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维药牛舌草的显微及薄层鉴别



全 文 :其中,水蛭活血化瘀作用最强,具有破血逐瘀之效,大血藤养血活
血,化瘀通络,桂枝温经通络,地龙祛痰通络,黄芪益气,使气行则
血行,气化则瘀消。故全方具有良好的活血化瘀之效。线栓法制
备的脑缺血大鼠模型能有效模拟因动脉管径狭窄而导致的脑缺
血性病理改变,本研究以线栓法制备局灶性脑缺血大鼠为研究对
象,通过比较新、旧工艺制备的蛭龙活血通瘀胶囊对局灶性脑缺
血大鼠的血液流变学指标的影响,结果发现,与模型组相比,蛭龙
活血通瘀胶囊新、旧工艺高剂量组血浆粘度、红细胞聚集指数降
低,表明蛭龙活血通瘀胶囊可降低血浆粘度,使红细胞聚集率降
低,对脑缺血大鼠的血液流变学状态具有显著的改善作用,新、旧
制备工艺在改善脑缺血大鼠的血液流变学方面未见明显差异。
通过对正常 SD 大鼠肠系膜微循环及凝血功能的检测,结果表
明,蛭龙活血通瘀胶囊新、旧工艺均能够增加正常大鼠肠系膜微
循环 Flux(血流量)和 Speed(血流速度)。蛭龙活血通瘀胶囊新
工艺、旧工艺对正常大鼠内、外源性凝血系统无明显影响。提示
蛭龙活血通瘀胶囊能够促进局部组织微循环,改善血液流变学状
态,具有“活血化瘀”作用。新工艺与旧工艺比较,两者的活血化
瘀作用无明显改变,故认为,新工艺可以用于蛭龙活血通瘀胶囊
的制剂制备。
参考文献:
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国药鉴别
收稿日期:2015-07-09; 修订日期:2015-10-10
基金项目:国家自然科学基金项目(No. 81160387);
新疆生产建设兵团科技援疆项目(No. 2011AB033)
作者简介:陈奎奎(1990-),男(汉族),河南郸城人,石河子大学药学院在
读硕士研究生,主要从事中草药活性成分研究工作.
* 通讯作者简介:王 琪(1968-),男(汉族),新疆石河子人,石河子大学药
学院教授,博士学位,主要从事中草药的活性成分及质量标准的研究工作.
维药牛舌草的显微及薄层鉴别
陈奎奎1,陆海空1,兰 卫2,王 琪1*
(1.新疆特种植物药资源教育部重点实验室·石河子大学药学院,新疆 石河子 832002;
2.新疆名医名方与特色方剂学自治区重点实验室,新疆 乌鲁木齐 830011)
摘要:目的 对维吾尔特色药材牛舌草开展显微特征及薄层色谱的鉴别研究。方法 徒手切片法、粉末制片法、石蜡切片
法和薄层色谱法。结果 获得了药材根和茎的横切面显微特征、粉末显微特征及薄层色谱鉴别特征。结论 所得结果可
为今后完善和提高牛舌草药材及其复方的质量标准提供参考。
关键词:牛舌草; 显微鉴别; 薄层色谱鉴别
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2016. 02. 040
中图分类号:R291. 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2016)02-0369-02
Microscopic and TLC identification of Anchusa italica
CHEN Kui-kui1,LU Hai-kong1,LAN Wei2,WANG Qi1*
(1. Key Laboratory of Xinjiang Phytomedicine Resources of the State Ministry of Education College of Pharmacy
of Shihezi University,Shihezi,Xinjiang,832002,China;2. Xinjiang Key Laboratory of Famous Prescription
and Science of Formulas,Urumqi 830011,China)
Abstract:Objective To provide a scientific basis for identification of Anchusa italica. Methods Freehand,powder,paraffin
section and TLC were used. Results Microscopical identification (including roots and stems,and powder)and TLC have been
gotten. Conclusion The results can serve as evidence for identification of the herb.
Key words:Anchusa italica; Microscopical character; TLC
维药牛舌草源自紫草科植物意大利牛舌草 Anchusa italica
Retz.的干燥地上部分,维药名高孜万,是维吾尔医治疗心脑血管
疾病的常用药材之一。牛舌草药材具有生湿生热,调节异常黑胆
质、生湿补脑、祛寒补心、爽心悦志、润燥消炎、止咳平喘等功效。
主治干寒性或黑肥质性疾病,如平性脑虚,寒性心虚、心悸,抑郁
症,干性脑膜炎、肺炎及结核疾病,寒性咳嗽、感冒、气喘等。全草
经预试有皂苷,黄酮类,氨基酸,挥发油,黏液质,糖类和微量生物
碱反应[1,2]。在土耳其民间将此属多种植物用于抗炎症及镇
痛[3],化学成分的研究发现其主要组成为三萜皂苷、黄酮皂苷及
生物碱[4]。本课题组在对新疆特色植物药抗补体活性成分的筛
选中发现,牛舌草药材醇提物的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取
部位,在体外均表现出良好的补体抑制活性。同时,在对不同批
次牛舌草药材的鉴定中发现,茎秆和根在广泛流通使用的药材中
占有较大比例,而目前对药材只有叶的横切面鉴别特征。本文旨
在对药材进行全面的显微鉴别研究,并增加薄层色谱鉴别,为今
后完善和提高牛舌草药材及其复方的质量标准提供参考。
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2016 VOL. 27 NO. 2 时珍国医国药 2016 年第 27 卷第 2 期
1 仪器与材料
1. 1 仪器与试剂 仪器:粉碎机;ZEISS Primo Star 数码显微系
统;NIKON E200 显微镜描绘器;所用试剂均为国产分析纯。对照
品(5 -羟基 - 3',4',6,7 -四甲氧基黄酮)由课题组从牛舌草药材
中分离纯化得到。
1. 2 材料 实验用药材维药牛舌草于 2013 年 8 月,购置于新疆
百草堂药业集团,并由石河子大学药学院李鹏副教授鉴定并确定
学名为意大利牛舌草 Anchusa italica Retz.的干燥全草,凭证标本
(WQ - AI - 13 - 1)保存于石河子大学药学院中药系标本室。
2 方法与结果
2. 1 药材性状特征 叶多破碎上表面黄绿色,下表面淡黄绿色,
具众多的白色尖硬刺,及刺落后的白色斑痕。叶面湿润展开后,
先端钝圆,叶片加厚,全缘,形似牛舌。茎具棱有纵皱纹,表面淡
绿色,具白硬刺和刺落后凸起的白色斑点,质坚脆,断面黄白色,
多中空。花冠大,呈管状,深蓝色,微具 2 唇形;根较粗大,呈深棕
色,表面多纵棱。气微,味淡。气微芳香,味淡,具黏液性。
2. 2 显微特征 根和茎的横切面采用石蜡切片,番红 -固绿染
色,二甲苯透化,加拿大树胶封片。粉末采用水合氯醛透化,稀甘
油装片。显微镜下观察与绘图。
2. 2. 1 根横切面特征 木栓层由 3 ~ 5 层木栓细胞组成偶有碎
裂,栓内层占横切面的 1 /3 左右,细胞排列疏松;韧皮部稀疏分
布,形成层明显;木质部导管稀少近单列排列,木薄壁细胞排列疏
松,形成加多的裂隙;根中空形成明显的髓腔。见图 1。
1.木栓层 2. 韧皮部 3. 形成层 4.裂隙 5. 木质部 6. 髓腔
图 1 意大利牛舌草根横切面图(90 ×)
2. 2. 2 茎横切面特征 表皮由 1 列排列紧密的细胞组成,外侧有
明显的角质层;皮层由 5 ~ 8 列类圆形细胞组成,有细胞间隙;韧
皮部狭窄;形成层不明显;木质部宽广,呈放射状排列;导管数个
成群或单个散在;髓部薄壁细胞类圆形,由大逐渐减小直至破裂,
在中央形成髓腔,髓部薄壁细胞中含有较多粘液质。见图 2。
1.表皮层 2. 皮层 3. 韧皮部 4.形成层
5. 木质部 6. 环髓细胞 7.髓腔
图 2 意大利牛舌草茎横切面图(90 ×)
2. 2. 3 全草粉末特征 粉末棕褐色。非腺毛多为单个细胞组成,
壁厚,多有狭长空腔,壁上多散在疣状突起,长 120 ~ 850μm;草酸
钙方晶较多见,形状不规则,大小不一;草酸钙簇晶,有棱角,多短
钝;花粉粒棕黄色,圆球形或椭圆形,壁上密布疣状突起,直径约
25μm;导管较多见,且多为孔纹或网纹导管,直径约 21 ~ 65μm;
木纤维壁厚,多成束存在;木栓细胞淡黄色,表面观呈多角形和类
方形。见图 3。
1. 非腺毛 2. 草酸钙晶体 3. 花粉粒
4. 木纤维束 5. 导管 6. 木栓细胞
图 3 意大利牛舌草全草粉末特征图(240 ×)
2. 3 薄层色谱鉴别 称取牛舌草药材粉末 2 g,置于具塞锥形瓶
中,加入 15 ml甲醇超声(300W,40kHz)30 min,过滤,滤液为样品
溶液待用。另取 5 -羟基 - 3',4',6,7 -四甲氧基黄酮对照品,加
入无水乙醇制成 1 mg /ml 溶液作用对照品溶液。照薄层色谱法
(2010 年版 <《中国药典》附录ⅥB)试验,吸取上述溶液各 2μl,
分别点于同一硅胶 G薄层板上,以石油醚 -乙酸乙酯 -丙酮(4
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时珍国医国药 2016 年第 27 卷第 2 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2016 VOL. 27 NO. 2
∶ 1∶ 1)为展开剂,展开,取出,晾干,紫外灯下检视,后喷以 1%
AlCl3 甲醇溶液显色。结果样品与对照品在相同 Rf位置处,紫外
灯 254 nm下都显示暗斑,喷显色剂后都有鲜黄色斑点。同时,样
品在上下还各有一斑点。见图 4。
S1 对照品(5 -羟基 - 3',4',6,7 -四甲氧基黄酮)
S2 意大利牛舌草药材甲醇提取液
图 4 意大利牛舌草薄层色谱图
3 讨论
由于在广泛流通使用的牛舌草药材中茎秆和根占有较大比
例,本项研究提供了二者的显微鉴别特征,为对药材更加全面和
准确的鉴定奠定了基础。
文献报道[5,6],5 -羟基 - 3',4',6,7 -四甲氧基黄酮已从多种天然
药物中分离得到,并显示出对人肺癌 A549、白血病和抗结肠癌细
胞株的抑制作用以及抗炎和对革兰氏阳性和阴性菌的拮抗作用。
研究结果中获得了以其为对照品的维药牛舌草薄层色谱鉴别特
征。为今后完善和提高牛舌草药材及其复方的质量标准提供了
更为可靠的依据。
参考文献:
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收稿日期:2015-06-08; 修订日期:2015-11-18
基金项目:福建省食品安全地方标准制定项目(No. 2014 - 6)
作者简介:卢端萍(1978-),女(汉族),福建顺昌人,福建省食品药品质量
检验研究院主管药师,硕士学位,主要从事保健食品与化妆品检验工作.
* 通讯作者简介:王 勇(1965-),男(汉族),福建福州人,福建省食品药
品质量检验研究院主任药师,硕士学位,主要从事中药有效成分及质量标
准研究工作.
不同产地燕窝中唾液酸含量的高效液相色谱法测定
卢端萍,程佳华,陈 硕,王 勇* ,简育莹
(福建省食品药品质量检验研究院,福建 福州 350001)
摘要:目的 建立燕窝中唾液酸的含量测定方法。方法 燕窝中的唾液酸在 0. 5%磷酸溶液中水解 30min后,以邻苯二胺
(10mg·ml -1)为衍生剂,60℃水浴中衍生 40min。采用 Agilent ZORBAX SB - Aq柱(4. 6mm × 250mm,5μm);流动相为乙
腈 - 0. 1%磷酸溶液(10∶ 90),流速为 1 ml·min -1;进样量:20μl;检测波长:228nm;柱温:30℃。结果 唾液酸在19. 12 ~
382. 4μg·ml -1范围内线性良好(r = 0. 9999);平均回收率为 95. 7% ~ 98. 4%;RSD为 0. 8% ~ 2. 2%(n = 9)。结论 实验
方法具有可操作性强、灵敏度高、重复性好等特点,可用于燕窝中唾液酸的含量测定,同时也为真假燕窝的鉴别提供了参
考依据。
关键词:燕窝; 唾液酸; 高效液相色谱
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2016. 02. 041
中图分类号:R284. 1 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2016)02-0371-03
燕窝为雨燕科金丝燕属动物金丝燕的唾液与绒羽等混合凝
结所筑成的巢窝;燕窝中含有蛋白质、氨基己糖及类似黏蛋白、
钙、磷、钾等矿物质[1]。具有养阴润燥、益气补中、化痰止咳之功
效。燕窝中的粘蛋白具有抗病毒活性[2,3],粘蛋白中富含唾液酸
糖蛋白[4]。燕窝作为名贵滋补品,市场上燕窝假冒伪劣情况较
严重,但目前燕窝没有统一的质量控制标准,燕窝的质量缺乏有
效监管手段。随着燕窝的来源日趋复杂,制伪技术不断提高,需
要制定出燕窝的质量标准,解决燕窝市场假冒伪劣的混乱情况。
唾液酸糖蛋白作为燕窝的活性成分,在酸性或碱性条件下可以水
解出唾液酸,因此唾液酸可作为燕窝的质控指标,目前唾液酸的
测定方法有离子色谱法[5]、高效液相色谱法[6,7]、紫外分光光度
法[8]等。本文采用 HPLC法,将燕窝中唾液酸糖蛋白酸水解成唾
液酸后,以邻苯二胺为衍生剂,测定了不同产地燕窝及部分伪品
和掺伪品中唾液酸的含量。本法具有可操作性强、定量准确、灵
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2016 VOL. 27 NO. 2 时珍国医国药 2016 年第 27 卷第 2 期