全 文 ：药 物 研 究
The medicine study
作者简介:何云 (1990 －)，女，汉族，在读硕士，研究方向:中药制药工程与技术;E-mail:heyun1059947332@ 163. com
通信作者:王庆华。
红葱提取物对酪氨酸酶的抑制作用
何 云1 王庆华2* 王晓艺1 王红星3
1. 广东药学院中药学院，广东 广州 510006;2. 广东药学院基础学院，广东 广州 510006;
3. 广州白云华南生物科技有限公司，广东 广州 510545
【摘 要】 研究红葱不同溶剂提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用。方法:通过 95%乙醇、60%乙醇和水等三种不同的提取方式获得
红葱提取物，采用 L －多巴速率氧化法，研究提取物对蘑菇酪氨酸酶催化 L －多巴氧化活性的影响。结果:95%乙醇、60%乙醇和水的提取
物对酪氨酸酶酶抑制作用的 IC50 分别约为 5. 76、3. 04 和 5. 81 mg /ml。结论:上述三种提取物均对蘑菇酪氨酸酶有一定的抑制作用，红葱
60%醇提物对酪氨酸酶抑制作用最强。
【关键词】 红葱;酪氨酸酶;抑制作用
【中图分类号】Ｒ285 【文献标志码】A 【文章编号】1007 － 8517 (2014)10 － 0013 － 02
Inhibition of Eleutherine plicata extract on tyrosinase
HE Yun1，WANG Qing-hua2* ，WANG Xiao-yi1，WANG Hong-xing3
1. Pharmaceutical College of Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，China;
2. The School of Basic Courses of Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，China;
3. Guangzhou Baiyun South China Bio － Technology Co．，Ltd，Guangzhou 510545，China
Abstract:To study the inhibition of Eleutherine plicata extract on the activity of tyrosinase． Methods:Three extracts of Eleuther-
ine plicata were used to investigate the inhibition on the activity of tyrosinase by measuring the oxidation rate of L － dopa． Ｒesults:The
IC50 of its 60% ethanol extract，95% ethanol extract and water extract were about 5． 60，3． 04 and 5． 85mg /ml，respectively．
Conclusion:These three extracts were on a certain inhibition of tyrosinase，and the 60% ethanol extract had the highest inhibitory ac-
tivity to tyrosinase．
Key words:Eleutherine plicata;tyrosinase;inhibition
酪氨酸酶 (Tyrosinase，EC1． 14． 18． 1)是一种多酚
氧化酶［1，2］，广泛存在于动植物和人体内，是动植物体酶
促褐变、体内色素合成的关键酶［1，3］。它能将酪氨酸羟化，
产生邻位二羟基苯丙氨酸 (L －多巴)，然后再将多巴氧化
成多巴醌，进而产生黑色素。因此，其代谢产物黑色素决
定皮肤颜色深浅，其异常过量表达可导致人体的色素沉着
性疾病，如雀斑、黄褐斑、老年斑等，因此酪氨酸酶活性
是化妆品行业皮肤美白和治疗皮肤色素沉着性疾病的药物
作用研究靶点。近年来，酪氨酸酶抑制剂的研究非常活跃，
有关植物提取物对酪氨酸酶的抑制作用也越来越受到研究
人员的重视。
红葱为鸢尾科红葱属红葱 Eleutherine americana Merr． et
K． Heyne ，以全草、鳞茎入药。原产于西印度群岛，我国
广西、云南等地有分布，为民间药用植物［4］。 《中华本
草》［5］记载，红葱有清热凉血、活血通经、消肿解毒的作
用，主治吐血、咯血、体虚乏力，头晕心悸，关节痛，跌
打肿痛等。但目前对该药物的药理作用研究较少，本文报
道了不同红葱提取方式对酪氨酸酶的影响，较好的阐明了
红葱对酪氨酸酶的抑制作用和机制，可为进一步开发和临
床用药提供理论基础。
1 实验部分
1. 1 仪器与材料 752 紫外可见分光光度计，上海菁华科
技仪器有限公司;FA2104 型电子天平，上海舜宇恒平科学
仪器有限公司;HH － 1 型电子恒温水浴锅，金坛市杰瑞尔
电器有限公司。红葱，广州白云华南生物科技有限公司云
南种植基地提供;蘑菇酪氨酸酶 (845U /mg)，worthington
公司;L －多巴，广州菲博生物科技有限公司;其他试剂均
为国产分析纯。
1. 2 红葱提取物的制备 鲜红葱，烘干，粉碎后取 1000 g，
加入 8 倍量的 95% (V/V)的乙醇和 60%以及水分别提取
2 次，每次 1 h。提取液过滤，合并滤液，滤液回收乙醇，
得浸膏。在 60℃下将浸膏浓缩到相对密度为 1. 30 ～ 1. 40 的
稠膏，在 60 ～ 70℃， － 0. 08 mpa的条件下真空干燥，粉碎，
即得红葱提取物。
1. 3 对酪氨酸酶活力的抑制作用 在 pH6. 8，25 mmol /L 磷
酸盐缓冲液体系中，以 L －多巴为底物，将 0. 2 ml 不同质
量浓度的红葱提取物与 0. 2 ml酪氨酸酶溶液于 30℃预混合
10 min后，加入 1 ml30℃L －多巴开始反应，立即放入分光
光度计中在 475 nm处测定吸光值，共测定 3 次，根据以下
公式计算红葱提取物对酪氨酸酶二酚酶活性的抑制率:
酶抑制率 = (1 －
A3 － A4
A1 － A2
) × 100%
式中 A1 为含 L － 多巴、酪氨酸酶的测活体系时 4
min 时的吸光值;A2 为含酪氨酸酶的测活体系 4 min
时的吸光值;A3 为含 L － 多巴、酪氨酸酶、红葱提取
物的测活体系 4 min 时的吸光值;A4 为酪氨酸酶、红
葱提取物的测活体系 4 min 时的吸光值;式中:A1、
A2、A3、A4 分别为表 1 中 1、2、3、4 号反应液的吸
光度值。
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中国民族民间医药
Chinese journal of ethnomedicine and ethnopharmacy
药 物 研 究
The medicine study
表 1 反应液组成
反应液组成
反应液体积 (ml)
1 2 3 4
酪氨酸酶 0. 2 0. 2 0. 2 0. 2
提取物 － － 0. 2 0. 2
PBS (pH 6. 8) 3. 6 4. 8 3. 6 4. 6
L －多巴 1. 0 － 1. 0 －
总体积 5. 0 5. 0 5. 0 5. 0
2 结果与讨论
以 L －多巴为底物，固定酪氨酸酶和 L －多巴的质量浓
度分别为 2. 75 × 10 －3 mg /ml 和 2 mg /ml，以熟知的酪氨酸酶
抑制剂曲酸和维生素 C为阳性对照，考察 95%、60%乙醇提
取物和水提取物对酪氨酸酶二酚酶活性的影响。由图 1 可
见，三种红葱提取物对酪氨酸酶二酚酶均具有抑制作用，且
抑制率随着红葱提取物浓度的增加而增大。95%乙醇提取
物、60%乙醇提取物和水提取物的 IC50 分别约为 5. 76 mg /
ml、3. 04 mg /ml和 5. 81 mg /ml。以 60%乙醇提取物对蘑菇酪
氨酸酶的抑制作用最为显著，其质量浓度为 6. 4 mg /ml 时，
对酪氨酸酶二酚酶活性的抑制率可达 79. 1%。在本酶活性测
定体系中，阳性对照样品曲酸和维生素 C 的 IC50 值分别约
为 3. 84 ×10 －3 mg /ml和 20. 2 ×10 －3 mg /ml (图 2、3)。
目前多巴色素氧化法广泛用于美白成分的筛选。曲酸
和维生素 C是熟知的酪氨酸酶抑制剂，实验中以此作为阳
性对照，结果显示本测试体系的结果与文献一致［6］。实验
中红葱 60%乙醇提取物对酪氨酸酶的抑制效果最好，优于
95%醇提和水提物，说明红葱中酪氨酸酶抑制剂成分在
60%乙醇的溶解度较大。研究发现红葱含萘酚类、萘醌类
和蒽醌类化学成分［2，7］，此类物质通常具有酪氨酸酶活性抑
制作用［8］。红葱 60%乙醇提取物的 IC50 约为 3. 04 mg /ml，
相较于文献报道的一些具有美白作用的药用植物提取物要
低得多，如白芨水提取物 (IC50 28 mg /ml)［9］，地榆多酚
70%丙酮提取物 (IC50 14. 5 mg /ml)［10］、银杏叶 50%乙醇
提取物 (IC50 6. 59 mg /ml)［11］、毛环竹 95% 乙醇提取物
(IC50 7. 88 mg /ml)、翠竹 95%乙醇提取物 IC50 6. 83 mg /
ml)［12］，显示了红葱良好的美白功效潜力。
3 结论
实验结果表明，红葱提取物可有效抑制酪氨酸酶二酚
酶活性，60%乙醇提取物对酪氨酸酶的抑制效果优于 95%
醇提取物和水提取物，IC50 值约为 3. 04 mg /ml。实验为今
后红葱这一民间药材在食品和化妆品等领域进一步开发利
用提供一定参考。
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(收稿日期:2014. 02. 24)
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