全 文 ：文章编号:1000-2375(2000)03-0289-03
珍珠花丛生芽的诱导及生根条件的研究
刘幼琪 ,洪艳艳 ,陈永勤 ,傅运生
(湖北大学生命科学学院 ,湖北 武汉 430062)
摘　要:诱导珍珠花(Staphylea bumalda DC)丛生芽的最佳培养基为 MS 基本培养基附加 NAA 0.2 mg·L-1
和 BA 5mg·L-1 ,无菌苗在 1/ 2MS 培养基中附加 NAA 1mg·L-1、活性碳 0.45 g·L-1、硫胺素 1 mg·L-1、蔗糖 20 g
·L-1能长根形成完整植株.
关键词:珍珠花;丛生芽;生根;组织培养
中图分类号:Q944.4　　文献标识码:A
收稿日期:2000-01-29
基金项目:湖北省重点学科基金资助项目
作者简介:刘幼琪(1949-　),女 ,硕士 ,副教授
珍珠花即省沽油科的省沽油 ,其花蕾营养丰富 ,食用风味独特 ,花中蛋白质含量可与豆制品和奶制
品媲美.它含有 8种丰富的人体必需的氨基酸和锌 、铁 、硒等微量元素;含有大量的维生素 ,特别是 B2的
含量远远高于一般果蔬 ,是一种纯天然的保健食品.珍珠花还有活血调经 、解毒消肿的临床疗效.因此 ,
珍珠花是一种有着极大开发利用价值的野生经济植物.但是 ,珍珠花种子在自然条件下萌发率极低[ 1] .
在湖北大悟山区 ,人们通常通过分蔸和扦插两种方式进行扩大繁殖.而人工分蔸繁殖面临种质资源量
小 、运输不便等问题;采用扦插法则成活率不超过 30 %.鉴于上述原因 ,我们采用微繁新技术 ,可以在较
短的时间和较少的空间内繁殖大量植株 ,为珍珠花的扩繁探索出一种活力高 、成本低 、经济效益明显并
且可以用于生产线大规模生产的方式.现将我们的试验工作报道如下.
1　材料与方法
1.1　供试材料　珍珠花种子采自湖北大悟山区 ,种子萌发后 ,试管苗长至2 cm高时切取带有 2 ～ 3片真
叶的茎尖作为外植体诱导丛生芽的形成.
1.2　培养基和培养条件
1.2.1　诱导丛生芽的培养基
(1)MS+BA(2 、4 、5 、8 、10mg·L-1)
(2)MS+NAA(0.1mg·L-1)+BA(4 、5 、6 、8 、10mg·L-1)
(3)MS+NAA(0.2mg·L-1)+BA(4 、5 、6 、8 、10mg·L-1)
(4)MS+NAA(0.5mg·L-1)+BA(4 、5 、6 、8 、10mg·L-1)
(5)MS+NAA(1mg·L-1)+BA(4 、5 、6 、8 、10mg·L-1)
1.2.2　生根培养基　1/2MS基本培养基 ,加活性碳 、硫胺素和激素.
培养条件:室温 25±1 ℃光强为 1 000 ～ 1 500 lx ,光照 14 h.
2　结果和分析
2.1　不同激素水平对珍珠花丛生芽诱导的影响　将无菌苗茎尖接种到培养基上 25天后 ,统计丛生芽
(图 1)数目 ,结果见表 1.由表 1可知 ,当培养基中附加NAA 0.2mg·L-1、BA 5mg·L-1时产生丛生芽的效
果最佳 ,且大部分丛生芽来源于潜伏的腋芽.一般说来 ,细胞分裂素 BA对植物不定芽的诱导具有促进
第 22 卷第 3期
2000 年9 月
湖北大学学报(自然科学版)
Journal of Hubei University(Natural Science Edition)
　Vol.22　No.3　
Sep., 2000
作用[ 2] .在很多植物的体外繁殖中 ,诱导产生的不定芽数目随细胞分裂素浓度的增加而增加.在我们的
实验中也可以看出在单一附加 BA的培养基中 ,当 BA的浓度为 2 ～ 5 mg·L-1时 ,产生的丛生芽数也随着
BA浓度的增加有显著的增加.但是当 BA浓度在 6 ～ 10mg·L-1时 ,外植体上虽也诱导出丛生芽 ,芽的增
殖倍数反而降低 ,同时有大量的愈伤组织发生.所产生的丛生芽有相当一部分是由愈伤组织再分化而形
成的.但由愈伤组织再分化而形成的丛生芽在遗传的稳定性及完整植株形成方面都不及由腋芽萌发而
形成的丛生芽[ 3] .
表1　不同浓度 BA、NAA对珍珠花丛生芽产生的影响
NAA
/(mg·L-1)
接
种
数
BA/(mg·L-1)
4 5 6 8 10
芽诱导
率/ % 芽数
＊ 芽诱导
率/ % 芽数
芽诱导
率/ % 芽数
芽诱导
率/ % 芽数
芽诱导
率/ % 芽数
0 20 58.3 0.8 61.3 1.3 52.7 1.1 10.4 0.3 2.9 0.1
0.1 20 68.4 1.2 92.6 1.3 86.5 1.9 40.6 0.9 19.2 0.5
0.2 20 100 2.1 100 3.8 100 3.5 56.6 1.0 23.5 0.6
0.5 20 10.2 0.1 18.8 0.3 11.3 0.3 9.6 0.2 6.7 0.5
1.0 20 10.2 0.1 12.8 0.2 11.2 0.2 7.7 0.2 5.8 0.1
　　　　＊芽数为每外植体平均芽数
2.2　根的诱导　新芽转移到生根培养基中 ,一周后开始统计生根(图 2)的情况(见表 2),生根培养基中
单独附加NAA 1mg·L-1时 ,生根率在 10 天左右达 61.1 %, 3周后可达 72.3 %.平均每株生根条数为
4.2 ,根的形状无异常.如果单一使用生长素 IBA或者在使用NAA或 IBA时同时加入细胞分裂素 BA ,对
珍珠花生根的诱导有明显的抑制作用.
表 2　不同浓度 IBA、NAA和 BA对珍珠花生根的影响
BA
/(mg·L-1)
接种
外植
体数
IBA/(mg·L-1) NAA/(mg·L-1)
0.5 1 2 1 2
分化率
/ % T＊/d
分化率
/ % T /d
分化率
/ % T ＊/ d
分化率
/ % T/ d
分化率
/ % T/ d
0 20 — — — — 5.9 12 61.1 10 16.2 15
0.2 20 — — — — 5.5 7 10.0 19 6.1 14
0.5 20 — — — — — — — — — —
　　　　＊ T 为最早生根时间
图 1　珍珠花茎尖培养形成的多芽体 图 2　珍珠花在培养基上培养的生根小苗
290 湖北大学学报(自然科学版) 第 22 卷
表 3　不同浓度蔗糖对珍珠花生根的影响
蔗糖浓度/(g·L-1) 10 15 20 30 40 60 90
生根率/ % 20.1 50.3 63.2 45.2 36.1 25.1 3.0
表 4　培养基中无机盐浓度 、活性碳 、硫胺素对珍珠花生根的影响＊
影响因素 无机盐 活性碳/(g·L-1) 硫胺素/(mg·L-1)
MS 1/2MS 0.45 0 1 5
生根诱导
率/ % 20.1 52.3 62.7 10.8 25.6 39.8
　　＊25 d后计数
　　在生根试验中 ,对培养基中的蔗糖
浓度在10 ～ 90 g·L-1的范围内进行了比
较试验[ 4] ,结果见表 3.从表中可以看
出 ,蔗糖浓度在 10 ～ 20 g·L-1的范围内 ,
生根率随蔗糖浓度的增加而上升;最佳
浓度值是 20 g·L-1;蔗糖浓度为 30 g·
L
-1或更高 ,生根率则显著下降.
为了解培养基中无机盐浓度和其他
附加物对珍珠花生根的影响 ,用 MS 、1/
2MS 、活性碳 、硫胺素进行了试验 ,结果
列于表 4.从表中可以看出 ,1/2MS 培养基生根率高 ,全量无机盐的培养基生根率明显下降.提高硫胺素
的浓度对生根有促进作用 ,活性碳的使用可观察到对生根率有明显的促进作用.
另外 ,在光线对生根影响的实验中 ,我们曾经设置黑暗 、弱光(500 ～ 800 lx)和2 000 lx 三种光照 ,结果
表明弱光条件下生根效果较好 ,完全黑暗未见对生根有促进作用 ,强光对生根有抑制作用且生根非常迟
缓.
参考文献:
[ 1] 刘幼琪 ,洪艳艳 , 罗　颍 ,等.珍珠花种子发芽条件的研究[ J] .湖北大学学报(自然科学版), 1992 , 21(4):81～ 83.
[ 2] 周俊彦 ,郭扶兴.细胞分裂素类物质在植物体细胞胚发生中的作用[ J] .植物生理学通讯 , 1996 , 32(4):247～ 253.
[ 3] 王冬梅 ,黄学林 , 黄上志.细胞分裂素类物质在植物组织培养中的作用机制[ J] .植物生理学通讯 , 1996 , 32(5):373 ～
377.
[ 4] 庄承记 ,周建葵.云南山茶花茎尖培养中多芽体的形成和生根的研究[ J] .实验生物学报 , 1997 , 31(1):1～ 7.
Studies on formation of the multiple-buds and rooting
shoot tips of Staphylea bumalda DC
Liu Youqi ,Hong Yanyan ,Chen Yongqin ,Fu Yunsheng
(School of Life Science ,Hubei University ,Wuhan 430062 , China)
Abstract:Effects of some factors on formation of multiple-buds and rooting shoot tips of Staphylea bumalda
DC in vitro have been studied.The results showed that the kind and the concentration of hormone were the keys
which adjusted formation of multiple -buds.The highest rate of multiple -buds induction was formatted on MS
medium containing BA 4 ～ 5 mg·L-1 and NAA 0.2mg·L-1.Higher BA concentration would induce a great deal of
callus formatting.It was also found that the best rooting results were obtained in NAA 1mg·L-1.When the concen-
tration of sucrose in mediumwas 15 ～ 20 g·L-1the rooting rate could be marked risen.The experiment revealed that
the rooting rate was higher on 1/2MS than onMS medium.The activated charcoal had remarkable effect on rooting.
Key words:Staphylea bumalda DC;formation of multiple-buds;rooting;tissue culture
(责任编辑　游　俊)
291第 3期 刘幼琪等:珍珠花丛生芽的诱导及生根条件的研究