全 文 ：物体积小 、不吸潮 、容易制成外形美观的各种剂型)在生产研究
中越来越被广泛地使用 ,它是对提取工艺影响最大 、带动面最广
的技术之一 [ 8] 。
参考文献:
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收稿日期:2007-06-18;　修订日期:2007-10-20
基金项目:国家重点科学项目—维吾尔医内科学心血管学科的建设项目
(No.国中医药发 [ 2004] 14号);
江西中医学院科研基金课题(No.200605号)
作者简介:木合塔尔·奴尔买买提(1970-),男(维吾尔族),新疆策勒人,现任
新疆维吾尔医学高等专科学校副教授 ,学士学位,主要从事维吾尔药质量控制
工作.
＊通讯作者简介:杨武亮(1965-), 男(汉族),江西南昌人 , 现任江西中医
学院中药学教授 ,学士学位 ,主要从事中药质量控制工作.
维吾尔药牛舌草中总黄酮提取工艺的研究
木合塔尔·奴尔买买提1 , 杨武亮 2＊ , 吐尔洪·艾买尔 1 ,
温倩·纳斯尔 1 , 余宝金2 , 买买提·奴尔艾合买提 1
(1.新疆维吾尔医学高等专科学校 ,新疆 和田　848000;
2.江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室 ,江西 南昌　330004)
摘要:目的 研究维吾尔药牛舌草中总黄酮的最佳提取工艺。 方法 采用正交实验确定各因素的影响大小 ,确定维吾尔
药牛舌草中总黄酮的最佳提取条件 ,通过紫外分光光度法测定总黄酮含量。 结果 乙醇浓度对维吾尔药牛舌草中总黄酮
的提取影响作用最大 , 牛舌草中总黄酮的最佳提取工艺为:乙醇 75%;料液比 1∶6;温度 90℃ ;提取 2次 , 1.5 h/次 。结
论 该研究可为牛舌草总黄酮工业化提取提供理论依据。
关键词:牛舌草;　总黄酮;　正交实验;　提取工艺
中图分类号:R291.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2008)06-1303-02
StudyonExtractionProcessofTotalFlavonoidsinAnchusaitalicaRetiz
MUHTARNurma-mmat1 ,YANGWu-liang2＊ , TURGUNAmar1 , GUNQAMNa-sir1 ,YUBao-jin2 ,MAMATNurah-mat1
(1.XinjiangWeiwuerMedicalColege, Hetian, Xinjiang848000, China;2.TheKeyLabforModernTraditional
ChineseMedicalPreparationofMinistryofEducationinJiangxiColegeofTCM, Nanchang, Jiangxi330004,
China)
Abstract:ObjectiveTooptimizetheextractionprocessoftotalflavonoidsinAnchusaitalicaRetiz.MethodsThecontentofto-talflavonoidswasdeterminedbyUVspectrophotometer.Theinfluenceofeachfactorwasmeasuredbyorthogonalexperiments.Re-
sultsTheconcentrationofethanolhadthegreatestefectontheextractionoftotalflavonoids.Theoptimalconditionwasasfol-
lows:75% ethano1, 90℃, 1∶6(W/V)andextracting2times(1.5heachtime).ConclusionThisstudyprovidesthetheorybasis
fortheindustrialproduction.
Keywords:AnchusaitalicaRetiz;　Totalflavonoids;　Orthogonalexperiment;　Extractionprocess
　　维吾尔药材牛舌草为紫草科植物意大利牛舌草 Anchusaital-
icaRetiz.或琉璃苣 BorageofficinalesL.的地上部分 , 维吾尔医治
疗心脑血管疾病的常用药材之一 ,具有生湿生热 、调节异常黑胆
质 、生湿补脑 、祛寒补心 、爽心悦智 、润燥消炎 、止咳平喘等功
效 [ 1] 。意大利牛舌草经预试内含有黄酮等多种化合物 , 但目前
未见深入研究的报道。黄酮类化合物许多研究已表明生物类黄
酮具有多种生物活性 [ 2] , 除有抗菌 、消炎 、抗突变 、降压 、清热解
毒 、镇静 、利尿等作用外 ,在抗氧化 、抗癌 、防癌 、抑制脂肪酶等方
面也有显著效果 [ 3] 。由于黄酮类化合物的这些生物活性使得对
它的研究进入了一个新的阶段 , 掀起了黄酮类化合物的研究 、开
发及利用热潮。
黄酮类化合物的提取方法一般有水煎法 [ 4] 、碱提酸沉法和
有机溶剂提取法。水煎法和碱提酸沉法会带入大量水溶性杂质 ,
对以后的纯化和分离工作带来诸多不便。由于有机溶剂的提取
方法具有工艺简单 、效率高和较经济等优点 [ 5] , 本文对用有机溶
剂提取意大利牛舌草中黄酮类化合物的工艺进行了研究 ,旨在为
其工业化提取提供理论依据。
1　器材
1.1　仪器 111-型二两装高速中药粉碎机(浙江瑞安环球药械
厂);SHB-III循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公
司);旋转蒸发器(上海申生科技有限公司);U-3000紫外分光
光度计(日本 HITACHI公司)。
1.2　试药 意大利牛舌草 , 购自新疆和田地区维吾尔药材市场 ,
经新疆维吾尔自治区药物研究所标本室张彦福研究员鉴定为意
大利牛舌草 (AnchusaitalicaRetiz.), 粉碎后过 20 目筛备用。
95%医用乙醇;芦丁标准品(中国药品生物制品鉴定所 , 含量测
定用 , 批号 0080-9705);亚硝酸钠 、硝酸铝 、氢氧化钠 、乙醇均为
分析纯 。
2　方法与结果
2.1　标准曲线的制备 准确称取芦丁标准品 10 mg, 置 50 ml容
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.6 时珍国医国药 2008年第 19卷第 6期
量瓶中 , 加 70%的乙醇溶解并稀释到刻度 ,配制成浓度为 0.2 mg
· ml-1的芦丁标准液。精密量取配制好的芦丁标准液 0, 0.2,
0.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0 ml, 分别装入 10 ml容量瓶中 ,加 5%亚硝
酸钠 0.4 ml, 放置 6min后加入 10%硝酸铝溶液 0.4 ml, 放置 6
min,再加入 4%的氢氧化钠溶液 4 ml, 加水至刻度 , 摇匀 ,放置 15
min后在 500 nm波长处进行比色测定 , 以吸光度(A)为纵坐标 、
芦丁标准品浓度(C)为横坐标作线性回归 , 得方程为 A=9.440 5
C-0.009 4 (r=0.999 7)。
2.2　提取条件的研究及结果
2.2.1　提取方法及溶剂的确定 取牛舌草粉碎后过 20目筛 ,备
用。在对常用的溶剂提取法(水提法和醇提法)进行对比实验后
发现 , 牛舌草含大量黏液质用水提取有一定的困难 , 采用乙醇提
取法提去牛舌草中的总黄酮效果较好。
2.2.2　温浸法正交实验设计 为了进一步找出乙醇提取的最佳
试验条件 , 将乙醇浓度(A)、提取温度(B)、提取次数(C)、料液比
(质量比)(D)、提取时间(E)5个因素进行正交实验设计。实验
因素水平见表 1。
表 1　实验因素水平
水平 A乙醇浓度(%)
B
提取温度T/℃
C
提取次数
D
料液比
E
提取 t/h
1 55 75 1 1∶6 0.5
2 65 80 2 1∶8 1
3 75 85 3 1∶10 1.5
4 85 90 4 1∶12 2
采用 L16(45)正交表进行实验 , 以总黄酮含量为考察指标。
具体步骤如下:精密量取提取液 0.5 ml, 置于 10 ml容量瓶中按
标准曲线的制备方法测定吸光度 , 通过标准曲线 , 得其含量。实
验结果见表 2 ～ 3。
通过对实验误差的计算 ,并以实验误差去检验各因素的显著
性 , 最后经方差分析可知 ,影响总黄酮提取的因素为 A>C>B>
E>D,即乙醇浓度 >提取次数 >温度 >提取时间 >料液比。其
中 , A因素对实验均有显著影响 , B, C, D, E因素对考察指标无显
著性影响 , 故确定最佳提取工艺为 A3B4C2D1E3 , 即乙醇浓度
75%、温度 90℃、提取次数为 2次 、料液比为 1∶6、提取时间为
1.5 h为优选提取工艺。
3　讨论
由表 2 ～ 3可知 ,首先 , 乙醇浓度对牛舌草中总黄酮提取率影
响最大 , 乙醇浓度高 , 极性小的黄酮类化合物易得;乙醇浓度较
低 , 极性大的黄酮类化合物易得 , 故选取 75%乙醇为最优。其
次 , 提取温度对提取的影响仅次于乙醇浓度 , 温度升高总黄酮的
含量随之增加 , 但达到一定程度即增速缓慢 , 且消耗能源。由于
本试验中使用的料液比值较大 ,提取很充分 , 所以其影响力较小。
一般来讲 , 增加液料比有利于牛舌草中黄酮的提取 , 但液料比过
大不仅增加乙醇消耗且回收难度大。
表 2　正交实验设计和结果
实验号 因素A B C D E
黄酮含量
(%)
1 55 75 1 1∶6 0.5 1.19
2 55 80 2 1∶8 1 1.96
3 55 85 3 1∶10 1.5 3.23
4 55 90 4 1∶12 2 3.62
5 65 75 2 1∶10 2 5.07
6 65 80 1 1∶12 1.5 3.86
7 65 85 4 1∶6 1 5.95
8 65 90 3 1∶8 0.5 4.94
9 75 75 3 1∶12 1 6.62
10 75 80 4 1∶10 0.5 6.25
11 75 85 1 1∶8 2 5.07
12 75 90 2 1∶6 1.5 6.86
13 85 75 4 1∶8 1.5 6.25
14 85 80 3 1∶6 2 5.74
15 85 85 2 1∶12 0.5 5.54
16 85 90 1 1∶10 1 5.32
均值 1 2.500 4.782 3.860 4.933 4.480
均值 2 4.955 4.450 4.857 4.555 4.963
均值 3 6.200 4.947 5.130 4.968 5.050
均值 4 5.710 5.185 5.518 4.910 4.873
极差 3.700 0.735 1.658 0.413 0.570
表 3　方差分析结果
因素 偏差平方和 自由度 F比 F临界值 显著性
乙醇浓度 32.399 3 3.974 3.290 ＊
温度 1.136 3 0.139 3.290
提取次数 6.021 3 0.739 3.290
料液比 0.446 3 0.055 3.290
提取时间 0.760 3 0.093 3.290
误差 40.76 15
本实验采用正交实验的方法对牛舌草中总黄酮的提取条件
进行了优选 ,正交实验方差分析表明 , 影响总黄酮提取的因素为:
乙醇浓度 >提取次数 >温度 >提取时间 >料液比。确定最佳提
取工艺为乙醇浓度 75%、温度 90℃、提取次数为 2次 、料液比为 1
∶6,提取时间为 1.5 h。优选出的提取工艺结果重复性好 , 回收
率高 , 操作简单 , 结果可靠。这为牛舌草中总黄酮的进一步研发
提供了很好的参考。
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时珍国医国药 2008年第 19卷第 6期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2008VOL.19NO.6