全 文 ： ［收稿日期］２０１５－１２－２７
［基金项目］安徽省高等学校自然科学重点课题 （ＫＪ２０１５Ａ３５８）；亳州市中药科技创新团队 （ＢＺ２０１３ｚｚｂ０６）。
［作者简介］王庆 （１９８２－），女，讲师，硕士，主要从事天然药物活性成分分离纯化研究工作；通信作者：薛天乐，８４１８１７１３＠
ｑｑ．ｃｏｍ。
［引著格式］王庆，薛天乐，叶敏 ．谷精草总黄酮抑制亚硝化反应活性研究 ［Ｊ］．长江大学学报 （自科版），２０１６，１３ （１２）：８２～８４．
谷精草总黄酮抑制亚硝化反应活性研究
王庆，薛天乐 （亳州职业技术学院药学院，安徽 亳州２３６８００）
叶敏 （贵州工程应用技术学院，贵州 毕节５５１７００）
［摘要］目的：观察谷精草总黄酮抑制亚硝化反应活性。方法：采用超声提取法对谷精草总黄酮进行提取，
通过分光光度法测定谷精草总黄酮抑制亚硝化反应活性。结果：当谷精草总黄酮浓度达到１６．５μｇ／ｍＬ时，
对亚硝胺合成的阻断率为８０．９％，当谷精草总黄酮浓度达到１３．５μｇ／ｍＬ时，对亚硝酸钠清除率最大，达到
７３．２％。结论：谷精草总黄酮具有较强的抑制亚硝化反应活性。
［关键词］谷精草；总黄酮；抑制；亚硝化反应
［中图分类号］Ｒ９６５ ［文献标志码］Ａ ［文章编号］１６７３－１４０９ （２０１６）１２－００８２－０３
恶性肿瘤严重威胁着人类的健康，亚硝胺类化合物是一类强致癌原，能引起包括胃癌、肝癌在内的
多种器官的肿瘤 ，减少或阻断亚硝胺的生成是预防恶性肿瘤的重要措施之一［１］。有研究表明，从植物
中提取的某些黄酮类化合物对亚硝化反应有抑制作用，因此成为抗癌新药研究的一个热点［２］。
谷精草是谷精草科 （Ｅｒｉｏｃａｕｌａｃｅａｅ）植物谷精草Ｅｒｉｏｃａｕｌｏｎ ｂｕｅｒｇｅｒｉａｎｕｍ Ｋｏｅｒｎ的干燥带花茎的头
状花序，在我国分布范围较广，江苏、安徽、浙江、江西、福建等省区均有种植［３］。谷精草味辛、甘，
性平，具有祛风散热、明目退翳的功效［４］。谷精草主要含有黄酮及其苷类、有机酸、植物甾醇等化学成
分［５］，其中黄酮类化学成分含量较高，本实验对谷精草总黄酮提取物抑制亚硝化反应活性进行了研究，
希望为谷精草的开发提供依据。
１ 材料与仪器
１．１ 材料
谷精草 （购于安徽省毫州市三义堂药业有限公司，经安徽中医药大学王效山教授鉴定为谷精草科
（Ｅｒｉｏｃａｕｌａｃｅａｅ）植物谷精草Ｅｒｉｏｃａｕｌｏｎ ｂｕｅｒｇｅｒｉａｎｕｍ Ｋｏｅｒｎ的干燥带花茎的头状花序）、芦丁标准品
（购于中国药品生物制品检定所）、无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、硫酸亚铁、柠檬酸、磷酸二氢钠、对
氨基苯磺酸、ａ－萘胺、Ｎ－１－萘乙二胺盐酸盐等 （均为分析纯）。
１．２ 仪器
圆盘粉碎机、旋转蒸发仪、循环水式真空泵、ＨＳ－３１２０超声波清洗机、ＵＶ－９２００型紫外可见分光
光度计等。
２ 方法与结果
２．１ 芦丁标准曲线绘制
精称５０．０ｍｇ芦丁标准品，加入６０％的乙醇溶解并定容到２５０ｍＬ容量瓶中。精确吸取０．０、１．０、
２．０、３．０、４．０、５．０、６．０ｍＬ芦丁标准溶液于２５ｍＬ容量瓶中，加入０．０５ｇ／ｍＬ亚硝酸钠溶液０．２ｍＬ，
摇匀后放置６ｍｉｎ，加入０．１ｇ／ｍＬ硝酸铝溶液０．２ｍＬ，摇匀后放置６ｍｉｎ，加入１．０ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠溶
·２８·
长江大学学报 （自科版） ２０１６年４月 第１３卷 第１２期 （医学）
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｙａｎｇｔｚｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ） Ａｐｒ．２０１６，Ｖｏｌ．１３Ｎｏ．１２
DOI:10.16772/j.cnki.1673-1409.2016.12.033
液２．０ｍＬ，再用６０％乙醇溶液定容至刻度，摇匀，放置１５ｍｉｎ。在波长为５１０ｎｍ处测定吸光度，并以
芦丁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作图，绘制标准曲线［６］。
２．２ 谷精草总黄酮的提取
图１ 芦丁标准曲线
将谷精草烘干后粉碎成粗粉，取谷精草粗粉若
干，石油醚回流脱脂６ｈ，晾干备用。精确称取脱脂
晾干后的谷精草粗粉４．０６ｇ置于平底烧瓶中，加入
６０％乙醇１００ｍＬ，超声提取２５ｍｉｎ，超声温度６０℃，
将提取液进行抽滤、洗涤，减压浓缩，定容到５０ｍＬ
容量瓶中，再从中精密吸取５ｍＬ溶液定容到２５０ｍＬ
容量瓶中，测量吸光度 （Ａ＝０．３９）［６］。
２．３ 谷精草提取液总黄酮浓度的含量测定
将吸光度Ａ＝０．３９带入线性回归方程中，计算
出谷精草提取液中黄酮的浓度 （２５０ｍＬ容量瓶）为
０．０３７ｍｇ／ｍＬ。
２．４ 谷精草总黄酮提取液对亚硝胺阻断作用
分别取ｐＨ３．０柠檬酸－磷酸氢二钠缓冲溶液１０．０ｍＬ置于１２只２５ｍＬ比色管中，分别加入１．０ｍｍｏｌ／Ｌ
ＮａＮＯ２１．０ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ／Ｌ二甲胺１．０ｍＬ，然后分别加入谷精草总黄酮提取液０．０、１．０、２．０、３．０、
４．０、５．０、６．０、７．０、８．０、９．０、１０．０、１１．０ｍＬ，将反应体系分别用蒸馏水稀释至刻度，在３７℃水浴
下恒温１ｈ后，用移液管分别吸取１．０ｍＬ该溶液加到７ｃｍ２ 的培养皿中，分别加入０．５％的Ｎａ２ＣＯ３ 溶液
０．５ｍＬ，在２５４ｎｍ紫外灯照射１５ｍｉｎ，取出后分别加１％对氨基苯磺酸溶液１．５ｍＬ、０．１％ａ－萘胺１．５ｍＬ，
加蒸馏０．５ｍＬ，摇匀放置１５ｍｉｎ后，用分光光度计在５２５ｎｍ处分别测吸光度值，计算阻断率［７～９］：
阻断率＝［（Ａ０－ＡＸ）÷Ａ０］×１００％ （１）
式中，Ａ０ 为未加提取液的比色管中ＮａＮＯ２ 的吸光度；ＡＸ 为加提取液的比色管中ＮａＮＯ２ 的吸光度。
结果如表１、图２。由表１和图２可以看出，谷精草总黄酮提取液对亚硝胺的阻断活性较强，随着
浓度的上升，其对亚硝胺的阻断率呈现明显的量效关系，当总黄酮提取液浓度达到１６．５μｇ／ｍＬ时，阻
断率为８０．９％。
图２ 谷精草总黄酮对亚硝胺的阻断结果
表１ 谷精草总黄酮对亚硝胺的阻断结果
加入提取液量／ｍＬ Ａ０ ＡＸ 阻断率／％
１ ０．２２５ ０．１９７ １２．４
２ ０．２２５ ０．１７９ ２０．４
３ ０．２２５ ０．１４４ ３６．０
４ ０．２２５ ０．１１２ ５０．２
５ ０．２２５ ０．０８８ ６０．９
６ ０．２２５ ０．０６９ ６９．３
７ ０．２２５ ０．０５７ ７４．７
８ ０．２２５ ０．０５１ ７７．３
９ ０．２２５ ０．０４６ ７９．６
１０ ０．２２５ ０．０４４ ８０．４
１１ ０．２２５ ０．０４３ ８０．９
２．５ 谷精草总黄酮提取液对亚硝酸钠清除作用
分别吸取谷精草总黄酮提取液０．０、１．０、２．０、３．０、４．０、５．０、６．０、７．０、８．０、９．０、１０．０、
１１．０ｍＬ于１２只２５ｍＬ比色管中，再分别加入１０．０ｍＬ柠檬酸－磷酸氢二钠缓冲溶 （ｐＨ＝３．０）、５０ｍｇ／Ｌ
ＮａＮＯ２溶液１．０ｍＬ，在３７℃水浴下恒温１ｈ。分别加入０．４％的对氨基苯磺酸溶液２．０ｍＬ，摇匀，５ｍｉｎ
后加入０．２％的Ｎ－１－萘乙二胺盐酸盐溶液１．０ｍＬ，分别用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置１５ｍｉｎ后用
·３８·第１３卷 第１２期 王庆 等：谷精草总黄酮抑制亚硝化反应活性研究
分光光度计在５４０ｎｍ处测吸光度值，计算清除率［７～９］：
清除率＝［（Ａ０－ＡＸ）÷Ａ０］×１００％ （２）
式中，Ａ０ 为未加提取液的比色管中ＮａＮＯ２ 的吸光度；ＡＸ 为加提取液的比色管中ＮａＮＯ２ 的吸光度。
结果见表２、图３。由表２和图３可知，谷精草总黄酮提取液浓度达到１３．５μｇ／ｍＬ时对亚硝酸钠清
除率最大，为７３．２％，表明谷精草总黄酮可以有效清除亚硝酸钠。当浓度达到１３．５μｇ／ｍＬ以上时，清
除率基本不再增加。
图３ 谷精草总黄酮对亚硝酸钠清除作用
表２ 谷精草总黄酮对亚硝酸钠清除作用
加入提取液量／ｍＬ Ａ０ ＡＸ 清除率／％
１ ０．７４６ ０．６２２ １６．７
２ ０．７４６ ０．４０３ ４６．０
３ ０．７４６ ０．３２６ ５６．３
４ ０．７４６ ０．２９７ ６０．２
５ ０．７４６ ０．２４１ ６７．７
６ ０．７４６ ０．２１８ ７０．８
７ ０．７４６ ０．２１２ ７１．６
８ ０．７４６ ０．２０５ ７２．５
９ ０．７４６ ０．２００ ７３．２
１０ ０．７４６ ０．２０３ ７２．８
１１ ０．７４６ ０．２０１ ７３．１
３ 结语
超声辅助提取可使植物细胞破壁，提取率高，速度快，耗能低。本实验利用超声辅助提取法考察了
谷精草总黄酮提取液对亚硝胺合成的阻断率和亚硝酸钠的清除作用，结果表明，谷精草总黄酮提取液具
有较强的抑制亚硝化反应活性，当总黄酮浓度达到１６．５μｇ／ｍＬ时，其对亚硝胺合成的阻断率为
８０．９％，浓度为１３．５μｇ／ｍＬ时，对亚硝酸钠清除率最大，为７３．２％。随着浓度的上升，谷精草总黄酮
提取液在０～１６．５μｇ／ｍＬ的范围内抑制亚硝化反应活性呈现出明显的量效关系。
谷精草种植广泛，价廉易得，其总黄酮提取液具有显著的抑制亚硝化反应活性，可作为一种新型抗
癌剂进行开发，应用前景广阔。
［参考文献］
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［７］吴春 ．杜仲提取物对亚硝化反应的抑制作用 ［Ｊ］．食品科技，２００５，２３ （６）：３４～３７．
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［９］傅茂润，陈庆敏，茅林春 ．黄花菜提取物对亚硝化反应的抑制能力研究 ［Ｊ］．食品科学，２００９，３０ （１５）：１１４～１１９．
［编辑］ 一凡
·４８· 医学研究 ２０１６年４月
the incidence of congenital fetal heart malformations in Gongan county has been in a stable trend and the opti-
mal gestational weeks for detection range from 24 to 30 weeks.
key words:color doppler ultrasound;fetal;congenital heart malformations
53 Imaging Diagnosis of Intrathoracic Extramedullary Hematopoiesis
Sherchand Ｒai Papita，Cai Yaqian，Liu Sibin (Medical Imaging Center，the Central Hospital of Jingzhou，Jingzhou 434020，China)
Abstract:Objective:To study the values of imaging diagnosis of intrathoracic extra-medullary hematopoiesis
(EMH). Methods:Image examination findings in 5 cases with pathologically-proved EMH had been retro-
spectively analyzed. Ｒesults:The tumors in 5 cases were located in mediastinum around the spine or protru-
ded to lungs with generally clear boundaries. Conclusion:The imaging findings of intrathoracic extramedullary
hematopoiesis (EMH)are of certain specificity and can improve the diagnosis in the light of medical history.
Key words:extra-medullary hematopoiesis;intrathoracic;mediastinum;X-ray computer;computed Tomo-
graphy
64 An Application of Double Action Nursing Intervention in the Treatment of Prolapse of Lumbar Interver-
tebral Disc
Li Lin (Department of nursing，Jingzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine，Jingzhou 434000，China)
Zhou Qiong (Department of Orthopedics，the First Hospital of Yangtze University，Jingzhou 434000，China)
Abstract:Objective:To study adjunctive efficacy of the double action nursing on the patients with lumbar in-
tervertebral disc protrusion. Methods:120 cases of patients with prolapse of lumbar intervertebral disc had been
randomly divided into the observation group and the control group with 60 cases in each，double action care for
the observation group and conventional care for the control group. Low lumbar pain scales (LLPS)had been an-
alyzed of the 2 groups before and after treatment. Ｒesults:LLPS scores of the observation group after treatment
was obviously lower than the control group (P＜0. 05) . Conclusion:Double action nursing intervention can
improve the efficacy of clinical treatment for prolapse of lumbar intervertebral disc，and effectively prevent the
recurrence of the disease.
Key words:double action care;prolapse of lumbar intervertebral disc;low lumbar pain scales (LLPS)
79 Design and Implementation of Online Ｒeporting Systems for Adverse Transfusion Ｒeactions Based on
ASP. NET Technology
Song Jianwei，Cao Changbai，Zou Jing，Xu Ling，Wang Ya，Liu Xiaoqin，Chen Zhuoren (Department of Blood Transfusion，the First
Hospital of Yangtze University，Jingzhou 434000，China)
Huang Qikun (Computer Centre，the First Hospital of Yangtze University，Jingzhou 434000，China)
Sun Hong (School of Computer Science，Yangtze University，Jingzhou 434023，China)
Abstract:The Blood quality is directly related to people’s health and life. The establishment of the reporting
system about adverse reactions of blood transfusion will help to monitor and control the errors and accidents，
and improve the safety of blood transfusion and rational use of blood. ASP. NET is a free web framework for
building great web sites and web applications by HTML，CSS and JavaScript. The reporting system about ad-
verse reaction of blood transfusion based on ASP. NET can ensure the safety of blood transfusion and error a-
nalysis;it can also advance the informatization of blood transfusion and reduce the risks of blood transfusion.
Key words:adverse transfusion reaction;ASP. NET technology;rational use of blood;the risk of blood
transfusion;software system
82 A Study of Inhibition Activity of Total Flavonoids from Eriocaulon buergerianum Koern on Nitrosati-
on
Wang Qing，Xue Tianle (Bozhou Vocational and Technical College，Bozhou 236800，China)
Ye Min (Guizhou University of Engineering Science，Bijie 551700，China)
Abstract:Objective:To observe inhibition activity of total flavonoids from Eriocaulon buergerianum Koern
on nitrosation Methods:The total flavonoids of Eriocaulon buergerianum had been extracted by ultrasonic ex-
traction，and then spectrophotometry had been used to measure inhibition activity of the total flavonoids from
Eriocaulon buergerianum Koern on nitrosation. Ｒesults:The results showed that when the concentration of to-
tal flavonoids reached 16. 5μg /mL，the blocking rate of nitrosamine synthesis was as high as 80. 9%;when
the concentration of total flavonoids reached 13. 5μg /mL，the clearance of sodium nitrite was highest，73. 2%
. Conclusion:The total flavononid of Eriocaulon buergerianum Koern has significant acitivity to inhibit nitrosation
and clear sodium nitrite.
Key words:Eriocaulon buergerianum Koern;total flavonoids;inhibition;nitrosation
Translated ＆ Edited by Li Zejuan (李泽娟)
Ⅳ