作用的有益菌群，在烟草、玉米等植物已经有所报
道(于群英等, 2012;程园园等, 2014)。
本研究利用 Roche 454高通量测序技术对野生
和移植栽培蒙桑根际细菌的 16S rRNA 基因的
V1~V3区域进行测序，为进一步蒙桑的栽培利用提
供参考。
1结果与分析
1.1细菌丰度与多样性分析
野生和栽培蒙桑土壤细菌 16S RNA 基因测序
分别获得有效序列 6 193和 9 505条，序列平均长度
435 bp。根据不同 16S rRNA在 97%相似性水平为分
类单元(operational taxonomic units, OTU)进行分类，
图 1栽培蒙桑(C)和野生蒙桑(W)根际细菌文氏图
Figure 1 The venn map of cultivated (C) and wild (W) Morus
mongolica Rhizosphere bacteria
栽培蒙桑和野生蒙桑分别有 OTU 150个和 588个，
二者共有 68个(图 1)。进一步用沙浓指数(Shannon in-
dex)和 Chao指数计算 2样品的菌群多样性和丰度，
结果显示栽培蒙桑和野生蒙桑根际细菌的沙浓指数
分别为 1.33和 5.8，Chao指数分别为 176和 589，野
生蒙桑根际细菌比栽培蒙桑具有更高的丰度和多样
性(表 1)。
表 1栽培蒙桑(C)和野生蒙桑(W)根际细菌群落丰度和多样性
Table 1 Community richness and diversity of cultivated (C) and wild (W) Morus mongolica Rhizosphere bacteria
样本
Sample name
C
W
序列数
Sequence number
9 505
6 193
OTU (0.97)
150
588
覆盖度
Coverage
0.996
0.998
Chao指数
Chao index
176
589
沙浓指数
Shannon index
1.33
5.8
1.2细菌类群比例分析
GenBank 数据库 BLASTN 程序对获得的有效
序列进行相似性比对，发现 2样品根际细菌来自酸酐
菌门(Acidobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、拟杆
菌门(Bacteroidetes)、绿弯菌门(Chloroflexi)、硬壁菌门
(Firmicutes)、芽单胞菌门(Gemmatietes)、硝化螺旋菌
门(Nitrospirae)、变形菌门(proteobacteria)等(图 2)。其
中，野生蒙桑根际细菌的主导类群变形菌门(31.62%)
和酸酐菌门(19.8%)。之后是硝化螺旋菌门、放线菌
门、拟杆菌门、芽单胞菌门和绿弯菌门，从 7.02到 4.8
不等。栽培蒙桑根际细菌的主导类群厚壁菌门的比
例达 89.07%，但其在野生蒙桑根际细菌中仅 0.92%，
其次为放线菌门(4.02%)和变形菌门(3.58%)。2样本
的细菌群落结构和主导类群明显不同。
1.3系统进化分析
野生蒙桑根际细菌多样性较高，其中含序列数
n1≤10、10＜n2≤30、n3＞30个的 OTU分别有 436个、
118个和 34个，其序列数占总序列数的比例分别为
2162
图 2野生(W)和栽培(C)蒙桑根际细菌门水平所占比例
Figure 2 Proportion of Rhizosphere soil bacteria phyla in the wild
(W) and cultivated (C) Morus mongolica samples
34.5%、31.6%和 33.8%。栽培蒙桑根际细菌中，含基
因序列数 n4≥15的 OTU有 28个。本文对野生蒙桑
n3＞30的 34个OTU和栽培蒙桑 n4≥15的 28个OTU
进行分析。Mothur软件生成每种基因型的代表性序
列(GenBank 登录号: KT316178-KT316239)，并与去
除未培养和环境微生物数据的 GenBank核苷酸数据
库进行 BLASTN比对，主要比对结果见表 2，野生蒙
桑根际细菌主要 OUT (656, 556, 568和 665)的最相近
菌为甲基营养菌的丝状共生菌(Takedaet al., 2004)，栽培
蒙桑中的 OTU498 的最相近菌为苏云金芽孢杆菌
(Bacillus thuringiensis)。
以各基因型的代表性序列及其最相近序列为基
础绘制了细菌的系统发育树(图 3)，结果表明，两样本
中仅少量序列来源于同一菌属，如栽培蒙桑与伯克式
菌 Burkholderia sp. 最相近的 OTU572和 OTU646，
和野生蒙桑与 Cupriavidus 类菌最相近的 OTU189、
OTU423、OTU348和 OTU8，均为 β变形菌纲 Burkh-
olderia属菌。多数菌群则分别聚类。如来自栽培蒙
桑、与 γ变形菌的 Dokdonella sp.和 Xanthomonadaceae
bacterium最相近的 OTU74、OTU169和 OTU571，与
β变形菌聚合后，再共同与其他 γ变形菌序列分支
聚合。
2讨论
作为根际细菌生活的场所，土壤类型、植被和管
理措施等对根际细菌有一定影响(章家恩等, 2002;王
光华等, 2006;何寻阳等, 2009)。本研究野生蒙桑生
长于秦巴山区森林茂密、植被丰富处，丰富的植被造
就了野生蒙桑根际细菌及群落结构的多样性。栽培
蒙桑栽植在桑园，周围植被单一，受田间管理除草、
施肥等人力影响，其土壤中的微生物类群相对固定。
据朱越雄等(2001)的报道，桑园土壤细菌中芽孢杆菌
的含量较高，本研究栽培蒙桑样本中的芽孢杆菌的
含量高达 84%，这与移栽土壤为桑树连作地和田间
管理有关。有研究发现微生物多样性高的土壤中病
源菌难以生存(Benizri et al., 2005; Pérez-Piqueres et
al., 2006)，被病源菌侵染后的根际土壤细菌不仅多
样性降低，而且群落结构也会发生变化(Gorissen et
al., 2004)，因此移植蒙桑易得根部病害可能与移植后
根际细菌多样性降低有关。
细菌主导类群和比例的分析显示，野生蒙桑根际
细菌的主要类群变形菌门、酸酐菌门，在栽培蒙桑根
际细菌中仅有 3.58%、0.93%和 0.95%，栽培蒙桑含量
最高的厚壁菌门在野生蒙桑样本中仅有 0.92%，其主
要菌株苏云金芽孢杆菌为内生芽孢的革兰氏阳性土
壤细菌，是常用的生防菌，大量该菌的存在可能与根
际细菌的种类由于根系分泌物的选择作用通常较少
相一致。而野生蒙桑根际细菌含量较高的 OTU的最
相似菌甲基营养菌的丝状共生菌，是 Takeda等(2004)
从澡堂水流出口附近收集的洗澡水中分离菌株时，分
离到的与杆状的产纤维素细菌 TFBT共生的一个丝
状菌(TFF)，该菌无法独立生长分离。
与两样本主要类群和比例的差异相一致，其主要
菌属和聚类关系也比较复杂。如野生蒙桑的OTU349、
OTU236和OTU609序列与 γ变形菌的 Steroidobacter
denitrificans strain FS最相似。该菌是厌氧细菌，可以降
解类固醇激素(Fahrbach et al., 2008)，基于 16S rRNA
序列的系统进化分析，显示其与其他 γ变形菌没有
近缘关系，进一步根据 γ变形菌表现型特征的描述，该
菌应为与现有 γ变形菌具有远缘关系的新属和新种。
有研究认为细菌多样性、群落结构受土壤类型
影响最大，受植物宿主基因型的影响较小(Bulgarelli
et al., 2012; Lundberg et al., 2012)。本研究植物宿主
均为蒙桑，2样本根际细菌的多样性和群落结构明显
不同，且野生蒙桑样本的丰度和多样性明显高于移
植样本，这有助于我们进一步了解秦巴山区环境与
微生物群落之间的关系。由于环境条件复杂，在野生
蒙桑样本中发现了很多与已知序列的同源性在 93%
以下的类群，且在其中有一定的丰度，说明有培养或
鉴定出新种或新属的可能，如 OTU299、OTU259。
3材料与方法
3.1材料收集与主要试剂
野生蒙桑根际土样取自岚皋大巴山北麓，栽培
蒙桑根际土壤取自本实验室野生桑种质资源基地
基于 16S rRNA测序研究蒙桑根际细菌多样性
Rhizosphere Bacteria Diversity of Morus mongolica Revealed Based on 16S rRNA Sequencing
2163
基因组学与应用生物学
Genomics and Applied Biology
表 2野生蒙桑(W)和栽培蒙桑(C)来源细菌主要 OTU及其所属门类
Table 2 The main OTUs and biological taxonomy of the wild (W) and cultivated (C) Morus mongolica Rhizosphere soil bacteria
克隆标识
Clone ID
OTU656
OTU556
OTU568
OTU665
OTU359
OTU7
OTU207
OTU422
OTU277
OTU37
OTU259
OTU299
OTU639
OTU217
OTU96
OTU445
OTU649
OTU233
OTU376
OTU432
OTU53
OTU657
OTU421
OTU398
OTU448
OTU276
OTU165
OTU189
OTU8
OTU423
OTU487
OTU348
OTU573
OTU545
OTU468
OTU572
OTU646
OTU349
OTU236
OTU609
OTU112
OTU74
OTU169
基因比例(%)
Gene percent (%)
最相近的可培养细菌,登录号
Closest cultured bacteria, accession number
Filamentous symbiotic bacterium ofMethylobacterium sp., AB112774
Filamentous symbiotic bacterium ofMethylobacterium sp., AB112774
Filamentous symbiotic bacterium ofMethylobacterium sp., AB112774
Filamentous symbiotic bacterium ofMethylobacterium sp., AB112774
TM7 phylum sp. canine, JN713414
Bacterium SOSP1-142, AM180162
Bacterium SOSP1-142, AM180162
Nitrospira sp., Y14644
Nitrospira sp., Y14644
Nitrospira japonica strain J1, NR_114396
Nitrospira moscoviensis strain NSP M-1, NR_029287
Acidobacteria bacterium Ac_11_E3, KF840370
Acidobacteria bacterium Ac_16_C4, KP638490
Acidobacteria bacterium KF4-15/2, JF707406
Acidobacteria bacterium UCL-041, JF707488
Acidobacteria bacterium Ac_16_C4, KP638490
Acidobacteria bacterium UCL-085, JF707525
Acidobacteriaceae bacterium A2-4c, HQ995662
Bacterium Ellin337, AF498719
Bacterium Ellin5080, AY234497
Rhodospirillales bacterium WX36, KC921187
Anaplasmataceae bacterium IS136, AB190771
Reyranella soli strain KIS14-15, NR_109674
Bradyrhizobium sp. ISA0901, KF859870
Sphingomonas sp. JS5, JF922305
Sphingomonas sp. CHNTR37, DQ337575
Phenylobacterium sp. DLS-83, FN646691
Bacterium SCGC AAA018-P21, HQ290515
Bacterium SCGC AAA018-P21, HQ290515
Bacterium SCGC AAA018-P21, HQ290515
Beta proteobacterium Schreyahn_AOB_SSU_Aster_5, AY795691
Bacterium SCGC AAA018-P21, HQ290515
Bacterium TG161, AB308363
Bacterium Ellin6067, AY234719
Bacterium TG152, AB308362
Burkholderia sp. S3.1, JN208913
Burkholderia sp. TAt-045, FJ478405
Bacterium Ellin5114, AY234531
Steroidobacter denitrificans strain FS, EF605262
Gamma proteobacterium L1884, JQ419544
Fontimonas thermophila strain HA-01, NR_109471
Dokdonella sp. KIS55-21, KF934398
Dokdonella sp. KIS55-21, KF934398
相似度(%)
Similarity
(%)
96
93
94
94
85
94
93
95
96
98
92
92
92
93
95
92
93
98
98
93
97
92
100
99
98
98
97
93
93
93
97
94
93
97
92
98
97
94
96
94
88
99
98
系统分类
Phylogenetic
classification
未分类菌
Unclassfied bacteria
绿弯菌门
Chloroflexi
硝化螺旋菌门
Nitrospira
酸酐菌门
Acidobacteria
α-变形菌
Alphaproteobacteria
β-变形菌
Betaproteobacteria
γ-变形菌
Gammaproteobacteria
C
0.05
0.00
0.00
0.00
0.26
0.25
0.17
0.00
0.00
0.00
0.01
0.03
0.00
0.00
0.00
0.06
0.00
0.25
0.18
0.00
0.00
0.00
0.06
0.32
0.22
0.19
0.18
0.00
0.00
0.00
0.00
0.00
0.00
0.00
0.00
0.22
0.16
0.00
0.01
0.00
0.00
0.36
0.18
W
2.54
2.34
1.42
1.87
0.00
0.00
0.00
2.03
1.24
1.24
0.95
1.31
0.82
0.95
0.69
0.76
0.63
0.00
0.00
0.92
0.61
0.52
0.52
0.16
0.00
0.00
0.00
1.71
0.55
0.84
0.73
0.68
0.76
0.69
0.50
0.00
0.00
1.03
1.05
0.66
0.52
0.03
0.00
2164
(2007年引种, 2013年秋取样)。土样采集参照 Xu等
(2009)的方法：随机选取 5棵植株，除去表面 20 cm
的土层，利用抖落法各取根际 4 mm内的土壤 5 mL，
混合分装于 50 mL离心管，置于干冰中保存带回实
验室，用于下一步实验。
主要试剂 E.Z.N.A Soil DNA提取试剂盒(OME-
GA)，TransStart Fastpfu DNA Polymerase (北京全式金
生物技术有限公司)，AxyPrepDNA凝胶回收试剂盒(美
国 AXYGEN)，GSFLXTitanium emPCRKits (Lib-L)和
SequencingMethodManual_XLR70 kit (Roche)。
3.2 土壤宏基因组 DNA 的提取和 16S rRNA 基因片
段的 PCR扩增
秤取 1.0 g土壤样品，按 E.Z.N.A Soil DNA说明
书提取土壤宏基因组 DNA，1%琼脂糖凝胶电泳检
测。后以此为模板，27F 和 533R 引物和 TransStart
Fastpfu DNA Polymerase进行 PCR扩增，引物序列为
27F：5-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3 和 533R：
5-TTACCGCGGCTG-CTGGCAC-3 (野生样本和栽
续表 2
Continuing table 2
克隆标识
Clone ID
OTU94
OTU571
OTU192
OTU120
OTU30
OTU498
OTU663
OTU433
OTU99
OTU410
OTU357
OTU154
OTU16
OTU555
OTU145
OTU637
OTU528
OTU509
OTU515
基因比例(%)
Gene percent (%)
最相近的可培养细菌,登录号
Closest cultured bacteria, accession number
Pseudomonas sp. NBRC 107616, AB682645
Xanthomonadaceae bacterium JMT1939, GU479695
Haliangium tepidum strain SMP-10, NR_024781
Gemmatimonadetes bacterium KBS708, HM154525
Trachelomonas volvocinopsis var. spiralis strain UTEX1313, FJ719709
Bacillus thuringiensis strain JN110, KF150394
Bacillus altitudinis strain TBTK040502C, LC057688
Bacillus cereus strain LSRC146, JF772081
Bacillus sp. R-38416, FR682745
Lactococcus sp. MARL29, AY762105
Lactococcus raffinolactis strain MARL77, JN226416
Brochothrix thermosphacta strain KSN1, KC346293
Oceanobacillus sp. BSi20641, DU330342
Krasilnikovia cinnamomea strain 3-54, NR_041337
Actinoallomurus spadix strain NBRC 14099, NR_112730
Thermomonosporaceae bacterium YE4-D4-16-CH2, FN870346
Bacterium Ellin334, AF498716
Bacterium YC-ZSS-LKJ159, KP174573
Actinomycetales str. Ellin143, AF408985
相似度(%)
Similarity
(%)
99
97
89
87
97
99
99
98
99
99
99
99
98
95
98
97
95
95
95
系统分类
Phylogenetic
classification
δ-变形菌
Deltaproteobacteria
芽单胞菌门
Gemmatimonadetes
鞘脂杆菌纲
Sphingobacteriia
硬壁菌门
Firmicutes
放线菌门
Actinobacteria
C
0.20
0.16
0.01
0.00
0.00
78.91
2.56
1.36
1.09
3.20
0.38
0.55
0.53
0.00
0.79
0.46
0.39
0.16
0.16
W
0.00
0.13
0.68
0.73
0.61
0.00
0.03
0.00
0.00
0.00
0.00
0.00
0.00
0.69
0.00
0.03
0.00
0.00
0.00
培样本 barcode分别为“ACGACACGTA”和“ACT-
CACTAGC”)。扩增程序为：94℃预变性 2 min；94℃
变性 30 s，55℃退火 30 s，72℃延伸 30 s，25个循环；
72℃延伸 5 min；10℃保存。最后取 2 μL PCR扩增产
物，2%琼脂糖凝胶电泳检测。
3.3 PCR扩增产物的纯化、定量和测序
AxyPrepDNA凝胶回收试剂盒切胶回收 PCR扩增
产物，Tris-HCl洗脱；Promega公司的 QuantiFluorTM-ST
蓝色荧光定量系统(Promega公司)进行荧光定量和均一
化，以带有各自barcode的 533R为测序引物在上海美
吉生物医药科技有限公司 RocheGSFLX+平台测序。
3.4细菌类群比例分析
Seqcln软件(http://compbio.dfci.harvard.edu/tgi/s-
oftware)检测测序序列的接头，修剪末端。mothur软
件(Schloss et al., 2009)去除含模糊碱基和长度过短的
序列，后继续使用 mothur软件提取非重复序列，与
silva库 SSU111版的 16S/18S SSU核糖体序列数据
库进行比对 (Pruesse et al., 2012)，使用 UCHIME
基于 16S rRNA测序研究蒙桑根际细菌多样性
Rhizosphere Bacteria Diversity of Morus mongolica Revealed Based on 16S rRNA Sequencing
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基因组学与应用生物学
Genomics and Applied Biology
图 3细菌 16S rRNA的系统发育树
注:节点处的数值是 1 000次抽样分析支持的百分比,小于 50未列出
Figure 3 Phylogenetic tree based on the bacteria 16S rRNA sequence
Note: The number in the node is the percent of the bootstrap value obtained using 1 000 replicates, the number less than 50 are not listed
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(Edgar et al., 2011)检测去除 Chimeric 序列，后比对
对齐序列，计算序列间的非校正配对距离，最后使用
最远邻近法(Mothur)计算 97%相似程度下的 OTU聚
类情况。
3.5细菌丰度与多样性分析
Chao 指数是生态学上反应样品中物种总数的
指数，Shannon 指数反应样品中微生物的多样性，
Shannon指数值越大，表示样品多样性越高。本文将
细菌的种类作为数量测度，使用 Mothur指数分析软
件计算Chao和 Shannon指数，以及测序深度Coverage
指数。其中 Coverage指数计算公式为：C=1-n1/N(n1
为只含有 1条 OTU序列的数目，N为抽样中出现的
总序列数目。
3.6不同土壤细菌聚类分析
Moth ur 软件生成代表性序列，NCBI 网站
BLA-STN程序进行比对，得到与目的序列相似性最
高的序列。所有序列用 ClustalX 程序比对对齐，
MEGA 5.0软件(Tamura et al., 2011)重复 1 000次构建
NJ树，进行聚类分析。
作者贡献
杨金宏老师是本研究实验设计、实验研究和论文
撰写的执行人；孔卫青老师指导实验设计、完成数据分
析和论文的修改。全体作者都阅读并同意最终的文本。
致谢
本研究由陕西省青年科技新星项目(No.2013K-
JXX-96)和陕西省教育厅重点实验室科研计划项目
(No.14JS003)共同资助。
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